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Jornal Mundial de Acupuntura - Moxabustão

Volume 28, Edição 1 , março de 2018 , páginas 44 a 49

Pesquisa experimental

Efeito do aquecimento Yang e completando a terapia moxabustão rim

na via de sinalização de NF-kB de ratos demência vascular ☆
Wanli ZHU (朱婉丽) um, Kun YANG (杨坤) um, Shengchao CAI (蔡 圣朝) b , Ying WANG (王莹) um, Xiaoge SONG (宋小 鸽)
c

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https://doi.org/10.1016/j.wjam.2018.03.007 Obtenha direitos e conteúdo

Abstrato

Objetivo
Observar o efeito do aquecimento yang e suplementação da terapia de moxabustão renal sobre as
comportamentalidades e os níveis de expressão dos genes e proteínas relacionados à IL-1β, TNF-α e NF-
κB do hipocampo de ratos com demência vascular (VD) e explorar o mecanismo de aquecendo yang e
suplementando a terapia moxabustiva renal na inibição da resposta inflamatória da VD. Métodos Setenta
e oito ratos SD, exceto 10 ratos como grupo de operação simulada (grupo A), foram estabelecidos em
modelos de VD aplicando o método de reperfusão de isquemia em artérias carótidas comuns bilaterais..
30 modelos foram bem sucedidos e foram aleatoriamente divididos em grupo modelo (grupo B), grupo
moxabustão (grupo C) e grupo medicação ocidental (grupo D), com 10 ratos em cada grupo. Após a
modelagem, a moxabustão suspensa foi realizada em “Dàzhuī (大椎 GV 14)”, “Mìngmén (命门 GV 4)” e
“Guānyuán (元 元 CV 4)” dos ratos do grupo C por 15 min / tempo. A intervenção foi realizada uma vez
ao dia, sendo necessária a intervenção por 4 semanas consecutivas. Administração intragástrica com
nimodipina(2 mg kg-1 d-1) foi realizado nos ratos no grupo D durante 4 semanas consecutivas. Labirinto
de águaMorrisO teste foi adotado para teste comportamental em ratos de cada grupo. A coloração de HE
foi realizada para observar as alterações patológicas. O método RT-qPCR e o método de Western blot
foram usados para detectar os níveis de expressão dos genes e proteínas relacionados com a IL-1β, TNF-
α e NF-κB do hipocampo.

Resultados
Após a modelagem, o labirinto aquático de Morris escapou da latência dos ratos nos grupos de operação
foi obviamente mais longo do que no grupo A ( P <0,05). De acordo com os resultados da coloração HE,
o arranjo dos neurônios do grupo B era incompato, as membranas celulares indefinidas, o citoplasma
heterogêneo, a cariofenose, a quantidade de necrose aumentada e o número de células inflamatórias
significativamente aumentado. Comparado com o grupo B, o número de células inflamatórias reduziu
significativamente no grupo C e no grupo D, e a quantidade de necrose neuronal também diminuiu.
Após a intervenção, em comparação com o grupo B, os níveis de expressão de mRNA de TNF-α, p-IκB e
NF-κBp65no hipocampo dos ratos no grupo C e no grupo D diminuiu significativamente (todos P
<0,05), em comparação com o grupo B, os níveis de expressão de mRNA IL-1β, TNF-α e NF-κBp65 no
hipocampo de ratos no grupo C e o grupo D também diminuiu significativamente (todos P <0,05).

Conclusão
O aquecimento de yang e suplementação da terapia de moxabustão renal pode inibir a via de sinalização
de NF-κB e reduzir a resposta inflamatória através da redução dos níveis de expressão de mRNA de IL-
1β, TNF-α e NF-kB no cérebro, alcançando assim o objetivo de tratar VD.

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Palavras-chave
Moxabustão; Ratos de demência vascular; Resposta inflamatória; Via de sinalização NF-κB;
Hipocampo

A demência vascular (DV) é um tipo de síndrome de demência causada por danos no tecido cerebral
devido a doenças cerebrovasculares , que perde apenas para a doença de Alzheimer , sendo responsável
por 20% dos casos de demência [1] . Foi descoberto, de acordo com estudos, que a resposta inflamatória
após isquemia cerebral está envolvida no comprometimento cognitivo [2] , e a inibição da cascata
inflamatória após lesão isquêmica pode aliviar danos neuronais e desempenhar um papel de proteção
cerebral [3] , [4] . Um dos principais efeitos da moxabustão é inibir o dano inflamatório[5] . O fator
nuclear kappa B (NF-κB) é uma proteína pró-inflamatória produzida por fatores inflamatórios, que
desempenha importante papel na resposta inflamatória [6] . Estudos clínicos mostraram que a
moxabustão tem um efeito definido no tratamento desta doença [7] , [8] , [9] , [10] . No entanto, houve
poucos estudos sobre a moxabustão na melhora da resposta inflamatória de ratos com DV. Do ponto de
vista da regulação inflamatória, o efeito da moxabustão sobre a capacidade de aprendizagem e memória
de ratos com VD foi observado neste estudo, e o papel da via de sinalização do NF-κB neste processo foi
explorado, fornecendo assim uma base científica para a moxabustão na melhoria dos sintomas clínicos
da DV.

materiais e métodos

Animais e agrupamento
Setenta e oito ratos SD machos adultos fornecidos pelo Centro de Animais Experimentais da
Universidade de Medicina de Anhui foram selecionados neste estudo com o número de licença de SCXK
(Anhui) 2011-002, e o peso era de 200-250 g. A temperatura ambiente para a alimentação foi de 22 a 25 °
C e a umidade relativa foi de 45 a 70%. Os ratos foram alimentados com dieta normal com bebida livre.
Após alimentação adaptativa por 3 dias, foi realizado aprendizado de labirinto de água Morris e
treinamento de memória, então 10 ratos foram atribuídos ao grupo de operação simulada (grupo A)
adotando método de tabela de números aleatórios e os 68 ratos restantes foram transformados em
modelos por operação. Após a modelagem, 38 ratos morreram e 30 ratos sobreviveram.

Dentro de 1 semana após a modelagem, a capacidade de aprendizagem e memória foi detectada através
do teste de labirinto aquático de Morris no grupo A e modelo de ratos, se houvesse diferença nos dois
grupos, o modelo seria dividido em grupo modelo (grupo B), moxabustão grupo (grupo C) e medicação
ocidental (grupo D) pelo método da tabela numérica aleatória, com 10 ratos em cada grupo.

O descarte de animais durante o experimento seguiu as Noções Instrutivas com Respeito ao Tratamento de
Animais de Laboratório, publicadas pelo Ministério de Ciência e Tecnologia da República Popular da
China em 2006.

Principais reagentes e instrumentos

Principais instrumentos: labirinto de água Morris (Instituto de Pesquisa de Drogas, Academia Chinesa
de Ciências Médicas), sistema de detecção PCR quantitativo fluorescente (Thermo PIKOREAL 96),
centrífuga de mesa de alta velocidade (Anhui Jiaven Instrument Equipment Co., Ltd., JW-3021HR ),
aparelho de eletroforese (Tanon, EPS300), a imagem escala de cinza foi analisada em Pequim Kechuang
Ruixin Biotecnologia Co., Ltd. via sistema de gel-imaging na forma de análise de fita de filme.

Principais reagentes : reagente de extração de RNA Trizol (Invitrogen, EUA, lote nº: 101002), kit
QuantiFast SyBr Green PCR (Qiagen, Alemanha, lote nº: 151034942), kit de transcrição reversa (Thermo,
EUA, lote nº: 00287813) , o primer foi sintetizado em Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. Tampão de lise
celular RIPA (Instituto Beyotime de Biotecnologia, lote nº: P0013B), kit luminescente hipersensível ECL
(Thermo, EUA, lote nº: QE218149); IgG de cabra anti-murganho (Beijing ZSGB-BIO, lote no .: 109145);
IgG anti-cabra de coelho (Beijing ZSGB-BIO, lote nº: 109525), TNF-α , IL-1β e p-IκBα (Bioworld, EUA);
NF-κBp50? e NF-κBp65 (Santa Cruz), β-actina (Beijing ZSGB-BIO).

Modelagem
Os modelos foram estabelecidos adotando-se o método de reperfusão isquêmica nas artérias carótidas
comuns bilaterais por referência à literatura [11] . Os ratos foram anestesiados intraperitonealmente
com 10% de hidrato de cloral na dosagem de 0,3 mL / 100 g de peso corporal , depois foram fixados na
placa de rato, os pêlos no pescoço foram removidos e a desinfecção convencional foi realizada. O
pescoço foi cortado a 0,5 cm da linha média, depois a artéria carótida comum direita foi exposta e
separada. A artéria carótida comum foi cortada com uma pinça de artéria não invasiva por 1 h, em
seguida a perfusão foi realizada por 10 min, e os dois passos foram repetidos por outro tempo. A artéria
carótida comumligadura foi realizada permanentemente. A penicilina foi aplicada na ferida e a ferida foi
suturada. Finalmente, os ratos foram devolvidos à gaiola para alimentação de preservação de calor. 3 dias
depois, a artéria carótida comum esquerda foi operada da mesma maneira. Em todo o processo de
modelagem, a temperatura anal dos ratos foi mantida em torno de 37° C, de modo a evitar o efeito
protector da baixa temperatura na lesão da isquemia cerebral .

Após a modelagem, a capacidade de aprendizagem e memória de ratos foi examinada através do teste de
labirinto aquático, e a modelagem foi bem sucedida se a latência de escape foi significativamente maior
do que no grupo A.

Métodos de intervenção
Grupo A: a artéria carótida comum foi separada apenas sem ligadura. Desde o 9º dia após a modelagem, o
estímulo de apreensão foi conduzido como no grupo C sem intervenção.

Grupo B: a partir do 9º dia após a modelagem, o estímulo de apreensão foi realizado como no grupo C
sem intervenção.

Grupo C: desde o 9º dia após a modelagem, foi dada a intervenção correspondente. De acordo com a
Ciência Experimental de Acupuntura , “Guānyuán (元 元 CV 4)”, “Dàzhuī (大椎 GV 14)” e “Mìngmén (命门
GV 4)” foram selecionados sob o estado sóbrio, depois os pêlos nesses acupontos foram raspados. e
moxabustão suspensa foi realizada. Moxabustão suspensa foi realizada por 15 min / hora em cada
acuponto e por uma vez ao dia. Um dia foi livre após 6 dias consecutivos de intervenção e o curso da
administração foi de 4 semanas.

Grupo D: desde o dia 9 após a modelagem, a administração intragástrica com nimodipina foi realizado, e
a dosagem (2 mg kg -1 d -1 ) foi determinada de acordo com a “taxa de conversão de tabela dose
equivalente de animais experimentais e humanos superfície corporal área relação ". O tratamento foi
realizado duas vezes ao dia, 1 dia foi livre de tratamento após o tratamento por 6 dias consecutivos, e a
intervenção do tratamento por 4 semanas foi necessária.

Índices de observação

Teste comportamental via labirinto aquático de Morris

Treinamento de aprendizagem e memória foi realizado com plataforma visual 4 dias antes da
modelagem. O teste comportamental via labirinto aquático de Morris foi conduzido no 8º dia e no 37º
dia após a modelagem, respectivamente. O labirinto de água foi dividido em quatro quadrantes com o
diâmetro ( φ) 120 cm e a altura 70 cm e manteve a temperatura da água a (23 ± 1) ° C. O processo
concreto da plataforma visual foi o seguinte: o quadrante incluindo a plataforma foi o primeiro
quadrante e o segundo, terceiro e quarto quadrantes foram dispostos no sentido horário. A plataforma
estava 1 cm acima da superfície da água. Os ratos foram colocados na água a partir do terceiro quadrante
(de frente para a parede da piscina). O teste durou quatro dias com duas vezes ao dia. Para o teste de
navegação no local, o primeiro quadrante estava com a plataforma a 1 cm abaixo da superfície da água.
Os ratos foram colocados na água a partir do terceiro quadrante (de frente para a parede da piscina), e o
tempo em que os ratos subiram até a plataforma (período latente) dentro de 2 minutos foi registrado. Se
os ratos não encontraram a plataforma dentro de 2 min, o período latente foi registrado como 2 min, e
os ratos foram guiados para a plataforma para permanecer por 15 s, em seguida, colocados na água
novamente. O teste foi uma vez por dia com cada rato colocado em água durante 4 vezes consecutivas.

Teste histopatológico hipocampal

No 38dia ap a modelao, os ratos foram anestesiados intraperitonealmente com 10% de hidrato de cloral
na dosagem de 0,3 mL / 100 g de peso corporal para amostragem de tecido cerebral. Os tecidos do
cérebro de 2 ratos, como um grupo, foram colocados em formalina neutra a 10% para fixação durante 24
horas a 4 ° C.

Após a eluição gradiente com álcool e transparência com xileno , os tecidos cerebrais foram embebidos
em parafina e cortados em secções coronais de 4 μm para fazer secções de parafina. A coloração com
hematoxilina e eosina foi realizada e as alterações histopatológicas foram observadas sob microscopia de
luz de 400 ×.
Detecção dos níveis de expressão de mRNA de IL-1β, TNF-α, NF-κBp65 e NF-κBp50 no
hipocampo via RT-qPCR
No 38dia ap a modelao, os ratos foram anestesiados intraperitonealmente com 10% de hidrato de cloral
na dosagem de 0,3 mL / 100 g de peso corporal para amostragem de tecido cerebral numa placa de gelo.
O hipocampo foi rapidamente colocado em tubo de congelamento e preservado em nitrogênio líquido
para aplicação em espera. O Trizol foi usado para extrair RNA total dos tecidos do cérebro de ratos, e o
kit de transcrição reversa foi usado para sintetizar o cDNA . Após amplificação, o valor de △ Ct no grupo
B foi usado para correção, e um valor de △△ Ct foi traçado. A fórmula 2 - △△ Ct foi aplicada para o cálculo
dos níveis de expressão de IL-1β, TNF-α, NF-κBp65 e NF-κBp50 mRNA em todas as amostras.

A β-actina foi a referência interna da reação de PCR, e todos os primers específicos foram vistos na
Tabela 1 .

Tabela 1 . Sequência dos primers e comprimento de amplificação.

Nome do primer Sequência de primer comprimento de amplificação (bp)

IL-1β F: 5′-GCATCCAGCTTCAAATCTCA-3 ′ 191

R: 5′-ATCATCCCACGAGTCACAGA-3 ′

TNF-α F: 5′-AAACACACGAGACGCTGAAG-3 ′ 132

R: 5′-ATCCAGTGAGTTCCGAAAGC-3 ′

NF-κBp65 F: 5′-AAGATCTGCCGAGTAAACCG-3 ′ 108

R: 5′-TCCCGTGAAATACACCTCAA-3 ′

NF-κBp50 F: 5′-CGTCTGTCTGCTCTCTCTCG-3 ′ 78

R: 5′-CTCTCTCGTCCTCTCTCGCT-3 ′ ′

β-actina F: 5′-CCCATCTATGAGGGTTACGC-3 ′ 150

R: 5′-TTTAATGTCACGCACGATTTC-3 ′

Detecção dos níveis de expressão da proteína do hipocampo IL-1β, TNF-α, p-IκB, NF-Kbp65
e NF-kBp50 via Western blot
No 38dia ap a modelao, os ratos foram anestesiados intraperitonealmente com 10% de hidrato de cloral
na dosagem de 0,3 mL / 100 g de peso corporal para amostragem de tecido cerebral numa placa de gelo.
O hipocampo foi rapidamente colocado em tubo de congelamento e preservado em nitrogênio líquido
para aplicação em espera.

O tampão de lise celular RIPA foi adicionado ao hipocampo na proporção de 10 mL / g. O sobrenadante

foi coletado contendo a proteína total do tecido. O tamp de carga de amostra SDS-PAGE 5X foi
adicionado amostras de protea na proporo de 1: 4, e foi aquecido no banho de ua a ferver durante 10
min, depois foi adicionado ao SDS-PAGE bem ap arrefecimento para electroforese e membrana
transferência . Após a transferência da membrana, a amostra foi enxaguada em leite desnatado a 5%
durante 5 minutos e depois selada durante 2 horas à temperatura ambiente. A amostra foi então diluída
com diluição primária do anticorpo e incubada durante a noite a 4° C. Após lavagem com TBST, o
anticorpo secundário marcado com peroxidase de rábano (HRP) foi diluído e incubado durante 2 h à
temperatura ambiente. O kit ECL foi adotado para desenvolvimento de cores, captura de imagens em gel
e análise na câmara escura.

Análise estatística
O software estatístico SPSS 23.0 foi aplicado para analisar dados estatisticamente. Os dados em
distribuição normal foram expressos como média ± desvio padrão (x ± s ), e as duas amostras
independentes foram analisadas através do teste t . Os dados multigrupos foram analisados através do
teste de homogeneidade de variância pelo método de Levene, se a homogeneidade de variância foi
conformada, análise de variância unidirecional (ANOVA) foi aplicada e a comparação paritária foi
conduzida pela adoção do método de Student-Newman-Keuls ; se a homogeneidade da variância não foi
conformado, os dados foram expressos como mediana (M) e a gama inter-quartil ( Q R ) , e de Kruskal-
Wallis teste rank-sumfoi realizado. As diferenças foram estatisticamente significantes quando P <0,05.

Resultados

Resultados comportamentais de ratos em cada grupo

(1) Comparação de latência de escape do teste de navegação de lugar de labirinto de água no

8º dia depois de modelar
Pode ser visto na Tabela 2 que, de acordo com a comparação após modelagem, a latência de escape de
ratos em grupos de operação foi significativamente maior do que no grupo A ( P <0,01), indicando que a
capacidade de aprendizado e memória de ratos VD diminuiu significativamente. o que significou o
sucesso da modelagem.

Tabela 2 . Comparação da latência de escape de ratos em cada grupo no 8º dia após a modelagem (
s, ).

Grupos Ratos Latência

Operação Sham 10 15,3 ± 3,55

Operação 30 58,84 ± 24,3 a

uma
Comparado com o grupo de operação simulada, P <0,01.

(2) Comparação da latência de escape de ratos em cada grupo no 37º dia após a modelagem
Como os dados de latência de escape dos ratos em cada grupo no labirinto aquático colocam o teste de
navegação no 37º dia após a modelagem não estarem na distribuição normal, foi utilizado o teste não
paramétrico [12] .

Pode-se observar na Tabela 3 que, de acordo com o teste não paramétrico, a latência de escape no grupo
B foi significativamente maior que no grupo A ( P <0,05); a latência de escape no grupo D e no grupo C
foi menor do que no grupo B, mas a diferença no grupo D foi significativa ( P <0,05).
 Tabela 3 . Escapar resultados da latência de ratos em cada grupo no dia 37 após a modelagem (M [
Q R ]).

Grupos Ratos Latência (s)

UMA 10 22,79 (10,99)

B 10 38,1 (29,88) a

C 10 35,64 (8,92)

D 10 23,54 (13,6) b

uma
Em comparação com o grupo A, P <0,05.

b
Em comparação com o grupo B, P <0,05.

Efeito da moxabustão na histopatologia do hipocampo de ratos com VD

Pode ser visto na Fig. 1 que os neurônios do grupo A organizados de forma firme e ordenada, apenas
algumas células inflamatórias foram vistas. O arranjo dos neurônios no grupo B era incompato, as
membranas celulares estavam indefinidas, o citoplasma era heterogêneo, encontrava-se cariofenose,
aumentava-se a quantidade de necrose e aumentava significativamente o número de células
inflamatórias. Comparado com o grupo B, o número de células inflamatórias reduziu significativamente
no grupo C e no grupo D, a parede celular estava intacta e a quantidade de necrose de neurônios
também reduzida.

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A Fig. 1 . Comparação patológica da área CA1 do hipocampo de ratos em cada grupo (HE, × 400).
(Para interpretação das referências a cor nesta legenda da figura, o leitor é encaminhado para a
versão web deste artigo.)
 Notas : a seta vermelha ilustrada células inflamatórias .

Comparação dos níveis de expressão de mRNA do hipocampo IL-1β, TNF-α, NF-κBp65 e

NF-κBp50 de ratos em cada grupo através da adoção de RT-qPCR
Pode ser observado na Fig. 2 que, em comparação com o grupo A, os níveis de expressão de ARNm do
hipocampo IL-1β, TNF-α , NF-κBp65 e NF-κBp50 de ratos no grupo B aumentaram significativamente (
P <0,05); em comparação com o grupo B, os níveis de expressão de mRNA do hipocampo IL-1β, TNF-α e
NF-κBp50 de ratos do grupo C e do grupo D reduziram significativamente ( P <0,05), e o nível de
expressão do mRNA NF-κBp50 no grupo C e o grupo D também reduziu, mas apenas a diferença no
grupo D foi significativa ( P <0,05).

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Fig. 2 . Comparação dos níveis de expressão de mRNA de IL-1β, TNF-α , NF-κBp65 e NF-κBp50
no hipocampo de ratos em cada grupo pela adoção de RT-qPCR ( , n = 6).

Notas : em comparação com o grupo A, ⁎⁎ P <0,05; comparado com o grupo B, △ P <0,05.

Comparação dos níveis de expressão da proteína IL-1β, TNF-α, p-IκB, NF-κBp65 e NF-
κBp50 no hipocampo de ratos em cada grupo
Pode ser visto na Fig. 3 que em comparação com o grupo A, os níveis de expressão de TNF-α
hipocampal, p-IκB, NF-κBp65 e NF-κBp50 proteína de ratos no grupo B aumentaram significativamente
( P <0,05), em comparação com grupo B, os níveis de expressão da proteína do hipocampo IL-1β, TNF-α,
p-IκB, NF-Kbp65 e NF-kBp50 de ratos do grupo C e grupo D reduziram, entre eles, os níveis de
expressão de TNF-α, p Proteína -IκB e NF-κBp65 reduziu significativamente ( P <0,05).
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Fig. 3 . Comparação dos níveis de expressão das proteínas do hipocampo IL-1β, TNF-α , p-IκB,
NF-Kbp65 e NF-kBp50 de ratos de cada grupo, adotando Western blot ( , n = 6).

Notas : em comparação com o grupo A, ** P <0,05; comparado com o grupo B, △ P <0,05.

Discussão
A demência vascular era conhecida na medicina tradicional chinesa desde muito cedo. Foi nomeado
como "demência" em Zhēnjiŭ Jiăyĭjīng (Sy 针灸 甲乙 经》, O Clássico Sistemático da Acupuntura e
Moxabustão ). Foi dito em Língshū (The 灵枢》, The Miraculous Pivot ) que “Se o mar de medula é
insuficiente, os seguintes sintomas podem aparecer: vertigem , zumbido , dor na perna, visão fraca e
cansaço”. governa o osso para gerar a medula que é fornecida ao cérebro ”, indicando que a deficiência
de rim e essência é a raiz da demência . Foi dito em Qiānjīnyìfāng(《千金 翼 方》, Suplemento a 'Fórmulas
Importantes que Vale Mil Peças de Ouro' ) que “Quando o povo tem mais de 50 anos, o yang qi diminui dia a
dia, os danos atacam gradualmente, e o espírito também declina, quem pode se tornar lento e
preguiçoso.”foi gravado em Shíshìmìlù ("石室秘录", Secret Records em um quarto de pedra ) que‘a exuberância
catarro podem causar grave demência’, indicando que recusou yang qi vai deixar de aquecer e ativar qi e
sangue, e o bloqueio do sangue qi pode induzir a estase úmida no cérebro, e assim a atividade vital não
funciona.

GV 4 e GV 14 são os acupontos do vaso governador. O GV 4 é usado para depositar o qi original e

suplementar o rim, consolidando a essência e tonificando o yang . VG 14 é um ponto de interseção de
três meridianos yang da mão e do regulador. O CV 4 é um ponto de interseção de três meridianos yin do
pé e do vaso de concepção , e também a saída e entrada do rim- yin e do rim- yang no jiao inferior .
Moxabustão em GV 4, GV 14 e CV 4 é um tipo de aquecimento yange suplementando a terapia de
moxabustão renal inventada pelo médico chefe CAI Sheng-chao durante a prática clínica de longo prazo,
que é guiada pelo eixo do vaso cérebro-cérebro-governador-vaso-conceito de rim. Sua base teórica está
na moxabustão tartaruga-plastron dividida em CV 4 e moxabustão suspensa em GV 4 e GV 14, que pode
conectar o navio governador, "o mar dos meridianos yang ", e o vaso de concepção, "o mar dos
meridianos yin ”, Aquecendo assim o yang do rim e abrindo a mente. Um bom efeito curativo clínico foi
obtido.

A via de sinalização do NF-κB é uma importante via inflamatória na lesão de reperfusão de isquemia
cerebral . Em células em repouso, o NF-κB liga-se ao NF-κB (IκB) no citoplasma , e sua ativação está
relacionada à fosforilação de IκB [13] , [14] . Sob a estimulação de citocinas e lipopolissacarídeos (LPS),
IκB é fosforilado por IKK, e então degradado por proteassoma , então o NF-κB desagregado transfere
para o núcleo e combina com sítios de ligação de DNA homólogos , induzindo assim a transcrição nas
regiões promotoras de vários genes (IL-1β, TNF-αe IL-6). O TNF-α é um importante promotor de
muitas citocinas e a IL-1β é um importante fator pró-inflamatório no tecido cerebral. Após isquemia
cerebral , o aumento de ambos pode aumentar a infiltração de leucócitos , ativar a cascata de citocinas e
agravar o dano dos neurônios.

O estudo sugeriu que tanto o yang aquecedor quanto a suplementação da terapia de moxabustão renal e
medicina ocidental diminuíram o nível de expressão da proteína NF-κB e mRNA no tecido cerebral de
ratos VD, inibindo assim a IL-1β e TNF-α para envolver na resposta imune e inflamatória . 15] , [16] . Ele
indicou que o aquecimento yang e suplementação da terapia moxabustiva renal pode tratar ou melhorar
os sintomas da demência vascular através da inibição da via de sinalização NF-κB e redução dos níveis de
expressão de fatores inflamatórios no tecido cerebral após isquemia cerebral, e o mecanismo pode ser o
mesmo que no grupo D.

O teste do labirinto aquático de Morris é um método de detectar a capacidade de aprendizagem e

memória de ratos com base no tempo de procura de plataformas na água (latência de escape). A latência
de escape longa mostra baixa capacidade de aprendizado e memória, e latência de escape curta significa
que a capacidade de aprendizado e memória é melhor. Este estudo mostrou que a latência de escape foi
longa após modelagem via método de reperfusão de isquemia em artérias carótidas comuns bilaterais , e
os achados histopatológicos sugeriram que houve resposta inflamatória. Depois de aquecer yange
suplementando a terapia de moxabustão renal por 4 semanas, o período latente teve uma tendência a
reduzir. Os resultados histopatológicos sugeriram diminuição da infiltração inflamatória, indicando que
a moxabustão pode inibir a resposta inflamatória, mas não foi possível concluir que o efeito do
aquecimento yang e suplementação da terapia moxabustiva renal em melhorar a capacidade de
aprendizagem e memória foi superior ao da medicina ocidental, que foi inconsistente com os resultados
do tratamento de moxabustão para desordem cognitiva através da inibição da lesão cerebral conduzida
por Zhu et al. e Wang et al. [17] , [18] .

Em conclusão, os resultados do estudo mostraram que o aquecimento de yang e suplementação da

terapia de moxabustão renal pode reduzir o conteúdo de TNF-α e IL-1β no tecido cerebral e diminuir o
nível de expressão de proteína NF-kB e mRNA no tecido cerebral após hipóxia e isquemia . Com base no
mecanismo de moxabustão para aliviar a resposta inflamatória no tecido cerebral de ratos VD através da
regulação da via de sinalização NF-kB neste estudo, pode-se concluir que a moxabustão desempenha um
papel terapêutico na demência vascular e pode melhorar a função cognitiva.

O acima exposto é a pesquisa preliminar sobre a exploração do mecanismo da moxabustão na demência

vascular. Desde que o tamanho da amostra foi menor, e o controle de condição sobre o método de teste
de latência de escape do teste de navegação não foi suficientemente estável, a aquisição de dados não
conseguiu atingir uma distribuição normal, portanto, houve alguns problemas que precisavam ser mais
estudados a fim de fornecer bases científicas para o aquecimento do yang e suplementação da terapia de
moxabustão renal na melhora da demência vascular.

Apêndice . Materiais suplementares

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Referências
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Contribuições vasculares para o comprometimento cognitivo e demência: uma declaração para
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Apoiado pelo Projeto Provincial de Pesquisa em Ciências Naturais em Faculdades e Universidades da Província de Anhui:
KJ2015A077 .

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