TEMA 2

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APIS

Dificultad de subjetivididad.

¿Cóó mó resólver esa subjetivididad? Un órdenadór detecta lós cambiós de cólór.

Sistemas autómatizadós: Vitek, Biólóg, Micróscan (marcas diferentes del mismó fundamentó).

Un órdenadór interpreta ló que ve en cada una de las placas y ló traduce en un infórme en el que detecta las especies seguó n
X gradó de próbabilidad.

En placas dónde se van a inócular vóluó menes muy pequenñ ós de la muestra de la bacteria que queremós aislar, en cada
pócilló se hace una reaccióó n bióquíómica diferente.

Própórcióna el perfil bióquíómicó necesarió para la identificacióó n del micróórganismó.

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TEMA 3: TEÉ CNICAS DE DIAGNÓÉ STICÓ MICÓLÓÉ GICÓ

Van a ser muy parecidas a las de diagnóó sticó micróbiólóó gicó.

HONGOS:

 Ceó lulas eucariótas.

 Despróvistós de clórófila.

 Pared celular de quitina.

 Sapróó fitós ó parasitós.

 Inmóó viles.

 100.000 especies.

 Estructuras unicelulares: levaduras.

 Estructuras pluricelulares: hóngós filamentósós ó móhós:

o Hifas (en su cónjuntó cónstituyen el micelió).

o Hóngós dimóó rficós: hay ciertós grupós de hóngós que se pueden presentar tantó en fórma de levadura
cómó en fórma de hóngó filamentósó. Se presentan de las dós fórmas (cómó móhó a temperatura
ambiente y cómó levadura a temperatura córpóral humana. Ej G. Mucor).

Diferencias hongos y bacterias

Caracteríósticas Hóngós Bacterias

Tamanñ ó Levadura: 20-50um 1-5um
Móhós: nó definible, peró mayór que
las levaduras
Nuó cleó Eucarióta Prócarióta
Citóplasma Mitócóndrias, retíóculó endóplasmaticó -
Membrana citóplasmaó tica Esteróles Sin esteróles (exceptó micóplasma)
Pared celular Glucanós, mananó, quitina Peó ptidós cón aó c, Muraó micó, ac
teicóicós
Metabólismó Heteróó trófós, aeróbió aneróbiós, facultativós y anaeróbiós.
Heteró y autóó trófós
Sensibilidad a agentes quíómicós Sensibles a pólienós y griseófulvinas Sensibles a antibióticós
Dimórfismó Algunas Nunca

Morfología de los hongos

El cuerpó ó estructura vegetativa de lós hóngós

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Lós móhós se denóminan tambieó n hóngós filamentósós pór estar fórmadós pór las hifas que són filamentós que crecen pór
lós extremós. Las hifas pueden ser cenócíóticas ó septadas.

 Hifas tótalmente huecas: hifas cenócíóticas.

 Hifas tabicadas: hifas septadas.

Estó va a ser la base de la identificacióó n de lós móhós, de fórma micróscóó pica atendiendó a su mórfólógíóa.
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Las levaduras que són unicelulares.

Saccharomyces cerevisiae, Schyzosaccharomyces, Candida, Hansenula…

Reproducción de los hongos

Lós hóngós presentan diversas módalidades de repróduccióó n sexual y asexual

Asexual:

 Cónstriccióó n y fisura transversal.

 Gemacióó n (fórmacióó n de yemas).

 Fórmacióó n de espóras.

Sexual:

 Unióó n de nuó cleós cómpatibles mediante fusióó n de gametós haplóides.

TIPÓS DE MICÓSIS y HÓNGÓS PRÓDUCTÓRES

MICÓSIS SUPERFICIALES:

Tinñ a: Epidermóphytón

Favus: Trychóphtón

MICÓSIS SUBCUTANEAS

Crómatóblastósis

ESpórótricósis

MICÓSIS SISTEÉ MICAS (las maó s graves)

Blastómicósis

Cóccidióiddómicósis
Criptócócósis
Históplasmósis.

OTRAS MICOSIS OPORTUNISTAS

CANDIDIASIS

 Candidiasis bucal ó muguet.

 Candidiasis del panñ al.

 Vaginitis.

 Balanitis (hómbre).

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ASPERGILOSIS

 Cutaó nea.

 Pulmónar (muy grave en individuós que puedan estar expuestós en el ambiente a espóras del geó neró Aspergillus).

MEDIOS DE CULTIVO PARA HONGOS

Lós hóngós filamentósós crecen muchó maó s despació.

Mayóríóa de hóngós y levaduras. Tambieó n pódríóan crecer

bacterias pór ló que ló suplementamós cón antibióó ticós.

La sangre siempre va a ser un nutriente muy

apetecible para lós micróórganismós patóó genós,
en cóncretó las bacterias patóó genas suelen
necesitar hierró que óbtienen a partir de la
sangre.

Lós mediós de cultivó són muy impórtantes cómó herramientas para cultivó y pósteriór identificacióó n de lós hóngós.

Lós hóngós se incuban entre 25-30 ºC. En casó de infecciónes sisteó micas se incuban del órden de 37 ºC.

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En casó de muestras líóquidas cóncentrar la muestra pór ultracentrifugacióó n.

La tincióó n de Gram nó se suele utilizar para lós hóngós.

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Microcultivo: aplicable a hóngós filamentósós (móhós), el próblema de lós móhós es q si crecen en placa y el móhó estaó
maduró va a crear muchas espóras. Esó cónstituye un riesgó de cóntaminacióó n para el ambiente y tambieó n es un riesgó de
cóntaminacióó n pór víóa aeó rea para el manipuladór. Pór elló lós hóngós filamentósós se cultivan en tubó (medió sóó lidó
inclinadó; slam?). Se mantiene la parte sóó lida bastante separada de la bóca del tubó para que nó exista la pósibilidad de
aerósólizacióó n de las espóras.

El aspectó de las hifas y la fórma de las espóras es ló que va a determinar la identificacióó n de un móhó cón ló cual si el
móhó ha crecidó ló tenemós que manipular cón el asa micólóó gica. Para cóger el micelió hay que pellizcar y esó supóne
rómper muchas de las estructuras pór ló que si queremós ver la muestra al micróscópió próbablemente esteó deteriórada.
Pór esó se desarrólló el micrócultivó.

Se cólóca sóbre un pequenñ ó sópórte un pórtaóbjetós y se recórta un trózó del medió de cultivó y se cólóca en el
pórtaóbjetós, se tóma muestra cón el asa y se inócula en dós puntós del trózó del medió de cultivó y se le cólóca un
cubreóbjetós encima y se tapa. Se incuba y el hóngó va creciendó y para verló al micróscópió retiramós el cubreóbjetós y ló
móntamós sóbre el cólórante de ótró pórtaóbjetós. Es muy cómpleja.

Estó se sóluciónóó cón la TÉCNICA DEL CELO. Tiene que ser un celó transparente. Si se trata de una micósis superficial en la
zóna afectada pór el hóngó se póne el celó, se despega y en un pórtaóbjetós se pega y se mira al micróscópió, va a arrancar
un móntóó n de ceó lulas epiteliales peró tambieó n arrancaraó lós hóngós que esteó afectandó esa zóna.

Pruebas muy específicas:

 Presencia de cápsula (Cryptócóccus): tincióó n tinta china.

 Test Filamentación (C. Albicans). Suspender una colonia de la levadura en un pequeño tubo Eppendorf que
contenga suero humano o suero de conejo. Este tubo se incuba entre 2-4 horas y se puede observar el fenómeno de
producción de filamentos (prolongaciones parecidas a los dedos de un guante). Es una prueba muy sencilla.

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LEVADURAS HÓNGÓS FILAMENTÓSÓS
cólónias cremósas, ópacas de crecimientó raó pidó y 2-5 mm Cólónias mayóres, vellósas, algódónósas

2 pruebas de indentificacióó n de levaduras:

ZIMOGRAMA

Fermentacióó n de lós hidratós de carbónó.

Se detecta pór la próduccióó n de gas en Campana de Durham (pequenñ ó tubó invertidó que capta el gas que se desprende en
la fermentacióó n).

AUXONOGRAMA: pruebas de asimilación

Valóra la capacidad de utilizacióó n de ciertós cómpuestós órganicós cómó uó nica fuente de carbónó en creimientó aeróbió.

Suelen usarse azucares, acidós órganicós y azucares-alcóhóles.