INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Práctica: Curva tipo de azúcares reductores Integrantes: Cedillo Alcantara Jan
Alexis y Loperena Chávez José Antonio. Sección: 2 Equipo: 1
Introducción
Los azucares reductores son aquellos azucares que poseen un Resultados
grupo carbonilo intacto y que a través de este pueden
reaccionar como reductores con otras moléculas. Una curva
tipo o curva de calibración es una representación gráfica entre
la relación de concentración y absorbancia.
Para realizar una curva tipo es necesario realizar el método
DNS el cual es una técnica colorimétrica que emplea ácido
3,5-dinitrosalicilico para la hidrolisis de polisacáridos
presentes en una muestra. Determina las absorbancias por
medio de un espectrofotómetro a 540 nm. Esta técnica sirve
para cuantificar los productos de una reacción enzimática o
cuantificar azucares reductores producidos durante una
fermentación.
El DNS reacciona únicamente con los azúcares reductores.
La sacarosa es un azúcar no reductor, pero tras su hidrolisis
en un medio ácido se liberan glucosa y fructosa que si son
reductores y reaccionan con el DNS generando un producto
de distintas coloraciones.
La intensidad de los colores que se pueden medir por métodos
espectrofotométricos es proporcional a la concentración de
glucosa más fructosa.
Objetivos
Resultados por sección
Obtener una curva de calibración, mediante la cual se puedan
transformar las lecturas de absorbencia obtenidas en los
experimentos de cinética enzimática, en micro moles de
azúcar reductor, para de esta manera calcular la actividad de
la enzima invertasa en unidades internacionales en las
prácticas de cinética enzimática.

Metodología
Se realizo una serie de tubos de acuerdo con la siguiente
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Cálculos
Si hay 0.01 mol por cada 1000ml de solución de azúcar observar como la absorbancia está directamente relacionada
reductor, entonces por cada 0.1 ml de solución de azúcar hay con las unidades de invertasa que de igual manera se
1x10-6 moles de azúcar reductor, entonces: comprueba con el análisis del espectro fotométrico de oxido
reducción
Tubo Micromoles
1 1 Referencias
2 2  Lehninger A. (2006) “Principios de bioquímica”, 4ta.
3 4 Ed., México, Omega
 Mc Murry (2008) Biomoléculas; carbohidratos in
4 8
“Química Orgánica”, México, Cengage Learning, 992-
5 10 993p.

Discusión de resultados
Con base a los resultados de la absorbancia y la cantidad
moles de azúcar reductor se obtuvo se observa como la
absorbancia y el numero de micro moles son datos
directamente proporcionales ya que mientras la cantidad de
moles de azúcar reductor aumenta también lo hace la
absorbancia, aunque en el ultimo ensayo se muestra una
disminución de la temperatura con respecto a los demás tubos
de ensaye esto puede deberse a diversos factores pero
principalmente a que no se adicionaron las cantidades
necesarias de reactivos o en este caso es muy probable que no
se haya adicionado glucosa mas sacarosa y eso se hace muy
evidente en la gráfica. A pesar de esto la curva nos servirá
para comprarla o extrapolarla con las siguientes prácticas de
laboratorio.
Se observo que los resultados por sección estuvieron fuera de
los rangos esperados esto el causante de esto puede ser la falta
de glucosa mas fructosa o algún reactivo, aunque no se puede
comprobar si esto es cierto debido a que solo dos equipos
incluyendo el nuestro compartieron sus resultados
Conclusiones
La curva de calibración elaborada con la absorbencia de los
problemas estándar y la concentración de azúcares reductores
permite realizar un estudio de la actividad de la enzima
invertasa ya que nos brinda la posibilidad de
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