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INDICE

I. OBJETIVOS ..................................................................................................... 1

II. FUNDAMENTO TEÓRICO ............................................................................... 1

III. MATERIALES ............................................................................................... 3

3.1. EQUIPOS E INSTRUMENTAL .................................................................. 3

3.2. MATERIALES, INSUMOS Y REACTIVOS ................................................ 3

IV. MÉTODOS .................................................................................................... 3

V. RESULTADOS Y DISCUSIONES .................................................................... 4

VI. CONCLUSIONES ......................................................................................... 9

VII. RECOMENDACIONES ................................................................................. 9

VIII. CUESTIONARIO ......................................................................................... 10

IX. BIBLIOGRAFIA .......................................................................................... 20


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SEPARACIÓN POR CENTRIFUGACIÓN

I. OBJETIVOS
 Aplicar los principios de la centrifugación para separar el almidón
resuspendido.
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
La separación mecánica (o física) de distintos componentes de los
alimentos se pueden realizar con tres operaciones unitarias como son la
filtración, la extracción por presión y la centrifugación Cualquiera de estos
métodos es ampliamente utilizado en la industria alimentaria para la
producción, purificación y concentración de alimentos, o de sus
componentes (por ejemplo: jugos, pectina, enzimas, cremas y cafés
solubles).
 Filtración: Es la separación de los sólidos suspendidos en líquidos
por paso de la mezcla a través de una capa de material poroso
 La extracción por presión: Es la separación mediante presión de los
líquidos retenidos en los sólidos.
 Centrifugación: Separación de dos líquidos no miscibles o de sólidos
suspendidos en líquidos mediante la aplicación de la fuerza
centrífuga.
La centrifugación es una operación unitaria básica con la que se lleva a
cabo la separación de las sustancias por medio de la fuerza centrífuga.
La centrifugación se aplica en la separación de líquidos inmiscibles, la
clarificación centrifuga, separación de lodos y filtración centrifuga
(Alcázar, 1997). Cuando un material es sometido a rotación se genera
una fuerza centrífuga cuya magnitud depende de su masa (densidad) y
del radio y la velocidad de rotación.

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Las centrifugas se clasifican en tres grupos: Para la separación de


líquidos no miscibles, para la clarificación de líquidos de líquidos y la
eliminación de sólidos a bajas concentraciones (centrifugas
clarificadoras) y para la eliminación de sólidos (limpieza, eliminación de
agua).

𝐹𝑐 = 𝑚𝑅𝑤 2

En la siguiente ecuación se puede observar que la fuerza centrífuga es


proporcional al radio de giro. El esfuerzo desarrollado en la pared de la
cámara es proporcional al cuadrado del radio de la misma. Este factor es
el que, de ordinario, determina la velocidad máxima, o límite, de la
cámara. Las separadoras centrifugas pertenecen a dos tipos generales,
de alta velocidad y pequeño diámetro y de baja velocidad y gran diámetro.
La fuerza centrífuga desarrollada en las del primer tipo es, en general,
mayor que la producida en los aparatos grandes. En la descripción de las
presentaciones de los separadores centrífugos, se usa con frecuencia
RFC, con lo que se designa el cociente entre la aceleración máxima
desarrollada en la cámara (𝑅𝑤 2 ) y la aceleración debida a ala gravedad
(g). Las máquinas industriales suelen desarrollar valores RFC entre 700g
y 22000g. Las centrifugas de laboratorio pueden desarrollar RFC de
34000g y las ultracentrífugas son más adecuadas para separaciones
sólido-líquido.
También es posible la obtención, en las separadoras centrifugas, de tres
corrientes:
 Fase ligera (oleosa)
 Fase densa (acuosa)
 Papilla o concentrado de sólidos insolubles.

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III. MATERIALES
3.1. EQUIPOS E INSTRUMENTAL
 Centrifuga
 Licuadora
 Balanza
 Espátulas delgadas
 8 Viales
 04 vasos de precipitados de 250 mL
 04 vasos de precipitados de 100 mL
 Tamiz de 80 mesh (177 µm) y 325 mesh (44 µm).
3.2. MATERIALES, INSUMOS Y REACTIVOS
 200 gr de quinua
 Agua destilada
 NaOH 0.2 %
 Ácido sulfúrico 1M
IV. MÉTODOS
- Los granos de quinua previamente lavados serán triturados en una
licuadora
- El material triturado pasara por tamices de 80 mesh (177 µm) y 325
mesh (44 µm).
- El almidón será resuspendido en agua destilada
- La separación del almidón se realizará por centrifugación.
- Después de cada centrifugación se descartará el sobrenadante
- La capa superior, de coloración oscura que contiene proteína y fibra
será retirada con ayuda de una espátula.
- Ese procedimiento será repetido por 5 veces retirando la capa
superior después de cada centrifugación.

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- El almidón obtenido será suspendido en solución a 0.2 % de NaOH


(pH=10,5). Y se continuará retirando la capa superior después de la
centrifugación
- El almidón se resuspenderá en una solución de HCl 1 M. Después de
la centrifugación se retirará la capa superior del almidón.
- El almidón purificado se secará en una estufa a 37°C por 12 horas e
inmediatamente
- Se continuará con la molienda en un mortero y se tamizará en una
malla de 60 mesh (250 µm).

V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
Anotar sus observaciones después de cada centrifugación y sobre el
almidón obtenido.

a. Tubo Utilizado en la Centrifugación.

Es un pequeño contenedor cilíndrico de


plástico, con un fondo cónico y típicamente
una tapa unida al cuerpo del tubo para evitar
su desprendimiento. Son empleados para la
centrifugación y a menudo como simples
viales contenedores de sustancias químicas.

Los tubos están fabricados de polipropileno y


pueden emplearse a temperaturas muy bajas
Figura 1. Tubo (-20 °C).Su tamaño oscila entre los 200 μL y
falcón.
los 2 mL.

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b. Centrifuga.
Es una máquina que pone
en rotación una muestra para –por
fuerza por
centrífuga– acelerar la decantación o
la sedimentación de sus componentes o
fases (generalmente una sólida y una
líquida), según su densidad. Existen
diversos tipos, comúnmente para
objetivos específicos

Figura 2. Centrífuga.

c. Rotor de la centrífuga.

Los tubos se alojan con un ángulo fijo


respecto al eje de giro. Se usan
habitualmente para volúmenes grandes
de solución de partículas de alta
densidad como son bacterias, o
levaduras y en la separación isopícnica
(isopícnica = de igual densidad, la
densidad del medio es igual a la
densidad de la partícula) de
macromoléculas (ácidos nucleicos,
etc.).

Figura 3. Rotor angular o de ángulo fijo

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Los rotores de ángulo fijo se emplean principalmente para sedimentar materiales


hasta que formen una masa muy compacta en el fondo del tubo (pellet) y después
por decantación, separar fácilmente el sobrenadante del sedimento. La ventaja de
este tipo de rotores es que normalmente permiten una sedimentación más rápida de
las sustancias y, puesto que todos sus componentes son fijos, el riesgo de fallos
mecánicos se reduce.

CUADRO N°1. Observaciones obtenidas en cada centrifugación.


N° Centrifugación OBSERVACIONES

Luego de realizar la centrifugación N°7, se procedió


7° centrifugación a extraer los residuos sólidos que se encontraban en
cada uno delos 3 viales.
8° centrifugación En la centrifugación N°8 se observó que la cantidad
de residuo que aparecía era mínimamente menor a
la anterior en cada uno delos viales.
9° centrifugación En la centrifugación N° se observó que la cantidad
de residuo que aparecía en el fondo de cada vial si
disminuyó aparentemente a comparación de la
centrifugación N°8.
10° centrifugación En la centrifugación N° 10 y N° 11 se observó que la
cantidad de residuos que ya era muy poco seguía
constante, donde ya no era notable el cambio ni la
11° centrifugación disminución de cada centrifugación.

FUENTE: Elaboración propia, 2017.

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 El peso para cada vial desde la centrifugación N°7 hasta la N°11


fue de 65.95 gr ± 1 gr., así que se puede afirmar que el peso fue
constante.

RENDIMIENTO DE LA QUINUA

Peso inicial =270 g.


Peso final = 23.7 g.

Figura 4. Muestra a centrifugar.

a. Porcentaje de rendimiento

270 gr. 100%


23.7% x%

(𝟐𝟑. 𝟕𝒈𝒓. )(𝟏𝟎𝟎%)


𝑿% =
𝟐𝟕𝟎 𝒈𝒓.

𝑿% = 𝟖. 𝟕𝟕𝟖% 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒎𝒊𝒅ó𝒏 𝒅𝒆 𝒒𝒖𝒊𝒏𝒖𝒂.

 El mayor componente de los granos de quinua es el almidón, que


constituye el 60% de peso fresco del grano con solo el 11% de
amilasa (Koziol, 1992).

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 La estructura de la amilopectina del almidón de quinua es similar


a la de los cereales, pero su elevado contenido hace que la pasta
de quinua sea más viscosa que la del trigo. El almidón de la quinua
es del tipo perispermo y no forma geles, se torna azul con el yodo,
por el contrario, el almidón de los cereales se encuentra en el
endospermo (Morón y Schejtman, 1997).

 Matos y Sánchez determinaron el rendimiento del almidón de tres


variedades de quinua, Pasankalla,quinua real y Kancolla, donde el
mayor rendimiento es de 47,39 % para Pasankalla; seguido de la
variedad Kancolla,de 38,46 %; mientras que el menor rendimiento
es de 18,25% para la variedad Quinua real. Cabe destacar que
estos valores superan al porcentaje de fuentes importantes de
almidón como la papa, camote, yuca y maíz (7-18%). Esta
diferencia, comparada con los resultados.

 Sin embargo, nuestros datos obtenidos se acercan más a los


resultados obtenidos para la yuca y la papa, esto se puede deber
a las variedades en estudio y a las condiciones climatológicas en
las que se desarrollan. Ello está corroborado por Singh et al.
donde la relación amilosa/amilopectina en los almidones varía de
acuerdo al origen botánico, al clima y tipo de suelo, al proceso de
obtención y purificación, así como de las condiciones de
almacenamiento.

 El rendimiento obtenido fue bajo, posiblemente se debió a la


limpieza no bien realizada en cada número de centrifugación,
donde se perdió cantidad de muestra en cada vial.

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VI. CONCLUSIONES
 En la presente práctica desarrollada se logró aplicar los principios
de la centrifugación para separar el almidón resuspendido.
 El rendimiento obtenido para la quinua fue de 8.778% 𝑑𝑒 𝑎𝑙𝑚𝑖𝑑ó𝑛
, el cual fue muy bajo a comparaciones bibliográficos.
 El almidón es un polisacárido muy abundante en la quinua y otros
alimentos y es útil para muchos aspectos tanto en la industria
alimentaria como en la industria química.

VII. RECOMENDACIONES

 Al realizar la limpieza y la eliminación de residuos de cada


vialluedo de finalizar una centrifugación se debe tener mucho
cuidado y no contaminar el almidón obtenido ya que si se hace ,la
centrifugación realizada sería vanamente.

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VIII. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la ultra centrifugación?
Es una técnica que se utiliza para separar los componentes de una
solución según su peso. El proceso consiste en someter la solución a un
campo gravitatorio suficientemente elevado haciendo girar la muestra a
más de 100000 revoluciones por minuto durante un tiempo prolongado
para que los distintos componentes se ordenen por capas.

Figura 4 .Desarrollo de la centrifugacion a velocidades y tiempos crecientes

La muestra homogeneizada ahora está lista para la centrifugación en


una ultracentrifugadora. Una ultracentrifugadora consiste en una cámara
al vacío y refrigerada que contiene un rotor, el cual es manejado por un
motor eléctrico capaz de girar a alta velocidad. Las muestras son
ubicadas en tubos que se encuentran dentro del rotor o sujetos a este. La
velocidad rotacional puede alcanzar más de 100.000 rpm para el modelo
“floor”, 150.000 rpm para el modelo “bench-top” (Beckman Optima Max-
XP), generando fuerzas centrífugas entre 800.000g y 1.000.000g. Esta
fuerza causa la sedimentación de macromoléculas e incluso puede

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causar una distribución no uniforme de moléculas pequeñas. Como los


diferentes fragmentos de la célula tienen diferentes tamaños y
densidades, cada fragmento se va a depositar en un precipitado con
diferentes fuerzas centrífugas mínimas. De esta manera, la separación
de la muestra en diferentes capas puede realizarse mediante un primer
centrifugado de la muestra homogénea original bajo fuerzas débiles,
removiendo el precipitado, y posteriormente exponiendo las
subsecuentes fases sobrenadantes a campos centrífugos cada vez
mayores. Cada vez, una porción de diferente densidad es precipitada a
la parte inferior del tubo y es extraída. La repetida aplicación de este
proceso produce un rango de capas que incluye diferentes partes de la
muestra original. Algunos pasos adicionales pueden realizarse para
refinar aún más cada uno de los precipitados obtenidos. La
sedimentación depende de la masa, la forma y el volumen específico
parcial de una macromolécula, así como también de la densidad del
solvente, el tamaño del rotor y la tasa de rotación. La velocidad de
sedimentación puede ser monitoreada durante el experimento para
calcular la masa molecular, así como el coeficiente de sedimentación.
Valores grandes de S (mayor tasa de sedimentación) corresponden a un
mayor peso molecular. Partículas más densas se sedimentan a mayor
velocidad. Las proteínas largas tienen mayores coeficientes de fricción y
se sedimentan más lentamente para asegurar mayor precisión.(Gerald
Karp, 2005)

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Figura 5.Ultracentrifugacion

2. ¿Qué tipo de centrifuga se emplea en la industria de lácteos?


En muchos casos la leche es primeramente clarificada a través de una
centrifuga en la recepción para eliminar las impurezas. Si las condiciones
del proceso son favorables, es también posible obtener una reducción
eficiente en la cantidad de leucocitos y bacterias.
El clarificador de leche puede operar con leche fría o caliente, sin
embargo una temperatura más alta aumenta la eficiencia de clarificación.
El tipo de centrifuga puede ser de rotor solido que serían máquinas de
limpieza manual o centrifugas automáticas que serían con descargas
programadas

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Desnatar la leche durante la pasteurización es la aplicación más común


para los separadores centrífugos en las lecherías. La grasa de la leche
globular se separa de la leche descremada, leche caliente la cual se lleva
a cabo entre 45 ° C y 60 ° C. Esta temperatura asegura una buena
eficiencia de espumado y una baja viscosidad de la crema a la salida.

Durante el proceso de clarificación de la leche se logra separar cualquier


sedimento que pueda esta tener durante el proceso de recolección que
se hace en las granjas o fincas.
Las centrifugas descremadoras se utilizan para desnatar la leche y estas
pueden dar un contenido de grasa residual en la leche inferior al 0,05 %.
A esto llamamos leche descremada.

La centrifuga descremadora cuenta con dos salidas de producto líquido.


Estos productos son: Leche descremada y crema. Estos equipos vienen
acondicionados con un sistema de tuberías y válvulas para poder darle
ajustes necesarios y así obtener una leche con diferentes porcentajes de
grasa pero lo normal oscila en 3,2% de grasa.

Los siguientes son ejemplos de aplicaciones:

■ Leche y crema descremado suero


■ Clarificación de leche y suero de leche
■ Las bacterias eliminación de la leche y suero de leche
■ Crema de concentración
■ Normalización de crema de leche, nata y suero de leche

La elaboración de los productos, tales como:


■ La caseína

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■ Queso fresco
■ Queso crema doble
■ La lactosa
■ Las proteínas del suero
■ Mantequilla
■ Mantequilla de aceite

Figura 6.Centrífugas y separadores para la obtención de suero


lácteo.

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Figura 7.Centrífuga - Clarificador CSE para leche o lactosuero

Figura 8. Bomba centrífuga / para bebida / para productos lácteos / de


aceite - C series

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Figura 9.Bomba para productos lácteos / eléctrica / centrífuga de


voluta / autocebante

3. Explique la Ley de Stoke


La Ley de Stokes se refiere a la fuerza de fricción experimentada por
objetos esféricos moviéndose en el seno de un fluido viscoso en un
régimen laminar de bajos números de Reynolds. Fue derivada en 1851
por George Gabriel Stokes tras resolver un caso particular de las
ecuaciones de Navier-Stokes. En general la ley de Stokes es válida en el
movimiento de partículas esféricas pequeñas moviéndose a velocidades
bajas.
La ley de Stokes puede escribirse como:

𝐹𝑑 =6πR η v

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donde R es el radio de la esfera, v su velocidad y η la viscosidad del fluido.


La condición de bajos números de Reynolds implica un flujo laminar lo cual puede
traducirse por una velocidad relativa entre la esfera y el medio inferior a un cierto
valor crítico. En estas condiciones la resistencia que ofrece el medio es debida casi
exclusivamente a las fuerzas de rozamiento que se oponen al deslizamiento de
unas capas de fluido sobre otras a partir de la capa límite adherida al cuerpo. La ley
de Stokes se ha comprobado experimentalmente en multitud de fluidos y
condiciones.
Si las partículas están cayendo verticalmente en un fluido viscoso debido a su
propio peso puede calcularse su velocidad de caída o sedimentación igualando la
fuerza de fricción con el peso aparente de la partícula en el fluido.

donde:
Vs es la velocidad de caída de las partículas (velocidad límite)
g es la aceleración de la gravedad,
ρp es la densidad de las partículas y
ρf es la densidad del fluido.
η es la viscosidad del fluido.
r es el radio equivalente de la partícula.
La ley de Stokes es el principio usado en los viscosímetros de bola en caída
libre, en los cuales el fluido está estacionario en un tubo vertical de vidrio y
una esfera, de tamaño y densidad conocidas, desciende a través del líquido.
Si la bola ha sido seleccionada correctamente alcanzará la velocidad
terminal, la cual puede ser medida por el tiempo que pasa entre dos marcas

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de un tubo. A veces se usan sensores electrónicos para fluidos opacos.


Conociendo las densidades de la esfera, el líquido y la velocidad de caída se
puede calcular la viscosidad a partir de la fórmula de la ley de Stokes. Para
mejorar la precisión del experimento se utilizan varias bolas. La técnica es
usada en la industria para verificar la viscosidad de los productos, en caso
como la glicerina o el sirope.
La importancia de la ley de Stokes está ilustrada en el hecho de que ha
jugado un papel crítico en la investigación de al menos 3 Premios Nobel.
La ley de Stokes también es importante para la compresión del movimiento
de microorganismos en un fluido, así como los procesos de sedimentación
debido a la gravedad de pequeñas partículas y organismos en medios
acuáticos.También es usado para determinar el porcentaje de granulometría
muy fina de un suelo mediante el ensayo de sedimentación.

 En la atmósfera, la misma teoría puede ser usada para explicar porque las
gotas de agua (o los cristales de hielo) pueden permanecer suspendidos en
el aire (como nubes) hasta que consiguen un tamaño crítico para empezar a
caer como lluvia (o granizo o nieve). Usos similares de la ecuación pueden
ser usados para estudiar el principio de asentamiento de partículas finas en
agua u otros fluidos. (Lamb, H. ,1994).

Un cuerpo que cumple la ley de


Stokes se ve sometido a dos
fuerzas, la gravitatoria y la de
arrastre. En el momento que
ambas se igualan su
aceleración se vuelve nula y su
velocidad constante.

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4. ¿Qué diferencias existen entre la centrifugación liquido-líquido y


sólido-líquido?

CENTRIFUGACIÓN CENTRIFUGACIÓN
LIQUIDO-LÍQUIDO SÓLIDO-LÍQUIDO
La centrifugación está basada en la Procesos de separación sólido-líquido la
distinta velocidad de desplazamiento de fuerza impulsora de la
las partículas en un medio líquido al ser sedimentación es sólo la de la gravedad
sometidas a un campo centrífugo y es En las separaciones centrífugas
aplicable a separaciones sólido-líquido y a sólido-líquido la velocidad de sedimen-
la separación de dos líquidos inmiscibles tación es mayor que la sedimentación libre
con o sin la presencia de sólidos. Tanto o gravitacional, debido a que
una como otra se basan en la diferencia de los equipos al girar producen una mayor
densidades entre ambas fases.. aceleración de las partículas
El objetivo de la separación de dos líquidos (Brunner y Hemfort, 1988).
es obtener la fase ligera libre de fase Si en una separación sólido-líquido se
pesada, el proceso se denomina pretende lograr un efluente puro libre de
PURIFICACIÓN y cuando lo interesante es partículas sólidas se denomina
aislar la fase pesada libre de fase ligera se CLARIFICACIÓN; y si lo que se desea es
habla de CONCENTRACIÓN. obtener una suspensión pero con mayor
contenido de sólidos se habla de un
Cuando en una separación líquido - líquido proceso de ESPESAMIENTO.
nuestro objetivo es obtener la fase ligera Por su parte, la separación sólido - líquido
libre de fase pesada, denominamos al y la líquido - líquido - sólido sólo puede
proceso PURIFICACIÓN y cuando lo basarse en la diferencia de densidades
interesante es aislar la fase pesada libre entre los líquidos y estos con el posible
de fase ligera lo denominamos sólido presente
CONCENTRACIÓN.

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IX. BIBLIOGRAFIA
 GERALD KARP(2005) Cell and molecular biology: Concepts and
experiments, fourth editionVon Hoffman press
 DORÁN P.(1998). Principios de Ingeniería de los Bioprocesos. pag 237-
239
 BATCHELOR, G.K. (1967). An Introduction to Fluid
Dynamics. Cambridge University Press. ISBN 0-521-66396-2.
 LAMB, H. (1994). Hydrodynamics (6th edition edición). Cambridge
University Press. ISBN 978-0-521-45868-9. Originally published in 1879,
the 6th extended edition appeared first in 1932.

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ANEXOS

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ANEXO 1. IMÁGENES DE LA PRACTICA DESARROLLADA.

Figura 9.Viales de la 7 ° centrifugación. Figura 10.Viales de la 8 ° centrifugación.

Figura 11.Peso de un vial luego de cada Figura 12. Residuo encontrado dentro
centrifugacion . del vial.

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