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CAPÍTULO TERCERO
Conservación por fermentación
1. INTRODUCCIÓN
En términos generales, la fermentación implica el uso de microorganismos para
realizar transformaciones de materia orgánica, catalizadas por enzimas. La
fermentación ha sido considerada durante muchos siglos como un arte, la elaboración
de vino se practica desde hace al menos 10.000 años, los historiadores indican que
los egipcios producían cerveza 5.000-6.000 años a.C. y también existen referencias
de elaboración de queso 5.000 años a.C. En resumen, la producción de alimentos y
bebidas que utiliza fermentación se viene realizando desde hace aproximadamente
10.000 años antes de que se conociera la existencia de los microorganismos.
La industria moderna de alimentos fermentados se ha desarrollado a partir de los
procesos tradicionales de fermentación, pero el procedimiento en sí mismo ha
continuado desarrollándose tecnológicamente. Procesos tales como fabricación de
pan, de quesos, cerveza y destilados se han desarrollado para implantar
requerimientos comerciales de producciones a gran escala, de calidad elevada y
constante, de costes competitivos y variedad de productos.
Así, la fermentación de la masa de pan se ha acelerado por el uso de elevadas
proporciones de levaduras a altas temperaturas, la utilización de amilasas
microbianas que liberan azúcares fermentables de los granos de almidón proporciona
azúcares para la fermentación de las levaduras y la producción de C(X que hace subir
la masa y da al pan su característica textura. El uso de cultivos starters para la
elaboración de queso es uno de los factores que han contribuido al desarrollo de una
amplia variedad de productos de alta calidad. Lo mismo puede decirse de los
embutidos crudos curados. En las industrias de cerveza, vino y bebidas alcohólicas,
se han producido muchos cambios desde los tiempos de Pasteur. la utilización de
levaduras seleccionadas, control de la temperatura de fermentación, etc.
En una parle importante de los métodos utilizados para la conservación de
alimentos, el objetivo es inhibir el desarrollo de los microorganismos que pueden
causar su deterioro, pero también existe la posibilidad de utilizar algunos
microorganismos para conseguir esa conservación, creando condiciones desfa-
vorables para el desarrollo de otros microorganismos, así por ejemplo la producción
de cantidades substanciales de alcohol o de ácido por ciertos organismos crea unas
condiciones desfavorables para el desarrollo de otros. En este principio se basan los
métodos de conservación de alimentos por fermentación.
La conservación de alimentos por medio de procesos fermentativos, en sus
orígenes se aplicaba como consecuencia de la contaminación accidental de las
distintas materias primas por la microflora ambiente llamada útil; pero hoy en día.
gracias a la individualización de los microorganismos responsables del proceso
fermentativo y al estudio de las condiciones óptimas de fermentación, es cuando este
método de conservación ha tenido más desarrollo. Actualmente, con el cultivo de
estos microorganismos en laboratorio y la incorporación de estos cultivos (cultivos
starter) a los productos a someter a fermentación, es posible reducir las pérdidas
debidas a fermentaciones anómalas, además de obtener productos terminados
estandarizados en sus características organolépticas.
Los procesos fermentativos se utilizan actualmente no sólo para la conservación
de los alimentos en el estricto sentido del término, sino también para conferirles un
mejor aroma y una mayor digestibilidad. El proceso fermentativo, en la mayor parte
de los casos, permite la prolongación de la vida útil no tanto del alimento tal cual, sino
de sus principios nutritivos, dando así origen a un producto cuyo estado físico se ha
modificado para presentar características organolépticas propias y típicas.
Un alimento se considera fermentado cuando uno o más de sus componentes
químicos son atacados por microorganismos, considerados útiles, por lo que su
composición química resulta modificada. Además de los microorganismos, pueden
intervenir en estos procesos fermentativos, también procesos pro- teolíticos debidos
a la acción de enzimas propias del producto alimentario de partida. En algunos casos,
además, el proceso fermentativo es realizado por microorganismos distintos, uno de
los cuales actúa después de que el otro haya modificado la materia prima de partida,
como es el caso de los quesos azules, en los cuales el desarrollo del moho, tiene
lugar después de que las bacterias lácticas hayan realizado la fermentación de la
lactosa.
Por último, hay que señalar que el proceso fermentativo de un producto alimentario
dado, puede hacerlo utilizable también para individuos que no toleran la presencia en
ellos de ciertos compuestos químicos. Es el caso, por ejemplo, de las personas
intolerantes a la lactosa, las cuales, según su estado patológico, pueden
tranquilamente tomar leches fermentadas, aunque con ellas ingieran cantidades de
lactosa superiores o al menos iguales a las de la leche. La explicación de este
fenómeno reside en el hecho de que los cultivos microbianos utilizados como starters
continúan su acción demoledora de la lactosa, también a nivel intestinal, acción que
está potenciada por la presencia de la misma enzima que se libera como
consecuencia de la lísis de una parte de los microorganismos. Muchos de estos
productos fermentados se consideran como verdaderos alimentos dietéticos, por su
efecto benéfico a nivel intestinal, regulando la flora.
2. MICROORGANISMOS DE IMPORTANCIA INDUSTRIAL PARA LA
CONSERVACIÓN DE ALIMENTOS
Los microorganismos útiles para el proceso de fermentación deben presentar tres
características especiales:
• Deben ser capaces de desarrollarse rápidamente en un sustrato y ambiente
adecuados, y ser fácilmente cultivados en grandes cantidades.
• Deben tener la capacidad de mantener constancia fisiológica bajo las condiciones
citadas, y producir fácil y abundantemente las enzimas esenciales para que se
puedan dar los deseados cambios químicos.
• Las condiciones ambientales requeridas para el máximo desarrollo y producción
deben ser comparativamente simples.
Los microorganismos utilizados en las fermentaciones deben producir grandes
cantidades de enzimas, que son las sustancias reactivas que controlan, como se ha
dicho, las reacciones químicas en la fermentación.
Los microorganismos que presentan interés en la industria alimentaria, son
también de tres tipos: levaduras, bacterias y mohos, pero en este caso tienen en
común el carácter de ser útiles.
2.1. LEVADURAS
Las levaduras pertenecen a tres clases de hongos: ascomicetos, basidiomi- cetos
y deuteromicetos. ésta última incluye las formas imperfectas de las levaduras, que
tienen afinidades con los ascomicetos y basidiomicetos.
La temperatura normal de cultivo de las levaduras se sitúa entre 25 y 30°C, que
permite efectivamente el crecimiento de la mayor parte de las mismas, pero éstas no
son las temperaturas óptimas de crecimiento que las levaduras encuentran en sus
hábitats naturales. Su velocidad de crecimiento disminuye progresivamente para
valores de au inferiores a 0.99. Aunque el efecto de la presión osmótica varía de una
cepa a otra, la mayor parte de las cepas no pueden desarrollarse para actividades de
agua inferiores a 0.90, pero algunas toleran presiones osmóticas mayores,
correspondientes a una aw del orden de 0.60, pero con un metabolismo lento.
Todas las levaduras son capaces de desarrollarse en presencia de oxígeno: no
hay levaduras anaerobias estrictas. Algunas son aerobias estrictas, particularmente
las levaduras de los géneros: Rhodotorula. Rhodosporidium. Lipomy- ces,
Sciccharomycopsis, Cryptococcus y Sporobolomyces, más algunas especies de los
géneros Hcinsenulci, Pichia. Torulopsis y Debciryomices.
Las otras levaduras son aero-anaerobias facultativas y entre ellas hay:
• levaduras que prefieren un metabolismo fermentativo incluso en presencia de
oxígeno. Después de una fase inicial de desarrollo y proliferación celular, pasan a
utilizar la glucosa con producción de alcohol etílico y C02; respiración seguida de
fermentación. A este tipo pertenecen Sac- chciromyces, Schizosaccharomyces y
Brettanomyces, más algunas especies de Torulopsis.
• levaduras que prefieren un metabolismo respiratorio si hay oxígeno. Pueden
utilizar también sustratos ya fermentados, dado que además pueden tolerar muy
bien discretas cantidades de alcohol, pueden también transformarlo
posteriormente hasta CO,. Pertenecen a este grupo Candida, Kluyveromyces. la
mayor parte de Pichia y Hansenula y algunas Torulopsis.
Todas las levaduras no presentan la misma sensibilidad al etanol, las más
resistentes son las Saccharomyces que se utilizan en los procesos de fermentación
alcohólica para la elaboración de bebidas o la producción de alcohol industrial. Según
las cepas y el estado fisiológico del cultivo, el etanol es tóxico a concentraciones de 8
a 18%. La tolerancia al etanol depende de la composición en ácidos grasos de las
membranas citoplasmáticas.
El SO: tiene un efecto inhibidor más intenso sobre las bacterias que sobre las
levaduras, pero entre éstas existe también diferente sensibilidad,
Zygosaccharomyces bailli y los Bretanomyces son más resistentes que Klo- eckera
apiculata y Pichia membranaefaciens por ejemplo. Su acción depende del pH. cuando
más bajo es el pH más activo es el SO, contra los microorganismos.
Existen muchos géneros de levaduras entre los más importantes están:
• Saccharomyces cerevisiae, variedad ellipsoideus, es la levadura por excelencia,
resistente al alcohol etílico hasta 16.8° y al S02
• Saccharomyces roser. no forma muchos ácidos volátiles, pero no es muy
resistente al alcohol y al S02.
• Saccharomyces bayanus u oviformis: es el más resistente al alcohol (hasta 18.4°’).
• Saccharomyces ludwigi: es interesante por su elevada resistencia al SO,.
• Schizosaccharomyces pombe: capaz de transformar el ácido málico en alcohol
etílico, por medio de la fermentación maloalcohólica.
Saccharomyces cerevisiae es la levadura más ampliamente utilizada en las
fermentaciones industriales, metaboliza los azúcares: sacarosa, glucosa, fructosa,
maltosa y maltotriosa en distinto orden. La sacarosa debe ser primero hidrolizada por
la invertasa localizada en el espacio periplásmico extracelular.
El almidón es un polisacárido abundante en la naturaleza, es interesante por lo
tanto para utilizarlo como sustrato de la fermentación por las levaduras.
Desgraciadamente. S. cerevisiae es incapaz de hidrolizar el almidón e incluso las
dextrinas. es necesario efectuar un pretratamiento de hidrólisis con enzimas
bacterianas para que S. cerevisiae pueda transformar los oligosacáridos obtenidos en
etanol. Sería interesante encontrar una especie de levadura capaz de realizar ambos
procesos, la hidrólisis y la fermentación. Algunas levaduras segregan amilasas. S.
diastaticus produce una amiloglucosidasa. pero esta enzima sólo tiene actividad sobre
los enlaces ct (1-4) del almidón.
Muy pocas levaduras tienen actividad celulolítica. únicamente se ha encontrado
en una cepa de Aareobasidiwnpullulans. Sin embargo, sí que se ha encontrado un
gran número de ellas capaces de utilizar la celobiosa (Bretta- nomyces, Candida.
Dekkera. Kluyveromyces. Pichia. Saccharomyces). Algunas levaduras producen
xilanasas que pueden hidrolizar las hemicelulosas. se trata en particular de
Trichosporon cutaneum. Cryptoccus albidus y Aureobasi- diwn pullulans. Otras
fermentan directamente la xilosa en etanol. por ejemplo Pachysolen tannophilus.
Pichia stipitis y Candida shehatae. S. cerevisiae no fermenta la xilosa pero fermenta
la xilulosa.
2.2. BACTERIAS
2.2.1. Bacterias lácticas
Son bacterias Gram +. anaerobias aunque generalmente toleran el oxigeno. En el
grupo de las bacterias lácticas, que se caracterizan por una gran producción de ácido
láctico, se incluyen los géneros Lactobacillus, Streptococcus, Leuconostoc y
Pediococcus. Las menos sensibles al oxígeno son los Streptococcus.
Las bacterias lácticas sintetizan su ATP en la fermentación láctica de los glúcidos.
Algunas especies de Lactobacillus también pueden obtener ATP por fermentación de
la arginina. Ya en 1920, Orla-Jensen clasificó las bacterias lácticas en dos grupos
según sus características bioquímicas: las homofermen- tativas y las
heterofermentativas. La diferencia entre estos dos grupos se detecta por la liberación
de oxígeno. Las bacterias homofermentativas se caracterizan por la capacidad de
transformar la glucosa y, en la mayor parte de los casos, también la fructosa en ácido
láctico, con producción nula o mínima de otros productos secundarios. Las bacterias
heterofermentativas no tienen fmctosa-difosfato-aldolasa y por lo tanto degradan los
glúcidos por la vía llamada de las pentosas fosfatos o de las hexosas fosfatos. En las
Figuras 4 y 5, en que se indican los esquemas de la fermentación homoláctica y de la
hetero- láctica, respectivamente, se pueden apreciar estas diferencias.
Los Streptococcus son bacterias homofermentativas puesto que su fermentación
es de tipo homoláctico, transformando la lactosa en ácido lác
tico. Los más conocidos son Streptococcus Icictis y Stveptococcus cremoris, que
son los responsables de la acidificación espontánea de la leche, y el Streptococcus
diacetylactis que produce también la fermentación del ácido cítrico a diacetilo,
sustancia característica del aroma de la mantequilla. Es también importante el
Streptococcus tliermophilus que se desarrolla bien a 40-45°C, por lo que se emplea
para conseguir la acidificación del yogur durante su maduración a 45°C y para la
maduración de los quesos de pasta cocida.
Los Lactobcicillus pueden ser homofermentativos y heterofermentativos. los
primeros son de dos tipos, termófilos y mesofilos. producen mayor cantidad de ácido
láctico que los Streptococcus y tienen una leve pero intensa actividad proteolítica.
Esta actividad protcolítica se aprovecha en la maduración de los quesos, en los de
pasta cocida son importantes el Lactobacillus helvéticas y el Lactobacillus lactis, que
son termófilos. Para los quesos de pasta dura no cocida se utilizan los mesofilos
Lactobacillus casei y Lactobacillus plantarían. Al grupo de los lactobacilos termófilos
pertenece el Lactobacillus bulga- ricus cuya actividad fuertemente acidificante se
aprovecha en la elaboración del yogur. Los lactobacilos heterofermentativos
presentan una menor capacidad acidificante.
Dos de las bacterias heterofermentativas (L. brevis y L. buclmerii) no pueden
desarrollarse en anaerobiosis con glucosa, porque no son capaces de reducir el acetil-
fosfato a etanol. Sobre otros glúcidos (per ejemplo, fructosa), estas bacterias pueden
desarrollarse en anaerobiosis.
El género Leuconostoc está caracterizado por bacterias heterofermentativas y
algunas pueden fermentar la nata con producción de diacetilo (Leuconostoc
citrovorum). Algunas especies como Leuconostoc mesenteroides, cultivadas sobre
medios hipersacarosados producen voluminosas cápsulas (dextrano), esta propiedad
se ha utilizado para la producción de alimentos de textura más o menos filante o
espesa.
La síntesis del ácido láctico y la tolerancia de las bacterias lácticas a este ácido
orgánico y a un pH inferior a 7, se utilizan en la conservación de alimentos, en
productos lácteos, productos cárnicos y vegetales fennentados. Estas condiciones
que, efectivamente, son soportables para las bacterias lácticas, no lo son para otros
muchos microorganismos causantes de alteraciones: Pseudomonas, enterobacterias,
Alcaligenes, Acinetobacter. etc. Sin embargo, las bacterias lácticas pueden crear
problemas en algunas otras industrias, produciendo sabores y olores desagradables,
como: vino, cerveza, carne, zumos de frutas, etc.
Otro grupo importante son los esquizomicetos. llamados "malolácticos" porque
metabolizan el ácido málico transformándolo en ácido láctico y anhídrido carbónico.
Son bacterias heterolácticas de los géneros Pediococcus y Leuconostoc, requieren
para su desarrollo una temperatura de al menos 18- 20°C y un pH óptimo del orden
de 4.
2.2.2. Bacterias acéticas
Lo que caracteriza a las bacterias acéticas es su notable capacidad de oxidar el
etanol a ácido acético a pH ácido. Son aerobias estrictas y Gram Las que se utilizan
en la producción de vinagre pertenecen al género Acetobacter, las principales
especies, en orden de importancia según su rendimiento fermentativo. son: Aceti,
Pasteurianum, Suboxydans, Oxydans, etc. Habrá por tanto que favorecer el desarrollo
de las que dan mayor rendimiento.
Para que las bacterias acéticas puedan desarrollarse de forma adecuada, el medio
debe estar bien oxigenado, es decir en continuo y constante contacto con el aire, así
como a temperaturas superiores a 20°C.
2.3. MOHOS
Los mohos, por la acción de sus activos y complejos sistemas enzimáticos, son
capaces de alterar los alimentos, produciendo en ellos cambios irremediables. Pero
también debido a sus actividades bioquímicas, se comportan como agentes
responsables de biodegradaciones. biosíntesis o bioconversiones, transformando de
forma beneficiosa sustratos de escaso valor alimenticio y poco atractivos, en
alimentos ricos en elementos asimilables de agradable sabor y aroma o en sabrosos
condimentos.
Un campo importante de aplicación de esta actividad de los mohos es la
fabricación de quesos. Los más interesantes son los mohos blancos, como Peni-
cillium camemberti que. con sus “biotipos" P. candidum y P. caseicolum se utilizan
para la fabricación de quesos enmohecidos superficialmente (Camembert, Brie) y los
mohos azules, como el Penicilliwn roqueforti utilizado para inocular los quesos
enmohecidos en toda la masa (Roquefort, Gorgonzola, etc.). Hay que tener en cuenta
también el Geotrichum candidum, utilizado frecuentemente en quesería como factor
de calidad en los quesos de pasta blanda o como flora dominante indispensable en
algunos quesos de pasta prensada.
Otros mohos, como el Penicilliwn nalgiovense, son utilizados en productos
cárnicos (mohos de la superficie del salchichón por ejemplo).
Los mohos intervienen también en la producción de los principales alimentos
fermentados típicos producidos en Japón: el “shoyu” (salsa de soja fermentada) y el
“miso" (pasta de soja fermentada). Su producción se hace en dos etapas, la primera
consiste en cultivar un Aspergillus (A. oryzae o A.fla- vus) en un medio a base de soja
y de arroz o de trigo con el fin de que produzcan enzimas que degraden los tejidos
vegetales (amilasas. proteasas, lipasas, celulasas. pectinasas), se obtiene así un
“koji” que se utiliza como “starter” para la segunda etapa. Según los procesos que
intervienen, asociando lactoba- cilos y levaduras, se obtendrá un “shoyu” o un “miso”.
También el “sake” (alcohol de arroz) se produce por digestión del arroz cocido con un
“koji al arroz” preparado con A. niger o A. flavas y fennentando el producto resultante
con lactobacilos y levaduras.
Los mohos ocupan un lugar importante en el mercado de las enzimas, en la tabla
1 se indican algunas enzimas de interés industrial obtenidas a partir de mohos.
Tabla 1. Principales enzimas de interés industrial obtenidas a partir de mohos
Enzimas Microorganismos productores Aplicaciones
Hidrolasas
Glucoamilasas A. awamori, .4. oiyzae, A. saitoi. Panadería industrial
A. niger, Rhizopus niveas. R. Cervecería Bebidas
delemar. Mucor pusillus, M. azucaradas Confitería
ronxiamts (sacarificación del aJmidón)
a-ami lasas A. oryzae, A. niger. .4. sojae, Idem
Penicillium expansión. Rhizopus
sp.
Cervecería (ayuda a la
P-glucanasa A. oryzae, .4. niger filtración)
a-galactosidasa Aspergidas sp. Mortierella Azucarería (cristalización del
vinacea aizúcar. conversión de rafinosa
en sacarosa)
p-galactosidasa A. niger Transformación del lactosuero
(laclasa) Mejora de la calidad de la leche
Dextranasas Penicillium funiculosum. Azucarería
Trichodenna sp.
Pectinasas A. niger, A. ocliraceus, Industrias de vinos y zumos de
Penicillium glaucum frutas (clarificación,
degradación de las pectinas)
Pentosanasas A. niger Industria del vino (eliminación
de turbios)
Naringinasa A. niger Eliminación del amargor de los
zumos de cítricos
Lipasas y A. niger, R. delemar, Geonicluon Industria quesera (factores de
esterasas candidum. Mucor javanicus. M. calidad)
miehei, Absidia butleri
Proteasas
Proteasas ácidas M. pasillos, A. oryzae. A. saitori, Hidrólisis de la proteína de soja
A. niger. Trámeles sanguineara Panificación (reducción de la
A. oryzae viscosidad de la pasta)
Proteasas neutras A. oryzae Ablandamiento de la carne
Proteasas maduración de los quesos
alcalinas
Oxidasas
Glucosa oxidasa A. niger, P. glaucum. P. notatum .Antioxidantes (eliminación de
trazas de glucosa en el polvo
de huevo seco: estabilización
del color y del sabor de
cervezas y bebidas
azucaradas) Transformación
de la glucosa en ácido
glucónico
3. EL PROCESO DE FERMENTACIÓN
Se puede definir la fermentación como la transformación que sufren ciertas
materias orgánicas bajo la acción de enzimas segregadas por microorganismos. Se
trata pues de un proceso de naturaleza bioquímica.
La palabra fermentación ha sufrido también una evolución, primero este término
se utilizó para describir el burbujeo que se produce durante la vinificación. antes de
que se descubriera la existencia de levaduras. Sin embargo, después del
descubrimiento de Pasteur. la palabra pasó a utilizarse para describir la actividad
microbiológica y después la actividad enzimática. Generalmente, el término es
utilizado para indicar la evolución del dióxido de carbono gas durante la acción de
células vivas. Ahora bien, ni la evolución del gas o la presencia de células vivas es
esencial para la acción fermentativa, en la fermentación láctica, por ejemplo, no se
libera gas.
Existe una diferencia clara entre fermentación y putrefacción. La fermentación es
una acción de descomposición de los hidratos de carbono, la putrefacción se
relaciona con la acción general de los microorganismos sobre los componentes
proteicos. El proceso de fermentación normalmente no genera malos olores y
usualmente se produce dióxido de carbono. En la putrefacción, los materiales
implicados pueden contener dióxido de carbono, pero los olores característicos son
ácido sulfhídrico y azufre contenidos en los productos de descomposición de las
proteínas.
La respiración es un proceso en el cual los hidratos de carbono son convertidos
aeróbicamente en dióxido de carbono y agua, con liberación de grandes cantidades
de energía. La fermentación es un proceso anaeróbico, o parcialmente anaeróbico.
de oxidación de los hidratos de carbono. Respiración y fermentación son dos
procesos que llevan a la liberación de la energía, contenida en las sustancias
orgánicas, aunque en distinta cantidad, en la fermentación se libera menor cantidad
de energía. La putrefacción es una degradación anaeró- bica de materiales proteicos.
La fermentación tiene lugar en ambiente anaeróbico, con degradación de la
sustancia orgánica en compuestos intermedios que actúan de donadores y aceptores
de electrones (proceso de oxido-reducción) con liberación de energía. La
transformación y la degradación de compuestos orgánicos, no siempre lleva a la
obtención de compuestos útiles, es importante, por tanto, tratar de controlar las
fermentaciones de forma que se eliminen los indeseables, aprovechando los
conocimientos fisiológicos de las especies microbianas que intervienen en el proceso
productivo.
Los microorganismos tienen a su disposición, en la materia prima de origen,
hidratos de carbono, proteínas, grasas, minerales y otros nutrientes menores. Pero
atacan primero a los carbohidratos, después a las proteínas y las grasas. El primer
requerimiento de la actividad microbiana es la energía, existe por tanto un orden de
preferencia. Así pues también hay un orden de ataque
entre los compuestos derivados del carbono, primero los azúcares, después los
alcoholes y después los ácidos.
4. TIPOS DE FERMENTACIONES
4.1. GLICOLÍSIS
La fase inicial del metabolismo de los azúcares, aunque posteriormente se
desarrolle por rutas bioquímicas diferentes, es la glicolísis o vía de Embden-
Meyerhof. que comprende el conjunto de reacciones que permiten a las células vivas
transformar los azúcares en C6 (glucosa y fructosa) en ácido pirúvico. Estas
reacciones se producen tanto en anaerobiosis (fermentación alcohólica y láctica)
como en aerobiosis (respiración) y constituyen, como se ha dicho, la primera fase del
metabolismo de los azúcares por diferentes rutas bioquímicas. En la figura 1 se indica
esta ruta metabólica. que lleva hasta la producción de ácido pirúvico.
Cuando hay presente sacarosa, es hidrolizada en glucosa y fructosa por medio de
una invertasa específica, y a partir de ellas se desarrolla el proceso, cuya primera
parte es una fosforilación de los azúcares con intervención de dos moléculas de ATP
(adenosintrifosfato) que lleva a la formación de fructosa-1.6-difosfato. En esta fase el
consumo de energía corresponde al paso de dos ATP a dos ADP (adenosindifosfato).
A continuación la fructosa-1,6-difosfato se divide en dos moléculas de tres átomos de
carbono cada una, que están en equilibrio entre ellas: fosfato de dioxiacetona y glice-
raldehido-3-fosfato. El equilibrio se desvía hacia el fosfato de dioxiacetona que
representa el 96.5%, mientras que el gliceraldehido-3-fosfato representa por tanto el
3,5%. pero es este último el que reacciona posteriormente con intervención del NAD
(nicotinamida-adenin-dinucleótido) y se transforma en ácido 3-fosfogl¡cérico, mientras
que la energía de oxidación permite la formación de una molécula de ATP a partir de
una de ADP y una de fosfato mineral.
El ácido 3-fosfoglicérico pasa a 2-fosfoglicérico y éste, por eliminación de agua, a
ácido fosfoenolpirúvico. El enlace del fósforo con el oxidrilo enólico es un enlace rico
en energía y permite, por reacción con una molécula de ADP. la formación de una de
ATP. mientras que se libera la forma enólica del ácido pirúvico, en equilibrio con la
cetónica.
La posterior evolución de una molécula de gliceraldehido-3-fosfato a ácido pirúvico
lleva todavía a la formación de dos moléculas de ATP. en consecuencia, en la
degradación de una molécula de hexosa a ácido pirúvico se forman cuatro moléculas
de ATP. De éstas, dos moléculas se han consumido en las reacciones de fosforilación,
por lo tanto la glicolísis implica una ganancia de dos ATP por cada molécula de hexosa
metabolizada.
Figura 1.-Esquema de la glicoltsis.
Figura 1 (continuación ).—Esquema de la glicolísis.
En la respiración aeróbica. el ácido pirúvico puede ser oxidado, por medio de las
reacciones del ciclo de Krebs. a agua y anhídrido carbónico:
CH3 - CO - COOH + 5/2 0: 3CO: + 2H:0
En anaerobiosis el ácido pirúvico no puede ser oxidado, por falta de oxígeno, pero
puede servir como aceptor del hidrógeno que aparece en la glicolísis bajo forma de
NADH-, (nicotamida-adenin-dinucleótido reducido), en este caso se reduce
directamente a ácido láctico (fermentación homoláctica). Si la reducción está
precedida por la descarboxilación a acetaldehido. se produce formación de alcohol
(fermentación alcohólica).
Si los dos átomos de hidrógeno de la glicolísis se utilizan de otro modo, el ácido
pirúvico no puede ser reducido, pudiendo dar origen en anaerobiosis a un gran
número de productos secundarios.
Como se ha indicado, a partir del ácido pirúvico las rutas metabólicas difieren
según se trate de fermentación alcohólica o de fermentación láctica.
4.2. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA
La fermentación alcohólica viene expresada por la ecuación de Gay-Lus- sac, en
la que a partir de una hexosa se obtiene alcohol etílico y anhídrido carbónico:
Sin embargo en la fermentación vinaria, no se tiene una fermentación aleo- hólica
pura, ya que no todas las moléculas de azúcar siguen la citada ecuación de Gay-
Lussac. sino que una cierta proporción es degradada siguiendo una fermentación
gliceropirúvica de acuerdo con la ecuación de Neuberg:
C6HP06 -» CH:OH - CHOH - CH.OH + CH, - CO - COOH
Hexosa Glicerina Ac. pirúvico
Junto a la glicerina aparece como producto de la fermentación ácido pirúvico,
eventualmente descarboxilado a acetaldehido, pero que no puede ser reducido a
alcohol, por lo que es el origen de diversos productos secundarios que se forman en
anaerobiosis.
En la fermentación alcohólica, el ácido pirúvico producido en la glicolísis es
descarboxilado a acetaldehido, que es reducido a etanol por medio del NADH, que se
ha formado en la glicolísis, durante la oxidación del gliceral- dehido-3-fosfato. Las dos
reacciones están acopladas y constituyen un mecanismo de óxido-reducción: si el
NADH., no fuera reoxidado, la glicolísis se detendría al reducirse todo el NAD. En la
figura 2 se indica el esquema del proceso de la fermentación alcohólica.