Enzimas

“São 2 condições fundamentais da vida:

1- o organismo deve ser capaz de se autorreplicar
2- e deve ser capaz de catalisar reações químicas
com eficiência e seletividade”
 Conceito

As enzimas geralmente são proteínas,

especializadas em catalisar reações
biológicas, ou seja aumentam a
velocidade de uma reação química sem
interferir no processo. Elas estão
associadas a biomoléculas, devido as
suas extraordinária especificidade e
poder catalítico.
A atividade catalítica de enzimas tem sido utilizada pelo homem
há milhares de anos

Fermentação do suco de uva para obtenção do vinho;

Fabricação de queijo;
Fabricação de pão.

No entanto, estas eram apenas aplicações práticas, uma vez que

o conhecimento do modo de ação dos catalisadores biológicos
só recentemente foi elucidado.
Atividade catalítica – dependente de integridade
na conformação
Estruturas primárias, secundárias, terciária e
quaternária necessárias
Algumas são dependentes de cofatores (Fe2+,
Mg2+, Mn2+) e coenzimas
Holoenzina, apoenzima – grupo prostético
 Co-fatores
Quase 1/3 das enzimas requerem um componente não protéico
para sua atividade, denominado cofator

Porção protéica Íons metálicos

Cofator
APOENZIMA

Moléculas
HOLOENZIMA orgânicas

Coenzimas
 Cofatores
Para alguns tipos de processos biológicos, apenas a
cadeia protéica não é suficiente, por isso a proteína
requer uma molécula denominada cofator a qual
pode ser uma pequena molécula orgânica,
denominada coenzima ou um íon metálico.
Os cofatores são geralmente estáveis em temperatura
alta. A catálise ativa enzima-cofator é denominada
holoenzima, quando o cofator é removido, se
mantém a proteína, a qual é catabolicamente inativa
e é denominada apoenzima.
Nomenclatura e classificação das
enzimas

Adição do sufixo “ASE” ao nome do substrato:

* gorduras (lipo - grego) – LIPASE

* amido (amylon - grego) – AMILASE

Nomes arbitrários:

* Tripsina e pepsina – proteases – degradam proteínas

 Reação ocorre em uma parte da enzima
denominada sítio ativo e a molécula que se
liga no sítio ativo é o substrato

Mudança da conformação da enzima induzida pela ligação com o substrato.

O exemplo mostra a hexoquinase antes e depois de se ligar ao substrato, a
glicose. A molécula da enzima consta de dois domínios, que se aproximam,
encaixando o substrato.
 Mecanismo de Ação

Etapas da reação enzimática:

E+S ES EP E+P

A catálise não afeta o equilíbrio, apenas a velocidade da reação

 Estado de transição: quando ocorrem as reações

Energia de ativação: Ea

Catalisadores/Enzimas atuam diminuindo a energia de ativação

Quanto as enzimas aumentam a v
da reação?
 Mecanismo de Ação
Modelo Chave-fechadura

Emil Fischer em 1894

Relação estérica entre enzima e substrato
 Mecanismo de Ação
Modelo do ajuste induzido
Koshland em 1958
Prevê um sítio de ligação não totalmente pré-formado,
E e o S sofrem conformação para o encaixe.
Interações fracas são otimizadas no Et
 Exemplos de ação enzimática
Proteases – quebram ligações de proteínas e podem atuar em
ativações de reações
Lipases – quebram triacilglicerol em ácidos graxos livres
DNA polimerase – síntese de DNA
Topoisomerases – desdobramento do supernovelo e tira a
tensão na fita de DNA
Cinética enzimática

Reação mais lenta –

limita a velocidade

V máx = enzima saturada

Velocidade inicial da reação (V0): tempo curto –
máximo 10% do substrato convertido em
produto
Tempo inicial: [S] e [ES] estáveis
Fase mais lenta determina a velocidade da
reação: formação do produto
Km: concentração do substrato no momento
em que a velocidade máxima é a metade.
Equação de Michaelis-Menten

V0 = [P]/t

V0 = 1/2Vmáx
Cinética enzimática
A velocidade passa a ser
constante porque não
depende da [S]

Inicialmente a velocidade da reação é

diretamente proporcional a [S].
 Fatores que Influenciam a Ação
Enzimática

pH

Temperatura

Concentração da Enzima

Concentração do Substrato
 Fatores que Influenciam a Ação
Enzimática
Temperatura
 temperatura dois efeitos ocorrem:
A taxa de reação aumenta, como se observa na maioria das
reações químicas;
A estabilidade da proteína decresce devido a desativação
térmica.
• Enzima  temperatura
ótima para que atinja sua
atividade máxima
 Fatores que Influenciam a Ação
Enzimática
pH
A ionização de aa pode provocar modificações na
conformação da enzima.
O substrato pode ver-se afetado.

Pepsina pH ótimo 1,5

Tripsina pH ótimo 7,7
 Fatores que Influenciam a Ação
Enzimática
Concentração da Enzima
A velocidade máxima da reação é uma função da quantidade
de enzima disponível (existindo substrato em excesso).

Efeito da [ ] da enzima sobre a velocidade inicial (V0) com

de substrato em excesso.
 Fatores que Influenciam a Ação
Enzimática
Concentração do Substrato
 Inibição enzimática
Inibidores

Substâncias que reduzem a

atividade de uma enzima de forma a
influenciar a ligação do substrato.
 Inibição enzimática

Classificação:

Irreversível
Competitiva

Reversível
Não Competitiva
 Inibição Enzimática
Inibição Reversível

Existem vários modos que estão envolvidos com ligação não

covalente, eles diferenciam quanto ao mecanismo pelo qual
diminuem a atividade enzimática e como eles afetam na
cinética da reação.
 Inibição Reversível Competitiva
Uma molécula apresenta estrutura semelhante
ao substrato da enzima que se liga para
realizar a catálise, ela poderá aceitar esta
molécula no seu local de ligação, mas não
pode levar ao processo catalítico, pois
ocupando o sítio ativo do substrato correto.
Portanto o inibidor compete pelo mesmo
local do substrato.
Reversão – excesso de substrato
 Síntese
bacteriana
tetraidrofolato

Síntese das
bases de
ácidos
nucléicos
Inibe DNA polimerase
 Inibidor Reversível não Competitivo
Ocorre quando um molécula ou íon pode se ligar em
um segundo local na superfície enzimática (não no
sítio ativo). Isto pode distorcer a enzima tornando o
processo catalítico ineficiente.
O inibidor não competitivo pode ser uma molécula que
não se assemelha com o substrato, mas apresenta
uma grande afinidade com a enzima. É o mecanismo
inverso do inibidor competitivo, porque inibe a
ligação do complexo ES e não da enzima livre.
Ex: metais
Inibidor Reversível não Competitivo
 Inibição Irreversível
Algumas substâncias se ligam covalentemente às
enzimas deixando-as inativas. Na maioria dos casos a
substância reage com o grupo funcional no sítio ativo
bloqueando o local do substrato, deixando a enzima
cataliticamente inativa.
 Inibição Irreversível
Inseticidas organofosforados na acetilcolinesterase (enzima
importante na transmissão dos impulsos nervosos)

Sítio ativo da colinesterase

Inibição da enzima ciclo-oxigenase pelo
acetilsalicilato
 Regulação alostérica
Efetores (+) e (-)