DETERMINACIÓN DE ETANOL POR EL MÉTODO DE WINNICK Y

ALCOHOLIMETRÍA

Ariel Castillo Moreno

Gabriel González Hidalgo
Gizela Levin Vergara
Sindy Medrano Díaz
Angie Rambao Sánchez

Ing. Ph.D Deivis Lujan Rhenals

Docente de la Asignatura

Biotecnología Alimentaria

Universidad de Córdoba
Facultad de Ingenierías
Ingeniería de Alimentos

2017
 INTRODUCCIÓN

Desde hace mucho tiempo se está buscando la forma de innovar al darle usos
alternativos a productos que ya están en el mercado, señalando que, una de las
principales motivaciones para ello es reducir los productos contaminantes y tóxicos,
mientras que por otro lado, se busca motivar el desarrollo de la eficiencia energética
para ello1.
Uno de estos productos muy utilizados actualmente es el etanol, el cual tiene
muchísimas aplicaciones en la actualidad, desde su uso alimentario hasta el
médico, pasando por el de la creación de productos de belleza. El etanol podemos
utilizarlo para la creación de bebidas alcohólicas, como recipiente en algunos
medicamentos y se utiliza también para la elaboración de ambientadores y
perfumes. Por otro lado también se utiliza como anticongelante y desinfectante.
En la industria alimentaria es importante la determinación de este componente
etílico debido a que ayuda a identificar el grado de alcohol que puede contener una
bebida, o una muestra desconocida, ya que puede concluir que tan eficiente puede
ser un proceso de fermentación.
Una de las maneras que existen para la determinación y/o cuantificación del
contenido etílico en una muestra es el uso del método de Winnick; que consiste en
la oxidación de la solución de dicromato de potasio 0,4N en ácido sulfúrico 10 N y
la posterior titulación con tiosulfato de sodio de esta muestra en presencia de
almidón como indicador, donde el volumen de tiosulfato es necesario para
determinar el porcentaje de etanol en dicha muestra; es apto a nivel de laboratorio
debido a que este permite calcular bajas concentraciones de alcohol al ser una
técnica rápida, sencilla pero poco precisa y puede aplicarse en la determinación de
etanol en caldos de fermentación.
A su vez también en aplicable el método del alcoholímetro (alcohometro), el cual es
un instrumento que basa su acción en la variación de flotabilidad que sufre un
cuerpo cuando es sumergido en soluciones de diferente densidad. Mediante tablas
esta densidad puede ser relacionada con el contenido de alcohol y expresarse
entonces como porcentaje o grado Gay-Lussac (ºG.L.)2.

1. Importancia del etanol. (2017). Retrieved from https://www.importancia.org/etanol.php

2. VINO DE FRUTA. (2010). Determinación de alcohol en vinos. Retrieved

from http://www.vinodefruta.com/medicion_de_alcohol_marco.htm
 RESULTADOS

MÉTODO DE WINNICK

Para la determinación de etanol por el método de Winnick se emplearon diferentes

concentraciones, las cuales se encontraban preparadas por el auxiliar de
laboratorio. Para cada concentración se tomaron 0,2 ml de la solución de alcohol y
se diluyeron en 9,8 ml de agua destilada, para tener un volumen de solución total
de 10 ml; luego se tomó 1 ml de solución de etanol y se agregó 2 ml de dicromato
de potasio a 0,4 N en ácido sulfúrico a 10 N, se dejó reposar durante 5 minutos y
luego de haber transcurrido el tiempo, se adicionó 2 ml de yoduro de potasio a 3 N
y se mezclaron; posteriormente se adicionaron dos gotas de solución de reactivo de
almidón soluble, rápidamente se procedió a titular la muestra con una solución
volumétrica de Tiosulfato de sodio a 0,1 N hasta obtener un cambio nítido hacia un
color azul marino. Los resultados se muestran en la siguiente tabla.

Concentración real de
Tiosulfato de sodio gastado (ml)
etanol
0% 8,96
1% 8,68
2% 8,27
3% 7,88
4% 7,56

Cuadro N°1. Volumen de tiosulfato de sodio gastado en cada solución.

La titulación de cada una de las soluciones nos permitió conocer el volumen gastado
de tiosulfato de sodio, con este volumen del agente titulante se procedió a calcular
con la ecuación de Winnick, el porcentaje de etanol experimental que contenía
cada muestra analizada.

Ecuación de Winnick:

𝒈𝒓 ((𝐕𝐛 − 𝐕𝐦) ∗ (𝟏, 𝟏𝟓𝟐) ∗ 𝟏𝟎𝟎)

% 𝐄𝐭𝐚𝐧𝐨𝐥 ( )=
𝟏𝟎𝟎 𝒎𝒍 (𝐦𝐋 𝐦𝐮𝐞𝐬𝐭𝐫𝐚 ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎)

Donde:

Vb = mL de tiosulfato gastados por el blanco

Vm = mL de tiosulfato gastados por la muestra

1,152 = Cantidad en mg de etanol que reaccionan con 1 mL de tiosulfato 0.1N

Luego el valor resultante de la ecuación de Winnick es multiplicado por el factor de

dilución (50).

𝒈𝒓 ((𝟖. 𝟗𝟔 − 𝟖. 𝟗𝟔) ∗ (𝟏, 𝟏𝟓𝟐) ∗ 𝟏𝟎𝟎)

% 𝐄𝐭𝐚𝐧𝐨𝐥 ( )= = 0 ∗ 50 = 0
𝟏𝟎𝟎 𝒎𝒍 (𝟏 ∗ 𝟏𝟎𝟎𝟎)

De la misma forma se calculó el porcentaje de etanol para las demás

concentraciones, y los resultados se muestran en la siguiente tabla.

Concentración
Concentración real de etanol
experimental de etanol
0% 0,000

1% 1,613

2% 3,974

3% 6,221

4% 8,064

Cuadro N°2: concentración de etanol experimental en cada solución

Con los datos de concentración real de etanol y concentración experimental de

etanol, que se calculó a partir de la ecuación de Winnick, se realizó la gráfica, en la
cual se observa el comportamiento de cada una de las rectas, tanto de las
concentraciones reales como las concentraciones experimentales. Cada una
presentó un valor en el coeficiente de determinación diferente como era de
esperarse.
 Etanol real vs Etanol experimental
9
8 y = 2.0736x - 2.2464
Concentración de Etanol

7 R² = 0.9966
6
5
4
y=x-1
3
R² = 1
2
1
0
-1 0 1 2 3 4 5 6
Numero de tubos

Concentración real de etanol

Concentración exp de etanol

Grafico N°1: Comparación de etanol y etanol experimental.

Para la muestra problema se realizó el cálculo para la determinar el porcentaje de

alcohol de la misma forma como se analizaron las demás muestras de etanol y dio
como resultado lo siguiente

Tiosulfato gastado por el blanco 8,96 ml

Tiosulfato gastado por la muestra problema 7,7 ml
Cuadro N°3: Volumen gastado de la muestra problema.

Con el dato de volumen gastado de la muestra problema se procede a

calcular el porcentaje de etanol con la ecuación de Winnick

[(8,96 − 7,7) ∗ (1,152) ∗ 100]

% 𝐸𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 = = 0,145 ∗ 50 = 7,258
[1 ∗ 1000]

ALCOHOLIMETRÍA

Mediante un alcoholímetro se determinó la cantidad de etanol que contenían dos

muestras: la primera es la muestra anteriormente estudiada de etanol al 4% y la
segunda es una muestra problema con concentración desconocida. Estos
resultados permiten corroborar lo que se determinó en el método anterior (sólo para
la muestra al 4%).

Muestra de Solución al 4%: 4° de alcohol a 27,3°C

Muestra con Concentración Desconocida: 4° de alcohol a 27°C

 ANALISIS DE RESULTADOS

MÉTODO DE WINNICK

De acuerdo con los resultados obtenidos en la gráfica se puede observar que la

cantidad de etanol obtenida experimentalmente es mayor a la teórica, es decir hay
una desviación de los datos reales o teóricos con respecto a los experimentales, a
pesar de que los valores del coeficiente de determinación para cada curva se
encuentran relativamente cerca con valores de R2 experimental de 0,9966 y R2 real
de 1. Este resultado se debe a que el método de Winnick es poco exacto según los
valores hallados experimentalmente y también debido a algunos errores de
apreciación, tales como el cambio de color en la titulación, que depende del
observador y su capacidad en cuanto al límite de la misma. (Duffau et. al, 2010).
Como otro parámetro se habla de la exactitud que hace referencia a la capacidad
del método analítico para obtener resultados lo más próximos posibles al valor
verdadero (Castillo, 1996). De igual manera, el alcohol tiene una alta volatilidad, si
bien durante la práctica de laboratorio se trabajaron bajas concentraciones de
etanol, el hecho de mantener los recipientes en un constante abrir y cerrar para la
toma de muestras afecta la concentración de la solución.
 ALCOHOLIMETRÍA

Debido a que el alcoholímetro esta calibrado a 20°C y como se observa que las
temperaturas son mayores se debe hacer una corrección para obtener los grados
de alcohol de las muestras, para lo cual utilizamos la siguiente tabla:

Tomado de UBA, 2017

Así que para la muestra de 4% a 27,3 °C los grados corregidos del contenido de
etanol son de 2,34 y para la muestra problema a 27°C de 2,4 por lo cual se observa
que están un tanto alejados del valor determinado en el método anterior, así que es
muy posible que los mismos factores del método anterior hayan provocado la
desviación de los resultados en este.
 CONSULTA

Consulte otros métodos para determinar alcohol etílico. Explique las ventajas
y desventajas para su uso.

R/ Se pueden aplicar varios métodos para determinar alcohol etílico. A continuación

se reseñará brevemente la base de ellos.

METODO VENTAJAS DESVENTAJAS

Hidrometría El contenido de etanol se puede medir en Los hidrómetros para etanol
el destilado a partir de un volumen de la deben calibrarse con soluciones
muestra exactamente medido. de etanol exactamente
Los azúcares reductores no son preparadas. Este método
destilables. Interfieren el SO2 y el ácido requiere bastante experiencia y
acético a los niveles que se señalan a cuidados extremos en todo el
continuación: proceso de neutralización,
Niveles de SO2 superiores a 200 mg/l destilación, medición y control de
temperatura.
Acidez volátil que exceda 0,10%
Por esta razón las muestras deben
neutralizarse antes de la destilación. La
determinación se efectúa por medio de un
hidrómetro calibrado y se registra
la temperatura. El porcentaje de etanol en
volumen se obtiene de tablas específicas.
También se puede determinar el
porcentaje de etanol en volumen con
hidrómetros que miden el peso específico
y consultar posteriormente las tablas
pertinentes. (Masson 1997)

Densitométrico Requiere de un equipo especial. Mide el El control de la temperatura y

peso específico de la muestra, por el presión son factores importantes
cambio de frecuencia de oscilación en un a considerar en la determinación.
tubo en U comparado con dos estándares. No es preciso ni eficaz a
El peso específico se convierte a concentraciones bajas.
porcentaje de etanol a 15,56°C. Se aplica
a destilados entre 25-79° alcohólicos
Refractométrico Ocupa el refractómetro de inmersión. La interferencia de otras
Debe tenerse un muy buen control de la sustancias diferentes a la
temperatura a 15,56°C. A estudiada.
temperaturas diferentes se aplican
factores de corrección. (Masson. 1997)
Determinación Se utiliza el método del picnómetro. Se Calibración de la balanza,
del etanol en debe tener la precaución de un buen presencia de burbujas en el
peso control de peso del picnómetro y bien picnómetro.
calibrado, y un muy buen control de
temperatura (Masson, 1997)

Análisis de El etanol presente en vinos, cervezas, Se recomienda determinar el

etanol por jugos se puede separar de otros porcentaje de etanol en volumen
cromatografía componentes por GLC. Para mejorar los por un método oficial para
gas-líquido aspectos cuantitativos se usa 2-propanol efectos de control.
(GLC) como estándar interno.
La relación de área de ambos picos se
compara con la de una solución patrón de
etanol y 2-propanol.
Se pueden emplear columnas empacadas
de acero inoxidable o vidrio de 2 m
rellenas con Porapack QS, Carbowax 0,2
% 1500 sobre Carbopack C 80 -100 mesh,
Chromosorb 103. (Masson. 1997)
Método El etanol se puede oxidar a acetaldehido El método es muy sensible, debe
enzimático por el NAD en presencia de la enzima tenerse especial cuidado con el
alcohol dehidrogenasa (ADH) para agua empleada que debe estar
producir NADH. Es una reacción libre de etanol. Igualmente se
esteoquiométrica en condiciones recomienda tapar las cubetas en
experimentales adecuadas. El NADH el momento de la lectura. El
producido se determina etanol es muy volátil. Debe
espectrofotométricamente a 334, 340 o trabajarse en atmósfera libre de
360 nm. etanol. Para controlar el método
La reacción se desplaza a la derecha en se recomienda emplear una
medio alcalino, atrapando el acetaldehído solución patrón de etanol.
formado y luego oxidándolo a ácido
acético en presencia de aldehído
dehidrogenasa.
Dependiendo de la longitud de onda que
se elija, se debe tener la precaución de
que la concentración de etanol sea de
0,01 a 0,12g/l (365 nm) o de 0,005 a
0,06g/l(340o334nm).
En general en alimentos líquidos se
recomienda clarificar y filtrar.
 CONCLUSIONES

Después de haber realizado la práctica de determinación de etanol por el método

de Winnick se puede decir que este método no tiene una confiabilidad alta, debido
a que hay que ser estricto a la hora de tomar o hacer las mediciones
correspondientes, se pudo observar en nuestra práctica, ya que los resultados
difirieron en una proporción considerable luego que nuestro porcentaje de etanol fue
de 7,258 lo cual está por encima de las concentraciones a las cuales trabajamos y
que se conocía con anterioridad

Como se mencionó posee la desventaja de que se debe realizar el procedimiento

con mucho cuidado y exactitud, porque si el volumen gastado de tiosulfato es mayor
del que debería ser, el grado de alcohol va a diferir mucho. En cambio el
alcoholímetro es mucho más preciso para la determinación de alcohol, ya que se
tiene en cuenta la temperatura a la cual se está haciendo la determinación de etanol.
Sin embargo, los resultados obtenidos no fueron más satisfactorios que el método
anterior debido a que una de las muestras estudiadas no concuerda con la
concentración a la que fue realizada, por lo cual el grado de alcohol de la muestra
problema estudiada tampoco es muy fiable.
 BIBLIOGRAFÍA

Castillo, B., y González, R. Protocolo de validación de métodos analíticos para la

cuantificación de fármacos. Rev Cubana Farm (en línea), 30(1), 1996
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-
75151996000100009&lng=es. Acceso:13 Septiembre (2017).

Duffau, B., Rojas, F., Guerrero, I., Roa, L., Rodriguez, L., Soto, M., Aguilera, M.,
Sandoval, S. 2010. Validación de métodos y determinación de la incertidumbre de
la medición

UBA. Universidad de Buenos Aires (2017). Método para la determinación de la

densidad. Retrieved from
http://virtual.ffyb.uba.ar/pluginfile.php/24713/mod_resource/content/4/M2/TP_M2_
DENSIDAD.pdf
ANEXOS