Proceso de Transcripción

RNA
TODAS LAS CÉLULAS SON
GENÉTICAMENTE IDÉNTICAS
Entonces….Por qué son tan distintas??
 Expresión de la información genética

Dogma Central

ADN ARN proteínas

ADN: A-T-C-G
ARN: A-U-C-G
proteínas: 20 aminoácidos
Gen

Unidad de DNA con información para la síntesis de una cadena polipeptídica o

RNA funcional

mRNA
copias de RNA de los genes codificadores de proteínas

RNA total

80% rRNA,
15% tRNA,
el resto es mRNA y snRNA
Proteínas

> 50% de masa seca de una célula y cumplen diversas funciones:

-estructural
-enzimática
-regulatoria

Síntesis proteica es central para mantenimiento, crecimiento y desarrollo

depende de colaboración de distintos tipos de RNA

PRIMER PASO:

TRANSCRIBIR LA INFORMACIÓN DEL ADN PARA

TENER UN MENSAJE QUE PUEDA DECODIFICAR LA MAQUINARIA
DE SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
TRANSCRIPCIÓN

ADN ARN
ARNpolimerasa

ARNm
ARNr
ARNt
ribonucleoproteínas
 Síntesis de ARN

Quién? ARNpol

Núcleo. Región
Dónde? promotora. Start-
stop

Cómo? Molde.
Complementarie
dad de bases.
5’-3’.
Cuándo? ………….?
 Etapas de la Trascripción

• Iniciación:

- la RNA pol reconoce y se une a un sitio PROMOTOR en

el DNA con ayuda de distintos factores de trascripción

- Las hebras del DNA se disocian y las bases de la hebra

molde quedan disponibles: burbuja de trascripción
 Secuencia promotora

TATA box: 25 a 30 nucleótidos antes del sitio de inicio

Etapas de la Transcripción
 Tipos de ARN polimerasas eucarióticas

Tipos de ARN sintetizados ARN polimerasa

ARNm II
ARNt III
ARNr
5.8S, 18S, 28S I
5S III
sn y sc ARN II y III
(ribonucleoproteínas nucleares y
citoplasmáticas pequeñas)
Formación del complejo de iniciación de la
transcripción polimerasa II (ARNm)
• TFIID
TBP TATA box
TAFs TBP
• TFIIB
• TFIIF
• Polimerasa II

• TFIIE
• TFIIH helicasa
quinasa
Transcripción:
1- Iniciación: Una ARN-polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a
partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso "que se encuentran
en el ADN.

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G
 Elongación

• La RNA pol se disocia del promotor y de los F de T

• Se va moviendo de a una base por vez en direccion 5’-3´

• Las moleculas de RNA se sintetizan en direccion 5’-3’ pero la hebra

molde de DNA se lee de 3’-5’

• En la burbuja de transcripcion hay 8pb DNA-ARN apareados

• DNA molde + RNA naciente + RNA pol : complejo muy estable (genes
largos)
Transcripción:
2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'3'. Después
de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de
metil-GTP en el extremo 5‘ con función protectora.

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G

m-GTP
 Terminación

• Se termina formando un transcripto primario (pre-mRNA) que se

libera de la RNA pol y se disocia del molde

• Hay secuencias especificas de terminación en el DNA

• La RNA pol se recicla

Transcripción:
3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región
terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA-polimerasa
añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado
ahora ARNm precursor, se libera.

poliA-polimerasa

m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A

ARNm precursor
4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata,
por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea traducida y
se sintetice la correspondiente molécula proteica.
En el proceso de maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones
y las ARN-ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro.

Cabeza cola
ARNm AAAAAA
maduro
precursor AUG UAG
Maduración del ARNm (Visión de conjunto).

Región codificadora del gen

ADN
Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminador

TAC ATC

Cabeza E1 I1 E2 I2 E3 cola
ARNm AAAAAA
precursor AUG UAG

Cabeza cola
ARNm
maduro AAAAAA
AUG UAG
 PROCARIONTES
• Utiliza una única ARN
polimerasa
• Sólo necesita unirse al
promotor para iniciar la
transcripción (estando
presente la subunidad σ de la
polimerasa)
• Mensajero policistrónico
no hay procesamiento mediante
splicing
EUCARIONTES
• Utilizan múltiples y diferentes ARN
polimerasas
• Necesita interactuar con una
variedad de proteínas adicionales
para iniciar la transcripción:
Factores de transcripción
- generales - adicionales
• Mensajero monocistrónico.
Maduración de ARNm precursor
mediante splicing
 Un gen…

…una proteína?
 Procesamiento del ARNm
eucariótico
• 5´ capping: agregado de un
“capuchón” de 7-
methylguanosine (GTP +
grupos metilo)

• 3´ poli-A:clivaje por
endonucleasa y
poliadenilación de 200
nucleótidos (poly-A
polymerase, asociada a
polimerasa II)

• Remoción de intrones:
(secuencias no codificantes)
mediante splicing
Síntesis de un ARN primario
(en el núcleo)

Funciones del poli-A

• interviene en la exportación del ARNm al

citoplasma

• regula la traducción del ARNm sirviendo

de señal de reconocimiento para el
ribosoma

• regula la estabilidad del ARNm en el

citoplasma
Transporte del ARNm al citoplasma
 Spliceosomas

Proteínas + ARN
snRNPs: “small nuclear
ribonucleoproteínas”

ARNs nuclear pequeños

U1, U2, U4, U5, U6
 Organización Génica
• Procariontes: genes en disposición
contigua en relación al objetivo
metabólico (grupo funcional): operon bajo
un solo promotor
- Se transcribe un único RNA conteniendo
el mensaje de una serie de proteínas
relacionadas

• Eucarionte: genes para una única vía

metabólica están físicamente separados
(hasta en distintos cromosomas)

- cada gen tiene su promotor

- exones: porciones codificantes (150pb)
- intrones: no codificantes (3500 pb)

• mRNA maduro tiene distinta secuencia

del DNA de partida
• Proca: Trascripción y traducción simultánea

• Euca: hay separación espacial

- los transcriptos primarios se procesan en el núcleo
antes de ser exportados al citoplasma para ser
traducidos
Regulación de la Transcripción
INICIACION
lactosa glucosa + galactosa
β-galactosidasa
(gen: lac operon)

Control negativo
del lac operon
 Lupus eritematoso sistémico

Enfermedad autoinmune crónica que genera auto-anticuerpos contra 1

o más de las snRNP afectando el mecanismo de splicing.
 β-Talasemia

Provoca niveles anormales bajos de la proteína GLOBINA lo que lleva

a deficiencias en el transporte de O2. Ocurre por mutaciones en el sitio
de splice del gen de la globina que provocan un splicing ineficiente.

Los ARNm de globina que no pudieron pasar por el splicing quedan

retenidos en el núcleo.
 Splicing alternativo
Mecanismo regulador de la expresión génica en eucariotas: Síntesis de
proteínas activadoras y represoras reguladoras de la transcripción.
Sistemas libres de células in
vitro