Universidad Autónoma de San Luis Potosí.

Unidad Académica Multidisciplinaria Zona Huasteca

Lic. Bioquímico

Cuarto semestre

Liquido peritoneal

Integrantes.
Alanís campos Luzma Gabriela
Cortez Escobar Jairo Manuel
García pacheco Ana Marlen.
Yáñez Gravioto Natanael.
 ¿Qué es el liquido peritoneal?

La capa serosa llamada peritoneo que

recubre a la cavidad abdominal esta
formada por dos capas, una de ellas
una recubre la pared de la cavidad
(parietal) y la otra, los órganos ubicados
dentro de esta membrana (visceral),
entre estas dos capas se encuentra un
liquido seroso, llamado liquido
peritoneal o ascítico, encargado de
proporcionar la lubricación entre las
membranas parietal y visceral. Y de
 ¿Cómo esta formado el liquido peritoneal?

El líquido es de color amarillo pálido, claro y

transparente, su composición consiste en agua,
electrolitos, anticuerpos, células blancas de la sangre
(300 por ml) Las proteínas y cantidad de liquido son
bajos. Se trata de un liquido estéril, cualquier presencia
de microorganismos es anormal en este liquido.
En ocasiones este liquido puede acumularse en grandes cantidades en cuadros
de inflamación produciendo ascitis, generada por diversas causas como:

1.- Aumento de la presión hidrostática capilar:

• retención de líquidos
• insuficiencia cardiaca
2.- Disminución de la presión oncótica:
• desnutrición,
• cirrosis hepática
• síndrome nefrótico
3.- Aumento de la permeabilidad capilar:
• infecciones bacterianas (peritonitis),
• inflamaciones de las membranas
• procesos malignos
4.- Obstrucción linfática:
• Tumores malignos
• Linfomas
• Infección e inflamación
• Lesiones o obstrucción del conducto torácico
Propósito del estudio
El examen se realiza para:

• Detectar infección (peritonitis) causada por la presencia de bacterias en el liquido estéril.

• Tumor (canceroso o no cancerígeno

• Apendicitis

• Extraer grandes cantidades de líquido del espacio peritoneal en personas que tengan enfermedad

hepática, enfermedad renal

• Ver si una lesión al abdomen ha causado sangrado interno.

• Enfermedad cardiaca

• Cirrosis hepática
 Procedimientos para la toma de
muestra.

La obtención de la muestra se obtiene por paracentesis abdominal, por ser el

proceso mas factible.
Se debe vacía la vejiga antes del procedimiento y se debe limpiar con un
antiséptico una pequeña área del abdomen Es un procesamiento invasivo que
debe ser realizado en condiciones estériles, e implica la introducción de un catéter
o una aguja en la cavidad peritoneal para extraer liquido con fines diagnósticos y
terapéuticos. El lugar de elección para practicar la punción suele ser el cuadrante
inferior izquierdo. La muestra no debe trasportarse en una jeringa tapada con
tapón de goma estéril por que es te método no es seguro. Una parte de10 a 15 ml
de la muestra se reparte entre dos frascos con medio de cultivo líquido(aerobio y
anaerobio), de los destinados para hemocultivos
 Esquema general del procesamiento de la muestra por el laboratorio
Obtención de la muestra Examen citológico Recuento celular en cámara de
por paracentesis microscópico Neubauer

Estudio Glucosa, pH, proteínas totales

Examen físico: aspecto bioquímico
macroscópico Cantidad de células presentes en el
Tinción de Wright
liquido.
(citología)
Presencia de leucocitos: posible
peritonitis
Para conocer cualquier Para identificar la presencia de moo en
alteración en su color normal: Estudio el liquido
amarillo pálido, claro, escaso y microbiológico:
darnos una idea de la posible Tinción de Gram
causa N Peritonitis descartada
o

Aspecto Opaco/ turbio: Hemorrágico:

pancreatitis,
Posible ascitis causada por
lechoso: punción
derrames infarto traumática o s contaminación del liquido
quilosos intestinal, derrame i
infección, o Cultiv Pruebas
perforación Estudio bioquímicas
Si fue una punción o
intestinal traumática se aclara el
Hemocultiv bacteriológic
liquido al seguir aspirando
o Antibiograma
o
 Estudio microscópico Recuento celular en la cámara de Neubauer: gruesa capa de cristal con
forma de portaobjetos, de unos 30 x 70 mm y 4 mm de grosor. Sirve para
determinar la presencia de células malignas

Dilución del liquido peritoneal Se cuentan las células contenidas en los cuatro cuadrados grandes de las
esquinas y se calcula: células por mm3= N x 2,5

Citocentrifugación de
Utilización del
un volumen importante
sedimento
Resultados

Leucocit Neutrófil Leucocit Células

os os os mesoteliales

No deben estar Cantidades elevadas en

Cantidades Aumento en la
presentes en el traumatismos, peritonitis
superiores a los 250 concentración
liquido, su presencia tuberculosa, neoplasias.
µl sin sintomas: posible infección
puede indicar Alteraciones en su
posible asictis del liquido,
neoplasias, morfología indican la
neutrofilica debido a peritonitis
tuberculosis o presencia de posibles
peritonitis bacteriana
hemorragia carcinomas o tumores
intraabdominal
 - El líquido peritoneal normal es pobre en proteínas (< 2 g/dl). es un criterio fundamental a
- la hora de clasificarlo como trasudado o exudado
Proteín - Colinesterasa: Desciende en trastornos hepáticos, se incrementa en la tuberculosis o
E -as neoplasias
s Para conocer Enzimas Lactato-deshidrogenasa: en el derrame pleural, se halla elevada en los exudados ascíticos
- - Es paralela a la concentración
t si existe una
Densida proteica - útil para el diagnóstico de peritonitis tuberculosa, en la que aumenta por encima
u alteración en - ADA: Adenosín-
d de 43 UI
d desaminasa
-Derrames hemáticos, cirrosis hepática, peritonitis espontáneas, secundarias, carcinomatosis peritoneal y
la -
i pH
peritonitis tuberculosa = descenso de los valores de 7.35 por el metabolismo anaerobio
concentración
o - - En infecciones bacterianas : valores disminuidos de la proporción de glucosa en liquido/suero .
de las Glucos - Gradiente alto: cirrosis
-aGradiente de
b sustancias que Gradiente bajo: carcinomatosis peritoneal
albumina
i componen - Fosfatasa - Se observa en derrames asociados a cáncer ovárico
o este liquido y
alcalina
q - - Su incremento ocasiona la ascitis quilosa u obstrucción linfática
en base a eso, Lípido
u -s
- Una concentración superior a 6 mg/dl, o mayor a la presente en suero, sugiere la presencia
determinar los
í Bilirrubi
de bilis o bien una perforación de intestino proximal

m estudios na
- - Inferior a 25 mg/dl, se eleva en las mismas situaciones en las que desciende el pH, posible
i siguientes. Lactat
peritonitis

c -oCreatinina y Rotura de la vejiga urinaria y de extravasación de orina a la cavidad peritoneal

o urea
- Ayuda al diagnóstico de ascitis quilosa causada por bloqueo linfático secundario a tumores
Triglicérid (linfomas) o traumatismos
 Diagnostico dependiendo del examen bioquímico: Concentración de proteínas

Superior a 3 g/dL : Inferior a 3 g/dL :

característico de exudados trasudado

Presentan escasa celularidad. Se Presentan abundante celularidad. Suelen

originan por un desequilibrio que ser secundarios a una lesión en el
afecta a las presiones hidrostática revestimiento
y/o coloidosmótica del plasma Es mesotelial o endotelial de los vasos. Es
característica de insuficiencia característica de ascitis biliar, ascitis
cardiaca, pericarditis constrictiva, pancreática, ascitis quilosa, tumores
cirrosis hepática, hepatocarcinoma, peritoneales, tuberculosis peritoneal,
hígado metastásico, peritonitis síndrome nefrótico , pericarditis constrictiva
bacteriana espontánea y cirrosis hepática.
Tinción de Tinción hematológica, que permite ver la morfología de las células sanguíneas, produciendo
Wright diversos colores

Elaboración del frotis con Cubrir completamente el portaobjetos con el colorante de Wright gota a gota, dejarlo
muestra sanguínea aproximadamente de 5-8 minutos para la fijación de los glóbulos sanguíneos. En caso
de evaporación, agregar un cantidad adicional

Secar al aire con la sangre hacia arriba

Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la

extensión presente un aspecto rosado al examinarlo a simple Agregar un volumen de amortiguador de Wright igual al
vista. del colorante para evitar una coloración débil. Esperar la
formación de un brillo metálico.

Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón

humedecido en alcohol para eliminar cualquier resto de colorante. Puede usarse de igual manera agua desionizada.
Dejar actuar de 10-15 minutos.

Secar al aire y observar con el microscopio con el

objetivo de inmersión. Los eritrocitos: naranja o rosado.
El citoplasma de los monocitos: tonalidad azul grisácea con gránulo rojizos bastante
finos y sus vacuolas características. El citoplasma de los linfocitos: azules.
Los núcleos de los linfocitos y neutrófilos: púrpura oscuro. Los núcleos de los
La presencia de Resultad monocitos: púrpura algo más claros (lila).
leucocitos indica una os Los gránulos de los eosinófilo :rojo-anaranjado intenso. Los gránulos de los basófilos
posible peritonitis púrpura azulado muy oscuro. Los gránulos de los neutrófilos se :lila, bastante finos.
Las plaquetas: violeta o púrpura.
Tinción de Permite diferenciar a las bacterias dependiendo de su pared celular en Gram + o -, en
Gram base a ello se determina el tipo de tratamiento para el proceso infeccioso

Preparaci Se toma una pequeña porción de la muestra, enseguida se esparce

ón del perfectamente lo ancho del portaobjetos
frotis

Escurrir el colorante y Fijación del frotis, pasándolo

enseguida cubrir con
Lugol. Dejar actuar
durante 1 minuto. Lavar
con agua
Decolorara con alcohol-acetona
durante 15 segundos
Cubrir el frotis con cristal tres veces sobre la flama del
violeta durante 1 minuto mechero
Cubrir con el colorante de Secar la preparación
contraste: safranina. Dejar al aire
actuar durante 1 minuto y
lavar con agua

Las bacterias Gram + se

observan de color morado o Observar al
azul microscopio al
objetivo de
Las bacterias Gram + se inmersión, 100x
observan de color rosa
 Sirven para establecer las categorías del aumento del liquido peritoneal o ascitis: bacterascitis,
Cultivos
peritonitis y ascitis neutrocitica . Si se trata de una peritonitis, se identifica al microorganismo
causante

Volúmenes
Cultivos puros y Hongos Cándi Agar
grandes dextrosa
mixtos da
de muestra Sabouraund

Cultivo en Cultivos para Gram Cultivos para Gram

medios solidos - +

Enterobacteri Staphylococ Agar Baird

Estría as os aureus Parker
en 4 Bacteroides
Zonas Colonia fragilis Streptococcu
-McConkey
s E. s
-EMB
aislada Coli
Kliebsell -Endo Clostridium
Con s Agar sps,
a spp
asa de Pseudonoma Agar TSN,
nicrom aeruginosa Cetrimida anaerobio
el Agar
EMB
McConkey
Proteus CLDE
Agar sangre
spp TCBS
Chapman
 Examen para determinar la presencia de moo
Hemocultivo en la sangre
Ayuda a la identificación del origen de la
ascitis

Muestra de 10 a 20 ml del liquido

ascítico recién extraído

Se coloca en frascos especiales Técnica con mayor sensibilidad ,

de hemocultivo comparada con la de siembra en
-aerobios laboratorio
-anaerobios

Mezclar Incubar a 37° c por 7 días Resultado

s

Presencia de No debe existir proliferación de moo

microorganismos: en el medio
peritonitis

Estudio bacteriológico: Pruebas
bioquímicas
Gram + : Provenientes de la piel
o de la flora normal del
organismo: Staphylococcus
aureus, clostridium spp y el
Staphylococcus epidermidis
Identificación del
microorganismo causante de
la peritonitis: pueden ser
bacterias o un pequeño
numero de hongos.
Gram - : Provenientes del tracto
gastrointestinal: Escherichia coli,
kliebsella spp,y Pseudomona
aeruginosa

Prueba de citrato
Prueba de Vogues Ureasa
Proskauer Rojo de metilo
Catalasa Vogues Proskauer
Coagulasa Triple azúcar
CAMP Licuación de
ADNasa gelatina
MIO
SIM
LIA
Microorganismos implicados en infecciones por contaminación del
liquido peritoneal
 Morfología colonial y celular de patógenos implicados.
MICROORGANISMO COLONIA CELULA
Staphilococus aureus En agar sangre, nutritivo chocolate, soya tripticasa, coco inmóvil, de 0.8 a 1 micrómetro de
para formar grupos de células irregulares
etc, se ven colonias pequeñas, blanquecinas, de
semejantes a racimos de uvadiámetro,
forma circular, bordes redondeados, superficie lisa que se divide en tres planos
y convexa. Algunas cepas producen un pigmento
carotenoide que les da un color dorado

Candida spp Agar Sabouraud Dextrosa: Colonias  célula oval levaduriforme

lisas, brillantes, de color blanco o de 2 a 4 micras, con
ligeramente beige paredes finas; en tejidos
infectadosse han
identificado formas
filamentosas de longitud
variable, con extremos
redondos de 3 a 5 micras de
diámetro y seudohifas, que
son células alargadas de
levadura que permanecen
unidas entre sí
Pseudomona son bacilos Gram negativos
aeruginosa Pequeños bastoncillos delgados
Haemophilus influenzae ,
(en n iños) peritonotis
primaria
Enterococcus spp
Clostridium spp
Streptococuus pyogenes

Streptococcus pneumoniae

Kliebsella spp En agar McCONKEY: Colonias

grandes planoconvexa,
mucoides, brillantes, forma
irregular, también se
observan redondeadas,
bordes ondulados, lactosa
positivo
 Morfología colonial y celular de patógenos implicados.

Staphylococcus aureus Candida spp

Pseudomonas aeruginosa
Pruebas bioquímicas
Antibiograma
 Pruebas de confirmación: pruebas bioquímicas

Prueba Staphylococuu Streptococus Clostridium Staphylococcu

s aureus pyogenes spp s epidermis

Prueba de cAMP Positivo /sufren Negativo Positivo negativo

hemolisis

Vogues Positivo Negativo Negativo positivo

proskauer

DNAasa Positivo Negativo Positivo Negativo

Coagulasa Positivo negativo Positivo Negativo

Catalasa Positivo Negativo Negativo positivo

Prueba E. coli Kliebsella.sp Pseudomona Bacteroides fragilis
p aeruginosa

Prueba de negativo Positivo Positivo Negativo

citrato
Rojo de metilo RM positivo / RM negativo / RM negativo/ RM positivo /
Vogues VP negativo VP positivo VP negativo VP negativo
proskauer
MIO Movilidad +/- Movilidad Movilidad movilidad negativo
Indol positivo negativo positiva Indol negativo
Ornitina Indol +/- Indol negativo
negativo Ornitina Ornitina +/-
negativo
SIM H2S Negativo H2S negativo H2S negativo H2S negativo
Indol positivo Indol +/- Indol negativo Indol positivo
Movilidad +/- Movilidad Movilidad Movilidasd negativo
negativo positivo

Ureasa Negativo Positivo Negativo Negativo

Antibiograma.
Descripción de los hallazgos
microbiológicos
 Mecanismos de patogenicidad
Staphylococcus aureus

Toxicidad: Producida por Exotoxinas

Toxinas citotoxinas: producen poros en

la pared de las células, lo que altera
su permeabilidad y provocan daño o
muerte celular. Dañan a eritrocitos y
leucocitos y activan las plaquetas.
Estructuras de pared:
Peptidoglicano: Efecto
pirógeno,
necrohemorrágico,
inmunogénico

Ácidos teicoicos: Participan Unas pocas cepas

en adherencia, producen una cápsula
antifagocitarios, o capa de baba que
inmunogénico. incrementa la
virulencia del
microorganismo
 Mecanismos de patogenicidad
de Pseudomonas aeruginosa

tiene múltiples cilias en la

superficie celular que son
responsables de la adherencia a
las membranas celulares y otras
superficies.

la exotoxina A que inhibe el factor 2

P. aeruginosa tiene un de elongación eucarionte, con la
flagelo único que interrupción en la síntesis proteica y
permite su motilidad y la contribución a la muerte de las
puede mediar las células del huésped
interacciones iniciales
de superficie.
 Bibliografia

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Infecciosas y microbiologia clinica peritonitis-bacteriana-espontanea-un-paciente-
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Strasinger, Di Lorenzo, 2008, Analisis de orina y de los liquidos corporales, 5ta
edicion, EDITORIAL MEDICA panamericana, España