Performance e confiabilidade

para o avanço da ciência

Soluções para análise celular por citometria de fluxo
Insights científicos através de
até 50 parâmetros simultâneos:
BD FACSymphony™
Com capacidade de análise de até 50 parâmetros simultâneos, a inovação é resultado de
colaboração da BD com o National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) no
National Institutes of Health (NIH).

Saiba mais em bdbiosciences.com/br/symphony

Citometria de Fluxo
A citometria de fluxo é uma tecnologia que permite análise
simultânea e multiparamétrica de células ou partículas em
suspensão, avaliando-as individualmente. À medida que o
fluxo de amostra passa por um ou mais feixes de luz (gerados
por um ou mais lasers), o sistema óptico-eletrônico registra a
forma como as estruturas dispersam a luz do laser incidente e
captando as fluorescências emitidas. Assim, o equipamento
obtém informações de diversos parâmetros, como tamanho
relativo, complexidade interna e intensidades de
fluorescências de cada célula ou partícula avaliada.
Aplicações
A técnica da citometria de fluxo vem ganhando cada vez mais
importância, tanto na área clínica, quanto da pesquisa.
Bem vindo a
um mundo
mais colorido!
Qualquer célula ou partícula suspensa em meio líquido pode ter
diversos parâmetros analisados simultâneamente. Conheça as
suas principais aplicações abaixo.
Pesquisa:
• Imunofenotipagem
• Proliferação Celular
• Vida e Morte Celular: Viabilidade, apoptose e ciclo celular
• Comunicação Celular: quantificação de proteínas, marcação
Intracelular e sinalização celular por citometria de Fluxo
• Marcação de Proteínas Intracelulares
Clínica:
• Caracterização de Células Tronco
• Monitoramento de HIV
• Diagnóstico de Leucemia
• Prova Cruzada de Transplantes
Análise de múltiplos parâmetros simultâneos e adicionando
mais cores, você pode desvendar um novo mundo de
informações e correlações.
Experimente todo o potencial da citometria de fluxo multicolor
com os equipamentos e reagentes BD. Utilizando anticorpos
conjugados a fluorocromos, explore características celulares
como expressão de moléculas de superfície, intracelulares,
proteínas secretadas e muito mais.
Quantificação de Proteínas solúveis
Imunoensaio tipo sanduíche, o BD™ Cytometric Bead Array
(CBA) é uma aplicação da citometria de fluxo que permite
quantificar até 30 proteínas solúveis e intracelulares ao
mesmo tempo com apenas 25 a 50 L de amostra. O sistema
Anticorpo
utiliza uma combinação de diferentes faixas de fluorescência e de captura

beads conjugadas a anticorpos de captura de alta afinidade.

Anticorpo
Cada uma destas beads possui uma fluorescência única, de detecção

permitindo a detecção de várias proteínas simultaneamente Analíto

Beads Fluorocromo PE
num único tubo. Fluorescentes

O sistema foi desenvolvido para análises multiplex, oferece

maior quantidade de informações de uma mesma amostra,
maximizando o número de proteínas que podem ser
analisadas com uma pequena amostra disponível. Assim a
técnica reduz o tempo e quantidade de amostra necessários
para os resultados se comparado às técnicas tradicionais ELISA
e Western Blot.
Concentração
Lavagem Análise por
Beads Amostra Citometria de Fluxo

Anticorpos de
detecção

Curva padrão

BD CBA - Principais Produtos

O sistema BD CBA está disponível em três formatos para diferentes necessidades:
BD CBA Flex Set
Um método de detecção aberto e configurável, para que o pesquisador possa construir seu próprio ensaio Multiplex. Escolha até 30 proteínas de interesse e o conjunto
de tampões apropriado para o seu ensaio. Flex Sets são suficientes para 100 testes e contém os reagentes de captura, detecção e curva-padrão.

Master Buffer Kit apropriado* Disponíveis para 100 ou 500 testes Curva Padrão* Beads de Captura +
• Diluentes Proteínas Liofilizadas Reagente de Detecção
• Tampão de lavagem para confecção da curva • Imunoglobulinas • Proteínas fosforiladas
• Beads de Setup (acompanham as beads • Citocinas e fatores • Alta sensibilidade
• Alguns kits incluem outros reagentes adicionais de captura e detecção).

BD CBA Kit
Painéis pré-configurados para análise de perfis imunológicos. Suficientes para 50, 80 ou 100 amostras (dependendo do kit escolhido). Contém todos os reagentes
necessários para realização do ensaio. Kits para Humanos, Camundongos e Primatas não-humanos. Detectam de 6 a 7 citocinas simultaneamente.

Tampões* Curva Padrão* Beads de Captura + Reagente de Detecção

• Diluentes • Beads de Setup Proteínas liofilizadas para Reagentes para detecção de um conjunto pré-estabelecido de
• Tampão de lavagem confecção da curva padrão proteínas solúveis, como Citocinas, imunoglobulinas e fatores.

BD CBA Functional Beads

Para pesquisadores que desejam quantificar uma proteína que não faz parte do portfólio dos sistemas BD CBA.

Functional Beads Conjugation Buffer Set* Reagente de Detecção Beads de Captura

558556 * Para confirmação da conjugação • Anticorpo conjugado 6 – 12 conjugações de 500 – 1000 testes
15 conjugações recomenda-se o uso de detectores marcados a PE contra a proteína cada. 30 opções de fluorescências
• Tampão de com PE contra a imunoglobulina conjugada. ou anticorpo de • Para conjugação ao anticorpo contra a
conjugação • Mouse Ig Detector – 558550 interesse capturado. poteína de interesse ou conjugação a um
• Tampão de • Rabbit IgG Detector – 558553 • Reagente não substrato poteico para captura do
armazenamento • Rat Ig Detector - 558551 comercializado. anticorpo a ser investigado na amostra.
* Os componentes podem ser adquiridos separadamente, caso haja necessidade.
bdbiosciences.com/br/cba
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Citometria de fluxo intracelular
Análise multiparamétrica de citocinas, fatores de transcrição e proteínas fosforiladas

A citometria de fluxo intracelular é uma poderosa técnica para

identificação de diversos tipos celulares e análise das vias de
sinalização e respostas funcionais em amostras de linhagens
celulares e populações heterogêneas. Para determinados tipos
celulares essa identificação depende da utilização combinada
de marcadores de superfície e intracelulares, como citocinas ou
fatores de transcrição.
Por meio desta técnica, diversas informações sobre a função e
sinalização celular podem ser obtidas pela combinação de
anticorpos fluorescentes específicos para marcadores de
superfície com marcadores de apoptose, proliferação e
proteínas fosforiladas determinando assim, a resposta a
estímulos ou tratamentos em diferentes subtipos celulares.
permite a detecção de múltiplas proteínas de superfície e
A combinação de múltiplos marcadores simultaneamente intracelulares, simultaneamente, em células individuais.
diminui o tempo de aquisição dos dados e possibilita a
A BD Biosciences possui anticorpos conjugados a diversos
utilização de amostras raras, permitindo que um maior número
fluorocromos, tampões, kits e protocolos para citometria de
de parâmetros possam ser estudados simultaneamente, em
fluxo intracelular para o estudos de citocinas, fatores de
uma mesma célula.
transcrição, vias de sinalização e análise de proteínas
Enquanto outras metodologias, como o Western blot, são úteis fosforiladas, contribuindo assim, com novas descobertas nas
no estudo da expressão de proteínas em uma população áreas de imunologia, inflamação, biologia celular e células-
celular como um todo, a citometria de fluxo intracelular tronco.

Citocinas e fatores de transcrição

Marcação Intracelular - Principais Produtos
! 554724 - BD GolgiStop™ – Protein Transport Inhibitor - Monensin solution
! Inibição do
transporte de
555029 - BD GolgiPlug™ – Protein Transport Inhibitor - Brefeldin A solution
555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus - Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™
proteínas
554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus - Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™
CITOCINAS Tampões de Marcação
554657 - Stain Buffer (BSA)
554656 - Stain Buffer (FBS)
Lise de eritrócitos para amostras Tampões de Lise
de sangue total periférico 555899 - BD Pharm Lyse™ – Lysing Buffer 10x
349202 - BD FACS™ Lysing Solution*

1 Tampões de Fixação
1 554655 - BD Cytofix™ Fixation Buffer
Tampões de Permeabilização
FIXAÇÃO e 554723 - BD Perm/Wash™ Buffer
PERMEABILIZAÇÃO 554722 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution
347692 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 10mL
340973 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 25mL

2 Conjuntos de Tampões
2 (Fatores de Transcrição/Detecção de Citocinas)
562725 - Transcription Factor Buffer Set 25 testes (com Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer)
562574 - Transcription Factor Buffer Set 100 testes (com Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash buffer)
MARCAÇÃO 554714 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit
555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™
554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™
560409 - Mouse Foxp3 Buffer Set
641776 - BD IntraSure™ Kit

3
3
Analisar as células em um citômetro de fluxo BD FACS™
ANÁLISE

bdbiosciences.com/br/intracellular
*Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção do item marcado com *.
Apoptose, ciclo celular, proliferação
e viabilidade
O balanço entre a proliferação e morte celular é importante
para o desenvolvimento e homeostasia tecidual. A proliferação
celular é regulada pelo processo de ciclo celular, possibilitando
o aumento do número de células após o processo de mitose. A
apoptose é caracterizada como uma morte celular
programada.

Nos últimos anos a citometria de fluxo multicolor tornou-se

essencial no estudo de processos celulares como ciclo Celular,
apoptose, viabilidade e proliferação celular e seus mecanismos
fundamentais envol-vidos na imunidade, inflamação,
hematopoiese e neoplasia, dentre outros. O sucesso da
metodologia é resultante da sua capacidade de monitorar
esses processos simultaneamente a outros eventos celulares
como a fosforilação de proteínas e secreção de citocinas
dentro de populações celulares heterogêneas. determinação e detecção da apoptose e proliferação celular
por ELISA, imunohistoquímica, imagem celular e Western blot.
Para o estudo destes processos por citometria de fluxo, a BD Não deixe de conhecer as inovações do BD Horizon™ Violet Cell
Biosciences oferece diversas ferramentas incluindo anticorpos, Proliferation Dye 450 (VPD450) e anticorpos para PARP clivado
kits, e sistemas, além de reagentes de alta qualidade para e caspase-3 disponíveis para diferentes tipos de aplicações.

Principais Produtos: Processos Celulares Fundamentais

Externalização de Fosfatidilserina
Células Vivas
Potencial de Membrana Mitocondrial
Apoptose
Atividade de Caspases
Células Fixadas
Fragmentação de DNA

Conteúdo de DNA
Células Vivas
Retenção de corante de proliferação

Análise de Ki-67
Processo Celular Proliferação e Ciclo Celular

Conteúdo de DNA

Células Fixadas Incorporação de BrDU/EdU

Retenção de corante de proliferação

Fosforilação de Histona H3

Atividades Esterase
Células Vivas
Integridade de Membrana
Viabilidade

Células Fixadas Integridade de Membrana

bdbiosciences.com/br/apoptosis
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
BD Horizon™ Fixable Viability Stain (FVS)
Viabilidade celular compatível com fixação e permeabilização
Produto BD Horizon™ Catálogo Laser - Excitação Canal - Emissão
FVS 520 564407 Azul FITC, BB515
FVS 570 564995 Azul/Yellow-Green PE
FVS 620 564996 Azul/Yellow Green PerCP-Cy5.5/PE-CF594
FVS 660 564405 Vermelho APC
FVS 700 564997 Vermelho APC-R700, Alexa Fluor-700
FVS 780 565388 Vermelho APC-H7, APC-Cy7
FVS 450 562247 Violeta BB421, V450, Pacific Blue
FVS 510 564406 Violeta BV510, V500
FVS 575V 565694 Violeta BV605

Aplicações e Uso
Os reagentes BD Horizon™ FVS são corantes amino-reativos
usados para discriminação de células viáveis e não-viáveis,
baseada na intensidade de fluorescência celular. O corante
reage e se liga covalentemente a aminas de superfície e
intracelulares, resultando em células viáveis impermeáveis
fracamente marcadas e células altamente fluorescentes
quando suas membranas são permeáveis, como em células
inviáveis e necróticas. O BD Horizon™ FVS foi validado com
diversos tampões de fixação e permeabilização a base de
detergentes e álcool, (incluindo os tampões BD), permitindo a
análise de viabilidade em protocolos de marcação
intracelular, como para estudo de citocinas e proteínas
fosforiladas.

Características Principais
• Corantes amino-reativos impermeáveis a membrana para
discriminação de células vivas/mortas;
• Células marcadas podem ser fixadas e permeabilizadas,
tornando possível múltiplas outras aplicações;
• Foram validados com e resistem a protocolos overnight e
criopreservação;
• Oito opções de cores permitem escolhas mais flexíveis para
um ótimo design de painel.

Análise da expressão de Stat5 fosforilada em células mononucleares humanas “viáveis”

ativadas (PBMCs).
PBMCs cultivados por 48 horas em meio de cultura, congelados
e armazendos (-80ºC) por 10 dias. As células foram
descongeladas e tratadas com IL-2 humana recombinante (100
ng/mL; Cat. No. 554603) por 15 min. com adição de BD
Horizon™ Fixable Viability Stain 450 (Cat. No. 562247) nos 7
últimos minutos de ativação. As células foram fixadas usando
BD Cytofix™ (Cat. No. 554655), permeabilizadas com BD
Phosflow™ Perm Buffer III (Cat. No. 558050), e marcadas com
PE Mouse Anti-Human CD3 (Cat. No. 555333), PerCP-Cy™5.5
Mouse Anti-Human CD4 (Cat. No. 552838) e Alexa Fluor® 647
Mouse Anti-Stat5 (pY694) (Cat.562076). O gráfico superior
mostra a incorporação de FVS450 x SSC como gate inicial,
anterior ao gate de linfóctios. Linfócitos viáveis, observados
foram analisados para marcações CD3+CD4+ (gate de
Linfócitos não apresentado). Os histogramas inferiores da figura
mostram os níveis de Stat5 (pY694) fosforilada expressos por
linfócitos viáveis discriminados usando o BD FVS450 em
comparação a análise desta expressão em linfócitos sem
discriminação de viabilidade. Os ensaios foram realizados
usando um BD LSRFortessa™.
Aplicações de Microscopia de
Fluorescência
A BD Biosciences oferece grandes inovações para microscopia
de fluorescência. Os fluorocromos da linha BD Horizon Brilliant™
possuem a mais alta tecnologia desenvolvida pela BD para
oferecer reagentes cada vez mais brilhantes e estáveis para suas
aplicações e disponibiliza ao mercado um portfólio com mais de
20.000 itens.
Devido ao alto brilho dos fluorocromos, um menor tempo de
exposição é necessário e a capacidade de detecção de
moléculas pouco expressas é maior (Fig.1). Além disso, a
estabilidade desses fluorocromos permite longos períodos de
captação de imagens in vitro e in vivo possibilitando ensaios
funcionais de longa duração (Fig. 2).

1,2

Normalizes Fluorescence Intensity

1

0,8

0,6

0,4

0,2

0
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5
Time (minutes)

BV421 BV480 Alexa Fluor® 488

Figura 1. Comparativo do tempo de exposição de BV421 (0,7
segundos) e AF488 (5 segundos). Com um período 7 vezes menor, o
BV421 apresenta maior resolução e sinais mais intensos. Já o BV480
(0,015 segundos) é exposto por um período de tempo 9 vezes menor,
alcançando resultado superior ao AF488 (0,14 segundos).
Figura 2. Comparativo de estabilidade do BV421 e BV480 com
AF488. A maior estabilidade dos fluorocromos da linha BD Horizon
Brillant™ permite realizar ensaios funcionais que demandam longos
períodos de exposição.

Verifique os comprimentos de onda de excitação e seus respectivos canais de detecção para a linha BD Horizon Brilliant ™ BV421,
BV480 e BB515 utilizando DAPI e DRAQ5™ para a marcação de DNA.

Tabela 1. Configuração padrão de um confocal de 5 canais.

Configuração de um confocal padrão de 5 canais Laser Corantes

405 nm DAPI

440 or 458 nm BD Horizon™ BV480

488 nm BD Horizon™ BB515 ou AlexaFluor® 488

Usando DAPI para marcação de DNA
561 nm AlexaFluor® 568 , RFP ou Mitostaus TMRE

633 nm AlexaFluor® 647 ou Mitostaus Red

405 nm BD Horizon™BV421 ou BD Horizon™ BV480

440 or 458 nm -

488 nm BD Horizon™ BB515 ou AlexaFluor® 488

Usando DRAQ5™ para marcação de DNA
561 nm AlexaFluor® 568 or RFP

633 nm Draq5™, AlexaFluor® 647 ou Mitostaus Red

Realize marcações indiretas com os seguintes reagentes:
Fluorocromos

Descrição Clone BV480 (cat. nº) BV421 (cat. nº)

Anti-Mouse Ig (Goat) Polyclonal 564877 563846

Anti-Rat Ig (Goat) Polyclonal 564878 565013

Anti-Rabbit IgG (Goat) Polyclonal 564879 565014

Streptavidin - 564876 563259

Potencial eletroquímico mitocondrial

BD MitoStatus TMRE e BD MitoStatus Red
Através da linha BD MitoStatus é possível avaliar a diferença de potencial eletroquímico mitocondrial (este parâmetro celular é um
importante indicador de viabilidade). Células saudáveis são positivas para MitoStatus, enquanto as células negativas indicam
perda de atividade mitocondrial. Na Figura 3 é possível visualizar a comparação de células tratadas com estaurosporina com o
grupo controle não tratado.

Untreated Staurosporine-Treated

Figura 3. Células HeLa tratadas com 0.02% DMSO (esquerda)

ou 1 uM estaurosporina (direita) por 3 horas. Células foram
marcadas por 30 minutos com 200 nM de MitoStatus TMRE e
5 ug/mL Hoechst.

Corantes de DNA
Além de um extenso portfólio de anticorpos e fluorocromos, a BD conta com diversos tipos de corantes de ácidos nucleicos com o
rigoroso padrão de qualidade BD Biosciences.

Imagem

Laser de Ex Em
Fresco Fixado
Descrição Excitação* Canal de Fluorescência (nm) (nm)** Cat. No.

BD Pharmingen Hoechst 33342 Solution UV/Violeta DAPI (UV) / BV421 (V) 350 461 561908

BD Pharmingen DRAQ5™ Vermelho/YG Alexa Fluor® 700 / APC / PE-Cy7 600/646 697 564902, 564903

BD Pharmingen DAPI Solution UV/Violeta DAPI (UV) / BV421 (V) 358 461 564907

BD Via-Probe Green Nucleic Acid Stain Azul FITC 503 526 565799, 565802

BD Pharmingen Propidium Iodide Staining Solution YG/Azul PE 535 617 556463, 550825

BD Pharmingen 7-AAD YG/Azul PerCP-Cy™5.5 546 647 559925, 555815, 555806

BD Via-Probe Red Nucleic Acid Stain Vermelho APC 535 617 556463, 550825

BD Pharmingen DRAQ7™ Vermelho/YG Alexa Fluor® 700 / APC / PE-Cy7 599/644 694 564904
Painel de referência
de Lasers e Fluorocromos
Ultraviolet Laser (355 nm)

Violet Laser (405 nm)

Blue Laser (488 nm) /

Yellow-Green Laser (561 nm)

Red Laser (640 nm)

Brilho relativo de fluorocromos

Laser de Fluorocromo Filtro Brilho relativo Laser de Fluorocromo Filtro Brilho relativo Laser de Fluorocromo Filtro Brilho relativo Laser de Fluorocromo Filtro Brilho relativo
excitação Brilliant Blue™ 515 530/30 Muito Brilhante excitação PE 575/26 Muito Brilhante excitação Brilliant Violet™ 421 450/50 Muito Brilhante excitação Brilliant Ultraviolet™ 661 670/25 Brilhante
PE 575/26 Muito Brilhante BD Horizon™ PE-CF594 610/20 Muito Brilhante Brilliant Violet™ 650 660/20 Muito Brilhante Brilliant Ultraviolet™ 737 740/35 Brilhante
BD Horizon™ PE-CF594 610/20 Muito Brilhante 561 PE-Cy™5 670/14 Muito Brilhante Brilliant Violet™ 711 710/50 Muito Brilhante 355 Brilliant Ultraviolet™ 563 585/15 ou Brilhante
PE-Cy™5 670/14 Muito Brilhante PE-Cy™7 780/60 Brilhante Brilliant Violet™ 605 610/20 Brilhante 560/40
488 PerCP-Cy™5.5 695/40 Brilhante 405 Brilliant Violet™ 786 780/60 Brilhante Brilliant Ultraviolet™ 395 379/28 Moderado
Brilliant Blue™ 700 695/40 Brilhante APC 660/20 Muito Brilhante BD Horizon™ V450 450/50 Moderado Brilliant Ultraviolet™ 496 515/30 Moderado
®
PE-Cy™7 780/60 Brilhante 633-640 Alexa Fluor 647 660/20 Brilhante Pacific Blue™ 450/50 Moderado Brilliant Ultraviolet™ 805 820/60, Fraco
Alexa Fluor® 488 530/30 Moderado BD Horizon™ APC-R700 710/20 Brilhante Brilliant Violet™ 480 525/40 Moderado 770LP
FITC 530/30 Moderado Alexa Fluor® 700 730/45 Fraco Brilliant Violet™ 510 525/50 Moderado
PerCP 695/40 Fraco APC-Cy™7 780/60 Fraco AmCyan 525/20 Fraco
BD APC-H7 780/60 Fraco BD Horizon™ V500 525/20 Fraco
Ferramentas
A BD oferece em seu website diversas ferramentas que facilitam a elaboração
de seu painel multicolor.

Fluorescence Spectrum Viewer BD FACSelect™

Encontre opções de fluorocromos para Multicolor Panel Designer
experimentos com mais cores e menos Construa um painel de reagentes baseado
compensação. em espécies, especificidades ou clones e
cores do interesse.

Absorption and Emission Spectra
Veja os espectros de emissão e aprenda
mais sobre cada fluorocromo contido na
linha de produtos da BD.
BD FACSelect™
Buffer Compatibility Resource
Navegue pelas opções de buffer para
selecionar a combinação certa para as
suas experiências de marcadores
intracelulares e de superfície.

Fluorochrome Specifications
Chart and Poster

Recursos
BD FACSDiva™ v6 Software e Curso Online Grátis:
Learning Course Introdução à Citometria de Fluxo
Aprenda a usar o BD FACSDiva v6 Aprenda o básico da citometria de fluxo
software com nosso curso de 6 horas e com o curso online de 2 horas de duração.
meia online.

BD FACSDiva v6 Software
BD FACSDiva v6 Software é uma coleção
de ricas ferramentas para citometria de
fluxo e configuração do aplicativo,
aquisição e análise de dados.

Acesse estas ferramentas em bdbiosciences.com/br/tools

6 dicas “Brilhantes” para obter
melhores resultados do seu
experimento de citometria de fluxo
A obtenção de resultados de alta qualidade em citometria de fluxo depende de diversos fatores. Baixa resolução
das populações de interesse, alta sobreposição de espectros, alto background e dificuldade nos ajustes
instrumentais são alguns dos problemas mais comuns encontrados por usuários da citometria de fluxo
multiparamétrica. Abordar cada um destes fatores de maneira apropriada garantirá resultados com melhor
identificação das populações de interesse, maior resolução das marcações realizadas e, finalmente, maior
assertividade e confiabilidade das conclusões obtidas.

1 Conheça a biologia das populações a 3 Classifique os antígenos investigados e escolha

serem estudadas
O painel de citometria de fluxo multicolor tem início muito anterior,
com a elaboração da hipótese biológica e desenho experimental.
Conheça o mais profundamente possível as células a serem
estudadas e suas peculiaridades, pois é um critério fundamental para
uma boa identificação das mesmas. Utilize pesquisas bibliográficas e
experiências anteriores para elaborar um quadro geral capaz de lhe
proporcionar uma visão geral de todas as células de interesse naquela
amostra, a frequência de cada uma delas, a expressão e coexpressão
das moléculas a serem investigadas para obter as informações
necessárias que lhe darão subsídio para a correta escolha dos
reagentes.
2 Escolha os melhores fluorocromos de acordo com
a configuração óptica do seu equipamento.
Os diferentes fluorocromos disponíveis não são todos iguais e, de
acordo com a configuração óptica do equipamento utilizado, podem
se tornar escolhas mais adequadas. Conhecer o equipamento que
será utilizado, quais lasers e canais disponíveis é o primeiro passo para
fazer a melhor escolha possível dos fluorocromos a serem utilizados.
Atualmente, os diferentes equipamentos são capazes de ler uma
gama muito diversificada de fluorocromos. Tirar o máximo proveito
desta capacidade, espalhando os fluorocromos pelos lasers e canais
de fluorescência do citômetro de fluxo, é um importante passo para
obter resultados de alta qualidade. Se você tem dúvidas sobre os
filtros disponíveis no seu equipamento, quais fluorocromos podem ser
utilizados e quais apresentam melhor performance, clique aqui e
saiba mais. A BD Biosciences possui o maior e mais completo
portifólio de fluorocromos do mercado, conheça mais sobre os
reagentes da linha BD Horizon Brilliant™, os mais brilhantes e estáveis
atualmente disponíveis no mercado.
os fluorocromos baseado em suas características
de expressão
Assim como os fluorocromos apresentam índices de brilho diferentes,
os antígenos investigados também são diferencialmente expressos
nas células estudadas. Uma regra fundamental do desenvolvimento
de painéis multicolor é juntar estas duas informações, privilegiando o
uso dos fluorocromos mais brilhantes para as moléculas menos
expressas e/ou células mais raras e deixando aquelas de maior
expressão em fluorocromos com índices de brilho menores. Este
raciocínio inicial foi profundamente desenvolvido e pode ser melhor
explorado em nossos seminários online. Facilite a confecção de um
painel multicolor com diversos reagentes usando ferramentas online
que auxiliam a visualização dos reagentes disponíveis e
compatibilidade com plataformas específicas, como o BD FACSelect™
Multicolor Panel Designer.
4 Não esqueça dos ajustes instrumentais e
compensação
A estruturação do experimento, estudo das células e a escolha dos
melhores reagentes de nada valerão se a aquisição dos dados não for
a ideal. É fundamental que o citômetro de fluxo tenha um
desempenho comprovadamente ideal. A utilização dos controles de
qualidade instrumentais recomendados, o correto ajuste de voltagens
dos canais de fluorescência, se necessário, e a utilização dos controles
de compensação apropriados são pontos críticos para obtenção de
dados de qualidade. A escolha de fluorocromos de baixa qualidade
ou inapropriados gera altos níveis de background de fluorescência e
sobreposição de espectros, diminuindo drástica e irreversivelmente a
resolução dos dados gerados. Utilize ferramentas que permitam a
confecção de controles de compensação adequados, por exemplo
com beads que permitam obter marcações individuais de alta
intensidade de brilho. Visualize a interferência dos espectros de
emissão sobre os canais colaterais usando nossa ferramenta online e
gratuita BD Spectrum Viewer.
Quanto mais brilhante melhor.
Os polímeros BD Horizon Brilliant™ foram desenvolvidos a partir da tecnologia pioneira de corantes polímeros adquirida da
empresa Sirigen Ltda. Estes corante únicos são mais brilhantes que os corantes convencionais, com background equivalente - uma
grande revolução na área. Para a seleção de reagentes, em geral, “quanto mais brilhante melhor”. Para células que possuem
poucos receptors em sua superfície, reagentes brilhantes são essenciais para determinar estas células de baixo brilho de outras em
uma amostra heterogênea. As características dos polímeros BD Horizon Brilliant™ permitem atingir sinais fluorescentes muito mais
brilhantes do que fluorocromos orgânicos tradicionais ou até mesmo do que ficobiliproteínas com o PE ou APC. Isto significa que
estes novos fluorocromos são mais eficientes na identificação de populações com diferentes graus de expressão de receptores do
que os fluorocrom os tradicionais.

Maior resolução, menor compensação

Os fluorocromos da linha BD Horizon Brilliant™ permitem a ampliação das capacidades de diversas aplicações, trazendo ainda
maior qualidade para os ensaios de citometria de fluxo. Anticorpos conjugados a fluorocromos mais brilhantes, com espectros de
excitação mais específicos e emissões menos abrangentes, oferecem importante aumento na resolução dos dados adquiridos.
Além disso, diminuem consideravelmente o processo de compensação, reduzindo a influência da so breposição dos espectros
fluorescentes nos resultados obtidos.

5 Otimize o seu painel 6 Sempre utilize marcadores de viabilidade

Após toda esta pesquisa e trabalho terem sido realizados, agora é Os diferentes processos de marcação, estímulo, incubação, lavagem,
hora de validar e otimizar o seu painel. Variáveis como titulação dos fixação, permeabilização e retirada das células da cultura são apenas
reagentes, protocolos de marcação, armazenamento da amostra, alguns dos procedimentos comumente realizados nos experimentos
entre outros, são grandes interferentes da qualidade dos dados. de citometria de fluxo. Naturalmente, algumas células podem sofrer
Apesar dos anticorpos já trazerem volumes/concentrações de uso diferentes estresses e danos perante estes processos e morrerem.
sugeridos, a titulação dos mesmos é primordial para ajustar o Sabidamente, a presença de células mortas contribui para o aumento
desempenho do reagente às necessidades e particularidades da sua do background de fluorescência, ligações inespecíficas, além de inserir
amostra. Igualmente, protocolos de marcação podem parecer inúmeros outros interferentes analíticos aos dados adquiridos.
detalhes menores do processo como um todo, mas frequentemente Atualmente, estão disponíveis marcadores de viabilidade em diversos
são responsáveis por grandes problemas nas marcações. Degradação canais de fluorescência para os lasers mais comuns em citometria de
de determinados fluorocromos por alguns tipos de fixadores e fluxo. Compatível com
permeabilizantes, pH das soluções, temperatura de utilização, protocolos de fixação e
qualidade da água utilizada, variação nas formulações não permeabilização,
comerciais e baixa qualidade, mau armazenamento e prazo de criopreservação e
validade experiado dos reagentes são apenas alguns dos procedimentos overnight,
interferentes comuns que podem colocar todo seu ensaio a perder. a linha de marcadores
Não corra riscos desnecessários e garanta reprodutibilidade e BD Horizon™ Fixable
padronização ao seu experimento, utilize soluções testadas e Viability Stain (FVS)
validadas que minimizem estes interferentes e tragam maior apresenta importantes
segurança e qualidade. diferenciais e maior
tempo de validade
quando comparado a
outras opções disponíveis
no mercado.
Shine light on new discoveries
Simplifique o mundo da Citometria de fluxo com soluções
comprovadas e corantes mais brilhantes.
BD Horizon Brilliant™

bdbiosciences.com/br
Mais brilho para o laser azul
Otimize a resolução de populações com fluorocromos mais brilhantes para o laser azul,
aumentando a qualidade de seu painel e diminuindo a necessidade de compensação.

Fluorocromo Alternativa mais brilhante:

Tradicional determine populações raras

PerCP-Cy5.5 BD Horizon Brilliant™

Blue 700 (BB700)

Ex Max: 485 nm, Em Max: 693 nm

BB700 é capaz de determinar totalmente

as células CD279+, levando a resultados
mais acurados.

FITC BD Horizon Brilliant™

Blue 515 (BB515)

Ex Max: 490, Em Max: 515

Na identificação de células T Reguladoras
(Tregs) em painel com CD4 APC, CD127
PE e CD3 PerCP-Cy5.5, o BB515 mostra
significativa melhora na separação de
células CD25+ das CD25–.

A linha BD Horizon Brilliant™ abre um mundo de possibilidades e produtividade

para pesquisadores que utilizam a citometria de fluxo multicolor em sua pesquisa.

Saiba mais em bdbiosciences.com/br/go/brilliantblue

Advancing research:
One cell at a time
One scientist at a time
One discovery at a time

Soluções comprovadas que impulsionam a ciência

Com mais de 40 anos de experiência e inovação em citometria de fluxo, a BD tem contribuído no avanço das pesquisas
científicas com sucesso. Dezenas de milhares de publicações citam os citômetros de fluxo, softwares e reagentes BD.
Protocolo de marcação de
superfície para Citometria de Fluxo
Conheça um protocolo fundamental de marcação de superfície celular para citometria de
fluxo. A partir dele, você será capaz de padronizar seus ensaios Multicolor aproveitando ao
máximo o potencial dos reagentes BD.

1 Coletar as células (PBMC ou linhagem celular).

2 Lavar 2x as células em BD Pharmingen Stain Buffer™ cat.554656 gelado.
Em seguida, centrifugar a amostra a 300g em 4°C.
3 Ressuspender o pellet de células em BD Pharmingen Stain Buffer™ cat.554656 gelado para obter concentração final de
2 x 107 células/mL.
4 Distribua alíquotas de 100-µL (106 células) das amostras de células em tubos de citometria ou em placas de 96 poços
com fundo em V.
5 (Etapa opcional) Para bloquear ligações inespecífícas mediadas por receptores Fc, adicione 2,5 µg de Fc Block
(cat. 564219 para amostra humana ou cat.553142 para amostra murina) para 106 PBMCs por tubo (ou poço) e incubar
por 10 minutos a temperatura ambiente.
6 Adicione o mix de anticorpos* segundo e incube por 30 minutos no gelo e protegido da luz. Caso esteja usando dois ou
mais fluorocromos da linha BD Brilliant, adicione 10-µL do BD Horizon Brilliant Stain Buffer cat. 566385.
7 Lave as células 2 vezes usando 1-mL (para tubos) ou 200-µL (para placas) usando Stain Buffer gelado.
Centrifugue células a 300g por 5 minutes a 4°C.
8 Cuidadosamente aspire o sobrenadante.
9 Agite suavemente os tubos (ou placas) para desfazer os pellets.
10 Ressuspender o pellet de células em 500-µL (para tubos) ou 200-µL para placas) usando Stain Buffer gelado.
11 Realize a análise por citometria de fluxo.

Reagentes
NOME CATÁLOGO

BD Pharmingen™ Stain Buffer com BSA ou BD Pharmingen™ Stain Buffer com FBS 554657 ou 554656
BD Fc Block™ Humano ou Camundongo 564220/564219 ou 553141/553142
BD Cytofix™ Buffer 554655

Entre em contato conosco para mais informações.

0800 771 71 57 ou suporte_cientifico@bd.com
Subpopulações de células
dendríticas de camundongo
P R I N C I PA I S M A RC A D O R E S
Sub-populações de
Células Dendríticas Marcadores Marcadores positivos Marcadores negativos Fatores
Primários Adicionais Adicionais de Transcrição
Plasmocitóides DCs (pDCs) CD45R (B220)+ CD4+, CD26+ CD11b– IRF7+, IRF8+
CD317 (BST-2)+ CD172a (Sirp-a)+ CD24– BATF3high
Ly-6C+ CD209a (DC-SIGN)+ CD36–, CD64 (FcgRI)–, SpiB+
Siglec-H+ CD272 (BTLA)+ CD103–
CD11clow CD370 (Clec9a/DNGR1)+ CD205 (DEC-205)– Zbtb46–
CD207 (Langerin)–
CD14– Gr1 (Ly-6C and Ly-6G)+ CD326 (EpCAM)–
FLT3 (CD135)+ DCIR2 (Clec4a4/33D1)–
TLR7high, TLR9high F4/80–
CX3CR1–, XCR1–
CD4+CD11b+ CD4+ CD24+, CD26+ CD36– IRF4+
Linfóide-residentes DCs CD11b+ CD172a (Sirp-a)+ CD45R (B220)– Zbtb46+
CD11chigh CD205 (DEC-205)+ CD64 (FcgRI)–, CD103– BATF3high
CD8a– CD209a (DC-SIGN)+ CD207 (Langerin)–
CD14– CD272 (BTLA)low CD326 (EpCAM)–
DCIR2 (Clec4a4/33D1)+
ESAM+ CD370 (Clec9a/DNGR1)–
F4/80+ Ly6C–
FLT3 (CD135)+ XCR1–
TLR5+, TLR7+, TLR9+
CX3CR1+
CD4–CD11b+ CD11b+ CD24±, CD26+ CD36– IRF4+
DCs migratórias CD11c+ CD64 (FcgRI)+ CD45R (B220)–, CD103– IRF2+
convencionais CD4– CD172a (Sirp-a)+ CD207 (Langerin)– Zbtb46+
CD8a– CD209a (DC-SIGN)± CD326 (EpCAM)– BATF3high
CD14– CD272 (BTLA)low CD370 (Clec9a/DNGR1)–
DCIR2 (Clec4a4/33D1)+ XCR1–
F4/80+
Ly-6C±
FLT3 (CD135)+
TLR5+, TLR7+, TLR9+
CX3CR1+
DCs CD8a+ Linfóide- CD8a+ CD1d1+, CD24+, CD26+ CD45R (B220)– IRF8+
residentes CD11chigh CD36+, CD103± CD64 (FcgRI)– BATF3+
convencionais CD4– CD205 (DEC-205)+ CD172a (Sirp-a)– Zbtb46+
CD11b– CD207 (Langerin)± CD209a (DC-SIGN)–
CD14– CD272 (BTLA)high CD326 (EpCAM)–
CD370 (Clec9a/DNGR1)+ DCIR2 (Clec4a4/33D1)–
NECL2 (CADM1)+ F4/80–
FLT3 (CD135)+ Ly-6C–
TLR3+, TLR4+, TLR11+
XCR1+, CX3CR1±
DCs CD103+ CD103+ CD1d1+, CD24+ CD45R (B220)– IRF8+
Migratórias convencionais CD11chigh CD26+, CD36+ CD64 (FcgRI)– BATF3+
CD4– CD205 (DEC-205)+ CD172a (Sirp-a)– Zbtb46+
CD8– CD207 (Langerin)+ CD209a (DC-SIGN)–
CD11b– CD272 (BTLA)high CD326 (EpCAM)–
CD14– CD370 (Clec9a/DNGR1)+ DCIR2 (Clec4a4/33D1)–
NECL2 (CADM1/CD317)+ F4/80–
FLT3 (CD135)+ Ly-6C–
TLR3+, TLR4+, TLR11+ CX3CR1–
XCR1+
Células de Langerhans CD207 (Langerin)+ CD24+ CD8a–, CD26–, CD36–
CD324 (E-Cadherin)+ CD172a (Sirp-a)+ CD45R (B220)–, CD103–
CD326 (EpCAM)+ CD205 (DEC-205)+ CD209a (DC-SIGN)–
CD11b+ F4/80+ CD370 (Clec9a/DNGR1)–
CD11c+ DCIR2 (Clec4a4, 33D1)–
TLR3+, TLR11+ Ly-6C–
CD14– CX3CR1–, XCR1–
DCs CD207+ da derme CD207 (Langerin)+ CD103± CD45R (B220)–
CD11blow CD172a (Sirp-a)–
CD11c+ CD326 (EpCAM)–

DCs CD207– da derme CD207 (Langerin)– CD172a (Sirp-a)+ CD45R (B220)–

CD11b± CD103–
CD11c+ CD326 (EpCAM)–

DCs inflamatórias CD64 (FcgRI)+ CD209a (DC-SIGN)+ CD8a–, CD45R (B220)–,

(Derivadas de monócito CD11b+ CD272 (BTLA)low CD103–
DCs) CD11c+ Ly-6C+ CD172a (Sirp-a)–
CD14– TLR1-6, TLR7-8+, TLR10+ CD207 (Langerin)–
CD326 (EpCAM)–
Principais marcadores de
linfócitos T e suas subpopulações
As soluções BD incluem citômetros de fluxo,
softwares, anticorpos e serviços que foram
desenvolvidas para auxiliar as diversas pesquisas
relacionadas à Linfócitos T. São produtos para a
identificação de fenótipos, sinalização intracelular e
produção e quantificação de citocinas, que refletem
um compromisso com a alta qualidade e
consistência necessária para pesquisas avançadas.
Para atender aos requisitos dos mais exigentes
pesquisadores, a BD oferece uma variedade de
opções, desde kits completos até fórmulas
totalmente personalizadas. Conheça abaixo os
principais marcadores de linfócitos T e suas
subpopulacões conhecidos:

Type of Cell Cytotoxic Th1 Th2 Th91 Th17 Tfh2 Treg

Principal Mata células Induz Ajuda Proliferação Aumenta a Regula o Regulação do

função infectadas por atividade linfócitos B a Células T e resposta de desenvolvime sistema
vírus. microbicida de fazer a troca aumento da neutrófilos. nto de imunológico.
macrófagos de isotipos dos produção de linfócitos B-
ativados, anticorpos. IgG e IgE. antígenos
ajuda específicos e
linfócitos B a produção de
produzirem anticorpos.
anticorpos.

Alvos Vírus Patógenos Parasitas Parasitas Fungos e - -

patogênicos intracelulares bactérias
extracelulares
Função Rejeição de Doenças Auto- Alergias e Alergias Auto- Auto- Auto-
prejudicial transplantes imunidade asma imunidade imunidade imunidade e
câncer

Marcadores CD8 CD4, CXCR3 CD4, CCR4, CD4 CD4, CCR6 CD4, CXCR5 CD4, CD25
extracelulares Crth2
(humano)

Citocinas de - IFN-g, IL-2, IL- IL-4, IL-2, IL- IL-4, TGF-ß TGF-ß, IL-6, IL- IL-12, IL-6 TGF-ß, IL-12
diferenciação 12, IL-18, IL- 33 1, IL-21, IL-23
27

Citocinas IFN-g, TNF, IFN-g*, LT-a, IL-4*, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10 IL-17A*, IL- IL-21 TGF-ß, IL-10
efetoras LT-a TNF IL-13 17F, IL-21, IL-
22,
IL-26, TNF,
CCL20

Fatores de - T-bet, Stat1, GATA3, Stat5, GATA3, Smads, RORgt, RORa, Bcl-6, MAF FoxP3, Smad3,
transcrição Stat6 Stat6 Stat6 Stat3 Stat5

*Principais citocinas
Citometria de fluxo ao seu alcance:
TM
BD Accuri C6 Plus
Com alta capacidade de processamento de dados, o BD Accuri™ C6 Plus simplifica sensivelmente a operação de um
citômetro de fluxo. Sem necessitar de ajustes de voltagem, a obtenção de resultados pode ser obtida através de análises
simples. Seu software possui interface altamente intuitiva, permitindo a aquisição e análise de dados sem complicação.
Usando a última geração de arquivos de citometria, permite modificação de parâmetros após a aquisição de dados.

Automação sistemas de tampões e reagentes necessários para aquisição e

O BD Accuri™ C6 Plus pode contar com o BD CSampler™, análise. Os templates do software BD Accuri™ C6 Plus
opcional que facilita ainda mais as rotinas dentro do combinados aos kits incluem Workspaces predefinidos,
laboratório. Esta opção permite a leitura automatizada de marcadores, regiões, gates e nomes dos parâmetros para uma
tubos ou placas de 48 e 96 poços. Com seu software, a rápida e fácil configuração e análise.
programação da leitura dos tubos ou poços é muito simples e
intuitiva. • Análise multiparamétrica de 5 ou 6 parâmetros
• Equipamento portátil, de fácil instalação, uso,
Kits e Templates para o BD Accuri™C6 Plus aprendizagem e manutenção
Análise Celular fácil como nunca visto antes, o BD Accuri™ C6 • Ideal para estudos em campo e uso no fluxo laminar
Plus torna ainda mais fácil aliar o poder da citometria de fluxo • Software intuitivo e livre
com sua pesquisa através de templates livres, pré- • Ensaios reprodutíveis e de fácil ajuste: voltagens pré-
configurados e kits prontos de reagentes específicos, otimizadas
oferecendo um fluxo de trabalho mais fácil e intuitivo. Kits pré- • Flexibilidade na aquisição de amostras: tubos de 0,5 a 5mL
configurados incluem anticorpos fluorescentes, e execução de ensaios cinéticos real-time

Saiba mais em bdbiosciences.com/br/accuri

Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Cell sorting simplificado:
BD FACSMelody™
Obtenha performance e confiança na separação celular em uma separação celular simplificada, com alto desempenho e
resultados consistentes reprodutíveis. A experiência da BD, aliada às mais novas tecnologias possibilitou o desenvolvimento
de um separador celular com software amigável customizado e ajustes automatizados.

Facilidade de uso Automation makes sorting simple

Automação de tarefas complexas e procedimentos guiados facilitam and saves time
resultados consistentes, mesmo com uma equipe com conhecimento técnico
heterogêneo, possibilitando mais insights científicos com eficiência 100%

laboratorial.

Alta Performance
• P
• S
• W
55%
O sistema completo com reagentes, software e hardware atuam de forma
• S
sheath pressure
reduction
conjunta para detectar e separar marcadores celulares de baixa densidade e • Adjust drop drive amplitude and
in steps
células raras. O sistema possibilita resultados reprodutíveis com separação droplet breakoff

em tubos ou placas, enquanto protege o operador e a amostra. • Focus side streams

• C
• P
• Turn on stream monitoring
Resultados rápidos • Aim sort streams
• R
• C
1. Inicialização do sistema 3 minutos • Run sample
• Run sample
• D
2. Alinhamento de stream e laser 0 minutos 0%
• D

3. Inicialização Fluídica 3 minutos Sort setup protocol

4. Otimização de stream 2 minutos

5. Checagem de performance diária com beads 9 minutos
6. Configuração de experimentos e compensação 0 minutos
normalizadas para resultados consistentes

Saiba mais em bdbiosciences.com/br/melody

Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Como garantir acurácia dos
resultados no painel multicolor
A presença de células mortas em amostras analisadas por Citometria 2 O que são os BD Horizon™ Fixable Viability Stain (FVS)?
de Fluxo pode afetar significativamente a qualidade da marcação e
aumentar inespecificidade de ligação dos anticorpos, gerando
resultados falso-positivos e diminuindo a resolução dos dados. Isso
pode dificultar a discriminação de células raras e antígenos de baixa
expressão.
Enquanto gates baseados em forward e side scatter auxiliam na
exclusão de debris e células mortas, essa estratégia não irá eliminá-las
por completo da análise. A inclusão, no painel multicolor, de um
marcador de viabilidade celular tem se estabelecido como prática
comum em Citometria de Fluxo para comprovar a acurácia dos
resultados.
Marcadores amino reativos para análise de viabilidade em células
Atualmente, estão disponíveis marcadores de viabilidade em diversos frescas, fixadas ou permeabilizadas. Esse corante se liga às células
canais de fluorescência para os lasers mais comuns em citometria de viáveis e não viáveis. Em processos de morte celular, a célula capta
fluxo. Compatível com protocolos de fixação e permeabilização, uma maior quantidade de corante pois perde sua integridade de
criopreservação e procedimentos overnight, a linha de marcadores membrana. Dessa forma, as células não viáveis possuem maior
BD Horizon™ Fixable Viability Stain (FVS) apresenta importantes intensidade de fluorescência do que as células viáveis. As células
diferenciais e maior tempo de validade quando comparado a outras mortas podem ser excluídas da análise através da seleção por um
opções disponíveis no mercado. gate das células de menor intensidade de fluorescência (células
vivas). Os FVS foi validado com diversos tampões de fixação e
permeabilização à base de detergentes e álcool, incluindo os tampões
1 Por que é importante excluir células mortas das BD Biosciences, permitindo a análise de viabilidade em protocolos de
análises em citometria de fluxo? marcações intracelular, como análise de citocinas, fatores de
transcrição e proteínas fosforiladas.
Células mortas podem ser um grande interferente nas análises por
Citometria de Fluxo:
• Anticorpos e sondas se ligam inespecificamente às células mortas.
• Células mortas podem apresentar uma maior autofluorescência.
3 Para quais canais de fluorescência existem BD Horizon™
• Células podem mascarar resultados de ensaios funcionais. Fixable Viability Stain (FVS)?
• Células mortas reduzem a qualidade da amostra e diminuem a Os BD Horizon™ Fixable Viability Stain (FVS) estão disponíveis para
estabilidade da aquisição (ex.: presença de mais agregados flexibilizar o design de panéis multicolor, existindo em diferentes
celulares). opções de cores para ser melhor adaptado a cada experimento. Veja
abaixo as opções disponíveis em nosso portfólio.

BD Horizon™ Fixable Viability Stain (FVS)

Status
Produto Catálogo Laser/Excitação Canal-Emissão Reg.*

FVS 520 564407 Azul FITC, BB515 RUO *

FVS 570 564995 Azul/Yellow-Green PE RUO *
FVS 620 564996 Azul/Yellow-Green PerCP-Cy5.5/PE-CF594 RUO *
FVS 660 564405 Vermelho APC RUO *
FVS 700 564997 Vermelho APC-R700, Alexa Fluor-700 RUO *
FVS 780 565388 Vermelho APC-H7, APC-Cy7 RUO *
PBMCs não estimulados foram avaliados para expressão de IL-17. A FVS 450 562247 Violeta BB421, V450, Pacific Blue RUO *
figura da esquerda indica que células não estimuladas marcadas com
FVS 510 564406 Violeta BV510, V500 RUO *
o isotipo controle do anticorpo anti-IL-17 não expressam IL-17 (gate
FVS 575V 565694 Violeta BV605 RUO *
em células viáveis CD3+CD4+. Quando, na mesma amostra, não é
incluída na estratégia de análise a exclusão de células mortas, pode-
se observar a presença de eventos falso-positivos devido à ligação
inespecífica do isotipo controle.
Estes fatores aumentam o background de fluorescência e diminuem a
resolução, reduzindo a habilidade de visualizar, sobretudo, moléculas
pouco expressas e populações celulares raras. É importante minimizar Para mais informações sobre design otimizado de painéis multicolor e
células mortas antes da aquisição (qualidade, preparo e protocolos de imunofenotipagem, converse com o nosso suporte
armazenamento da amostra) e, excluí-las na análise pós-aquisição científico através do telefone 0800 771 7157 ou e-mail
inserindo no painel multicolor marcadores de viabilidade. suporte_cientifico@bd.com.
BD and FlowJo
are now one!
Learn more at
info.flowjo.com/faq
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Cy™ é marca da GE Healthcare. Fluorocromos Cy estão sujeitos aos direitos de propriedade de GE Healthcare e Carnegie Mellon University e são produzidos e vendidos sob licença da
GE Healthcare somente para pesquisa e uso diagnóstico in vitro. Qualquer outra utilização requer licença comercial da GE Healthcare, 800 Centennial Avenue, Piscataway, NJ 08855-1327, USA.
Pacific Blue™ é marca e Alexa Fluor® e Texas Red® são marcas registradas de Molecular Probes, Inc.
CF™ é ma rc a de Biot ium , Inc.
DRAQ5™ e DRAQ7™ são marcas registradas da BioStatus Ltd.

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