PROTOCOLOS DE LABORATORIO

PRACTICA DE LABORATORIO – QUÍMICA ORGÁNICA

GENERALIDADES

La práctica de laboratorio busca que el estudiante adquiera destrezas básicas para la

extracción y caracterización de compuestos orgánicos que se encuentran o son generados
por diversos recursos y que hacen parte del eje agropecuario-ambiental. Para esto, el
estudiante presentará una evaluación corta al inicio de cada práctica que se computará
con la valoración de su desempeño, informe de laboratorio y reconocimiento de normas
de seguridad – primeros auxilios de los reactivos a ser usados.

El estudiante debe seguir atentamente los procedimientos descritos en esta guía y tener
en cuenta las normas de seguridad indicadas aquí y por el personal del laboratorio.

Se desea generar en el estudiante, la capacidad de analizar e interpretar los resultados

obtenidos en la práctica, a partir de la contrastación de los mismos con los reportados por
la literatura científica.

TIEMPO DE DURACION: 10 horas (2 horas para el montaje de la fermentación y 8

horas para la ejecución de los procedimientos experimentales)

FECHA DE REALIZACIÓN DE PRÁCTICA

De acuerdo a la programación establecida por cada CEAD

ORDEN DE LAS ACTIVIDADES A REALIZAR POR LOS ESTUDIANTES:

1. Inscríbase en el aplicativo de oferta integrada de laboratorios OIL de acuerdo a la

zona donde pueda realizar su práctica.

2. Descargue los siguientes documentos:

a. Guía de desarrollo del componente practico.
b. Protocolos de laboratorio con formato de realización de informes.
c. Formatos informes de laboratorio

3. Lea detalladamente cada uno de esos documentos.

4. Revise detalladamente las precauciones y primeros auxilios de los reactivos que
usará en el laboratorio. Esta información será revisada por el tutor práctico,
contemplada en la nota valorativa total del componente práctico, como también
evaluada en la prueba inicial de cada procedimiento experimental.

5. Asista a la práctica en el lugar, fecha y hora que programe el CEAD al que pertenece.

6. Lleve bata blanca manga larga, gafas de seguridad, guantes de nitrilo, bayetilla,
marcador para vidrio o cinta de enmascarar. No podrá ingresar si no lleva por lo
menos, bata, gafas y guantes de nitrilo. Es por su seguridad y bienestar.

7. Lleve leído y estudiado los protocolos del laboratorio.

8. Recuerde que debe tener claros los conceptos de la guía de laboratorio (marco
teórico y procedimientos).

9. Cada estudiante debe tener presente que se hará una evaluación antes de comenzar
cada práctica (una en la mañana y otra en la tarde) y un informe para cada práctica
en un formato preestablecido, los cuales deberán ser entregados al tutor de práctica,
máximo 8 días después de realizados los procedimientos experimentales.
 PRÁCTICA No. 1: PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS ALCANOS – METANO, GAS
TRANSVERSAL AL EJE AGROPECUARIO-AMBIENTAL

1. Fundamento teórico
El manejo adecuado de residuos rurales, contribuye significativamente a la producción y
conversión de residuos animales y vegetales (biomasa) en distintas formas de energía.
Estos procesos se dan mediante un conjunto de reacciones bioquímicas, que a su vez
producen biogás, el cual está compuesto principalmente de metano (CH4) y dióxido de
carbono (CO2). Este biogás, puede ser capturado y usado como combustible y/o para
generar electricidad. De esta forma, la digestión anaeróbica, se constituye como un
método de tratamiento de residuos, el cual permite disminuir la cantidad de materia
orgánica contaminante, estabilizándola y convirtiéndola en una forma de energía. De esta
forma, vemos al gas CH4 como un gran combustible que se puede usar en diversos
sectores y que puede ser obtenido a partir de procesos sanitarios y ambientales eficientes,
usando la biotecnología.

Por otro lado, desde la pecuaria, se sabe que se producen grandes cantidades de CH 4,
estimándose una producción de 114 toneladas de este gas al año. Esto presenta dos
puntos de vista negativos: primero, que el gas metano se constituye como una pérdida
energética para el animal y segundo, que este gas contribuye al calentamiento global,
causando serios daños a los ecosistemas y al equilibrio biológico. Por tanto, desde la
nutrición y producción animal, se están buscando estrategias para reducir las emisiones
de CH4 por la bovinocultura, en aras de maximizar la eficiencia de uso de recursos por
parte del animal y al mismo tiempo, reducir su impacto en el calentamiento global.

Así las cosas, desde la química orgánica, conviene entender acerca de la reactividad de
los alcanos, como también, adquirir herramientas para su caracterización. En la práctica
que se desarrollará en esta sección, se pretende producir en el laboratorio y de forma
sencilla CH4, y llevar a cabo su caracterización, a la luz de los principios de la química
orgánica. En esta oportunidad, no se hará su producción mediante fermentación, debido
a que el proceso requiere más tiempo del proyectado para el desarrollo del laboratorio.
Sin embargo. Todo lo realizado aquí (recolección de CH4 y su caracterización), se puede
aplicar a un sistema de fermentación. Lo invito a que consulte e intente este procedimiento
en su casa, tomando las debidas precauciones.
2. Objetivos

 Asociar las propiedades químicas de los alcanos y compararlas con las de los alquenos,
buscando semejanzas y diferencias.
 Representar algunas reacciones químicas características de los alcanos, para así
evidenciar las propiedades de estos.
 Realizar la obtención química de CH4.

3. Materiales y reactivos

Materiales Reactivos
 2 erlenmeyer o tubo de ensayo grandes  n-hexano (cualquier alcano)
con tubuladura lateral  Acetato de sodio anhidro
 2 tapones  Cal sodada
 10 tubos de ensayo  Reactivo de Bayer (NMnO4 al 2%)
 2 vasos de precipitado  Solución de Bromo en CCl4 al 2%
 2 mangueras de caucho con terminales  Papel indicador (tornasol)
de vidrio
 1 probeta de 25 mL
 1 pinza con nuez
 1 matraz de 500 mL
 Papel alumínio (el estudiante debe
traerlo)

Descripción de las precauciones con los reactivos a utilizar y/o primeros auxilios (consulte
esta información y tráigala el día de la práctica; esta puntuará en la evaluación final de la
actividad y será revisada por el tutor).
4. Procedimiento
4.1 Preparación y combustión del metano
Realice el montaje, cuya figura se muestra a continuación (Revise el siguiente video, para
aprender a recoger y medir gases: https://www.youtube.com/watch?v=ozko7fkg4Ko)

Figura 1. Montaje a ser construido para la recolección y análisis de metano

Coloque 2 g de acetato de sodio anhidro y 1 g de cal sodada en el tubo de ensayo.
Introduzca la manguera en la cubeta o vaso con agua, justo en la boca del tubo de ensayo
que está previamente lleno de agua. Caliente la mezcla de tubo suavemente al principio
y luego fuertemente. Deje escapar algo de gas. Recoja el metano sobre agua, tal como se
muestra en la Figura 1. Una vez que el agua de tubo invertido haya sido completamente
desplazada, acerque rápidamente una llama pequeña a la boca del tubo y observe el tipo
de combustión.
4.2 Propiedades químicas de los alcanos
Para esta prueba, se usará n-hexano y el gas CH4 producido por el sistema.
Pruebas con n-hexano: tome 4 tubos de ensayo y coloque en cada uno de ellos, 1 mL de
n-hexano. Agregue al primero, 0,2 mL de solución de Bayer; al segundo, 0,2 mL de H 2SO4
concentrado; al tercero y cuarto, 0,1 mL de Br2/CCl4. Exponga el tercer tubo a la luz
ultravioleta; guarde el otro en un lugar oscuro, cúbralo con papel aluminio y obsérvelo
después de 5 minutos. Anote sus resultados.
Pruebas con metano: adicione primero los reactivos en los cuatro tubos y luego haga pasar
una corriente ligera del gas sobre cada uno de ellos. Anote los resultados.
Nota: siempre que mezcle los reactivo, agite bien.
5. Referencias
Wells A (2003). Guías de laboratorio de química orgánica. Departamento de química.
Universidad de los Andes.
Carmona, J. C., Bolivar, D., Giraldo, L. (2005). El gas metano en la producción ganadera
y alternativas para medir sus emisiones y aminorar su impacto a nivel ambiental y
productivo. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias, 18(1): 49-63.
PRACTICA No. 2 – FERMENTACIÓN ALCOHOLICA – PROCESO DE OBTENCIÓN DE
SUBPRODUCTOS Y ENERGÍA LIMPIA EN EL EJE AGROPECUARIO AMBIENTAL

1. Fundamento teórico
La fermentación es un proceso en el cual los compuestos orgánicos se descomponen en
otros más sencillos, por acción de enzimas (fermentos). Está constituido por reacciones
biológicas de óxido-reducción productoras de energía. Para que un compuesto sea
fermentable, ha de producir compuestos intermedios oxidables y reducibles. Estas
condiciones las cumplen perfectamente los azucares, por lo que son compuestos
universales y fácilmente utilizados por los organismos fermentadores. Los productos
finales de la fermentación, dependen del tipo de organismo que la lleva a cabo, de la
naturaleza del sustrato fermentable y de factores ambientales como la temperatura y el
pH. La fermentación alcohólica es la más característica de las levaduras, tejidos de plantas
superiores, ciertos hongos y algunas bacterias.
El etanol puede obtenerse por fermentación de carbohidratos, como la glucosa, la fructosa
y la manosa, que a su vez se obtienen de otros azúcares y almidones. Una enzima
convierte el carbohidrato en glucosa y otra transforma esta última en etanol.

Figura 2. Proceso bioquímico de la fermentación alcohólica

Las aplicaciones prácticas de la fermentación son muy comunes en el eje agropecuario-
ambiental. Por ejemplo, se le usa para aprovechar recursos de la industria frutícola para
la fabricación de bebidas alcohólicas, como también, en la elaboración de diversos
derivados lácteos (mantequilla, queso, yogur, etc), dando así un aprovechamiento
eficiente a la producción lechera originada de la pecuaria. Adicionalmente, se convierte en
una opción interesante para producción de energía renovable a partir de sistemas
biológicos, mitigando de esta forma, el uso de combustibles fósiles, que tanto daño causan
al medio ambiente.
De esta forma, se puede apreciar claramente, que el proceso de fermentación, incide
significativamente en la eficiencia de diversos procesos del eje agropecuario-ambiental, al
contribuir en el aprovechamiento eficiente de recursos agrícolas y pecuarios, como
también, generando alternativas energéticas limpias y ambientalmente sostenibles.
2. Objetivos

 Preparar alcohol etílico por fermentación de panela.

 Utilizar el proceso de destilación simple para separar el etanol obtenido.
 Determinar el porcentaje de alcohol del producto obtenido.
 Identificar alcoholes mediante algunas reacciones químicas sencillas.

3. Materiales y reactivos

Materiales Reactivos
 1 equipo de destilación  1 panela rallada
 1 baño María  Levadura
 1 probeta de 100 mL  Papel tornasol azul y rojo, o papel
 1 termómetro indicador universal
 1 erlenmeyer de 250 mL  Yodo
 1 cápsula de porcelana  Solución de Na2SO3
 1 alcoholímetro  Ácido sulfúrico concentrado
 4 tubos de ensayo  Ácido acético
 1 pinza para crisol  Alambre de cobre No. 10
 Reactivo de Schiff

Descripción de las precauciones con los reactivos a utilizar y/o primeros auxilios (consulte
esta información y tráigala el día de la práctica; esta puntuará en la evaluación final de la
actividad y será revisada por el tutor)
4. Procedimiento

4.1 Fermentación de panela (en su residencia: realizar antes de venir a la

práctica)
Coloque en un recipiente, una panela rallada y hierva la mezcla, hasta disolución completa
de la panela. Posteriormente y cuando la mezcla se encuentre fría, transfiera el contenido
a un recipiente de un de 1 L (puede ser una botella plástica de gaseosa) y agregue a la
mezcla, 2 papeletas de lavadura (o 15 g) y complete con agua, hasta alcanzar las ¾ partes
del volumen de recipiente. Tape el frasco, con su respectiva tapa rosca, pero adaptando
a esta una manguera como se muestra en la Figura 3, la cual debe estar completamente
ajustada al orificio hecho a la tapa y debe estar sumergida en un vaso con agua (ojo, no
olvidar esto último, ya que, de no hacerse, la reacción se puede inhibir y la botella estallar,
por acumulación del CO2 generado durante la fermentación). Dejar la mezcla por espacio
de 12 días, a temperatura ambiente, en un lugar fresco y alejado de la luz solar, para que
ocurra la fermentación. Evidencie en el bajo burbujeo, que denota producción de CO 2. Si
esto no sucede en los dos días siguientes a la fermentación, revise si el sistema está
completamente cerrado (ej: manguera ajustada a la tapa y/o manguera dentro del agua)

Figura 3. Montaje artesanal del sistema de fermentación

4.2 Obtención de alcohol etílico (en el laboratorio)

Ensamble el equipo de destilación tal como se ilustra en la Figura 4. Vierta la mezcla de
fermentación en el balón de destilación hasta alcanzar la mitad del volumen. Agregue 10
mL de ácido sulfúrico concentrado, ajuste el equipo de destilación simple y destile de tal
manera que la temperatura no pase de los 85 °C. Recoja el destilado que salga entre los
80-85 °C. Determine el porcentaje de alcohol (grados) utilizando el alcoholímetro.
Figura 4. Montaje de destilación simple, para recuperar el etanol producto de la
fermentación
4.3 Propiedades químicas del etanol

4.3.1 Combustibilidad: coloque 1 mL de alcohol obtenido en una cápsula de porcelana

y acerque el mechero o un fósforo encendido. Observe el tipo de combustión
(¿llama azul?, ¿llama amarilla?, ¿por qué?)
4.3.2 Acidez: introduzca el papel tornasol azul primero y luego el papel tornasol
rosado. Si tiene papel indicador universal, use este en reemplazo del tornasol.
Determine pH. Anote sus observaciones.
4.3.3 Reacción del yodoformo: disuelva en un tubo de ensayo, 4 cristales de yodo
en 2 mL de alcohol producido. Añada con una pipeta, poco a poco, 3 mL de
solución de carbonato de sodio al 10%, hasta que desaparezca el color del yodo.
Anote sus observaciones.
4.3.4 Formación de ésteres: mezcle 2 mL de alcohol, 1 mL de ácido acético glacial y
0,5 mL de H2SO4 concentrado. Caliente suavemente la mezcla en el baño María
y luego viértala sobre 25 mL de agua fría. Aprecie el olor del éster formado
(pregunte al profesor, como realizar la detección de olor, antes de realizarlo).
4.3.5 Oxidación: en un vaso de precipitados de 25 mL, coloque 5 mL de alcohol
preparado e introduzca en él un alambre de cobre en espiral, previamente
calentado al mechero. Repita la operación unas 6 veces. Pruebe si el alcohol se
ha oxidado, utilizando 3 gotas de reactivo de Schiff (consulte para que sirve y el
positivo para esta prueba). Describa lo observado.
5. Referencias
Wells A (2003). Guías de laboratorio de química orgánica. Departamento de química.
Universidad de los Andes.
Duran, D., Trujillo Y, Mejía, K. (2013). Capacidad de producción de alcohol de levaduras
vinícolas sobre un sustrato a base de panela. Alimentech Ciencia y Tecnología Alimentaria,
11: 79-87.