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Este documento presenta los resultados de un experimento para medir la actividad de la enzima transaminasa utilizando alanina y ácido α-cetoglutárico como sustratos. Se realizó una cromatografía en papel para identificar la presencia de ácido glutámico y alanina. Los resultados no mostraron una gran discrepancia entre la alanina y el testigo. La curva de calibración del ácido glutámico permitió comparar la muestra problema. Los hallazgos indican que la transaminasa transfirió efectivamente un grupo amino de
Este documento presenta los resultados de un experimento para medir la actividad de la enzima transaminasa utilizando alanina y ácido α-cetoglutárico como sustratos. Se realizó una cromatografía en papel para identificar la presencia de ácido glutámico y alanina. Los resultados no mostraron una gran discrepancia entre la alanina y el testigo. La curva de calibración del ácido glutámico permitió comparar la muestra problema. Los hallazgos indican que la transaminasa transfirió efectivamente un grupo amino de
Este documento presenta los resultados de un experimento para medir la actividad de la enzima transaminasa utilizando alanina y ácido α-cetoglutárico como sustratos. Se realizó una cromatografía en papel para identificar la presencia de ácido glutámico y alanina. Los resultados no mostraron una gran discrepancia entre la alanina y el testigo. La curva de calibración del ácido glutámico permitió comparar la muestra problema. Los hallazgos indican que la transaminasa transfirió efectivamente un grupo amino de
RESULTADOS α-cetoalaninato, para corroborar esto se
efectuó una cromatografía en papel
whatman, poniendo de manifiesto el ácido glutámico en diferentes concentraciones, además de colocar la muestra problema con su respectivo testigo, y una muestra Tabla . Cálculo de las unidades arbitrarias de alanina, esta es para identificar la de transaminasa en los estándares muestra que no reaccionó con el testigo. utilizados. El problema nos determinara la actividad enzimática con los sustratos y el testigo Estandar µL µmoles UAT nos permitirá saber la concentración de 1 5 0.1 41.6 alanina que reacciono y que no reaccionó. 2 10 0.2 83.3 3 15 0.3 125.0 Como lo vemos en nuestros resultados no 4 20 0.4 166.6 hay gran discrepancia entre la alanina y el 5 25 0.5 208.3 testigo. Las muestras que utilizamos del papel whatman, se fragmentan para cuantificar la concentración de los analitos Calculo de las Unidades Arbitrarias de por el método espectrofotométrico. Las Transaminasa. (ejemplo estándar 1). muestras de ácido glutámico a diferentes concentraciones, sirven para realizar la ● Obtención de micromoles en cada curva tipo, esta nos permite comparar tubo estándar nuestra prueba. En este caso la prueba tiene una gran concentración de ácido 20 µmol----------------------1000 µL glutámico, lo que evidencia el efecto de la X=0.1 µmol------------------5 µL transaminasa sobre la alanina y el ácido α-cetoglutárico. ● Obtención de los microgramos de hígado en cada aplicación. CONCLUSIONES
1000 µL----------------------0.03 g hígado La transaminasa, transfiere un grupo
amino de un aminoácido a un α-cetoácido 80 µL-------------------------x=0.0024 g hígado aceptor dando como resultado la formación de un nuevo aminoácido y un UAT= µmol/g hígado/1hr nuevo cetoácido UAT= 0.1 µmol/0.0024 g hígado/1hr UAT= 41.6 µmoles/ghígado/hr BIBLIOGRAFÍA Vejar Rivera Eva Irma, Prácticas de DISCUSIÓN Bioquímica descriptiva, 2da edición, Editorial Unison, México 2005, pp. 152- A partir de una preparación cruda de 153. transaminasa, se comprobó el efecto sobre la alanina y el ácido α-cetoglutárico. sabiendo que la transaminasa en la alanina va a transferir su grupo α-amino, al carbono α de la α-cetoglutarato con la intervención del piridoxal fosfato como coenzima, formando así el glutamato y el