CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

DANA MARCELA BENÍTEZ URÁN

LEINYS SANTANA PEREZ

LUIS DIEGO RUIZ VELASQUEZ

Profesora:

DIANA OSSA

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE INGENIERÍAS

INGENIERÍA DE ALIMENTOS

QUÍMICA ORGÁNICA

BERASTEGUI

06/05/19
 CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

1. Objetivo General: Separar los pigmentos más abundantes presentes en hojas de

espinacas utilizando la cromatografía de capa fina

Procedimiento.

1- Obtención de los pigmentos.

Triture una hoja de espinaca con etanol, hasta cuando salga un liquido (solución

de pigmentos).

2- Preparación de eluente.

Prepare 4 mL de la mezcla de solventes ( benceno etanol, cloroformo, butanol,

ecetato de etilo, acetona, hexano, diclorometano etc) o use uno solo.

3-Aplicación de la muestra y cromatografía. Introduzca la punta de un capilar

en la solución de los pigmentos. Cuando la solución haya ascendido en el capilar

, retírelo y toque momentáneamente y con mucha suavidad un punto de la placa -

en el centro a 0,5 cm. del borde inferior -. Se debe lograr una manchita circular

de unos 3 - 5 mm. de diámetro . Si se estima que no quedo suficiente muestra en

la mancha , se puede hacer una segunda aplicación en el mismo punto . Esperar a

que el solvente se evapore de la placa, para cromatografia . Luego con una pinza

se coge la placa por su parte superior limpia y se introduce con mucho cuidado ,
 verticalmente - mancha hacia abajo - , en el cilindro volviendo luego a separarlo

en una cámara (frasco de compotas –traer)

El solvente al entrar en contacto con la parte inferior de la placa empieza a

ascender y cuando llega a la mancha empieza el proceso de cromatografía . Deje

que el solvente llegue hasta el nivel superior del adsorbente en la placa , retire la

placa con cuidado con las pinzas y deje que el solvente se evapore . Cuántas

manchas ve en la placa ? . De qué color son ? . Cuál es su posición ? . Discuta

con el profesor los resultado y repita la experiencia tantas veces como sea

necesario para encontrar el mejor sistema de separación de los pigmentos.

2. PREGUNTAS

1. Cuáles son los tipos de cromatografía más utilizados y describirlos.

2. Qué es el Rf.

3. Determine el Rf de cada pigmento

4. Cuales pigmentos se separaron en la espinca

5. Que se puede concluir de los pigmentos

RESPUESTAS. 1

 Cromatografía de columna

Es la aplicación providente de la cromatografía. Se usa para conseguir compuestos químicos

completamente puros a partir de Tipos de cromatografíauna mezcla de elementos en un nivel de

microgramos hasta kilogramos usando grandes columnas industriales. La columna básica de

cromatografía providente es un tubo de vidrio con un diámetro de 5 a 50 mm y posee una altura

de 50 cm a 1 m con una llave en la parte inferior.

  Cromatografía de papel

Es un método analítico utilizado para identificar y separar las mezclas que son pintadas

principalmente con pigmentos fuertes. Este proceso también se puede utilizar en las escuelas de

secundarias o primarias en experimentos de laboratorio con tinta. Esta técnica ha sido sustituida

en gran parte por cromatografía de capa fina, sin embargo este método sigue siendo una eficaz

herramienta de enseñanza.

La cromatografía en papel bidireccional, es conocida como cromatografía bidimensional,

envuelve la utilización de dos solventes y a la misma vez aplicando una rotación del papel a 90 °

entre ellos. Esto es ventajoso para lograr separar las mezclas complejas de elementos similares,

un ejemplo particular es la separación de aminoácidos.

 Cromatografía de capa fina

La cromatografía en capa fina (TLC) es un método de la cromatografía que es eficaz para separar

elementos orgánicos. Envuelve una fase estacionaria que radica en una capa muy delgada del

material absorbente, habitualmente es el óxido de aluminio, gel de sílice o la celulosa paralizada

sobre una lámina puntal inerte completamente plana. La fase líquida radica en obtener una

solución exacta para separar un solvente apropiado en atraída a través de una placa por acción

fina, logrando separar la solución experimental.

 Cromatografía líquida de alta resolución

La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) es un tipo de cromatografía en la columna

utilizada diariamente en bioquímica y química analítica. También es conocida a veces como

cromatografía líquida de alta presión y se usa para separar los elementos de una mezcla mediante
la utilización de una diversidad de interacciones químicas entre la sustancia que se está

analizando y la columna de cromatografía.

En este tipo el análisis se fuerza a través de la columna en su fase estacionaria habitualmente el

tubo está lleno de pequeñas partículas circulares con una cierta química en la superficie

bombeando un líquido a alta presión a través de la columna.

 Cromatografía de intercambio iónico

Diferente afinidad de los componentes de la muestra para el intercambio de iones. ¿Qué significa

intercambio de iones? La F.E. posee carga eléctrica y por ello interacciona con los componentes

de la muestra que tienen carga opuesta.

Intercambio aniónico: F.E. con carga positiva, une aniones, bien los del disolvente (F.M.) o

bien los de la muestra (de ahí la palabra intercambio).

Intercambio catiónico: F.E. con carga negativa, une cationes, bien los del disolvente (F.M.) o

bien los de la muestra.

 1Cromatografías de fase normal y de fase invertida

Fase normal: cuando la F.E. es más polar que la F.M.

Fase invertida: cuando es más polar la F.M.

1
Clasificacionde.Tipos De Cromatografía[en línea] 03, octubre,2013> https://www.clasificacionde.org/tipos-de-
cromatografia/
2 El valor Rf se define como el cociente entre las distancias recorridas por el compuesto

utilizado como soluto y la recorrida por el disolvente en el mismo tiempo. Los valores Rf para un

compuesto dado varían mucho, evidentemente, al cambiar el disolvente o el absorbente.

3 determino el Rf para cada pigmento

𝑅𝑓 = 𝑑𝑖𝑠𝑡 𝑠𝑡𝑜 (𝑝𝑖𝑔𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜) ÷ 𝑑𝑖𝑠𝑡 𝑠𝑡𝑒

 Espinaca:

Rf = 1.8cm / 06.9cm (cloroformo)

Rf = 0.2608

 Repollo morado

Rf = 6.0cm / 7.9cm (metanol)

Rf = 0.7594

4 los pigmentos que se pudieron separar en las espinaca fueron 2. El primero con un color verde

y el segundo con un color amarillo.

5 es un material que cambia el color de la luz que refleja o transmite como resultado de la

absorción selectiva de la luz según su longitud de onda (que es el parámetro determinante del

color).
BIBLIOGRAFIA.

https://www.clasificacionde.org/tipos-de-cromatografia/