Nordrhein-WestfaIische Akademie der Wissenschaften

Natur-, Ingenieur- und Wirtschaftswissenschaften Vortrage . N 411

lierausgegeben von der

Nordrhein-Westfalischen Akademie der Wissenschaften
BRIGITTE M. JOCKUSCH
Architekturelemente
tierischer Zellen

Westdeutscher Verlag
384. Sitzung am 3. Juni 1992 in DUsseldorf

Die Deutsche Bibliothek - ClP·Einheitsaufnahme

Jocku.ch, Brigitte M.:

Architekturelemente tieri",her Zellen I Brigitte M. Jocku.ch. - Opladen: Westdt.
VerI.,1995
(Vortrage / Nordrhein-Westfalische Akademie der Wissenschaften: Natur-,
In~nieur- und Wirtschaftswissenschafteo; N 411)
ISBN 978-3-663-01734-9 ISBN 978-3-663-01733-2 (eBook)
DOI 10.1007/978-3-663-01733-2
NE: Nordrhein-Westfalische Akademie der W~senschaften (DUsseldorf): Vor-
tdige / Natur-, Ingenieur- und Wirtschaftswisseos:hahen

Der Westdeutsche Verlag ist ein Unternehmen der Bertelsmann Fachinformation.

© 1995 by Westdeutscher Verlag GmbH Opladen

Herstellung: Westdeutscher Verlag

ISSN 0944-8799
ISBN 978-3-663-01734-9
 Inhalt

Brigitte M Jockusch, Braunschweig

Architekturelemente tierischer Zellen 7
Literatur ...................................................... 19

Diskussionsbeitrage
Professor Dr. rer. nat. Hermann Sahm; Professor Dr. rer. nat. Brigitte M
Jockusch; Professor Dr. phil. Friedrich Scholz; Professor Dr. phil. Lothar
Jaenicke; Professor Dr. med. Volker Herzog; Professor Dr. rer. nat. Ulrich
Thurm; Professor Dr. rer. nat. Dietrich Neumann; Professor Dr. rer. nat.
Klaus Heckmann; Professor Dr. rer. nat. Eckart Kneller.... ......... .. 20
 Die evolutionare Entwicklung von einzelligen Lebewesen zu vielzelligen Orga-
nismen ist gekennzeichnet durch eine starke Spezialisierung der beteiligten
Zellen. Obwohl beim Vielzeller aIle Zellen aus einer einzigen Zelle, der befruchte-
ten Eizelle, durch Teilungen hervorgehen, bilden die Tochterzellen haufig schon
sehr fruh in der Embryogenese andere Eigenschaften aus als die Mutterzellen. Das
genetische Material aller dieser Zellen ist identisch, aber eine zunachst durch ver-
schiedene mutterliche Faktoren, au6ere Einflusse und spater yom Embryo selbst
gesteuerte differenzielle Genexpression fuhrt zu ganz verschiedenartigen Zell-
typen. Diese Differenzierung betrifft dabei sowohl Bau wie Funktion der Zellen,
wobei sich die gleichartigen haufig zu Geweben organisieren. Am Ende der
tierischen oder pflanzlichen Embryogenese ist ein hochorganisiertes, komplexes
Lebewesen entstanden, dessen Zellen eine geregelte und genau programmierte
Arbeitsteilung durchfuhren.
Damit die Zellen im Hirn einer Katze andere Aufgaben ubernehmen konnen
als die der Leber, des Herzens oder der Haut, mussen sie nicht nur einen Satz hirn-
spezifischer Biomolekule im Zellplasma aufweisen, sie mussen auch von verschie-
dener Gestalt sein. Die Erforschung der funktionellen Morphologie und Differen-
zierung von Zellen hat sich in den letzten zwei Jahrzehnten zu einem faszinieren-
den Kapitel der Zellbiologie entwickelt. Zur Identifizierung der fur die zellulare
Architektur verantwortlichen Molekule war es zunachst wichtig, geeignete Zellen
zu finden und Zellkulturmethoden so zu verfeinern, da6 die zellspezifische struk-
turelle Organisation der Zellen auch in Kultur ausgepragt wird oder erhalten
bleibt. Diese Aufgabe war nicht trivial, da die Kulturbedingungen nur einen
unvollstandigen Ersatz fiir die Verhaltnisse im Organismus bieten. -So weisen viele
in Kultur genommene Zellen zum Teil innerhalb weniger Tage Dedifferenzie-
rungserscheinungen auf (z. B. Glattmuskelzellen), andere entwickeln sich gar
nicht erst bis zu der im Korper erreichten Organisationsstufe (z.B. Skelettmuskel-
zellen). Weitere Zelltypen, wie Blut- oder Nervenzellen, sind bereits beim neu-
geborenen Saugetier "enddifferenziert" - d. h. sie teilen sich nicht mehr. Kultu-
ren solcher Zellen haben damit nur eine begrenzte Lebensdauer.
Aus diesen Grunden gibt es bis heute in der Zellbiologie nur einige wenige
tierische und menschliche Objekte, an denen ZelImorphologie und "molekulare
8 Brigitte M. Jockusch

Anatomie" in Kultur erforscht werden. Dazu gehoren insbesondere Epithelzellen

der Augenlinse, der Haut, des Diinndarms und der Nierentubuli, Bindegewebs-
zellen der Haut, Herzmuskelzellen und Zellen, die die BlutgefaBe auskleiden
(Endothelzellen). Gewonnen werden diese Zellen meist von Labornagern, aus
Material der Humanchirurgie und Geburtshilfe sowie von angebriiteten Hiihner-
eiern. Insgesamt stellt somit die Zahl der verschiedenen Zelltypen, die fiir solche
Untersuchungen zur Verfiigung stehen, nur einen kleinen Ausschnitt aus der
Fiille der in der Natur entwickelten Zellformen dar.
Aus der Analyse solcher Zellkulturen und der Untersuchung von Zellen im
Gewebe haben wir nicht nur allgemeines Grundlagenwissen iiber die Gesetz-
maBigkeiten der Architektur von Zellen und Geweben, der Mechanik der Ver-
teilung von Erbmaterial wahrend der Zellvermehrung und die molekulare Basis
zellularer Beweglichkeit erhalten. Fehlerhafte zellulare Architekturelemente
konnten als U rsachen verschiedener angeborener Krankheiten des Menschen, wie
z. B. Muskeldystrophien, Myopathien, Karthagener's Syndrom und Epidermoly-
sis bullosa simplex identifiziert werden, und der Nachweis gewebs- und zell-
spezifischer Strukturelemente wird zur Diagnostik bei Tumorerkrankungen,
Herzinfarkten, Wundheilungsdefekten und verschiedener Fehlentwicklungen
beim U ngeborenen eingesetzt. Solche Beispiele zeigen, daB die Strukturanalyse
tierischer (und menschlicher) Zellen Grundlagenforschung von hoher biomedizi-
nischer Relevanz ist.
Molekulare Gr~ndlage der Architektur tierischer Zellen ist ein Satz fibrillarer
Strukturelemente im Zellplasma, der aus Proteinen besteht und von innen heraus
die auBere Form bestimmt, vergleichbar dem Stangengeriist eines Zeltes oder den
Metallstreben eines Schirms. Dieses Stiitzsystem wird Zell- oder Zytoskelett
genannt. Man unterscheidet drei solcher fibrillarer Systeme, die (bis auf wenige
Ausnahmen) in allen Zelltypen der hoher entwickelten Tiere und des Menschen
gemeinsam vorkommen: die Mikrofilamente, die Mikrotubuli und die Inter-
mediarfilamente. Zusammen bilden diese Elemente bis zu einem Drittel aller
Proteine in tierischen Zellen. Sie unterscheiden sich in den sie aufbauenden Pro-
teinen, ihrer raumlichen Organisation und ihrer Funktion.
Nach heutigen Modellvorstellungen ist das Intermediarfilamentsystem fiir
Stiitzfunktionen und den Zell:Zell-Zusammenhalt im Gewebe verantwortlich
und erfiillt damit den Anspruch an ein Zell-Skelett im engeren Sinne. Die beiden
anderen Systeme tun das offensichtlich nur teilweise: Das Mikrotubuli-System
ist vor allem fiir zellulare Transportvorgange zustandig, wobei die einzelnen
Elemente als Schienen benutzt werden, an denen Vesikel und Organelle iiber
eigene "Motorproteine" und unter Energieverbrauch transportiert werden. Die
Gleise, die Mikrotubuli, sind dynamische Elemente, die von der Zelle nach Bedarf
auf- und abgebaut werden konnen, wobei erstaunlich lange Strecken iiberwunden
 b
Abb. 1: Mikrofilamentbiindel als Architekturelemente in tierischen Zellen.
(a): Fluoreszenzmikroskopische Aufnahme einer Bindegewebszelle des Hiihnchens nach
Anfarbung mit einem fluoreszierenden Aktin-spezifischen Reagens (Rhodamin-Phalloidin).
Die Zelle ist in der Aufsicht zu sehen. Die im Foto weiB erscheinenden Balken entsprechen
parallel gepackten Mikrofilamenten, die aus Aktin und akzessorischen Proteinen bestehen. Sie
durchziehen das gesamte Zellplasma und spannen als "StreBfasern" die Zelle. Balken: 10/lm.
(b): Rotelzeichnung von Leonardo da Vinci (aus Mathe, 1980). In diesem Detail einer Zug-
maschine werden Seile durch einen Ochsen gespannt, auf einen Punkt gebiindelt und mit dem
Erdboden verbunden. Ganz analog dazu stellt man sich vor, daB die StreBfasern der Zelle in
(a) iiber ein komplexes Molekiilaggregat von Strukturproteinen gebiindelt und punktformig
mit der Zellmembran verkniipft werden.
Abb. 2: Entwieklung von Zell:Substrat-Kon-
takten bei einer Bindegewebszelle
des Hiihnchens. Diese Zellen wur-
den in Kulturmedium suspendiert
und 4 Stunden vor der Analyse in
eine Plastikschale ausgesat. Die
mit Nomarski-Interferenzoptik des
Lichtmikroskops erzielte Aufnahme
in (a) zeigt die Oberseite einer Zelle
wah rend der Besiedel ung des Scha-
lenbodens: Von einem dickeren
Zentrum aus, in dem sich der Zell-
kern befindet, breitet sich das Zell-
plasma als kreisrunder Schleier
gleichma6ig aus . Die waehsenden
Stre6fasern sind als diinne radiale
Speichen zu erkennen, die am Rand
punktformig an die Plasmamem-
bran herantreten (Beispiele dureh
schwarze Pfeilspitzen markiert). In
(b) ist die U nterseite derselben Zelle
im Reflexkontrast abgebildet. Die
Enden der Stre6fasern erscheinen als
schwarze punkt- oder kommafor-
mige Strukturen, da hier die Zell-
membran direkt auf dem Schalen-
boden aufliegt und das Licht total
reflektiert wird. In (e) ist die Vertei-
lung des Proteins Vinculin durch
Markierung mit einem fluorochro-
mierten Antikorper gegen Vinculin
im Fluoreszenzmikroskop sichtbar.
Vinculin ist im dickeren Zentrum
der Zelle konzentriert, au6erdem
aber bereits in den in (b) erkenn-
baren, noeh jungen "Zellfii6chen"
angereichert (wei6e Pfeilspitzen).
 Architekturelemente tierischer Zellen 11

Abb. 3: Zell:Substrat-Kontakte bei einer stationaren, fest verankerten Bindegewebszelle. Diese Zelle
gibt die Situation in einer Kultur 28 Stun den nach Aussaen auf Plastikschalen wieder. Die mit
der Nomarski-Interferenzoptik erzielte Aufnahme in (a) zeigt die flach ausgespannte Zelle mit
dem ovalen Zellkern in Aufsicht, die reliefartigen Endregionen der Stre6fasern sind deutlich
erkennbar (schwarze Pfeilspitze). Im Reflexkontrast (b) erscheinen nun die voll ausgebildeten
Zell:Substrat-Kontakte als prominente "ZellfiiBe" mit mehreren kommaartigen Substruk-
turen. Dekoration mit fluorochromiertem Anti-Vinculin und Fluoreszenzmikroskopie (c)
zeigt, daB aile diese Strukturen Vinculin in hoher Konzentration enthalten (weiBe Pfeilspitze).
Vinculin ist damit als eine Komponente der Zellkontakte und bildlicher Bestandteil des
Ochsen der Zeichnung in (1 b) identifiziert.
 Architekturelemente tierischer Zellen 13

werden. So mtissen z. B. in den Motoneuronen eines Elefanten oder einer Giraffe

viele in Vesikel verpackte Substanzen, ausgehend yom Zellkorper im Rticken-
mark, an dem axonalen Mikrotubulisystem entlang bis in die FuGsohle trans-
portiert werden. Dabei bilden sich tiberlappende Mikrotubuli-Gleisbahnen, die
mehrere Meter lang sind.
Das nach Zahl der daran beteiligten Proteinkomponenten, Organisations-
muster und Funktionen wohl komplexeste der drei Systeme ist das Mikrofila-
mentsystem. Seine Entdeckung als ubiquitares Bau- und Strukturelement begann
in den fiinfziger und sechziger Jahren mit der Isolierung seiner Hauptproteine aus
Schleimpilzen und BlutpHittchen (Loewy, 1952; Bettex-Galland & Luescher, 1959;
Hatano & Oosawa, 1966). Es stellte sich heraus, daG man es hier mit alten Bekann-
ten zu tun hatte: den Proteinen Aktin und Myosin, die bereits zehn bis fiinfzehn
Jahre frtiher aus Skelettmuskel isoliert worden. waren und die im Reagenzglas
"ktinstliche Fibrillen" bilden und einen Komplex formen konnten, der ATP-
abhangig kontrahierte (Szent-Gyorgyi, 1942). In den nachsten Jahrzehnten lern-
ten wir, daB die Expression von Aktin und Myosin und ihre Anordnung in Fila-
menten in der Skelett- und Herzmuskulatur nicht, wie vorher angenommen,
muskelspezifisch sind: 1m Muskel werden diese Proteine nur in groGerer Menge
synthetisiert als in anderen Zellen und lagern sich zu den sehr hochgeordneten,
stabilen Myofibrillen zusammen. Diese Anordnung der Komponenten ermog-
licht (unter Energie-Verbrauch) Kontraktionen oder die Entwicklung von Span-
nung in der Ebene dieser Myofibrillenpakete tiber erhebliche Strecken.
AuGer Aktin und Myosin enthalt der Skelettmuskel noch andere mit diesen
Komponenten assoziierte Proteine, die zur Mechanik der Kraftentwicklung und
zu ihrer Regulation beitragen - und solche Polypeptide sind ebenfalls in "Nicht-
muskelzellen" gefunden worden. FUr unsere heutige Vorstellung der Organisa-
tion und Funktion des Mikrofilamentsystems waren dabei zwei methodische Ent-
wicklungen von groGer Bedeutung: zum einen die biochemischen Praparations-
verfahren, fUr die man glticklicherweise auf die fUr Muskelproteine entwickelten
Rezepte zuruckgreifen konnte. Es stellte sich heraus, daG die Mikrofilament-
komponenten mit den entsprechenden Muskelproteinen sehr nahe verwandt,
aber nicht vollig identisch sind - die am Muskel ausgearbeiteten Fraktionierungs-
und Reinigungsmethoden fiihrten mit einigen Abwandlungen auch bei den
Nichtmuskelzellen und -geweben zum Erfolg, wobei die wesentlich geringere
Konzentration und Sequenz-bedingte Ladungsunterschiede den Hauptgrund ftir
Rezeptmodifikationen darstellten. AuGerdem fand man haufig in den Nicht-
muskelzellen mehrere Isoformen gleichzeitig vor, wahrend der Muskel in der
Regel ein bescheideneres Spektrum solcher Varianten synthetisiert. Bei der Reini-
gung und Charakterisierung dieser Proteine trat nattirlich ein fiir alle Struktur-
proteine evidentes Problem auf: Welches Testverfahren kann als Kriterium zur
14 Brigitte M. Jockusch

Identifikation eines "Mikrofilamentproteins" angewendet werden? Auch hier

half die Erfahrung aus der Muskelforschung: Die direkte Bindung vieler Kompo-
nenten an Aktinfilamente konnte z. B. durch Viskositatsmessungen oder in
elektronenmikroskopischen Bildern an negativ-gefarbten oder metallbedampften
Praparaten nachgewiesen werden.
Zum anderen erweiterten spezifische polyklonale und monoklonale Anti-
korper unsere Kenntnis iiber Verbreitung und Lokalisation der verschie.denen
Mikrofilament-Bestandteile. Antikorper, die gegen die aus Muskelgewebe ge-
reinigten Strukturproteine hergestellt wurden, reagieren in vielen Fallen auch mit
den entsprechenden Isoformen in Nichtmuskelzellen, und so zeigten die Anti-
korper als spezifische Markierungshilfen die weite Verbreitung der Mikrofila-
mentproteine auf. Man schatzt heute, daB viele tierische Zellen etwa zwanzig bis
dreiBig Mikrofilamentproteine gleichzeitig synthetisieren, die zur Supraorganisa-
tion dieses Zytoskelettsystems beitragen (Craig & Pollard; 1982; Weeds, 1982;
Jockusch, 1983).
In Verbindung mit geeigneten Fluorochromen (hauptsachlich Fluoreszein- und
Rhodamin-Derivaten) und der Auflicht-Fluoreszenzmikroskopie eroffneten die
Antikorper als spezifische Sonden neue Einblicke in die strukturelle Organisation
von Zellkulturzellen. U m Aussagen iiber die Relevanz dieser Organisation fiir die
Zellen im Organismus zu gewinnen, miissen natiirlich die in Kultur untersuchten
Zellen sorgfaltig auf ihren Differenzierungszustand untersucht und mit entspre-
chenden Zellen, die direkt aus Gewebe isoliert werden, verglichen werden. Man
hat z. B. aus den hochspezialisierten Epithelzellen, die den Diinndarm und die
Nierentubuli auskleiden, eine Reihe von Zell-Linien etabliert, an denen man die
Aufnahme von Nahrstoffen und den Transport von Molekiilen durch diese Zellen
hindurch in Kultur verfolgen mochte - Vorgange, die fiir die Funktion dieser
Organe sehr wichtig sind. 1m Gewebeverband zeigen diese Zellen einen polaren
Aufbau: Auf der Oberflache eines schlanken, annahernd zylindrischen Zell-
korpers sind hunderte von Zellfortsatzen, die Mikrovilli, zu einem sogenannten
Biirstensaum angeordnet, der dem Lumen des Diinndarms oder Nierentubulus
zugekehrt ist. Dadurch wird eine beachtliche OberflachenvergroBerung erreicht,
die der effektiven Resorption verschiedener Molekiile dient. Die Mikrovilli sind
durch eng gepackte Filamente ausgesteift, die im oberen Abschnitt des Zell-
korpers durch ein ringformiges Filamentbiindel verankert sind. Diese zellularen
"Ringmuskeln" liegen bei benachbarten Epithelzellen stets auf der gleichen Hohe
und tragen auch zur festen Verankerung der Zellen untereinander bei, so daB eine
geschlossene Lage gebildet wird. Mit Antikorpern wurde gezeigt, daB die
Filamente der Mikrovilli wie die der Ringmuskeln Aktin enthalten. Untersuchun-
gen haben ergeben, daB bei einigen der aus solchen Zellen gewonnenen Zell-
Linien die charakteristischen Mikrovilli und die ringformigen Mikrofilament-
 Architekturelemente tierischer Zellen 15

bundel auch in Kultur erhalten bleiben, obwohl die Zellen in der Schale stark
abgeflacht sind. Die Ausbildung solcher typischen Strukturen berechtigt dazu,
diese Zellen auch in Kultur als "polarisierte Burstensaumepithelien" zu bezeich-
nen und sie fur physiologische Analysen einzusetzen.
Es stellte sich hera us, da6 adharente, einschichtige Gewebe-bildende Zellen wie
Fibroblasten, Epithel- und Endothelzellen generell in Kultur Bundel parallel an-
geordneter Filamente ausbilden konnen, die im Gegensatz zu den oben fur polari-
sierte Epithelzellen beschriebenen Filamenten in der dem Schalenboden nahen
Zellregion lokalisiert sind. Sie enthalten au6er Aktin (Lazarides & Weber, 1974)
noch Myosin (Weber & Groeschel-Stewart, 1974) und viele ebenfalls aus dem
Skelettmuskel bekannte akzessorische Proteine (Groeschel-Stewart, 1980; Craig &
Pollard, 1982; Weeds, 1982). Ganz analog zur Muskelfibrille sind in diesen Bun-
deln die einzelnen Komponenten in "Sarkomer-Einheiten" organisiert (Sanger &
Sanger, 1980; Sanger et al., 1983). Diese Strukturen stehen unter Spannung wie
eine gedehnte Muskelfibrille (Kreis & Birchmeier, 1980). Die Bezeichnung "Stre6-
fasern" fur diese Elemente impliziert, da6 ihre Bildung an bestimmte physio-
logische Zustande der Zellen gebunden ist, und tatsachlich werden sie in situ in
Zellen beobachtet, die an Entzundungsprozessen oder bei der Wundheilung betei-
ligt sind. In den oben erwahnten Zellkulturzellen bilden sie prominente Struk-
turen aus, die an der Innenflache der ventralen Plasmamembran konvergieren
(Abbildung 1a). Diese Verankerungsstellen der Stre6fasern entsprechen den Stel-
len, an denen au6en die Plasmamembran einer adharenten Zelle mit dem Sub-
strat fest verhaftet ist. Solche Zellen liegen also nicht platt auf dem Untergrund,
sondern ruhen auf gut definierten, diskreten Haftpunkten wie eine auf Schwibb-
bogen konstruierte Brucke. Die an diesen "fokalen Adhasionspunkten" funktio-
nell beteiligten Molekulketten sind in den letzten Jahren Gegenstand zahlrei-
cher Untersuchungen gewesen. Welche Molekule sind direkt daran beteiligt und
vermitteln vom Aktinfilament innen uber integrale Membranproteine mit der
Au6enseite? Welche Proteine sind als strukturelle Organisatoren notwendig zur
Bundelung der terminalen Aktinfilamente an diesen Stellen? Wie werden die
Ausbildung und Dynamik der fokalen Adhasionspunkte und der Stre6fasern zeit-
lich und raumlich reguliert? Diese Architekturelemente der Zellen sind namlich
keine statischen, sondern dynamische Strukturen: Sie werden jedesmal aufgelost,
wenn sich die Zellen auf eine Teilung vorbereiten. Wie beim Abbau eines Zeltes
werden dabei die Kontakte zwischen Stutzelementen und der "Haut" (Zeltplane
oder Zellmembran) gelost und die Stutzen in klein ere Bestandteile zerlegt. Von
den Tochterzellen werden diese Elemente neu zusammengesetzt. In der Kultur-
schale hangt die Ausbildung von Stre6fasern und fokalen Kontakten au6erdem
von den physiologischen Bedingungen ab: Platzmangel in dicht besetzten Schalen
sowie limitierte Ernahrung begiinstigen zellulare Se6haftigkeit und damit Ausbil-
16 Brigitte M. Jockusch

dung von Stre6fasern und den als Zellfti6chen dienenden Adhasionspunkten,

wahrend in dtinn besiedelten Schalen die Zellen lokomotorisch aktiv sind und
dann keine dieser beiden Strukturen ausbilden. Ein kompletter Katalog der betei-
ligten Proteine, ihre Interaktionen, die Dynamik und Regulation des Auf- und
Abbaus der StreBfaser-Transmembran-Komplexe, die an der Verankerung der
Zellen am Untergrund beteiligt sind, kannten unser Verstandnis von Zellhaftung
und Gewebebildung einerseits und von zellularer Beweglichkeit andererseits
grundlegend erweitern. Mit anderen Worten: Was steckt auf molekularer Ebene
in dem Ochsen, mit dem Leonardo da Vinci uns eine so passende Illustration
dieser Strukturen geliefert hat (Abbildung 1b)?
Dartiber hinaus ist die Lasung dieses Fragenkomplexes auch von biomedizini-
scher Relevanz: Viele Tumorzellen, insbesondere solche mit einer hohen Kapazi-
tat zur Metastasierung, haben offen bar die Fahigkeit zur Ausbildung von Stre6-
fasern und festen Adhasionspunkten verloren. Diese verminderte Haftung geht
mit einer drastischen Erhahung der lokomotorischen Beweglichkeit einher - ein
Faktor, der vermutlich bei der Metastasierung im Organismus eine wesentliche
(wenn auch sicherlich nicht die einzige) Rolle spielt. Die drastische Umorganisa-
tion des Zytoskeletts bei Transformation von normalen Zellen zu Tumorzellen
mit stark erhahter Membrandynamik und lokomotorischer Aktivitat ist an vielen
Systemen untersucht und beschrieben worden, auch von unserer Arbeitsgruppe
(s. z. B. Boschek et aI., 1981; Haemmerli et aI., 1982), aber es fehlt bis heute die
genaue Kenntnis der molekularen Grundlagen, die zu diesen Phanomenen ftihren,
und ebensowenig haben wir die Prozesse verstanden, die zur Ausbildung der
Mikrofilamentstreben in den Stre6fasern und der mit ihren Enden verbundenen
"Zellfti6chen" in normalen Zellen ftihren (Abbildungen 2 und 3).
Biochemische und immunchemische Methoden zeigen, da6 ein verbltiffend
gro6er, vermutlich noch nicht vollstmdiger Katalog von Proteinen daran beteiligt
ist, die mangels besserer Alternativen mit Fantasienamen belegt werden. Hierzu
geharen a-Aktinin, Vinculin, Paxillin, Talin, Zyxin und Tensin - alles Proteine,
die mit Hilfe spezifischer Antikarper in den Kontaktstellen der Stre6fasern mit
Plasmamembran adharenter Zellen lokalisiert worden sind (Obersicht bei Gei-
ger & Ginsberg, 1991). In welcher Weise sie zum Aufbau dieser Strukturen bei-
tragen, wie sie dort angeordnet sind und welche Modifikationen ihre Dynamik
regulieren, ist weitgehend unbekannt. Ein Modell postuliert eine Interaktions-
kette, die von den Enden der Aktinfilamente tiber a-Aktinin, Vinculin und Talin
zu den Transmembranproteinen der Integrin-Familie reicht, die wiederum mit
den extrazellularen Matrix-Proteinen verbunden sind. Die erst vor kurzem iden-
tifizierten Proteine Tensin und Zyxin sind hierbei aber noch nicht berticksich-
tigt. Wir kennen also vorlaufig weder aIle Komponenten dieser zellularen Archi-
tekturelemente noch die genaue geometrische Anordnung und die Funktion der
 Architekturelemente tierischer Zellen 17

bisher beschriebenen Bausteine. Von besonderem Interesse ist in diesem Zusam-

menhang die Entdeckung, daB ein an der Regulation der Blutplattchenaktivie-
rung beteiligtes Protein auch mit den Mikrofilamentbtindeln in Zellkulturzellen
assoziiert ist (Reinhard et al., 1992). Solche Befunde lassen vermuten, daB Orga-
nisation und Membrananheftung der Mikrofilamente nicht nur in Thrombocy-
ten, sondern auch in gewebebildenden Zellen durch Signalmolektile von auBen
steuerbar und regulierbar sind.
Einen methodischen Ansatz zum Verstandnis der Funktion einzelner Proteine
in Zellen und Geweben bieten die sogenannten "Knock-out"-Experimente. Sie
beruhen auf der Dberlegung, daB man bei der gezielten Ausschaltung eines Fak-
tors in einem Multikomponentensystem einen definierten Ausfall oder eine Fehl-
funktion in den betroffenen Zellen beobachten kann, der nun wieder Rtick-
schltisse auf die Funktion der ausgeschalteten Komponente zulaBt. Aus der Welt
der makroskopischen Architektur kann das an einem Beispiel verdeutlicht wer-
den: Die Entfernung des SchluBsteins an einem tragenden Gew6lbebogen ftihrt
zum Einsturz des Gew6lbes - daraus kann man die Funktion des SchluBsteins als
essentielle Komponente des gemauerten Bogens ableiten. In Zellen kann man nun
die "Wegnahme" eines Proteinbausteins durch mehrere Strategien erreichen. Die
Molekularbiologie bietet hierzu im wesentlichen zwei Maglichkeiten, die eine
permanente Ausschaltung nur eines Proteins in einer manipulierbaren Zellkultur-
zelle und aller ihrer Nachkommen erlauben: Einmal k6nnen durch Einschleusen
spezifischer DNA-Sequenzen, die fur ein verandertes (z. B. verktirztes) Molektil
der gleichen Proteinsorte kodieren, die normalen, zellinternen Molektile ver-
drangt werden (urn im Bild zu bleiben: durch einen nicht passenden Gew6lbe-
schluBstein), und man bekommt eine dominante Fehlfunktion; zum anderen
kann man tiber homologe Rekombination Gene so verandem, daB in der Zelle
kein oder kein funktionsfahiges Protein mehr abgelesen werden kann ("Gene-
Disruption"-Technik). Ein Effekt wird mit dieser Technik erst zu erwarten sein,
nachdem die Menge an intakten Proteinmolekiilen, die vor der Manipulation
synthetisiert waren, durch den nattirlichen Abbau unter eine kritische Konzentra-
tion gesunken ist. Beide Methoden ftihren nicht tiberall zum Erfolg - wenn die
Zelle selbst noch gentigend normale Proteinmolektile synthetisieren kann (z. B.
weil die eingeschleusten DNA-Sequenzen nicht ausreichende Mengen an mutier-
tern Protein entstehen lassen, oder weil diese Molektile instabil sind, oder weil die
"Gene-Disruption" nur ein Gen in Zellen trifft, die zwei identische Gene tragen),
so wird ein Effekt ausbleiben. Andererseits kann das Ausschalten eines Proteins
tiber die Genmanipulation auch so drastische Konsequenzen haben, daB die mani-
pulierten Zellen gar nicht mehr lebensfahig sind - auch dann k6nnen wir aus
diesen Experimenten wenig in bezug auf die Funktion einzelner Komponenten in
einem komplexen System lemen.
18 Brigitte M. Jockusch

Weniger drastische Konsequenzen haben Methoden, mit denen vorhandene

zellulare Bausteine inaktiviert werden, ihre Neusynthese aber nicht beeinfluBt
wird - hier sollten die Effekte der Manipulation zwar ebenso spezifisch, aber nur
transient sein. Zu den Techniken, die dies ermoglichen, gehort die Applikation
von Oligonukleotiden in "Antisense"-Orientierung, mit der die Translation von
mRNA-Molekiilen blockiert wird, sowie die Mikroinjektion hochaffiner Anti-
korper. Da Antikorpermolekiile nur jeweils sieben Aminosauren umfassende
Epitope auf einem Proteinbaustein erkennen, kann man durch Injektion ver-
schiedener homogener (monoklonaler) Antikorper auch untersuchen, welche
Domanen innerhalb eines Proteins fUr die Interaktion mit anderen zellularen
Elementen verantwortlich sind Qockusch & Fiichtbauer, 1985; Jockusch et aI.,
1991).
Durch Injektion verschiedener monoklonaler Antikorper, deren Bindungs-
stellen auf dem Mikrofilament-Protein Vinculin bestimmt worden waren,
konnten wir zeigen, daB eine N-terminale Domane in diesem Protein fUr die Ver-
ankerung von Aktinfilamenten an der Plasmamembran von Bindegewebszellen
essentiell wichtig ist. Antikorper gegen diesen Bereich, die in solche Zellen mit
Glasnadeln mikroinjiziert werden, losen diese Verkniipfung auf - ein Zusammen-
bruch der hochgeordneten StreBfasern sowie der ZellfiiBchen in Form fokaler
Kontakte und eine verringerte Zellhaftung sind die Folge. Die Zellen runden sich
ab und losen sich yom Untergrund. Wie erwartet, sind alle diese Reaktionen tran-
sient - nach wenigen Stunden kehren die Zellen zu ihrer normalen Architektur
zuriick, da sie neues Vinculin synthetisieren konnen. Die zu dieser Reversion
benotigte Zeitspanne ist der Anzahl injizierter Antikorpermolekiile proportional
(Westmeyer et aI., 1991).
Die Identifizierung des Vinculins als essentielle Komponente der StreBfaser-
abhangigen Zellverankerung ist natiirlich nur ein kleiner Schritt zum Verstandnis
des Gesamtproblems. Es werden viele solche Funktionsanalysen notig sein, bis
wir alle Bausteine der Architekturelemente tierischer Zellen identifiziert und ihre
Funktionen bei der Zellverankerung und der Zell-Zell-Kontaktbildung im
tierischen Gewebe verstanden haben.
 Literatur

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domains in vinculin. The EMBO J. 9, 2071-2078.
 Diskussion

Herr Sahm: Frau Jockusch, Sie haben uns sehr deutlich gezeigt, wie komplex
die Strukturen dieser verschiedenen Proteine sind und welcher beachtlichen
Dynamik sie unterliegen. Konnen Sie uns vielleicht noch etwas mehr iiber die
dabei beteiligten Regulationsmechanismen sagen?

Frau Jockusch: Das dad ich vielleicht an dem letzten Beispiel erlautern. Das
Protein Vinculin, das ich Ihnen als ein Protein vorgestellt habe, das wirklich
in diesem Schema zwischen Plasmamembran und dem Aktinsystem vermittelt,
kann modifiziert, z. B. phosphoryliert werden. Auch die anderen Komponen-
ten in diesem Schema werden vermutlich von der Zelle an einzelnen Aminosau-
ren phosphoryliert. Die Einfiihrung jeder einzelnen Phosphatgruppe bewirkt
eine negative Ladung, und dadurch werden natiirlich Wechselwirkungen beein-
fluBt.

Herr Sahm: Was sich daran anschlieBt ist die Frage nach den Signalketten. Wenn
sich die Zelle an eine Oberflache anheftet, dann muB die Zelle die Oberflache
erkennen. Konnen Sie uns vielleicht noch etwas zu der Signalkette bei der An-
heftung sagen?

Frau Jockusch: Bei der Anheftung produzieren gewebebildende Zellen, wie z. B.

Bindegewebszellen der Haut, ihren eigenen Leim, also extrazellulare Proteine
(z. B. Fibronektin). Diese Proteine enthalten Motive, die von Membranproteinen
(Rezeptoren) erkannt werden. Man vermutet, daB eine Zelle, die sich absiedelt,
z. B. in einer Kulturschale, erst solche Sekretproteine macht, die au&n in Form
von Fibrillen abgelagert werden und iiber die Erkennungssequenzen Rezeptor-
Membranproteine in ein Aggregat zusammenziehen. Die Membranproteine
schwimmen ja nach dem Singer-Nicholson-Modell in der Phospholipidmembran,
werden dann aber durch diesen Vorgang lokal in einem Aggregat gesammelt.
Wenn auf der zytoplasmatischen Seite die Rezeptorproteine nun an Aktinfila-
mente binden, ist ein FiiBchen ausgebildet, wobei diese Kette von Proteinverbin-
dungen von auBen nach innen wachst.
 Diskussion 21

Herr Scholz: Frau Jockusch, Sie haben Uber das Phanomen der Dedifferenzie-
rung von Zellarchitekturen gesprochen, die dann zu beobachten ist, wenn Zellen
aus dem lebenden Organismus auf Kultur gesetzt werden. Diese Dediffenzierung
tritt aber offensichtlich nicht immer ein, wenn ich es recht verstanden habe. WeiB
man etwas Uber die spezifischen Bedingungen, unter denen eine solche Dediffe-
renzierung eintritt oder nicht eintritt? Oder hangt eine solche Dedifferenzierung
von bestimmten Eigenschaften der Zelle oder von bestimmten Strukturen von
Zellen ab?

Frau Jockusch: Das ist ein Problem, das wir bisher sehr wenig verstehen. Es gibt
tatsachlich Zellen, die fUr solche Dedifferenzierungserscheinungen anfalliger sind,
und andere sind es weniger. Wir arbeiten deshalb natUrlich immer mit denen, die
noch moglichst hoch differenziert sind, dUrfen uns aber nicht darliber hinweg-
tauschen, daB es eigentlich nur wenige Zelltypen sind, mit denen wir dann Uber-
haupt in Kultur arbeiten konnen. - Ein Beispiel fUr eine Zelle, die sehr schnell
dedifferenziert, ist die Glattmuskelzelle. Glattmuskelzellen sind pharmakologisch
sehr interessante Objekte. Eine ganze Reihe von Pharmaka wirken auf glatten
Muskel, und man wlirde sehr gern eine Zellkultur ausdifferenzierter Glattmuskel-
zellen zur VerfUgung haben, um so etwas zu testen. Glattmuskelzellen konnen
innerhalb von Stunden in der Zellkultur die zelltypischen Protein muster ver-
lieren und sind dann fUr diesen Zweck wertlos. - Wir vermuten, daB das Medium,
das wir den Zellen geben, eben nicht komplett ist. Es fehlen Dinge, die im norma-
len Organismus vorhanden sind, z. B. Wachstumsfaktoren, die vermutlich von
anderen Zelltypen im Organismus geliefert werden. - Ein wei teres Beispiel
betrifft die Kultivierung von Hautzellen. Das versucht man in groBem MaBstab,
um bei Verbrennungen genUgend Hautmaterial fUr Transplantationen zu be-
kommen. Man hat herausgefunden, daB sich kultivierte Hautzellen wesentlich
besser differenzieren und vermehren, wenn man andere Zellen mitkultiviert. Man
bemUht sich nun, Bindegewebe von Verstorbenen in solche Kulturen zu geben,
dam it diese Deckzellen der Haut besser wachsen konnen. Das scheint zu funk-
tionieren.

Herr Jaenicke: Die Konstruktion des Vinculins und des daranhangenden Aktins
ist ja ungeheuer interessant. Jeder Brlickenbauer wird begeistert sein, wenn er das
Schema sieht. Wie ist das eigentlich in der Wirklichkeit?

Frau Jockusch: Genau so, Herr Jaenicke, nur sind die MolekUle nicht so eckig,
wie ich sie gezeichnet habe.

Herr Jaenicke: Wie macht die Natur den Winkel?

22 Diskussion

Frau Jockusch: Wir konnen zeigen, daB das Vinculinmolekiil auch in Losung
einen dicken "Kopf" und einen flexiblen "Schwanzteil" hat. Durch Wechselwir-
kung dieses Schwanzstiickes mit anderen Proteinen oder z. B. der Zellmembran
kann ein bestimmter Winkel in dem Molekiil eingestellt werden.

Herr Jaenicke: Sie haben monoklonale Antikorper gegen fur Heptapeptid oder
was es immer war, gemacht. Geschah das in situ oder mit einem synthetischen
Heptapeptid?

Frau Jockusch: Wir haben eine ganze Reihe monoklonaler Antikorper gegen das
komplette Vinculinmolekiil gemacht und dann die Epitope iiber proteolytische
Fragmente kartiert. Dabei fanden wir eines, das nur aus sieben Aminosauren
besteht. Das war Gliick, und das moB man auch einmal haben.

Herr Herzog: Ich mochte etwas zur Beziehung zwischen Differenzierung und
Wachstum kommentieren. 1st es nicht so, daB wir in der Zellkultur etwas Unmog-
liches von der Natur erwarten? Urn das Problem vereinfacht auszudriicken: Hoch
differenzierte Zellen wachsen nicht oder nur sehr schlecht, schwach differenzierte
Zellen wachsen sehr viel besser. Wenn wir eine hoch differenzierte Zelle in der
Zellkultur halten, dann impliziert das doch, daB wir sie wachsen lassen wollen.
Wir fordern damit eigentlich etwas von der Natur her Unmogliches. Eigentlich
ist es immer der KompromiB zwischen Wachstum und Differenzierung, dem wir
uns fiigen miissen. Oder wie wiirden Sie das sehen?

Frau Jockusch: Das ist richtig. Wir hatten natiirlich gern etwas Steuerbares. Wir
hatten gern etwas, was wir zunachst gut wachsen lassen konnen und dann durch
Zugabe von irgend etwas zur Differenzierung anregen konnen.

Herr Herzog: Meine eigentliche Frage war: Sie haben zu Beginn 1hres Vortra-
ges den Ausdruck Stiitzpfeileraktin bei Mikrovilli verwendet. Wollen Sie damit
sagen, daB dieses Aktin von dem iiblichen Turnover des Aktinskeletts ausge-
schlossen ist? Der Ausdruck sollte doch wahrscheinlich nicht nur die bildhafte
Vorstellung von Stiitzpfeilern vermitteln, die das Gebaude der Mikrovilli auf-
rechterhalten. Wollten Sie damit auch zum Ausdruck bringen, daB sich dieses
Aktin vom iiblichen Turnover des restlichen Aktins unterscheidet?

Frau Jockusch: Genau das ist unsere Vorstellung. Ob dieses Mikrovillus-Aktin

einen anderen Turnover hat, wissen wir noch nicht.
 Diskussion 23

Herr Thurm: 1st in der komplexen Einheit, die Sie zuletzt im Zusammenhang
mit dem Vinculin dargestellt haben, auch eine mechanische Spannungsproduk-
cion vorhanden? Oder ist die Struktur relativ starr?

Frau Jockusch: Diese Aktinfilamentbiindel stehen unter Spannung. SeBhafte

Bindegewebszellen sitzen tatsachlich wie iiber Schirmstreben, und die Enden der
Streben sind die "ZellfiiBchen". Man kann diese Spannung nachweisen, wenn
man mit einem feinen Laserstrahl die Streben durchschneidet. Dann kontrahieren
diese Aktinfilamentbiindel.

Herr Thurm: Welche Anteile sind es, die die Spannung oder die mogliche Be-
wegung erzeugen?

Frau Jockusch: In diesen Biindeln ist auch das Motorprotein Myosin lokalisiert,
und man stellt sich vor, daB das genauso funktioniert wie bei den parallelen Aktin-
filamenten im Muskel.

Herr Jaenicke: Ich habe noch eine kurze Frage zu dem, was Herr Herzog wegen
der Mikrovilli fragte. Die Stiitzpfeiler ziehen sich zusammen, kontrahieren sich
und konnen sich wieder ausdehnen. 1st da doch ein Ringmuskel urn die Mikro-
villi, eine Ringkonstruktion, die das bewirkt?

Frau Jockusch: Die Mikrovilli selbst ziehen sich nicht zusammen. Das hat lange
in der Literatur herumgegeistert, aber das scheint nicht der Fall zu sein. Nur das
ringformige Mikrofilamentbiindel darunter kontrahiert, so daB die Mikrovillus-
tragende Oberflache dieser Zellen verkleinert wird und diese Zellen konisch wer-
den. 1m Zellverband entstehen dadurch Kriimmungen, die bei der Organbildung
wahrend der Embryogenese wichtig sind.

Herr Neumann: Ich habe eine entwicklungsbiologische Frage zu einem Form-

bildungsproblem. Sie wiesen eingangs auf die spezifische Form der verschiedenen
Zellen hin und zeigten die Biirstensaumzellen mit ihren im Verband stehenden
Mikrovilli und dann die Zellkulturzelle mit den diffuser und kleiner stehenden
Mikrovilli. Haben Sie einen Ansatzpunkt, was die Lange und die Dichte der
Mikrovilli steuert?

Frau Jockusch: Das wiirden wir gem wissen. Das Problem ist ganz augenfallig
z. B. bei den Stereozilien der Gehorgangszellen, wo man auf den Oberflachen der
einzelnen Zellen ganze Orgelpfeifen von Mikrovilli mit verschiedener Lange
24 Diskussion

stehen hat. Da weiB niemand, wie das zustande kommt. Das kann ich also nicht
beantworten.

Herr Neumann: Konnen Sie etwas iiber die Menge an Mikrofilamenten aus-
sagen, die in der Zelle synthesiert wird? Gibt es moglicherweise eine einfache
Korrelation zur Form der Zelle?

Frau Jockusch: Soweit wir das sagen konnen, andert sich die Synthese des
Proteins nicht mit der Morphologie der Zelle.

Herr Heckmann: Frau Jockusch, Sie erwahnten, daB man iiber dreiBig unter-
schiedliche Komponenten kennt, die mit den Aktinfilamenten wechselwirken,
und Sie sagten auch, daB man einzelne Komponenten zum Beispiel durch Muta-
tion ausschalten kann. Wieviel von diesen dreiBig Komponenten hat man schon
wegmutieren konnen? Sind aIle notwendig oder konnen sich auch einzelne
wechselseitig ersetzen?

Frau Jockusch: Dazu sind sehr elegante Versuche mit Amoben des Schleimpilzes
Dictyostelium gemacht worden. Man hat bei diesen Amoben einzelne dieser
aktinbindenden Proteine durch Mutagenese ausschalten konnen, so daB man
Mutanten erhielt, denen drei Proteine mit ahnlicher Funktion fehlten. Erstaun-
licherweise konnen diese Amoben wunderbar wachsen und kriechen, und man
merkt eigentlich keinen Unterschied. - Das sagt vielleicht, daB dieses System hoch
redundant ist, so daB mehrere Proteine in dieser Zelle fiir eine bestimmte Funk-
tion vorhanden sind. Es konnte aber auch darauf hinweisen, daB diese speziellen
Schleimpilze, die schon sehr lange im Labor gehalten werden, einige Eigenschaf-
ten verloren haben, die sie fiir das Leben in der freien Natur benotigen wiirden.
Man kann im Moment zwischen diesen beiden Moglichkeiten nicht unter-
scheiden.

Herr Tbumz: Es gibt ja noch das kleine Myosin, das keine Filamente bildet und
von dem vermutet wird, daB es eventuell an der Membran binden und diese auch
bewegen konnte. Gibt es schon Hinweise, ob es direkt mit Membranmolekiilen
Kontakt aufnimmt? Oder gibt es Zwischenglieder, die eventuell ahnlich denen
sind, die Sie fur das Aktin beschrieben haben?

Frau Jockusch: Die Myosine sind Angehorige einer Superfamilie, und man kann
darunter eine ganze Reihe von Proteinen fassen, die eigentlich nur noch zwei
Eigenschaften gemeinsam haben: Sie wechselwirken mit Aktinfilamenten, und sie
 Diskussion 25

haben eine ATPase-Aktivitat, die durch das Aktin aktivierbar ist. Diese Eigen-
schaft ist in einer bestimmten Kopfregion des Molekiils lokalisierbar. Aber ab-
gesehen von dieser Kopfdomane kann der Rest des Molekiils stark variieren. - Wir
kennen Minimyosine, denen die Schwanzregionen der klassischen Myosine
fehlen und die statt dessen Dommen besitzen, die direkt mit Phospholipid-
membranen wechselwirken. Da haben Sie dann tatsachlich ein Molekiil, das ent-
weder an Organellenmembranen oder innen an der Plasmamembran sitzen und
mit Aktinfilamenten wechselwirken kann und damit fUr zellul1iren Transport von
Organellen oder von Bewegungsprozessen an der Plasmamembran bedeutsam
sein kann.

Herr Kneller: Sie sagten anfangs, daB die Morphologie der Zelle nicht statisch
ist, sondern daB eine breite Variation von Formen beobachtet wird. Wie wird
diese Variation veranlaBt? 1st das eine Reizleitung durch die Anbindung an die
Umgebung?

Frau Jockusch: Das nehmen wir an. Fiir die Epithelzellen scheint auBer dem
Kontakt zum Untergrund auch der enge Kontakt zu den Nachbarzellen notig zu
sein, und da werden ja ganz besondere Strukturen zwischen benachbarten Mem-
branen ausgebildet, die dazu fUhren, daB der elektrische Widerstand in einer
solchen Zell-Lage sehr hoch ist. Damit wird verhindert, daB bei diesen Epithelien
Substanzen zwischen den Zellen transportiert werden konnen, sondern nur kon-
trolliert durch die Zellen. So ist es z. B. bei der Niere ganz wichtig, daB alles nur
durch die Nierenzellen bewegt wird, Wasser, Salze oder andere Molekiile.

Herr Kneller: Darf ich das generell so verstehen, daB die Morphologie be-
stimmter Zellen in einer gewissen Variationsbreite von der Umgebung abhmgt,
daB also die Zelle merkt, welche Umgebung sie hat, und sich dementsprechend
formiert?

Frau Jockusch: Das ist sicher richtig.

Herr Kneller: U nd die Signalsubstanzen werden in diesen Mikrotubuli trans-

portiert?

Frau Jockusch: Nein, die werden zum groBen Teil nur auBen an die Zelle gebun-
den. Die Bindung dieser Signalmolekiile, z. B. von Hormonen an ihre Rezeptor-
molekiile, bewirkt im Inneren der Zelle letztendlich die differentielle Expression
bestimmter Gene, wodurch Zelltyp-spezifische Molekiile gemacht werden.
26 Diskussion

Herr Herzog: Frau Jockusch, ich mochte Sie bitten, etwas zu Dictyos telium zu
kommentieren. Sie haben die beiden Moglichkeiten Redundanz und moglicher-
weise Verlust spezifischer Eigenschaften im Verlaufe der in·vitro·Kultur aufge-
zeigt. Wenn man sich den Verlust von Eigenschaften in der in·vitro·Kultur uber
viele Generationen vorstellt, konnte man eher daran denken, daB etwas von der
Redundanz verlorengeht. Aber das wollen Sie ja gerade nicht zum Ausdruck
bringen. Was meinen Sie, was da verlorengegangen sein konnte?

Frau Jockusch: Der Verlust einzelner dieser Proteine in der Natur konnte fur das
Uberleben dieses Pilzes ein Selektionsnachteil sein. Zum Beispiel konnte ich mir
vorstellen, daB der Pilz in der Natur bestimmte Stoffe aus der Umgebung auf-
nehmen muB, wozu er, sagen wir einmal, sehr rasch und effektiv phagozytieren
muB, und daB der Verlust eines bestimmten Proteins dazu fuhren kann, daB die
fur die rasche und effektive Phagozytose notwendige Mikrofilamentorganisation
eben nicht mehr so effektiv stattfinden kann. Das ist ein fiktives Beispiel. Es
konnte sein, daB dieser Pilz das aber dann verkraften kann, wenn ich ihn in der
Flasche im Labor halte und ihm standig alle Nahrung im UberfluB anbiete, weil
ich ja mochte, daB er gut wachst. Ich betone das deshalb, weil das naturlich auch
die Gefahren und die Grenzen der Zellkultur generell zeigt.
 Vero./Jentlichungen
der Nordrhein-Westfalischen Akademie der Wissenschaften

Neuerscheinungen 1988 bis 1994

VortnigeN NATUR-, INGENIEUR- UND

Heft Nr. WIRTSCHAFTSWISSENSCHAFTEN

362 Erich Sackmann, Miinchen Biomembranen: Physikalische Prinzipien dec Selbstorganisation und Funk-
tion als integrierte Systeme zur Signalerkennung, -verstarkung und -iibertra-
gung auf molekularer Ebene
Kurt Schaffner, MiihlheimlRuhr Zur Photophysik und Photochemie von Phytoschrom, einem photomorpho-
genetischen Regler in griinen Pflanzen
363 Klaus Knizia, Dortmund Energieversorgung im Spannungield zwischen Utopie und Realitat
Gerd H. Wolf, jUlich Fusionsforschung in der Europaischen Gemeinschaft
364 Hans Ludwig Jessberger, Bochum Geotechnische Aufgaben der Deponietechnik und der Altlastensanierung
Egon Krause, Aachen Numerische Stromungssimulation
365 Dieter Stoff/er, Munster Geologie der terrestrischen Planeten und Monde
Hans Volker Klapdor, Heidelberg Der Beta-Zerfall der Atomkerne und das Alter des Universums
366 Horst Uwe Keller, Katienburg·Lindau Das neue Bild des Planeten Halley - Ergebnisse der Raummissionen
Ulf von Zahn. &mn Wetter in der oberen Atmosphare (50 bis 120 km Hohe)
367 Jozef S. Schell, Koln Fundamentales Wissen tiber Struktur und Funktion von Pflanzengenen
eroffnet neue Moglichkeiten in der Pflanzenztichtung
368 Frank H. Hahn, Cambridge Aspects of Monetary Theory
370 Friedrich Hirzebruch, Bonn Codierungstheorie und ihre Beziehung zu Geometrie und Zahlentheorie
Don Zagier, Bonn Primzahlen: Theorie und Anwendung
371 Hartwig Hocker, Aachen Architektur von Makromolekiilen
372 Janos Szentdgothai, Budapest Modulare Organisation nervoser Zentralorgane, vor allem der Hirnrinde
373 RolfStaufenbiel, Aachen T ransportsysteme der Raumfahrt
Peter R. Sahm, Aachen Werkstoffwissenschaften unter Schwerelosigkeit
374 KarlHeinz Buchel, Leverkusen Die BedeutWlg der Produktinnovation in der Chemie am Beispiel der AzoI-
Antimykotika und -Fungizide
375 Frank Natterer, Munster Mathematische Methoden der Computer-Tomographie
Rolf W. Guntber, Aachen Das Spiegelbild der Morphe und der Funktion in der Medizin
376 Wilhelm Stoffel, Koln Essentielle makromolekulare Strukturen fUr die Funktion der Myelinmem-
bran des Zentralnervensystems
377 Hans Schadewaldt, DUsseldorf Betrachtungen zur Medizin in der bildenden Kunst
378 6. Akademie-Forum Arzt und Patient im Spannungsfeld:
Natur - technische Moglichkeiten - Rechtsauffassung
Wolfgang Klage~ Aachen Patient und T echnik
Hans-Erhard Bock, Tiibingen, Patientenaufklarung und ihre Grenzen
Hans-Ludwig Schreiber, Hannover
Herbert Weltrich, DUsseldorf Arztliehe Behandlungsfehler
Paul ScMlmerich, Mainz Arztliches Handeln im Grenzbereich von Leben und Sterhen
Gunter Solbach, Aachen
379 Hermann Flohn, Bonn Treibhauseffekt der Atmosphare: Neue Fakten und Perspektiven
Dieter Hans Fhhalt, Jiilich Die Chemie des antarktischen Ozonlochs
380 Gerd Herziger, Aachen Anwendungen und Perspektiven der Lasertechnik
Manfred Week, Aachen Erh6hung der Bearbeitungsgenauigkeit - eine Herausfocderung an die Ultra-
prazisionstechnik
381 Wilfried Ruske, Aachen Planung, Management, Gestaltung - aktuelle Aufgaben des Stadtbauwesens
382 Sebastian A. Gerlach, Kiel FluBeintdige und Konzentrationen von Phosphor und Stickstoff und das
Phytoplankton der Deutsehen Bueht
Karsten Reise, Sylt Historische Veranderungen in der Okologie des Wattenmeeres
383 Lothar Jaenick~ Koln Differenzierung und Musterbildung bei einfa.chen Organismen
Gerhard W. Roeb, Fritz Fuhr, Julich Kurzlebige Isotope in der Pflanzenphysiologie am Beispiel des IIC-Radio-
kohlenstoffs
384 Sigrid Peyerimhoff, Bonn
Siegfried Matern, Aachen
385 Parlamentarisches Kolloquium
386 Bernd Hoff/inger, Stuttgart
387 Janos Kertesz, Koin
388 Enmrd Hornbogen, Bochum
389 Otto D. CreutzJeld; Gottingen
390 Friedheim StanlP'herg, Bochum
391 Helmut Domk~ Aachen
392 Sir John Eccles, Contra
393 Klaus Kirchgiissner, Stuttgart
394 Hermann Josef Roth, Tubingen
RudolfK. Thauer, Marburg
395 Guy Ourisson, Straflburg
Werner Schreyer, Bochum
396 Gottfried Bombach, Basel
Knut Bkicher, St Gallen
397 Jean-Michel Grandmont, Paris
Martin ~ber, Kiel
398 Alfred Piihkr, Bielefeld
399 Horst Kleinkauf, Berlin
Helmut Sies, DUsseldorf
400 Herbert Gkiter, SaarbrUcken
Hans Luth, Juli'"
401 Gerhard Heimann, Aachen
Egon Macher, Miinster/Westf
402 Konstantin-Alexander Hossmann, Kiiln
Herrmann M Bolt, Dortmund
403 Volker Weidemann, Kiel
Alfred Muller, Erlangen
404 Matthias Kreck, Mainz
405 Henno Parthler, Halle
Erhard Hornbogen, Bochum
406 Hubert Mark~ Konstanz, Berlin
407 Joachim Triimper, Garching
Dietrich Neumann, Koin
408 Wilfried Werner, Bonn
409 Holger W. Jannasch, Woods Hole MA
410 Hartmut Zabel, Bochum
Eckart Kneller, Bochum
411 Brigitte M Jockusch, Braunschweig
412 Alfred Fettweis, Bochum
Theoretische Untersuchung kleiner Molekiile in angeregten Elektronen-
zustanden
Konkremente im menschlichen Organismus: Aspekte zur Bildung und Thera-
pie
Wissenschaft und Politik - Molekulargenetik und Gentechnik in Grundlagen-
forschung, Medizin und Industrie
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Tropfchenrmdelle des Fliissig-Gas-Obergangs und ihre Computer-Simula-
tion
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Teile
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den SymbiC6epartnern bei der Ausbildung von Luzerneknollchen
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gisch suppressiver Cydosporinderivate
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Medizin
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und die Grundlagenforschung
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nen
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striellen Massengesellschaft
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Epitaxielle Schichten: Neue 5trukturen und Phaseniibergange
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magnete
Architekturelemente tierischer Zellen
Numerische Integration partieller Differentialgleichungen mit Hilfe diskreter
passiver dynamischer Systeme