PRÁCTICA No.

2 EXTRACCIÓN DE CASEÍNA Y DETERMINACIÓN DE PI

RESULTADOS Y DISCUSION

El método que se usó en la práctica para la obtención de la caseína fue mediante acidificación,
con ácido acético, a una muestra de leche. A partir de esto, se obtuvo un precipitado blanco, esto
debido a que la solubilidad de la caseína disminuye a un valor de pH 4,6 y el pH de la leche se
encuentra a un valor de 6.6; al adicionar acido las cargas de la proteína se neutralizaran y su
desnaturalización produce la precipitación tal como se observó en la práctica Lo anterior se
logró evidenciar al realizar la adición de proporciones de ácido de ácido y acetato de sodio al
tubo 7, dando un pH de valor cercano a 4.6, siendo de 4,67. Este dato se observa en la Gráfica 1,
en donde se aprecia que es el punto más alto y se infiere que es el punto isoeléctrico. Este dato
se compara con el teórico, para así calcular el porcentaje de error, confirmando si el método fue
acertado y que tan alejado esta la parte experimental de los datos reportados en la literatura.

%Error = 1,52%

Tubo A pH
Blanco 0,000
1 0,027 3,24
2 0,033 3,68
3 0,017 3,78
4 0,000 3,98
5 0,001 4,20
6 0,000 4,48
7 0,034 4,67
8 0,004 5,10
9 0,000 5,50
10 -0,001 6,16

Punto isoeléctrico experimental de la caseína

0,040
 0,035 pI apróx.
4,67
0,030
0,025
0,020
0,015
0,010
0,005
0,000
-0,005

0,00 1,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 7,00

Al seguir observando la Gráfica .

Se
Observan unos picos muy bajos en los
Puntos de pH entre 3,98 y 4,48. Esto se
Puede deber a una inadecuada preparación
De la muestra en los tubos 4, 5 y 6, en donde
Tal vez no se contó con las proporciones
 Correctas de los reactivos, afectando la muestra y de esta forma llevando a una incorrecta
lectura de la absorbancia.

La absorbancia se ve afectada de manera directa por la turbidez de las muestras, de esta

manera, si una muestra presentaba alta turbidez la lectura saldría incorrecta. De igual
forma, pueden interferir diversos compuestos en la muestra que absorben en el UV/Vis.

Por otro lado, la adición de KOH a la caseína que se encontraba sólida produjo un efecto de
solubilización, ya que al ser un compuesto básico, tiene la propiedad de regenerar el medio
hasta alcanzar las condiciones iniciales de la muestra.

4. Conclusiones

Debido a las propiedades de precipitación que presenta la caseína, es posible realizar una
medición de su punto isoeléctrico a partir de una desestabilización por acidificación.

La PI experimental, obtenida a partir de la Gráfica 1. Fue de 4,67. Mediante la comparación

con el pI reportado en la literatura, se obtuvo un % de error de 1,52%.

Se infiere que la práctica se realiza con un 98,49% de exactitud, esto se debe a errores
comprendidos en el procedimiento de extracción de la caseína.

5. Bibliografía
Gil Hernández, Á. (2010). Tratado de Nutrición: Composición y calidad nutritiva de los
alimentos. Madrid: Editorial Médica Panamericana, D.L.

Lacad Godina, A. (1985). Ciencia de la leche. Principios de técnica lechera. Barcelona:

Editorial Reverté, S.A.

Segal, C., & Ortega, G. (2005). Manual de práctivas biología molecular de la célula I.
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Vian Otuño, Á. (2006). Introducción a la

química industrial. Barcelona:
Editorial Reverté.