Nombre: Michael Tipanta

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Tema: Técnicas de tinción

1. TEORÍA
1.1.Tinción.
El término tinción significa simplemente colorear los microorganismos con un colorante
que destaque ciertas estructuras, debido al poco contraste que poseen los microorganismos
no apreciable con el microscopio, se acostumbra a teñirlos para aumentar el contraste con
su entorno. La tinción se da cuando se une el cromóforo a un componente celular.
(Cavallini & María, 2003)

1.2.Frotis
Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o
cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen
agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis
debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos
habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la
muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. (Grandos & Villaverde, 2003)

1.3.Tipos de tinción.
Tinciones simples: una tinción simple es una solución acuosa o alcohólica de un colorante
básico único. Aunque los diferentes colorantes se unen de forma específica a las distintas
partes de las células, el propósito principal de una tinción simple es destacar el
microorganismo completo para que se vean las formas y estructuras celulares básicas.
(Tortora & Funke, 2007)

Tinciones diferenciales: las tinciones diferenciales reaccionan de modo diferente con las
distintas clases de bacterias y por lo tanto pueden ser empleadas para establecer una
distinción entre ellas. Las tinciones diferenciales utilizadas con más frecuencia para las
bacterias son la tinción de Gram y la tinción de ácido-alcohol resistencia, se emplean por lo
menos dos colorantes. (Tortora & Funke, 2007)

Tinción negativa: en realidad no tiñe las bacterias, sino que tiñe su entorno aumenta el
contraste entre este y las células y facilitan su observación. El método es ideal para
observar inclusiones refráctiles que no se tiñen fácilmente tales como gránulos de azufre,
esporas o cápsulas bacterianas. Para hacer esta tinción se impregna una preparación de
bacterias con tinta china o nigrosina, (Cavallini & María, 2003)

Tinciones para estructuras bacterianas o para materiales de reserva: se basan en la

afinidad de la estructura o del material de reserva por un determinado colorante que
fácilmente los evidencia. (Cavallini & María, 2003)

1.4.Tinción Gram
La tinción gram, es la más utilizada en el laboratorio microbiológico para la observación de
especímenes, facilita la observación microscópica y permite diferenciar dos grandes grupos
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eubacterias: grampositivas y gramnegativas. La afinidad grampositiva o gramnegativas de

las bacterias depende de la composición y estructura química de la pared celular. Las que
mantienen o presentan una coloración violeta se denominan grampositivas y los que
pierden se llaman gramnegativas. Esto se debe a que el alcohol acetona desorganiza la
membrana externa de las bacterias gramnegativas y permite la salida del colorante primario
al agregar el contracolor estos se tiñen de rojo. (Negroni, 2009)

1.5.Tinción Flagelar
Los flagelos son apéndices extracelulares delgados, para poder visualizarlos es necesario
engrosar su diámetro mediante el empleo de técnicas especiales. Una de las técnicas
utilizadas se realiza cubriendo el extendido con una suspensión coloidal inestable de sales
de ácido tánico que precipita sobre estas estructuras, lo que aumenta su tamaño. Luego se
cubre con solución de fucsina ácida, lo que permite observarlos de color rojo. (Negroni,
2009)

1.6.COLORACIÓN DE AZUL DE METILENO DE LOEFFLER (coloración de

gránulos metacromáticos)
La tinción de materiales de reserva o tinción de gránulos metacromáticos se basa en ciertas
bacterias que bajo ciertas condiciones de cultivo, son capaces de acumular dentro del
citoplasma depósitos de materiales de reserva, que se denominan inclusiones. Los gránulos
metacromáticos constituyen acumulaciones de poli fosfato. (Cavallini & María, 2003)

Estos gránulos se llaman así porque muestran un efecto metacromáticos, esto es aparecen
de un color rojo o de diferentes tonos de azul, cuando se tiñen con azul de metileno o azul
de toluidina. Son comunes en corinebacterias, espirilos y bacilos lácticos y su presencia se
utiliza en la identificación de esas bacterias. (Cavallini & María, 2003)

BIBLIOGRAFÍA

 Cavallini, E., & María, C. (2003). Bacteriología General: Principios Y Prácticas de

Laboratorio. San José: Editorial Universidad de Costa Rica.

 Grandos, R., & Villaverde, M. (2003). Microbiología. Madrid: Ediciones Paraninfo

S.A.

 Negroni, M. (2009). Microbiología Estomatológica. Buenos Aires: Editorial Médica

Panamericana .

 Tortora, G., & Funke, B. (2007). Introducción a la microbiología (Novena ed.).

Buenos Aires: Editorial Médica Panamericana.