PRÁCTICAS DE LABORATORIO

BIOLOGÍA I

1. Recomendaciones generales

El laboratorio es el lugar de la experimentación. Para evitar de dañar los equipos delicados

del laboratorio y para evitar accidentes es necesario cumplir con las normas de
bioseguridad y las reglas del laboratorio. Es muy importante seguir las instrucciones
cuidadosamente y mantenerse concentrado durante la práctica, ya que errores en el
procedimiento llegan a dañar el experimento.

Por lo tanto es importante:

1. Cumplir con las normas de bioseguridad.

2. Leer cuidadosamente el procedimiento a seguir antes de iniciar la práctica.
3. Llevar una franela para limpiar inmediatamente cualquier salpicadura.
4. Traer todo el material para la práctica. Leer las instrucciones de la próxima
practica ya una semana antes.
5. Tener un cuaderno pequeño para las anotaciones durante la práctica y una caja de
colores para iluminar las observaciones. Hacer apuntes detallados durante la
práctica.

Materiales personales:

1. Pinzas
2. Aguja de disección
3. Mandil
4. Hojas de trabajo impresas, cuaderno de informes, colores
5. Franela
6. Lancetas o Gillete (siempre nueva)
7. La cédula

Materiales del curso:

 Rollo de papel toalla

 Jabón líquido
 Caja de 100 cubre objetos (24x50)
2. LOS APUNTES Y EL INFORME DE LAS PRÁCTICAS

En un cuaderno pequeño (A5) de hojas blancas anotar con detalles:

 Fecha, hora, lugar

 El objetivo
 Materiales
 Procedimiento detallado
 Observaciones detalladas y con dibujos a colores

Indicar el cuaderno después de cada práctica.

3. ÍNDICE DE PRÁCTICAS:

1. Bioseguridad
2. Microscopio
3. Bacterias del yogurt 1/2
4. Bacterias del yogurt 2/2
5. Levadura 1/2
6. Levadura 2/2
7. Protozooa (paramecio)
8. Células vegetales (cebolla, tomate)
9. Células vegetales II
10. Células vegetales III
11. Células animales (tráquea, mucosa)
12. Práctica individual
4. INSTRUCCIONES DE LAS PRÁCTICAS

3. y 4. Observación de las bacterias del yogurt

Introducción:

Las células procariotas son las células más extendidas y abundantes de la biosfera y se
encuentran en nuestro medio en grandes cantidades activas o en forma de esporas. Son de
gran interés para el hombre por su participación en procesos fisiológicos, patológicos e
industriales. La figura 1 ilustra los diferentes tipos básicos de bacteria.

Figura 1. Tipos de células bacterianas. Con frecuencia las bacterias se encuentran agrupadas
en acúmulos o en cadenas.

Objetivo:

Observar con el microscopio óptico células procariotas para percatarse de su pequeño

tamaño y de sus diferentes formas. Introducir el concepto de fijación y en el uso de
colorantes para aumentar el contraste de las células por medios químicos.
Materiales:

1. Microscopio
2. Portaobjetos
3. Cubreobjetos
4. Palillos de dientes o asa microbiológica
5. Pipeta Pasteur
6. Aguja de disección
7. Frasco lavador
8. Solución de azul de metileno al 1%
9. Agua destilada
10. Papel filtro, papel toalla
11. Yogurt natural

Fundamento:

El yogurt es producto de la fermentación láctica de diferentes bacterias: los diferentes

Lactobacillus y el Streptococcus thermophilus (Figura 2.).

Figura 2. Imagen de microscopio electrónico de Streptococcus thermophilius (izquierda) y

Lactobacillus (derecha).

Procedimiento:

Observación in vivo:

 Limpiar bien un portaobjetos (Figura 3.A.)

 Con la ayuda de una pipeta Pasteur coloca una gota de agua destilada sobre el
porta limpio (Figura 3.B.)
 Con una asa o con un palillo de dientes toma una pequeña cantidad de yogurt y
colócala sobre la gota de agua destilada
 Monta la preparación (Figura 3. L)
 Observa y toma notas.
En material fijado:

1. Extensión del material:

 Limpiar bien un portaobjetos (Figura 3.A.)

 Con la ayuda de una pipeta Pasteur coloca una gota de agua destilada sobre el
porta limpio (Figura 3.B.)
 Con una asa o con un palillo de dientes toma una pequeña cantidad de yogurt y
colócala sobre la gota de agua destilada
 Extiende suavemente la gota sobre la superficie del porta (Figura 3.D.).

2. Fijación del material:

 Deja que el material se seque al aire. Este proceso mata las bacterias y se altera la
permeabilidad de sus membranas facilitando el ingreso a su interior.
 También se la puede secar con la llama del mechero cuidando que el calor no sea
excesivo (Figura 3.E.).

3. Tinción de las bacterias:

 Coloca el porta, en el soporte o sobre papel toalla y cúbrelo con el colorante

(azul de metileno) (Figura 3.J.) durante 3-5 minutos.
 Lava la preparación con agua destilada (Figura 3.F.) para arrastrar el exceso de
colorante y sécala con papel de filtro (Figura 3.K.) o al aire.
 Monta la preparación (Figura 3. L)
 Seca cuidadosamente la cara inferior del porta con papel de filtro o con un papel
toalla.

4. Observaciones:

Mira la preparación al microscopio óptico. Toma notas de las observaciones.

Figura 3. Diferentes procedimientos de laboratorio biología.
5. y 6. Observación de las células de la levadura

Introducción:

Las levaduras son hongos unicelulares muy abundantes en la naturaleza. Estan en todas
partes: sobre las semillas y las frutas, en el suelo y en el intestino de los animales. Juegan
un papel importante en muchos procesos industriales (producción de bioetanol, cerveza
ect.). También ciertas levaduras son patógenos (Por ejemplo Candida albicans produce
candidiasis en la piel y mucosas del hombre y la Nematospora coryli puede infectar y
destruir frutas y verduras).

Objetivo:

Observar con el microscopio óptico células eucariotas del reino hongos.

Materiales:

 Microscopio
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Palillos de dientes
 Pipeta Pasteur
 Aguja de disección
 Frasco lavador
 Solución de azul de metileno al 1%
 Levadura fresca

Fundamento:

La forma más fácil de encontrar levaduras para observarles es comprando levadura de

pan. Estas levaduras pertenecen al género Saccharomyces.

Procedimiento:

1. Preparación de la levadura:

Para tener una solución acuosa de levadura, pon agua con azúcar en un frasco limpio.
Agrégale un poco de levadura de pan y agítalo hasta que se disuelve totalmente. Deja
fermentar en temperatura del ambiente durante 24 horas para que la levadura se divida
por gemación (Figura 4.).
Figura 4. Ciclo vital de levadura.

2. Preparación del material:

"In vivo":

 Limpiar bien un portaobjetos

 Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución de levadura y
ponla sobre el porta limpio.
 Colócale un cubreobjetos encima (Figura 3.L.) y ya está lista para observar al
microscopio.
 Si tienes suerte podrás ver este fenómeno (Fig. 4.).

En material fijado:

 Limpiar bien un portaobjetos.

 Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución de levaduras y
ponla sobre un porta limpio.
 Con un palillo de dientes extiende suavemente la gota sobre toda la superficie
del porta (Figura 3.D.).
 Seque el material al aire o sobre la llama de mechero.
 Coloca el porta, en el soporte o sobre un papel toalla y cúbrelo con el colorante
(azul de metileno al 1%) durante 15 minutos.
  Lava la preparación con agua destilada para arrastrar el exceso de colorante
(Figura 3.F.) y sécala con papel de filtro o al aire
 Monta la preparación (Figura 3.L.).
 Seca cuidadosamente la cara inferior del porta con papel de filtro o con un papel
toalla.

3. Observaciones:

Mira las preparaciones al microscopio óptico. Toma notas de tus observaciones.

7. Observación de protozoos

Introducción:

Los protozoos son organismos unicelulares eucariotas, muy abundantes. Los podemos
encontrar en medios acuosos (marinos o no), en medios terrestres húmedos y parasitando
a otros organismos. Los protozoos presentan una gran diversidad de formas y especies.

Objetivo:

Observar con el microscopio óptico los paramecios que son un ejemplo de células
eucariotas del reino protista, concretamente protozoos.

Materiales:

 Microscopio
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Palillos de dientes
 Pipeta Pasteur
 Agujas disección
 Frasco lavador
 Solución de azul de metileno al 1%
 Agua destilada
 Cultivo de paramecios
 Lámina de estructura de paramecio

Fundamento:

Los paramecios pueden buscarse en su hábitat natural, es decir en medios acuosos de agua
dulce. Por lo tanto es fácil obtener muestras para su observación al microscopio.
Procedimiento:

1. Cultivo de paramecios:

Para realizar un cultivo de paramecios se puede conseguir agua de florero de panteón,

de culantro (después de varios días) o bien colocar un poco de paja en un frasco con agua por lo
menos con una semana de anterioridad.

2. Preparación del material para su observación:

"In vivo":
 Limpiar bien un portaobjetos.
 Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución de paramecios y
ponla sobre el porta limpio.
 Colócale un cubreobjetos encima (Figura 3.L.)

En material fijado:
 Limpiar bien un portaobjetos.
 Con la ayuda de una pipeta Pasteur toma una gota de la solución de paramecios y
ponla sobre el porta limpio.
 Con un asa o un palillo de dientes extiende suavemente la gota sobre toda la
superficie del porta.
 Seca en material al aire o con la llama de un mechero.
 Coloca el porta, en el soporte o sobre un papel toalla.
 Cúbrelo con el colorante, durante 5 a 10 minutos.
 Lava la preparación con agua destilada (Figura 3.F.) para arrastrar el exceso de
colorante.
 sécala con papel de filtro o al aire.
 Monta la preparación (Figura 3.L.)
 Seca cuidadosamente la cara inferior del porta con papel de filtro o con un papel
toalla.

3. Observaciones:
Observa las preparaciones con microscopio óptico y toma notas.
8. Observación de células eucarióticas vegetales

Introducción:

Las plantas son muy importantes en el ecosistema. Para entender sus funciones es
necesario conocer la estructura de sus células. El límite más externo es la pared celular,
que rodea el material vivo de la célula: el protoplasma. La parte que rodea todo el
protoplasma y que está en contacto con la pared celular, es la membrana celular. Próxima
a esta pared hay una capa irregular, granular, que constituye el citoplasma. El núcleo
aparece homogéneo.

Objetivo:

Observar con un microscopio óptico las células eucarióticas vegetales en: cebolla
blanca, en cebolla roja y tomate.

Materiales:
 Microscopio
 Porta objetos
 Cubreobjetos
 Pipeta Pasteur
 Gillette
 Pinzas
 Agujas de disección
 Azul de metileno
 Agua
 Tomate de riñón
 Cebolla blanca
 Cebolla roja

Procedimiento:

1. Observación de las células de cebolla roja

 Corte un bulbo de cebolla en 4 partes, tome una de estas escamas con la
superficie cóncava y rómpala. Entonces observará que se desprende con
facilidad una capa muy delgada y transparente que es la epidermis.
 Coloca una gota de agua una gota de agua sobre el porta.
 Tome un fragmento (1cm) de la epidermis y colóquelo sobre la gota de modo
que la superficie que estaba en contacto con la escama quede hacia arriba.
 Cubrir con el cubreobjetos.
  Coloque una gota de azul de metileno de un lado de la preparación para que la
solución entre por capilaridad.
 Observa y toma notas.

Observación de células de cebolla blanca.

 Separar una de las hojas interna de la cebolla y desprender la tenue membrana
que está adherida por su cara inferior cóncava.
 Coloca una gota de agua sobre el porta objetos.
 Depositar un fragmento de membrana sobre la gota.
 Añadir unas gotas de azul de metileno sobre la membrana y dejar actuar durante
5 minutos aproximadamente. ¡No debe secarse la epidermis por falta de
colorante o por evaporación del mismo!
 Con el gotero bañar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte
colorante.
 Cubrir con cubreobjetos.
 Observa la preparación y toma notas.

Observación de pulpa de tomate:

 Cortar un trozo de pulpa de tomate de unos 2 mm de grosor.
 Cologar el trozo en el centro de un portaobjetos sin poner agua.
 Colocar encima un cubreobjetos y comprimir suavemente con los dedos hasta
obtener un completo aplastamiento del fragmento de pulpa de tomate.
 Observar y tomar notas.
9. Observación de diferentes células vegetales

Introducción:

En una sola planta encontramos una variedad grande de diferentes tipos de células, cada
una con su función especial.

Objetivo:

Observar con microscopio diferentes tipos de células vegetales.

Materiales:
 Microscopio
 Porta objetos
 Cubre objetos
 Gillette
 Pinzas
 Agujas de disección
 Agua
 Pipeta Pasteur
 Hojas de cartucho (tradescancia o elodea) (frescas)

Procedimiento:

1. Observación de estructuras celulares en epidermis de cartucho

 Desprenda la epidermis de la hoja de cartucho. Se desprende con facilidad una
capa muy delgada y semi-transparente.
 Coloque una gota de agua sobre el porta objetos.
 Tome un fragmento (1cm) y colóquelo sobre la gota de agua de modo que la
superficie que estaba en contacto con la escama quede hacia arriba.
 Cubrir con cubre objetos.
 Observar y tomar notas.
Figura . Células estomáticas.
10. Observación de diferentes células vegetales II

Introducción:

En una sola planta encontramos una variedad grande de diferentes tipos de células, cada
una con su función especial.

Objetivo:

Observar con microscopio diferentes tipos de células vegetales.

Materiales:
 Microscopio
 Porta objetos
 Cubre objetos
 Gillette
 Pinzas
 Aguja de disección
 Agua
 Pipeta Pasteur
 Una muestra (manda tu sugerencia de muestra al e-mail 3 días antes de la
práctica)

Procedimiento:

1. Observación de las células de la muestra

 Planifica y haz tu propia preparación.
 Observa y toma notas.
11. Observación de células animales

Introducción:

La célula es la unidad básica funcional y estructural más pequeña de los seres vivos. Se
compone de partes características cuyo trabajo está coordinado de tal manera que cada
tipo de célula lleva a cabo una función estructural bioquímica única. Regulan el flujo de
entrada y salida de los materiales a fin de asegurar las condiciones óptimas para los
procesos vitales prevalecientes dentro de ellas. Aseguran procesos como la generación de
ATP, por desdoblamiento de los nutrientes, la síntesis molecular, la transportación de las
moléculas dentro y entre las células, la remoción de desechos y el movimiento parcial o
incluso total de la célula.
Las principales diferencias entre las células son de tipo morfológico. Los vegetales
presentan cloroplastos, organelos citoplasmáticos en donde se lleva a cabo la fotosíntesis,
la pared celular que le da forma y rigidez a la célula vegetal, está formada por un
polisacárido llamado celulosa, también, contienen una vacuola muy grande que en
ocasiones ocupa casi todo el contenido celular, la membrana celular tiene la función de
barrera osmótica. Las células animales no presentan cloroplastos ni cápsula de secreción
(pared celular) y en caso de tenerla no está constituida por celulosa como las células
vegetales.

Objetivo:

Observar las células de la mucosa bucal y células ciliadas de tráquea en pollo.

Materiales:
 Microscopio
 Porta objetos
 Cubre objetos
 Pinzas
 Gillete
 Palillos anchos
 Aguja de disección
 Agua
 Tráquea de pollo
 Azul de metileno

Procedimiento:

1. Observación de células epiteliales de la mucosa bucal

 Limpiar el porta y cubre objetos.
 Hacer un raspado de la boca.
  Hacer un frotis en el portaobjetos.
 Cubrir con azul de metileno.
 Cubrir
 Observar y tomar notas.

2. Observación de células ciliadas de la tráquea

“In vivo”:
1. Limpiar el porta y cubre objetos.
2. Hacer un raspado con el palillo de la mucosa de tráquea de pollo.
3. Frotar con el palillo el portaobjetos.
4. Cubrir con azul de metileno.
5. Cubrir
6. Observar y tomar notas.
En material fijado:
 Hacer de manera independiente una preparación fijado de las células de tráquea
de pollo.
 Observar y tomar notas.
12. Práctica individual

Planificar y realizar una práctica individual. Esta práctica reemplazará la prueba de la

parte práctica de la cátedra. Planificación de la práctica tiene que ser entregado una
semana antes de la práctica al correo electrónico y tiene que incluir:

 Introducción
 Objetivo
 Materiales
 Procedimiento

El estudiante tiene que asegurar la disponibilidad de todos los materiales necesarios.

Durante la práctica el estudiante hace los apuntes a su cuaderno y a base de sus apuntes
escribe un informe sobre la práctica realizada.
En la calificación todas las partes de la práctica (planificación, tema, realización,
bioseguridad, apuntes e informe) serán tomados en cuenta. Trabajo copiado tendrá
automáticamente la nota cero.