Suscríbete a DeepL Pro para poder editar este documento.

Entra en www.DeepL.com/pro para más información.

3.1. Doble colocación de bonos

Se puede encontrar una variedad considerable en la posición de doble enlace entre especies estrechamente relacionadas,
y esta colocación es a menudo crucial para la especie specificity y la función de una feromona. Por ejemplo, el rodillo de
cabeza verde Planotortrix excessana utiliza (Z)-5-y (Z)-7-tetradecenil acetato, mientras que su especie hermana P. octo
utiliza (Z)-8-y (Z)-10-tetradecenil acetato[92,93]. Se han observado otros ejemplos de regioisomería de doble enlace en
otras numerosas parejas de especies de rodillo de hoja[94-96]. Las feromonas sexuales de otras especies de lepidópteros
también codifican specificity a través de complejas mezclas de polienos con entre 2 y 4 sitios de insaturación[89]. El número,
posición y modification de estos enlaces en epóxidos permite la variación combinatoria. En D. melanogaster, se encuentran
isómeros posicionales para el heptacosa- diene femenino afrodisíaco: las poblaciones cosmopolitas utilizan (Z, Z)-7,11-
heptacosadiene, mientras que las poblaciones africanas y caribeñas producen principalmente (Z, Z)-5,9-
heptacosadiene[97]. En cada uno de estos ejemplos, los cambios sutiles en la posición de doble vínculo son capaces de
impartir una discriminación funcional specificity y una fuerte discriminación de pareja influence

3.2. Chirality

Hay muchos ejemplos que ilustran la specificity de un solo enantiómero y la inactividad de su imagen espejo[91]. En las
hormigas cortadoras de hojas, el isómero (S) de la feromona de alarma 4-metil-3-heptanona demostró ser 400 veces más
efectivo que el isómero (R)[98]. Para la palomilla gitana, el (7R, 8S)-enantiómero de disparlure, la feromona sexual femenina,
fue 106 veces más efectivo que la antípoda (7S, 8R)[99]. Curiosamente, el configuration natural de la feromona no es
necesariamente el más bioactivo. En algunos casos, uno o más de los estereoisómeros no naturales pueden ser más activos
que el estereoisómero producido por insectos. Este fenómeno se observó en la cucaracha alemana (Blattella germanica)
donde cuatro estereoisómeros sintetizados de la feromona sexual blattellaquinona (Fig. 1)
100] provocó una mayor actividad biológica en comparación con el estereoisómero producido por insectos[101,102]. Un
fenómeno similar se observó en D. melanogaster, donde la versión producida por insectos de la feromona sexual CH503
era funcionalmente más débil, comparada con los estereoisómeros sintéticos que no se encuentran en la
naturaleza[103,104]. De estos resultados inesperados podemos concluir que la recapitulación de la actividad biológica no
es necesariamente la prueba más rigurosa para determinar la actividad natural configuration Además, estos ejemplos
ilustran la importancia de determinar la estructura absoluta de los componentes de feromonas cuando se diseñan señuelos
para trampas. Por último, puede valer la pena probar estereoisómeros no naturales de feromonas naturales como señuelos
potenciales.

3.3. Complejidad combinatoria

La actividad biológica también puede ser codificada por una especie-specific mezcla de compuestos en una proporción
particular. Por ejemplo, el exobrevicomin, la feromona de agregación del escarabajo del pino occidental (Dendroctonus
brevicomis), mostró la mayor bioactividad cuando se combinó la versión (1R, 5S, 7R) con la versión (1S, 5R)-frontalina,
ambas son acetales bicíclicos[105]. Sin embargo, las mezclas de las antípodas fueron menos efectivas. De manera similar,
el sulcatol, la feromona de agregación del escarabajo de la ambrosía Gnathotrichus sulcatus, es más eficaz como una mezcla
racémica de (R) y (S)-sulcatol (Fig. 1). Los enantiómeros puros dieron poca o ninguna respuesta. En particular, una mezcla
racémica de 50:50 de los enantiómeros produjo un efecto de agregación aún mayor que una combinación de 35:65 (R/S),
que es la proporción que se produce naturalmente[106].
En las polillas, un cambio en la proporción de estereoisómeros ha sido identified como un mecanismo subyacente a la
generación de nuevas especies. Las razas regionales de la polilla europea del barrenador del maíz Ostrinia nubilalis se
distinguen por su raza -specific mezclas de feromonas sexuales femeninas (E)-11- y (Z)-11- acetato de tetradecenilo. Una
raza se caracteriza por una mezcla molar de 98:2 E/Z[107,108] mientras que la otra se distingue por una mezcla molar de
3:97 E/Z[108,109]. Los machos muestran una fuerte atracción por la proporción expresada por las hembras de su propia
raza de feromonas, aunque ambas poblaciones son genéticamente compatibles y producen descendencia fértil. Es de
esperar que los híbridos expresen una mezcla molar de feromonas de 65:35 E/Z[110]. También se han observado razas de
feromonas para los escarabajos grabadores de pino, la raza de la Costa Este de Ips pinian utiliza una mezcla de 33:66 (R)-(
)- y (S)-(+)-ipsdienol mientras que la raza de la Costa Oeste produce una relación R/S de 90:10[111]. Se postula una
combinación de separación geográfica y presión depredadora (de las avispas y escarabajos que utilizan la señal química
para localizar a las presas) como base de esta divergencia[112,113].
No todas las mezclas de feromonas son sinérgicas o aditivas. Por ejemplo, el (R)-enantiómero de japonilure, una feromona
sexual liberada por los escarabajos japoneses femeninos Popillia japonica, es antagonizada por su antípoda, (S)-japonilure.
Una mezcla de los enantiómeros de (R)- y (S)-japonilure es significantly menos efectiva para atraer a los machos a las
trampas colocadas en el sitio field[114]. Posteriormente se descubrió que el antagonista (S)-japonilure es la feromona sexual
de otra especie de escarabajo, Anomala osakana (escarabajo Osaka)[115]. En particular, el (R)-japonilure es el antagonista
conductual de A. osakana. Se cree que este sistema recíproco por el cual cada estereoisómero es inhibido por su antípoda
impide que los machos persigan a las hembras de la especie equivocada.

3.4. Longitud

Ligeras diferencias en la longitud de las feromonas también pueden afectar el comportamiento que induce. En D.
melanogaster, se ha demostrado que el 23 monoeno de carbono (Z)-7-tricoseno inhibe el cortejo macho-hembra y es
necesario para la agresión macho-macho, pero el 25 monoeno de carbono, (Z)-7-pentacoseno, ligeramente más largo, no
produce este efecto[49].

3.5. Uso de compuestos similares en diferentes taxones

Compuestos similares a veces se usan de diferentes maneras en diferentes taxones de insectos. Los niveles más altos de un
CHC 2Me-C26 ramificado con metilo en machos de D. serrata aumentan el éxito de apareamiento en esta especie[116]. En
contraste, la misma molécula junto con otro CHC ramificado con metilo, 2Me-C28, funciona como una feromona sexual
producida por las hembras del escarabajo de cuernos largos, Mallodon dasystomus[117]. De manera similar, el cVA es
secretado por el macho D. melanogaster y utilizado como afrodisíaco para la hembra flies Sin embargo, este compuesto
también se produce en las hembras del escarabajo cerambícido Ortholeptura valida como una hembra-specific sex
pheromone[118].

4. Bioquímica de la biosíntesis de feromonas

La síntesis de feromonas ha sido bien estudiada en numerosos órdenes de insectos y comparte muchas similitudes con las
vías bioquímicas conocidas por el metabolismo lipídico[119]. Los precursores de las feromonas se derivan de tres fuentes
principales: la tesis de novo syn-, la conversión de los precursores proporcionados por la planta huésped o sustrato, y la
incorporación directa de las moléculas encontradas en el huésped. El specificity de las estructuras químicas de feromonas
está codificado por enzimas biosintéticas, algunas de las cuales se encuentran expresadas en sitios de síntesis de feromonas
como glándulas y ovocitos, células epidérmicas especializadas. La caracterización de las enzimas y precursores en la vía ha
sido un esfuerzo de investigación importante debido a la aplicación potencial para el control de plagas. Además, los genes
que codifican las enzimas bioquímicas sirven como marcadores útiles para evaluar cómo la feromona profiles evoluciona a
través del tiempo evolutivo (ver Sección 6). Esta sección se divide en tres partes. En primer lugar, briefly encuesta los
diferentes sitios de síntesis de feromonas. Segundo, describimos las diferentes clases de especies-specific enzimas que
modifican precursores comunes y producen moléculas especializadas. En tercer lugar, describimos algunos de los nuevos
enfoques utilizados para identificar las enzimas de la biosíntesis de feromonas.

4.1. Sitio de síntesis de feromonas

Las feromonas y los componentes de las mezclas de feromonas se producen en una amplia variedad de órganos localizados
en especies-specificstructures Comúnmente se encuentran entre muchos insectos células secretoras especializadas
conocidas como envocitos. La forma, el tamaño, la distribución y el número de envocitos varían de una especie a otra y
pueden residir debajo de la epidermis en racimos o ser distribuidos individualmente a lo largo del cuerpo adiposo[120].
Además de producir hidrocarburos cuticulares, los envocitos también son necesarios para el metabolismo y
almacenamiento general de los lípidos[121]. Otros tejidos que producen feromonas son más especializados. Por ejemplo,
las hembras de la mayoría de las especies de polillas producen esferomonas sexuales en las glándulas que se encuentran
dentro de los segmentos abdominales terminales[122]. Los machos de Drosophila producen feromonas sexuales en el bulbo
eyaculatorio, un sitio de secreción en el extremo de la región anogenital que está ligado a los órganos reproductores
masculinos[22,123]. Las hormigas usan glándulas múltiples como la Dufour, veneno, glándulas pigidiales y
mandibulares[124]. Notablemente, se cree que las reinas de las abejas melíferas tienen al menos 15 glándulas de feromonas
diferentes[125].

4.2. Enzimas en la biosíntesis de feromonas

Los ácidos grasos, que se originan tanto de la síntesis de novo como de fuentes dietéticas, son el componente básico de
muchas feromonas. La mayoría de las enzimas que intervienen en la síntesis de feromonas modifican los ácidos grasos.
Destacamos algunas de las clases enzimáticas y ejemplos pro-video de los genes conocidos que codifican estas enzimas.

4.2.1.1. Sintasas de ácidos grasos

Muchos insectos son capaces de sintetizar ácidos grasos de novo a partir de precursores de acetilcoA (Fig. 2) a través de la
actividad de la acetilcoA carboxilasa y la sintasa de ácidos grasos. Generalmente se asume que el proceso de generación de
precursores de ácidos grasos para el pro-ducto de feromonas utiliza las mismas vías para la síntesis de ácidos grasos en el
metabolismo general. Experimentos de Lepidoptera, houseflies, fruta flies, y cucarachas que usan precursores etiquetados
han demostrado la elongación de los ácidos grasos acil-CoAs a los ácidos grasos de cadena larga. Por ejemplo, en las
glándulas de feromonas de las polillas, los precursores de acetato etiquetados se incorporan a los ácidos grasos comunes
con 16 y 18 cadenas de carbono[126-130].
El trabajo de Blomquist y sus colaboradores indica que los insectos tienen dos formas de sintasas de ácidos grasos, una
sintasa de ácidos grasos citosólicos y una sintasa de ácidos grasos microsómicos[131]. El primero se utiliza para sintetizar
hidrocarburos lineales mientras que el segundo es necesario para sintetizar hidrocarburos ramificados[132]. Los CHC
ramificados requieren aminoácidos como la valina, la metionina y la isoleucina como precursor biosintético inicial[133] y la
incorporación de metil-malonilo durante el alargamiento[133-135]. Una segunda vía de síntesis incorpora propionato,
succinato y butirato y se ha demostrado en escarabajos, houseflies[136], cucarachas americanas[137], algunas especies de
polillas[138], y termitas de Zootermopsis angusticollis[139]. Un candidato probable para la sintasa de ácidos grasos
microsómicos en Drosophila es CG3524/mFAS. Oenocyte-specific knock-down de la expresión génica CG3524 tanto en D.
melanogaster como en D. serrata eliminó casi todos los CHC ramificados por metilo, dejando intactos los demás CHC[116].

4.2.2.2. Desaturasas
Las enzimas desaturasas añaden un doble enlace a los sustratos de ácidos grasos y pueden ser altamente specific para
diferentes longitudes o clases de precursores. Los genes que codifican desaturasas que juegan un papel en la síntesis de
feromonas han sido identified en muchos insectos. En Lepidoptera, se sabe que una gran familia de desaturasas de acyl-
CoA modifica los intermediarios grasos saturados, solos o dobles insaturados de acyl (Fig. 2). En particular, las D11
desaturases, que colocan un doble vínculo en la posición C11, parecen desempeñar un papel importante en las especies de
polillas y butterfly[140-145]. Numerosas otras enzimas han sido identified para la colocación de dobles enlaces en otras
posiciones en precursores de acyl saturado[146,147]. En particular, se ha sugerido que la expresión diferencial de una D10-
desaturasa, desaturase, desat5, subyace en interspecific diferencias de feromonas sexuales en polillas pertenecientes a los
géneros Ctenpseustis y Planotortix[148]. Varias desaturasas exhiben specificity para sustratos monoinsaturados[149-154].
Por último, se sabe que varias desaturasas de Lepidoptera producen componentes de feromonas triénicas, utilizando
también ácido linoleico como sustrato[89,155]. En Drosophila, se ha dedicado mucho trabajo a dilucidar la función y el uso
conservado de las desaturases desat1, desat2, desatF debido a su supuesta función de contribuir al aislamiento
reproductivo y a la formación de especies. desat1 transforma el ácido palmítico y esteárico en ácido palmitoleico y ácidos
oleicos, ambos conocidos por servir como precursores de los hidrocarburos monoinsaturados y diinsaturados de 23-29
átomos de carbono de longitud[156,157]. Las mutaciones de desat1 causan una gran disminución de los hidrocarburos
insaturados masculinos y femeninos y un aumento concomitante de los hidrocarburos saturados[156], lo que ilustra que
un solo producto genético es capaz de cambiar drásticamente el hidrocarburo total profile La desaturasa se expresa en los
ovocitos y el bulbo eyaculatorio, dos sitios principales de producción de feromonas en D. melanogaster. Además, otras
isoformas de empalme se expresan en partes del sistema nervioso, el abdomen y los cuerpos grasos, lo que indica funciones
probables en el comportamiento y los procesos metabólicos básicos[158]. Otra desaturasa, desat2, es specific para el
sustrato ácido mirístico (C14:0)[159]. Una diferencia en la actividad de desat1 vs. desat2 es de tamaño hipotético para
contribuir a un hidrocarburo cuticular distinto profiles que distingue a las especies cosmopolitas de Drosophila de las que
provienen del África subsahariana[159.160]. Las diferencias en la cuticular profile entre hombres y mujeres también se
derivan de la expresión de la desaturasa en el sexo -specific El CHC sexualmente dimórfico profiles en varias especies de
Drosophila puede atribuirse a la expresión de la enzima desatF[161], que añade un segundo doble vínculo a los precursores
de acyl monoinsaturados[162-164]. Observamos que los diferentes grupos de investigadores utilizan su propia
nomenclatura y sistemas para nombrar las desaturasas. El desat1 del papel de Albre et al. no es ortólogo del gen desat1 en
Drosophila.

4.2.3.3. Elongases
Las elongaciones de ácidos grasos son una clase de enzimas que controlan la longitud de los ácidos grasos de cadena muy
larga. Se sabe que las reacciones de elongación tienen lugar en la cucaracha americana y en la cucaracha M. domestica,
basada en ensayos in vitro con microsomas aislados del tejido integumento. En preparaciones de cucarachas, el estearil-
CoA se alargó hasta 26 carbonos mientras que el linoleoil-CoA se alargó hasta 28 carbonos[165]. Los productos alargados
probablemente sirven como precursores del pentacosano y el heptacosadiene, dos de los principales CHC de cucarachas.
En la página web flies, C18:1-CoA y C24:1-CoA se alargaron hasta 28 carbonos utilizando una preparación similar (Fig.
2)[166]. Los genes que codifican estas elongasiasis aún no han aparecido en estas especies. En Drosophila, sólo se han
caracterizado dos elongasiosis, aunque se prevén otras 17 a partir del genoma en base a la homología[119]. La hembra--
specific elongase eloF muestra mayor actividad en las hembras que en los machos, y es capaz de elongar sustratos de ácidos
grasos saturados y monoinsaturados de hasta 30 carbones de longitud[167]. La reducción de la expresión de eloF resulta
en un acortamiento de los dienos insaturados (de (Z, Z)-7,11-nonacosadieno a (Z, Z)-7,11-pentacosadieno) pero no en la
eliminación de hidrocarburos de cadena muy larga, lo que indica la participación de otros elongases[168]. Una segunda
elongasa, elo68a, se encuentra en el bulbo eyaculatorio masculino y en los testículos y se cree que contribuye a la
elongación de la feromona sexual masculina, cVA[169]. Basado en la expresión heteróloga de la levadura, esta elongasa
utiliza como sustratos los ácidos miristoleico y palmitoleico, extendiéndose cada uno de ellos en 2 carbonos cada uno. Para
lograr el producto final, es probable que se necesite una reductasa para eliminar el carbonilo, así como una acetil
transferasa para formar el acetato.

4.2.4.4. Reducciones
Las reductasas de ácidos grasos (FARs) convierten los cursores previos de feromonas grasas-acílicas en alcohol (Fig. 2). Una
gran familia de FARs ha sido identified para Lepidoptera y se cree que su sustrato specificity es la base de la producción de
feromonas[143,170]. Algunas FARs reducen preferentemente los acetatos o ácidos Z o E, tal como se encuentran en
diferentes poblaciones de la palomilla barrenadora del maíz[171]. Otras especies de Ostrina exhiben reductasas con
specificity[172] más amplio. Los ésteres de acetato también pueden ser producidos por acetil transferasas que
convierten alcoholes grasos en acetatos[173-175]. Otras enzimas relacionadas con los grupos funcionales incluyen las
oxidasas productoras de aldehídos. Estos han sido identified de las glándulas de feromonas de H. zea[176] y Manduca
hawkmoths[177].

4.2.5.5. Citocromo P450s

Los citocromos P450 forman una gran familia multigenética que cataliza una gama extremadamente diversa de reacciones
químicas, aunque una de las reacciones más comunes catalizadas por los citocromos P450 es una reacción de la
monooxigenasa[178]. En muchas especies de insectos, el paso de la síntesis de CHC en final requiere la separación del
precursor de aldehído de cadena larga a un hidrocarburo[179]. Recientemente, utilizando una combinación de genética y
bioquímica, el producto del gen citocromo P450 Cyp4g1, se ha demostrado que cataliza el paso de carbonilación oxidativa
en los envocitos productores de feromonas de Drosophila[180]. La expresión silenciosa del gen Cyp4g1 en los ovocitos
redujo drásticamente los niveles de CHC. La subfamilia de la enzima Cyp4g1 también se sirve en abejas melíferas y pulgones
y se cree que su innovación ha permitido que los insectos se adapten a ambientes no acuáticos al proporcionar una capa
cerosa e impermeable en forma de CHC. Además de Cyp4g1, otros citocromos P450s también han sido implicados en la
síntesis de feromonas en houseflies[181] y Lepidoptera. Por ejemplo, en la lombriz de la caída Hyphantria cunea, la epoxiasa
Cyp341b14 cataliza la formación del anillo epoxi en dos de los cuatro componentes de la feromona sexual: cis-9,10-epoxy-
(3Z,6Z)-3, 6-henicosadiene y cis-9,10-epoxy-(3Z,6Z)-1,3,6-henicosatriene[182].

4.2.6.6. Enzimas relacionadas con HMG-CoA

Los isoprenoides (que se forman de 1 a 6 unidades de isopreno de carbono five) son otra clase química común de feromonas
utilizadas por especies de corteza y escarabajos del pino. Muchos de los compuestos monoterpenoides se producen de
novo a partir de acetato, mevalonato y glucosa o modified a partir de terpenos de pino huésped como los vapores de
mirceno[183]. La incorporación de acetato radiomarcado inyectado y mevalonato en los productos de feromonas
proporcionó pruebas de la síntesis de isoprenoides de novo (revisadas en[184]). Dos importantes enzimas reguladoras
contribuyen a la fase inicial de la producción de monoterpenos: HMG-CoA (3-hidroxi-3-metil-glutaril-CoA) sintasa y HMG-
CoA reductasa. Tres enzimas ya estaban bien caracterizadas en los sistemas de vertebrados como las principales enzimas
de control de la velocidad involucradas en la vía del mevalonato y en la síntesis del colesterol. Los homólogos
correspondientes fueron identified de varias especies de escarabajos de la corteza y del pino que utilizan la biología
molecular para examinar una biblioteca de marcas de secuencia expresada[185-187]. La expresión de la HMG-CoA
reductasa se localizó posteriormente en el intestino medio de los machos[188].

4.3. Estrategias para identificar los genes de síntesis de feromonas

Aunque numerosas categorías de ácidos grasos modification enzimas involucradas en la síntesis de feromonas han sido
identified, no todos los genes codificadores han sido anotados en el número cada vez mayor de genomas de insectos
secuenciados. Es probable que la mayoría de estas enzimas se utilicen en la síntesis de compuestos derivados de ácidos
grasos implicados en otros aspectos del metabolismo y la fisiología. Sin embargo, se pueden utilizar varias estrategias para
identificar las enzimas que intervienen en la síntesis de feromonas. Primero, la hibridación in situ es útil para visualizar sitios
celulares de expresión génica en tejidos productores de feromonas. En segundo lugar, la tecnología de secuenciación de
próxima generación (NGS) se aplica rutinariamente para describir el transcriptoma de las glándulas feromonas[189-191].
La combinación de NGS con el análisis bioinformático de un número creciente de genomas publicados ha permitido una
rápida identification de candidatos a enzimas putativas en muchas especies"no modelo". En última instancia, sin embargo,
la función y la expresión in vivo de la enzima candidata requiere validación. El uso creciente de métodos como la
interferencia de ARN, los transgénicos y las herramientas de edición del genoma ayudará en este sentido[191-195].

5. Métodos para el descubrimiento y detección de feromonas

La separación cromatográfica combinada con la espectrometría de masas (MS) es el principal método analítico utilizado
para la detección y elucidación estructural de feromonas. La masa de la molécula intacta (es decir, la del ión molecular)
proporciona una asignación preliminar de la composición elemental y a menudo permite la asignación de características
tales como el grado de saturación. Se puede obtener más información estructural a partir del patrón de fragmentación tras
la disociación de los iones moleculares. Los patrones de fragmentación característicos pueden producirse ya sea dentro del
proceso de ionización inicial[por ejemplo, utilizando la ionización de electrones (EI)] o sometiendo determinados iones a la
EM en tándem. A continuación discutimos los métodos más comúnmente usados para la detección y caracterización de
feromonas en MS y tándem, además de algunas innovaciones recientes que han ampliado las posibilidades analíticas,
particularmente con respecto a las feromonas polares y de mayor peso molecular.

5.1. Cromatografía de gases

La cromatografía de gases es el método de detección más utilizado, quantification, y la caracterización estructural de

feromonas volátiles. Los extractos de lípidos cuticulares de los lavados de todo el cuerpo con moléculas volátiles o
disolventes recogidas del espacio de cabeza de un volumen cerrado se introducen en el sistema y la columna mediante
inyección o desorción, respectivamente. Los compuestos se separan en función de su presión de vapor y affinity para la
fase estacionaria de la columna. Una vez eluidos de la columna, los compuestos se detectan comúnmente por detección de
ionización (FID) o por espectrometría de masas. Con FID, la combustión de los compuestos y la ionización en un hidrógeno
flame produce un cambio en la conductividad medida por los electrodos del detector. El cambio en la conductividad
eléctrica es proporcional a la concentración del analito. La identidad del compuesto se basa en los tiempos de retención
conocidos (la rapidez con la que el compuesto llega al detector), que antes se disuadían de ser extraídos con compuestos
sintéticos.
Los compuestos eluidos de la columna también pueden ser detectados por la EM tras la ionización por EI. La EI suele
producir iones moleculares intactos y patrones distintos de fragmentación que pueden utilizarse para buscar en una base
de datos de espectros como el Registro Wiley de Datos Espectrales de Masas[196] y la base de datos del Instituto Nacional
de Normas y Tecnología[197]. El análisis GC-MS es particularmente útil para diferenciar entre alcanos ramificados y lineales,
ya que cada clase de molécula tiene un índice de tiempo de retención característico y produce distintos patrones de
fragmentación. Sin embargo, la determinación de características estructurales como la posición y la estereoquímica de los
grupos funcionales y los enlaces dobles a menudo requiere una derivatización química antes del análisis GC-MS. Al igual
que con el análisis FID, la disponibilidad de estándares sintéticos es útil para el análisis estructural confirmation Se espera
que las versiones sintéticas de compuestos naturales presenten idéntico comportamiento cromatográfico y patrones de
fragmentación.
Aunque se utiliza comúnmente para la cuantificación y caracterización estructural de feromonas volátiles, el análisis de GC
tiene varios inconvenientes. En primer lugar, en las condiciones estándar utilizadas para el análisis de hidrocarburos, la GC
se limita a la detección de lípidos apolares de bajo peso molecular. Sin embargo, el uso de columnas de alta temperatura y
diferentes parámetros de temperatura e ionización pueden permitir el análisis de moléculas más pesadas como los
triacilglicéridos[198]. En segundo lugar, la alta cantidad de energía interna que se imparte al analito durante la EI puede
causar una rápida fragmentación del ión padre radical, lo que hace que sea difficult el que identifique la masa molecular
intacta. El GC-MS basado en EI en frío recientemente introducido proporciona una mejora a este respecto al mejorar la
detección de iones moleculares intactos mediante el uso de temperaturas de elución más bajas[199]. Tercero, la
preparación de la muestra puede llevar mucho tiempo, ya que requiere la recolección y extracción de múltiples individuos.
Además, el análisis de la muestra requiere, en promedio, entre 30 y 45 minutos. Por último, la elución de todo el cuerpo
evita la información espacial y previene la aparición de sitios especializados de secreción como las glándulas.
Para lograr un análisis de resolución espacial con GC, la microextracción en fase sólida fibers (SPME) se ha combinado con
el análisis de GC para permitir el muestreo de regiones anatómicas discretas. Un delgado fiber recubierto con un material
adsorbente se utiliza para adsorber moléculas del espacio de cabeza o directamente de las cutículas de los insectos por
contacto físico. Un número de recubrimientos de fase estacionaria están disponibles dependiendo de la polaridad de los
compuestos de interés. Los compuestos se vaporizan directamente de fiber después de colocarlos en una entrada de GC.
Además de permitir el muestreo con resolución espacial, SPME tiene otras ventajas en términos de preparación de
muestras. Por ejemplo, la emisión de feromonas se puede medir en tiempo real a partir de insectos vivos[200], la
recolección de muestras se puede realizar en field, y hay menos riesgo de extraer lípidos de fuentes internas. En términos
de cuantificación, análisis recientes de CHCs de D. melanogaster mostraron que las muestras obtenidas de SPME exhiben
las mismas proporciones cuantitativas que las muestras preparadas por extracción[201]. A pesar de estas ventajas, el
muestreo por SPME tiene varios inconvenientes: first, las muestras recogidas en el fiber se agotan completamente por
inyección en el GC. Segundo, es difficult para derivar muestras adsorbidas en un SPME fiber. Tercero, diferentes
composiciones de fiber son selectivas para diferentes clases de químicos.

5.2. Análisis directo en espectrometría de masas en tiempo real

El análisis directo en tiempo real (DART) MS es un método de espectrometría de masas ambiental recientemente
introducido[202]. La ionización de los analitos tiene lugar en condiciones de presión atmosférica. Se aplica un alto potencial
eléctrico a una corriente de gas helio, generando iones (que son filtered para el análisis DART) y átomos de helio en estado
excitado (Fig. 3A). En una de las vías de ionización propuestas, los átomos de helio excitados interactúan directamente con
el agua en la atmósfera, facilitando la formación de cúmulos de agua protonada. Los grupos de agua cargados transfieren
fácilmente un protón a muchos tipos de moléculas de analito, generando moléculas protonadas ([M+H]+). El calentamiento
de la corriente de gas facilita aún más el proceso de desorción/ionización.
Varias características de DART MS son ventajosas para los estudios de ecología química. En primer lugar, las muestras
pueden colocarse directamente en una fuente de iones al aire libre y requieren una preparación mínima. La fuente
configuration acomoda una variedad de formas y tamaños de muestras, incluyendo insectos intactos, partes del cuerpo
disecadas, sondas SPME u otras, y tubos capilares sumergidos en extractos líquidos. Para los estudios de insectos, los
individuos intactos se manipulan con pinzas y se colocan directamente en la fuente, lo que produce mediciones casi
instantáneas de la sustancia química profile En términos de capacidad analítica, DART MS permite la detección de más
moléculas polares y de mayor peso molecular (incluyendo, por ejemplo, tricilglicéridos, alcoholes grasos de cadena larga y
esteroles) que pueden pasar desapercibidas para GC-MS en condiciones estándar. Además, la EM DART puede adaptarse
para el análisis de feromonas profiles de animales vivos en paralelo con el comportamiento[203].
Una desventaja importante de DART MS en comparación con GC-MS es que bajo condiciones estándar, no se detectan
hidrocarburos saturados. Sin embargo, se ha establecido un método para mejorar la detección de estos compuestos en
modo de iones negativos[204]. Otro inconveniente es que la cuantificación absoluta se complica por dos aspectos. Primero,
la ionización DART puede causar la extracción de hidruros de hidrocarburos saturados, produciendo[M H]+ iones[205]. La
masa (formalmente, relación masa/carga, m/z) de los hidrocarburos extraídos por hidruros es indistinguible de las
señales[M+H]+ de los hidrocarburos insaturados aislados. Por lo tanto, la señal de masa puede atribuirse a dos clases
diferentes de hidrocarburos. Además, la intensidad de la señal puede variar dependiendo de dónde se coloque la muestra
en la fuente. Agregar un estándar a la superficie de la muestra o a la sonda puede ayudar a proporcionar una referencia
interna para objetos sólidos relativos. El uso de un micromanipulador o un portamuestras estandarizado también puede
ayudar a la colocación consistente de la muestra.

5.3. Espectrometría de masas de desorción/ionización asistida por láser de matriz

La espectrometría de masas de desorción/ionización asistida por láser (MALDI) permite el análisis de moléculas de una
amplia gama de clases biomoleculares. Sin embargo, el método se aplica más comúnmente a compuestos más polares. Un
rayo láser enfocado, típicamente con una longitud de onda UV de 337 o 355 nm y un diámetro de 200 lm o menos, se utiliza
para irradiar la muestra líquida o sólida. La muestra está recubierta o co-cristalizada con una matriz química que facilita la
absorción de la energía láser y su posterior desorción e ionización. El análisis MALDI se realiza típicamente bajo condiciones
de vacío (ya sea bajo alto vacío, p < 10-6 mbar o rango de presión media, p 0.1-2 mbar). Una ventaja del método para el
análisis de lípidos es la capacidad mejorada para detectar más moléculas polares y de mayor peso molecular. Además, los
procesos de ionización producen relativamente pocos fragmentos y, en general, permiten la detección de iones moleculares
intactos, facilitando así la determinación de elementos. Estas características se utilizaron con gran eficacia cuando se aplicó
MALDI, en combinación con una matriz litiada, para analizar extractos cutáneos de termitas, hormigas, cucarachas y flesh
flies[206]. Se detectaron hidrocarburos apolares de cadena larga e inesperadamente pesados, algunos de los cuales
contenían más de 70 átomos de carbono.
Una variación del método, la ionización por desorción láser (LDI) MS, omite el uso de la matriz. Los insectos o partes de
insectos se colocan directamente en el instrumento y se analizan con un rayo láser enfocado bajo condiciones de presión
intermedia (1-2 mbar) en la composición de la fuente (Fig. 3B). Es probable que los procesos térmicos contribuyan a la
generación de iones y pueden ser facilitados por cromóforos de expresión endógena en las cutículas que ayudan a absorber
la energía láser[207,208]. Los iones se detectan como iones conductores de metales,[M+K]+ o[M+Na]+. Se han detectado
alcanos, azúcares, ácidos grasos y lípidos de mayor peso molecular como los triacilglicéridos directamente de insectos
intactos[22,24,207]. En general, la MALDI y la LDI MS son más adecuadas para el análisis de feromonas no volátiles. Al igual
que con DART MS, los insectos intactos pueden ser analizados rápidamente con una preparación mínima de la muestra. En
condiciones normales, no se observa ningún daño visible en las cutículas después de la interrogación con láser.
Una ventaja distintiva de la LDI MS es la capacidad de proporcionar profiling espacial de sitios especializados en la
producción de feromonas[24,209]. La resolución lateral, determinada por el tamaño del punto focal del láser, oscila entre
unos pocos diez y unos pocos cientos de micrómetros.

Esta función se ha utilizado para mostrar los cambios en el sitio web -specific en la página web química profiles después de
la interacción de comportamiento. Por ejemplo, después del apareamiento de Drosophila, se detectaron esferomonas
sexuales masculinas en regiones posteriores femeninas[22,85]. De manera similar, las feromonas masculinas del sepsid fly
Themira superba fueron detectadas en las alas de las hembras después de la transferencia de los machos durante el
apareamiento[209]. En particular, los ajustes de presión elevada, que son un parámetro esencial para que este método
funcione, no son posibles actualmente con los instrumentos estándar MALDI MS y requieren la personalización de la fuente
de iones.
El uso de MALDI y LDI tiene varias desventajas. Primero, al igual que con DART MS, los alcanos no se detectan bajo
condiciones estándar, excepto con el uso de una matriz. Además, dado que la determinación de la posición elemental de la
comunicación se basa únicamente en mediciones de masa exactas, dependiendo de la precisión de la masa y de la
resolución del instrumento, es posible que no sea posible distinguir entre especies químicas que son casi isobáricas entre
sí. Por último, el análisis no proporciona información sobre la estereoquímica. Sin embargo, la determinación de la ubicación
de doble enlace y de la posición del grupo funcional puede ser posible con la derivatización antes del análisis de la EM, la
derivatización en fase gaseosa durante el análisis de la EM o mediante el uso de EM en tándem (véase más adelante).
Los ejemplos de DART y LDI MS descritos en esta sección han involucrado principalmente el análisis de insectos intactos o
extracto crudo. Minimizar la preparación de la muestra reduce el riesgo de pérdida de la misma, de oxidación y de
degradación. Sin embargo, la complejidad química de las muestras no fraccionadas dificulta la caracterización estructural
de moléculas individuales. Además, las señales de compuestos menos abundantes pueden ser suprimidas o mal resueltas
en presencia de moléculas más abundantes. Para abordar el tema de la complejidad química, tanto DART como LDI MS
pueden combinarse con varios métodos de fraccionamiento fuera de línea o en línea. Por ejemplo, tras la separación del
extracto lipídico por cromatografía de capa fina (TLC) en clases químicas amplias, los extractos de la placa TLC o de la placa
misma pueden analizarse con ambos métodos MS[210.211]. Las fracciones resultantes de la cromatografía líquida también
podrían prepararse fuera de línea antes del análisis de la EM.

5.4.4. Espectrometría de masas por ionización por electrospray

La ionización por electrospray (ESI) MS genera iones a partir de muestras líquidas en condiciones atmosféricas. La muestra,
disuelta en disolvente, se carga en una aguja o capilar de vidrio o metal, que se coloca delante de la entrada de la MS (Fig.
3C). La aplicación de un alto voltaje conduce a la formación de una niebla de gotas cargadas. A medida que el disolvente se
evapora, la carga es retenida por el analito, generando iones que luego pasan a través del analizador de masa y al detector
(revisado en[212]). ESI MS permite la ionización de una amplia gama de biomoléculas incluyendo lípidos apolares y polares,
péptidos, proteínas y carbohidratos[213]. Además, el emparejamiento de la cromatografía líquida (CL) en línea con ESI MS
puede mejorar la detección de moléculas de baja abundancia, aumentar la resolución analítica y, mediante el uso de
columnas especiales de cromatografía, facilitar identification de estereoisómeros[214]. Por estas razones, el análisis de ESI
MS sirve como un poderoso complemento a GC-MS, particularmente con respecto al análisis de feromonas lipídicas no
volátiles. Por ejemplo, se utilizó un enfoque de EM LC-ESI para identificar supuestas feromonas lipídicas de nematodos a
partir del extracto[215]. A pesar de estas ventajas y de la disponibilidad de ESI MS en muchas instalaciones centrales,
sorprendentemente pocas aplicaciones de ESI-MS para el análisis de feromonas se encuentran en la literatura.

5.5. Métodos en línea para la elucidación estructural

DART, LDI y ESI pueden combinarse con una serie de poderosos métodos en línea para mejorar la elucidación estructural.
La espectrometría de masas en tándem (EM/EM) es una característica común de muchos instrumentos comerciales de EM.
Los iones de una mezcla se aíslan en fase gaseosa según m/z mediante un dispositivo de selección de iones (por ejemplo,
una masa cuadrupolar filter). Los iones seleccionados por la masa están sujetos a la fragmentación por colisión con un gas
inerte (por ejemplo, argón). Cuando se aplica a una amplia gama de clases de lípidos neutros y polares, este proceso permite
cierta elucidación sobre la identidad y posición de los grupos funcionales[216].
Un método en línea recientemente desarrollado llamado disociación inducida por ozono (OzID) facilita la determinación de
la posición de doble enlace mediante la exposición de iones seleccionados por la masa al vapor de ozono dentro del
espectrómetro de masas. El ozono convierte rápidamente los dobles enlaces carbono-carbono en ozonuros. El clivaje en el
sitio de doble enlace pro-duce fragmentos de iones con masas que son indicativas de la posición de doble enlace[217,218].
Por ejemplo, el OzID, se utilizó para identificar especies isobáricas y determinar componentes grasos de acilo encontrados
en feromonas de Drosophila triacylglycerides[24].
La espectrometría de movilidad iónica (IMS) es un tercer método de cromatografía en línea que puede combinarse con la
EM. Las moléculas en fase gaseosa son arrastradas por un field eléctrico a través de un tubo de deriva que contiene un gas
tampón. El tiempo de transición de los iones a través del tubo varía según el tamaño, la carga y la forma. La IM es más
efectiva para separar clases químicas de moléculas (por ejemplo, diferentes clases de fosfolípidos[219]). Dado que la
separación de la movilidad iónica se desvincula del análisis de masa, el IMS puede utilizarse potencialmente para separar
moléculas isobáricas si su sección transversal colisional (es decir, su forma) difiere. Por ejemplo, Dwivedi et al. separaron
con éxito enantiómeros de aminoácidos y azúcares de mezclas racémicas[220]. La EM IMS aún no se ha utilizado para el
análisis de feromonas.

5.6. Cromatografía de gases acoplada a la detección de electroantennogramas.

Una de las herramientas más útiles para la evaluación simultánea de la actividad química y funcional es la cromatografía de
gases acoplada a la detección por electroantenografía (GC-EAD). La separación cromatográfica de un extracto crudo se
divide en dos detectores diferentes: una parte del effluent de la columna GC se transporta a un detector de ionización flame
mientras que la otra parte se sopla sobre un sensor biológico en forma de insecto (Fig. 3D). Los electrodos insertados en las
antenas o tarsos (patas) miden la actividad eléctrica de grupos de neuronas sensoriales. El método ha sido extremadamente
útil para la identification de feromonas emitidas por muchas especies diferentes de insectos y artrópodos, así como para
los olores volátiles de plantas que son atractivas para los insectos[221- 224]. Por ejemplo, el alkyl aldehído nonanal fue
identified como un olor atractivo usado por los mosquitos para find humanos y aves[225]. Una ventaja del GC-EAD es que
el método es sensible a cantidades muy bajas (pg e inferiores) de ligando. Esta característica permite que los componentes
menores de las mezclas de feromonas sean más fácilmente identified La respuesta de EAD también es cuantitativa: para
cada componente individual, la respuesta de EAD se escala cuantitativamente a la cantidad de la molécula detectada.
También se pueden distinguir las respuestas fisiológicas diferenciales a los diferentes componentes de una mezcla de
feromonas, proporcionando información sobre qué componentes tienen más probabilidades de ser funcionalmente
importantes. Una versión más refined de este sistema combina la separación y detección de GC con la grabación de un solo
sensillo. Las grabaciones eléctricas se miden a partir de células sensoriales individuales en lugar de a partir de antenas
completas (que están compuestas por muchos sensores), lo que permite un mapeo funcional de las neuronas individuales
y sus correspondientes proyecciones neuronales. Este método se ha utilizado con un efecto espectacular para identificar
clases únicas de neuronas receptoras olfativas de Drosophila que responden a olores ecológicamente relevantes[226,227].

5.7.7. Espectroscopia de resonancia magnética nuclear

La espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) ha sido considerada durante mucho tiempo el estándar de oro
para la elucidación estructural absoluta.

Sin embargo, se necesitan varios cientos de microgramos a cantidades de miligramos de material puro para el análisis, un
requisito que puede ser un reto para las moléculas de baja abundancia aisladas de productos naturales. Los recientes
avances en la sensibilidad de detección y los métodos de interpretación espectral han permitido utilizar la RMN como
herramienta de cribado para la identificación de moléculas de señalización a partir de mezclas complejas (revisado en[228].
Mediante el uso de una sonda de RMN de volumen reducido, Dossey et al. pudieron analizar las secreciones defensivas de
un solo insecto[229]. Además, los análisis diferenciales de los espectros de RMN 2D permiten comparar los espectros
adquiridos a partir de dos condiciones diferentes. Esta estrategia se utilizó con éxito para identificar feromonas atrayentes
de Caenorhabditis elegans comparando fracciones activas con fracciones inactivas[230]. Una ventaja de la RMN en
comparación con la EM es que hay poco sesgo en los tipos de analitos que se detectan. Las condiciones de ionización por
espectrometría de masas y de preparación de muestras pueden ser considerables en cuanto a los tipos de analitos que se
detectan. Sin embargo, el mayor rango analítico proporcionado por la RMN también resulta en una mayor complejidad
espectral. Actualmente, la interpretación manual de los espectros de RMN lleva mucho tiempo y es muy difícil de realizar.
Se necesitarán métodos computacionales mejorados que proporcionen análisis automatizados para el análisis efectivo de
mezclas biológicas complejas.

6. Más allá del comportamiento: aplicaciones al manejo de plagas y a la biología evolutiva

El impacto de los descubrimientos en la ecología química ha sido de gran alcance, proporcionando aplicaciones directas a
la ciencia agrícola y de la conservación, así como ampliando nuestra comprensión de cómo se diversifican los rasgos
fenotípicos y cómo se forman nuevas especies.

6.1.1. Manejo de plagas

Una promesa importante de la ecología química es que el identification de las moléculas de señalización y su función nos
permitirá manejar mejor las plagas agrícolas y los vectores de enfermedades. Comparado con el uso de pesticidas generales
que pueden ser tóxicos para muchos animales, el control de plagas basado en feromonas es usualmente no tóxico y permite
la manipulación del comportamiento de una especie specific-manner[231]. Se utilizan tres estrategias principales: la
interrupción del apareamiento, la captura masiva y la atracción y muerte. La interrupción del apareamiento opera al
penetrar feromonas sexuales sintéticas en un área amplia, de esta manera interfiriendo con la comunicación química
necesaria para el apareamiento y la fertilización femenina. La interrupción efectiva depende del uso de los datos de los
estudios de comportamiento de field para optimizar parámetros tales como el momento de la liberación de sustancias
químicas, la tasa de liberación, la mezcla de sustancias químicas y la concentración. La captura masiva se basa en atraer
objetivos a una trampa utilizando un señuelo (por ejemplo, atrayentes, señales de agregación y señales de oviposición) para
uno o ambos sexos. El enfoque de atraer y matar combina un atrayente con un insecticida, matando así a los insectos al
proporcionar contacto con un cebo tóxico. Se necesita una concentración más baja de plaguicidas en comparación con un
enfoque basado únicamente en insecticidas. Esta estrategia ha llevado al control exitoso de los gorgojos del algodón,
houseflies, la fruta flies, la aceituna flies, y las polillas de los huertos y ha ayudado a reducir la destrucción de viñedos,
huertos y bosques[6]. También se están desarrollando trampas que utilizan una mezcla de feromonas para atraer a más de
una especie de insectos[232.233].
Un enfoque innovador para el control de plagas mediado por feromonas utiliza la ingeniería genética para producir plantas
capaces de emitir feromonas de insectos. La introducción de un gen de la terpeno sintasa en la Arabidopsis dio lugar a la
producción de (E)-b farnenese, la feromona de alarma de los pulgones[79]. La expresión de este compuesto tiene por objeto
repeler áfidos y atraer simultáneamente al parasitoide pulgón Diaeretiella rapae. Las plantas de trigo que contienen el gen
de la terpeno sintasa se están probando actualmente en field[234].

6.2. Las feromonas como biomarcadores de especies y edades

La catalogación de la diversidad química de los insectos también puede aplicarse a la ciencia de la conservación y a la
taxonomía. Las especies correctas identifica- tion es crucial para los estudios de la diversidad ecológica y la evaluación de
la efficacy de control de plagas. Química profiling de lípidos cuticulares podría proporcionar una forma rápida y económica
de identificar especies, especialmente en el caso de especies crípticas que son indistinguibles sólo por su morfología. En
particular, el lípido cuticular profiles ha demostrado ser útil para identification de varias especies crípticas de hormigas,
butterflies, termitas y escarabajos[235-238]. Otros estudios químicos a gran escala que comparan cientos de especies de
pequeñas polillas del armiño[239], escarabajos de la corteza[240,241] y hormigas[242] han demostrado que las mezclas de
feromonas muestran diferencias cuantitativas y cualitativas distintas entre especies estrechamente relacionadas.
Además de la especie identification, el lípido profiling puede ser útil para la clasificación por edades, un indicador importante
de las tasas de supervivencia diaria que se utiliza para evaluar los métodos eficaces de control de plagas. Varios estudios
han demostrado que los lípidos cuticulares varían con la edad y, por lo tanto, pueden utilizarse para predecir la
edad[29.243.244]. Aunque este enfoque ha sido validado para los mosquitos criados en laboratorio, aún no se ha probado
en field mosquitos[244]. La desventaja del lípido cuticular profiling es que la variación de significant puede introducirse
debido a las condiciones ambientales (por ejemplo, humedad, temperatura), condiciones sociales y dieta[245]. Además,
una evaluación precisa de la edad podría ser difficult si los cambios consisten en sutiles diferencias cuantitativas, que
requieren grandes tamaños de muestra para establecer la fiabilidad estadística. Sin embargo, el lípido cuticular profiling
ofrece un enfoque complementario a otros métodos moleculares e indicadores morfológicos utilizados para la clasificación
por edad y la determinación de especies.

6.3. Contribución de la ecología química a la biología evolutiva

Una de las cuestiones más fundamentales y fascinantes de la biología es comprender cómo se forman las nuevas especies.
Primera hipótesis de Charles Darwin, la competencia por los compañeros es una fuerza impulsora detrás de la
especiación[246.247]. Un corolario de esta teoría es que las preferencias femeninas por rasgos particulares causan la
selección de los machos que expresan esos rasgos en abundancia[248-251]. A lo largo de generaciones sucesivas, tanto el
rasgo como la preferencia se estabilizan. Dado que las feromonas influence reconocen el sexo y las especies en muchos
sistemas, es lógico que un cambio en las señales químicas podría desencadenar la especiación por significantly cambiando
las preferencias de apareamiento[252].

6.3.1. Evolución de la diversidad química en las mezclas de feromonas

Los estudios de cómo las mezclas de feromonas divergen entre especies y los mecanismos genéticos subyacentes ofrecen
excelentes oportunidades para examinar la formación de nuevas especies. En Lepidoptera, se han realizado amplios
estudios de feromonas profiles y se han mapeado a la filogenia[253-255]. Se dispone de datos transcriptómicos detallados
de las glándulas feromonas para varias especies[256-259]. Esta profundidad de información ha permitido rastrear las
diferencias en feromonas profiles entre especies estrechamente relacionadas hasta el nivel de un solo gen. Por ejemplo, se
cree que la activación de un gen no funcional de la desaturasa subyace a la diferencia en la posición de doble enlace que se
encuentra entre dos especies de Ostrinia. Las hembras de Ostrinia furnicalis y O. nubilalis utilizan acetato de tetradecenilo
como feromona sexual. Sin embargo, en O. furnicalis, el enlace doble se coloca entre C12 y C13[260] mientras que en O.
nubilalis, el enlace doble se coloca entre C11 y C12[261]. Dentro de O. nubilalis, la variación alélica en el gen pg-FAR de la
reductasa grasa-acilo subyace en las distintas mezclas de feromonas de las razas E y Z (ver Sección 3.3). Se cree que las
diferentes proporciones de los componentes (E)-11- y (Z)-11-tetradecenilacetato son responsables del fuerte aislamiento
reproductivo entre las dos razas[171].

¿Cómo se traduce un cambio en la feromona profile en un cambio en la preferencia de apareamiento? Roelofs et al.
plantearon la hipótesis de que la atracción de unos pocos hombres raros por el componente novedoso sería sufficient Los
vástagos de tal apareamiento probablemente heredarían tanto el nuevo componente de feromonas como la preferencia
conductual por el componente, dando lugar a una nueva especie[146]. Sin embargo, la reciente findings indica que nuevos
compuestos de feromonas pueden surgir en poblaciones sin que los receptores tengan preferencia por el com-
pounds[262]. En la avispa Nasonia vitripennis, un grupo de tres supuestas reductasas de cadena corta produce un nuevo
componente de feromonas masculinas, 4(R),5(R)-5-hidroxi-4-decanodilo, que no se encuentra en cuatro especies de avispas
estrechamente relacionadas. En particular, ni las hembras de la especie ni las de una especie de avispa relacionada
responden a la feromona. Los resultados indican que los componentes de feromonas pueden surgir espontáneamente y
persistir en ausencia de un receptor.

6.3.2.2. Ecológico influences sobre la evolución de las feromonas

Factores ambientales como la dieta[263], la humedad[116,264] y la temperatura[265] también pueden inducir un cambio
en la feromona profile El trabajo de Etges et al. ha mostrado que en Drosophila arizonae y Drosophila mojavensis
cactofílicas, el hidrocarburo cuticular profiles cambia debido a la dieta de la planta huésped y que este cambio media el
aislamiento reproductivo entre especies estrechamente relacionadas[266,267]. En muchas especies de Dipteranos, los
hidrocarburos cuticulares juegan un papel en proporcionar una capa cerosa en la cutícula para prevenir la desecación,
además de actuar como feromonas[268]. Los dos roles diferentes hacen que los hidrocarburos cuticulares tengan un
potencial ''doble rasgo'' que podría explicar los mecanismos que subyacen a la especiación ecológica[269]. Estos ejemplos
indican que los pequeños cambios en la química, ya sea debido al medio ambiente o a una mutación espontánea, pueden
conducir a grandes cambios de comportamiento y, eventualmente, a eventos de especiación.

7. Conclusiones y orientaciones futuras

La ecología química ha avanzado mucho en las últimas décadas desde que bombykol era first identified Miles de personas
ya no son necesarias para los propósitos estructurales de identification. El análisis de un solo insecto por RMN y
espectrometría de masas se ha vuelto más común y la cantidad de información que se puede obtener de un solo espécimen
es sorprendente. Además, la bioquímica y la regulación de la producción de feromonas están tan claramente delineadas en
algunos sistemas que las plantas pueden ser diseñadas para emitir feromonas de insectos con la estereoquímica apropiada
para controlar el comportamiento de las plagas (y sus depredadores). El rápido progreso ha sido posible gracias al desarrollo
de la bioquímica de los lípidos en la página web fields, ya que muchos de los mismos retos se enfrentan, a saber, la
elucidación estructural, la separación de compuestos quirales, la detección de moléculas de baja abundancia dentro de una
matriz compleja y la síntesis enantioselectiva. La combinación de la EM con métodos de separación en fase gaseosa como
la espectrometría de masas de movilidad iónica es un futuro apasionante refinement que ayudará en la detección y
separación de moléculas isobáricas[270]. Además, la espectrometría de masas por imágenes podría utilizarse para producir
mapas químicos de las secciones de tejidos de insectos y ser potencialmente útil para mapear las glándulas de producción
de feromonas y los precursores biosintéticos que residen en las glándulas[271.272]. Además, la combinación de la
bioinformática y los enfoques transcriptómicos de secuenciación de próxima generación abre la puerta a la descodificación
de la bioquímica de feromonas en muchas especies de insectos. Es posible que, por fin, las capacidades analíticas estén
empezando a tener la oportunidad de mantenerse a la altura de la complejidad química que se encuentra en la naturaleza.
En última instancia, sin embargo, las feromonas son defined por su función conductual. La información química tiene que
estar relacionada con el comportamiento - una ciencia para la cual, desafortunadamente, aún no se dispone de una
``Omics''. A medida que comenzamos a desentrañar el significado de estos mensajes químicos utilizados por los insectos
para la comunicación, el estudio de estas pequeñas moléculas de lípidos contribuirá a la gestión de nuestra seguridad
alimentaria mundial, así como a proporcionar importantes conocimientos en el sitio web field de la biología evolutiva.