PRODUCCIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO

Ácido cítrico:

Es un ácido orgánico tricarboxílico que está presente en la mayoría de las frutas, sobre todo en cítricos como el
limón y la naranja. Su fórmula química es C6H8O7.

Es un buen conservante y antioxidante natural que se añade industrialmente como aditivo en el envasado de
muchos alimentos como las conservas de vegetales enlatadas y en la producción de bebidas gaseosas.
En bioquímica aparece como un metabolito intermediario en el ciclo de los ácidos tricarboxílicos, proceso
realizado por la mayoría de los seres vivos.
El nombre IUPAC del ácido cítrico es ácido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxílico.
Usos y aplicaciones:
Los usos aplicaciones que se le dan al ácido cítrico en la industria son variados:

 Industria alimenticia
 Industria de las bebidas
 Imparte un sabor agrio y refrescante para la industria farmacéutica
 Su uso primario es como acidulante

Producción Fúngica de Ácido Cítrico:

La producción de ácido cítrico, preferentemente, se realiza con A. niger en medios con azúcares a pH bajo.
Las razones de preferir A niger sobre otros organismos son:
1. Facilidad de manejo
2. El uso de materia prima, barata como substrato
3. Rendimientos altos y consistentes
4. Económicamente conveniente
Como principal fuente de carbono (sustrato) se utiliza la melaza de caña de azúcar o jarabe de glucosa.

Metabolismo:
El ácido cítrico es un producto intermedio del ciclo de Krebs, es producido a partir de glucosa según la via de la
glicolisis, que en ambiente aeróbico da como resultado la producción de acetil-coenzima A. Esta coenzima entra
en el ciclo de Krebs en donde reacciona con el ácido oxalacético para formar ácido cítrico.
La reacción es catalizada por la enzima citrato cintasa. Luego es necesario bloquear la enzima aconitasa que
cataliza la reacción sucesiva del ciclo de Krebs, en donde el ácido cítrico es transformado en ácido isocitrico. A
tal propósito se puede agregar EDTA (ácido etilendiaminotetraacético) que atua omo secuestrante de Fe, que se
encuentra en la enzima aconitasa mejor que el Fe, bloqueando de este modo la reacción. Pero se debe tener
cuidado de no bloquear toda la enzima aconitasa, ya que se requiere que una parte del citrato complete el cilo
de Krebs para la formación del oxalacetato que participa en la formacíon del citrato.
 Materias primas:
Fuentes de C: los mayores rendimientos se obtienen usando sacarosa y fructosa. Industrialmente se
fermentan soluciones de sacarosa de una concentración comprendida entre 12 y 20%, obtenidas de
melazas de caña de azúcar o remolacha.
Fuente de N: en los medios sintéticos se agregan sales nitrogenadas, generalmente NO3NH4 (0. 5-0.25%).
Usando melaza no es necesario agregar sustancias nitrogenadas. Es importante que la fuente de N sea
escasa respecto a la de C, para limitar el desarrollo del hongo. Si la concentración de N es elevada se forma
mucho micelio y poco ácido cítrico; en cambio, si está en cantidad limitada, el hongo desarrolla, y queda
azúcar (10-15%) que solo se oxida hasta ácido cítrico.
Sales nutritivas: en medios sintéticos se agregan pequeñas concentraciones de PO4H2K (0.03-0.3%) y
SO4Mg (0.05-0.1%).En cantidades mayores aumenta la formación de ácido oxálico y disminuye el
rendimiento en ácido cítrico.

Condiciones ambientales de la fermentación

pH: el empleo de pH bajo favorece la producción de ácido cítrico y suprime la de oxálico, reduce al mínimo
el peligro de contaminaciones y facilita la esterilización. El intervalo de pH más satisfactorio es de 1 a 2.
Debe evitarse en lo posible la formación de ácido oxálico, producto que aparece cuando el pH es mas alto.
Temperatura: la temperatura se encuentra entre 25°C y 35°C.
Aireación: la formación de ácido cítrico es una oxidación y por tanto, el O2 no debe faltar nunca. Para
cultivos de superficie, la circulación de aire saturado de humedad debe ser de 200ml de aire/hr.gr de
micelio. Para procesos a micelio sumergido, la cuba se airea con O2 o aire a presión (P en fermentador=2 a
3 atm), regulando la velocidad del agitador de manera de disolver más de 100mg de O2 /lt*min.

Proceso de producción:
1) Preparación de la melaza: En esta etapa se produce el purificado del jarabe. Se inicia mezclando el
jarabe con agua para diluirlo. Luego se filtra utilizando un filtro rotatorio al vacío para eliminar
impurezas y sólidos suspendidos. Luego se procede a la pasteurización de la mezcla elevando la
temperatura a 105ºc por unos minutos y luego reduciéndola a 37ºc.

2) Fermentación: una vez purificado el jarabe se bombea al reactor. El hongo es inoculado en esta etapa. Se
ajusta el pH y la temperatura y se inyecta aire estéril. Una vez culminado el tiempo de fermentación, que
 es aproximadamente de 10 días, se procede a filtrar utilizando un filtro rotatorio al vacío. El micelio se
puede reutilizar en la producción, y del líquido se recupera el ácido cítrico.

3) Recuperación del ácido cítrico: el líquido obtenido se procede a tatar por el método conocido como cal-
sulfúrico, consiste en agregar “lechada” de Ca(OH)2 formando un precipitado de citrato de calcio que es
filtrado y luego tratado con ácido sulfúrico, para producir sulfato de calcio, que es posteriormente
tratado como un efluente sólido del proceso. La solución restante contiene el ácido cítrico que es
cristalizado en un cristalizador. Los cristales son secado luego en reactor de lecho fluidizado y
clasificados en un clasificador de 4 mallas obteniendo tres clasificaciones: granular, granular fino y
cristal.

Rendimiento:
En cuanto a la evolución de la fermentación, puede decirse que cuando se ha transformado un 90% de la
sacarosa que había en el medio, disminuye la velocidad de incremento de la acidez total. En una
fermentación normal la acidez total aumenta hasta el noveno o décimo día, habiéndose acumulado un 7-8%
de ácido cítrico. Normalmente en este punto se detiene la fermentación, ya que luego existe la posibilidad
de que el hongo comience a utilizar el ácido cítrico como fuente de C, ante la escasez de azúcar disponible.

Reactores:
Todos los reactores utilizados en la industria son del tipo discontinuos.
1. cultivo de Aspergillus estacionario o de superficie
2. cultivo sumergido
Este sistema es más económico y más efectivo debido a la facilidad de manejo comparado con el cultivo
estacionario o en superficie. Se utilizan tanques agitados de 150m3 de capacidad con múltiples
 agitadores que favorecen el crecimiento del micelio en forma de pellets, que aumentan la superficie de
contacto entre el sustrato, el hongo y las burbujas de aire.
También pueden utilizarse reactores del tipo airlift

Ecuaciones del Fermentador tipo Tanque Agitado (Batch)

Balance de masa de células (pellets de Aspegillus Niger):
∂(VX)
= 𝐹𝑜 . 𝑋𝑜 − 𝐹𝑆 . 𝑋𝑠 + 𝑉. (𝑟𝑔− 𝑟𝑑 ) (1)
𝜕𝑡

Donde:
𝐹𝑜 = 𝐶𝑎𝑢𝑑𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎
𝐹𝑠 = 𝐶𝑎𝑢𝑑𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑆𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎
𝑋𝑜 = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑋𝑠 = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝐹𝑖𝑛𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑟𝑔 = 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑔𝑒𝑛𝑒𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠

𝑟𝑑 = 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑟𝑡𝑒 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑟

𝑉 = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑏𝑖𝑜𝑟𝑒𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟

𝐹𝑜 , 𝐹𝑠 , 𝑟𝑑 = 0 (𝑠𝑒 𝑑𝑒𝑠𝑝𝑟𝑒𝑐𝑖𝑎 𝑙𝑎 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑟𝑡𝑒 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑟)

Por lo que la expresión (1) queda de la siguiente manera:

𝜕(𝑋)
= 𝑟𝑔 (2)
𝜕𝑡

Reemplazando los valores de biomasa obtenidos experimentalmente el aumento de biomasa con el tiempo
resulta:
𝑔𝑟 𝑔𝑟
∆𝑋 7 −1 𝑔𝑟
𝑟𝑔 = ∆𝑡
𝑙𝑡
= 7 𝑑𝑖𝑎𝑠−0 𝑙𝑡
𝑑𝑖𝑎𝑠
= 0.857 𝑙𝑡.𝑑𝑖𝑎
(3)
Balance de Consumo de Sustrato
∂(VS)
𝜕𝑡
= 𝐹𝑜 . 𝑆𝑜 − 𝐹𝑆 . 𝑆𝑠 + 𝑉. (𝑟𝑠 ) (4)

𝐹𝑜 = 𝐶𝑎𝑢𝑑𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎
𝐹𝑠 = 𝐶𝑎𝑢𝑑𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑆𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎
𝑟𝑠 = 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜

Por lo dicho anteriormente para la ecuación (1), la ecuación (4) queda expresada como:
𝜕(𝑆)
𝜕𝑡
= 𝑟𝑠 (5)

A los fines prácticos se toman los incrementos totales transformándose así las diferenciales en delta.
𝑔𝑟 𝑔𝑟
∆𝑆 5 −150 𝑔𝑟
𝑟𝑠 = ∆𝑡
𝑙𝑡
= 7 𝑑𝑖𝑎𝑠−0 𝑙𝑡
𝑑𝑖𝑎𝑠
= −20.71 𝑙𝑡.𝑑𝑖𝑎
(6)

El signo negativo indica consumo del sustrato

Balance de formación de producto
∂(VP)
𝜕𝑡
= 𝐹𝑜 . 𝑃𝑜 − 𝐹𝑆 . 𝑃𝑠 − 𝑉. (𝑟𝑝 ) (7)

Donde:
𝐹𝑜 = 𝐶𝑎𝑢𝑑𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎
𝐹𝑠 = 𝐶𝑎𝑢𝑑𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑆𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎
𝑟𝑝 = 𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑔𝑒𝑛𝑒𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜

Aplicando a la ecuación (7) los mismos criterios aplicados anteriormente a la ecuación (1), se obtiene la
siguiente expresión:
𝜕(𝑃)
𝜕𝑡
= 𝑟𝑝 (8)

A los fines prácticos se toman los incrementos totales transformándose asi las difereciales en delta.
𝑔𝑟 𝑔𝑟
∆𝑃 125 −0 𝑔𝑟
𝑟𝑝 = ∆𝑡
𝑙𝑡
= 7 𝑑𝑖𝑎𝑠−0 𝑙𝑡
𝑑𝑖𝑎𝑠
= 17.86 𝑙𝑡.𝑑𝑖𝑎
(9)