Agar

citrato
simmons

Se estiriliza el asa
y tomar una o dos
colonias

Realizar una
emulsion en la gota • Se inocula subiendo en
al final de la cuña zig-zag
del tubo

Utilizar un cultivo
de 24 horas y
incubar a 37°C
durante 24h a 48h

• Si el medio vira a color azul es

citrato positivo por alcalinizacion, si
Informar hubo crecimiento: citrato positivo
por crecimiento y si se mantiene
igual es negativo
LIA (Agar de hierro
lisina)

Estirilizar el asa •Se debe enfrias al lado de

recta la muestra

Se toma el inoculo
y se hace una •Incubar en aerobiosis
siembra por durante 24h a 35°-37°
puncion profunda

• Positiva: Pico
Violeta/Fondo Violeta
• Negativa: Pico
Informar Violeta/Fondo amarillo
• Desaminacion: Pico
rojizo/Fondo amarillo
 azucares

azucares
azucares
Apartir de un Estirilizar el Incubar a 35-
cultivo puro asa recta picar 37°C durante
sembrar en en el fondo y 24 horas en

tres

tres
tres
TSI extender aerobiosis,
sobre el observar e

TSI (Agar

TSI (Agar
TSI (Agar

medio informar

huerro)

huerro)
huerro)
 Agar
manitol • (Agar Chapman)
hipersalino

Esterilizar el asa
redonda

Realizar una • Incubar en

simbra en la aerobiosis a
superficie del 35-37°C por
18 a 24h
inoculo

• Colonias de color
amarillo(Manitol
+)
Informar • Colonias de color
del medio
rojas(Manitol -)
 Para la lectura de indol
Incubar a 37°c por 24 a
SIM 48h
añadir 2 o 3 gotas del
reactivos de kovacs

Lectura de movilidad:
Estirilizar el asa recta y
Observar e informar si Informar si es indol
inocular una o dos
hay presencia de positivo o negativo
colonias
turbidez o crecimiento

Hacer una puncion Lectura de H2S

recta a una observar e infromar si
profundidad de 2 hay enegrecimiento o
tercios no hay cambio de colot
Tioglicolato

Estirilizar
asa,tomar el • Suspension
una
en
solucion
inoculo y salina esteril
suspenderlo

Agregar 1 o 2
gotas de la • Incubar a 35-
muestra a los 37°c durante 18
tubos conteniendo a 24h
medio de cultivo

• Microorganismos aerobios
estrictos
Observar e • Microorganismos anaerobios
informar facultativos
• Microorganismos anaerobios
estrictos
 Se agregan dos a tres gotas de
reactivo rojo de metilo si da color
Prueba rojo rojo en todo el tubo: Rojo de metilo
de metilo Positivo (+) y si da color no viro o
amarillo: Rojo de metilo Negativo (-
)
Tubo con 9 ml con RM-VP,
esterilizar el asa, tomar una o dos
colonias, despues sembrarla (hacer
MR-VP (Rojo de una suspensión en la pared del tubo
Metilo, Voges para depositar las células) y
Proskauer) homogenizar (colocar en el vortex)
y por ultimo Incubar a 37ªC entre 24
a 48 horas.
Se le agrega 2 o 3 gotas de KOH
para neutralizar la acidez de los
ácidos que se formaron y luego 2 o 3
Prueba del Voges gotas de α -naftol y para detectar la
Proskauer acetoína producto de la fermentación
butilén-glicolica, esperar 10 a 20
minutos.
 Si hay aparicion de
burbujas Aparicion de una o dos
Catalasa inmediatamente al burbujas, catalasa
agregarse es catalasa debilmente negativo
positivo

Colocar una gota de No hay formacion de

H2O2 (3%) sobre una Informar burbujas, catalasa
lamina negativo

Coloque la gota sobre

Con el asa redonda
un fondo oscuro para
tomar el centro de una
permitir mejor
colonia de 18h a 24h
oservacion
 Oxidasa

Impregnar tiras de papel filtro con una masa de

bacterias

Agregar sobre el frotis unas gotas de reactivo

de kovacs

Se informa, si en el transcurso de un minuto se

vira a color azul-violeta es oxidasa positivo

Si no hay presencia de color es oxidasa

negativa

CONCLUSIONES

 La presencia H2S en la prueba TSI indica la presencia de bacterias productoras de sulfuro de hidrogeno en esta prueba en donde en las
demás no hubo presencia de esta.
 La principal importancia de las pruebas bioquímicas en la microbiología es que permiten identificar las actividades metabólicas
de bacterias y hongos aislados, con la finalidad de identificarlos, clasificarlos y buscar una solución si estos están afectando algo.
 El correcto desarrollo de la siembra está directamente relacionado con los resultados del cultivo, esto determinado al evidenciar
muestras en donde no se evidencio crecimiento.
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