CÁTEDRA: ANÁLISIS INSTRUMENTAL

Unidad I. Introducción al Análisis Instrumental

Joan Vera PhD.

DESCRIPCIÓN DE LA UNIDAD
El proceso analítico en química
Clasificación de las técnicas instrumentales
MÉTODOS ANALÍTICOS

CUANTITATIVOS CUALITATIVOS
Cantidad relativa de las Identidad de las especies
especies tratadas

CLÁSICOS INSTRUMENTALES

Básicos, usados desde el principio de la Tecnología de punta, técnicas automatizadas, sensibles,

química analítica: específicas:
✓ Espectroscópicas (propiedades ópticas,
✓ Precipitación
electromagnéticas)
✓ Extracción
✓ Separación
✓ Destilación
✓ No espectroscópicas
✓ Espectrométricas
NATURALEZA DEL PROBLEMA:
CARACTERÍSTICA QUE SE VA A ESTUDIAR
DEL ANALÍTO

ANALÍTOS: SOLIDO, LIQUIDO, GAS.

IONES, BIOMOLECULAS, POLARES, APOLARES

MATRÍZ: INTERFERENCIAS DE MATRIZ,

TRATAMIENTO DE MUESTRA, TÉCNICAS
CLÁSICAS.

ESCALA:
CONCENTRACIÓN DEL ANALÍTO
UNIDADES DE CONCENTRACIÓN

OTRAS CONSIDERACIONES:TÉCNICAS
ACOPLADAS: SELECTIVIDAD, SENSIBILIDAD,
(NO)DESTRUCTIVAS, PRECISIÓN,
EXACTITUD, NÚMERO DE MUESTRAS
Algunas técnicas instrumentales
Técnicas espectroscópicas
Espectrofotometría de visible y ultravioleta
Espectrofotometría de fluorescencia y
fosforescencia
Espectrometría atómica (emisión y
absorción)
Espectrofotometría de infrarrojo
Espectroscopía Raman
Espectroscopía de rayos X
Espectroscopía de resonancia magnética
nuclear
Espectroscopía de resonancia de espin
electrónico (o de resonancia paramagnética
electrónica)
Técnicas cromatográficas
Cromatografía de gases
Técnicas de cromatografía líquida de alta
resolución (NP, RP, Iónica, GPC,
Inmunoafinidad,
Técnicas electroquímicas
Potenciometría (electrodos de pH y
selectivos de iones)
Voltamperometría
Técnicas voltamperométricas
Técnicas de redisolución
Técnicas amperométricas
Coulombimetría
Electrogravimetría
Técnicas de conductancia
Técnicas diversas
Análisis térmico (DSC)
Espectrometría de masas
Técnicas cinéticas
Técnicas conjuntadas o acopladas
(GC-MS) (cromatografía de gases -
espectrometría de masas)
(ICP-NIS) (plasma con acomplamiento
inductivo-espectrometría de masas)
(GC-IR) (cromatografía de gases -
espectrometría de infrarrojo)
(MS-MS) (espectrometría de masas-
espectrometría de masas)
Técnicas radioquímicas, incluyendo el
análisis por activación de neutrones
GENERALMENTE ESTAN CONTITUIDOS POR:

•Dispositivo de carga de muestra

•Sistemas de toma y dispensación de muestra
•Sistema de dispensación de reactivos
•Dispositivo de muestras y reactivos
•Baños de incubación
•Detectores
•Procesador de datos
•Impresora
•Compartimiento de desechos biológicos
LA RADIACIÓN ELECTROMAGNÉTICA
DUALIDAD ONDA-PARTÍCULA
Principio de Incertidumbre de Heisenberg:

Es imposible determinar exactamente la posición y el momento (y por tanto la

velocidad) de un sistema físico al mismo tiempo. En mecánica cuántica, la relación
de indeterminación de Heisenberg o principio de incertidumbre afirma que no se
puede determinar, simultáneamente y con precisión arbitraria, ciertos pares de
variables físicas, como son, por ejemplo, la posición y el momento lineal (cantidad
de movimiento) de un objeto dado
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
INTERACCIÓN ENERGÍA-MATERIA
MECANISMOS DE RELAJACIÓN
DIAGRAMA DE JABLONSKI
 La señal, lleva información
SEÑAL acerca del analíto de
interés para el científico
ANALÍTO
El ruido, es información extraña
OBSERVABLE ANALÍTICO que no se desea porque degrada la
exactitud y precisión de un análisis
MEDIDA ANALÍTICA y también coloca un límite inferior
en la cantidad de analíto que se
RUIDO puede detectar.
 Conceptos importantes
Precisión: Concordancia de datos realizados de la misma forma; requiere de repeticiones analíticas.

Exactitud: Mide los errores sistemáticos. Se define como la diferencia de la mitad de los análisis realizados y el valor
verdadero.
Mide el error sistemático, o determinado de un método analítico.
Exactitud = μ – xt
μ es la medida de la población para la concentración de analíto de una muestra cuya concentración verdadera es xt.
Requiere analizar estándares de referencia
Sensibilidad: Es la capacidad de un método o instrumento de discriminar entre pequeñas diferencias en la
concentración del analíto.

Depende de:
– La pendiente de la curva de calibración
– Reproducibilidad o precisión del sistema de medida.

Definición cuantitativa:
– Sensitividad de calibración (IUPAC):
• Pendiente de la curva de calibración del analíto de interés

S = mC + Sbl
• S señal analítica
• m= pendiente de la recta de calibrado
• C= Concentración
• Sbl= señal promedio del blanco
Límite de Detección: Concentración o peso mínimo de analíto que puede detectarse para un nivel de confianza
dado.
Depende de:
– Relación entre la magnitud de la señal analítica con el valor de la fluctuaciones estadísticas
de la señal del blanco.

La mínima señal analítica distinguible Sm se toma como la suma de la señal media del blanco Sbl más un múltiplo k de la
desviación estándar (sbl) del mismo:
Sm = Sbl + (k)Sbl

Estadísticamente se considera que para k=3, el nivel de confidencia de detección es del 95%.

Intervalo de Concentración Aplicable

Intervalo útil de un método analítico: intervalo entre la concentración más pequeña con la que pueden realizarse medidas
cuantitativas (LOQ-limit of cuantitation) hasta la concentración a la que la curva de calibrado se desvía de la linealidad.
(LOL-limit of linearity)
Selectividad

Es el grado de ausencia de interferencias debidas a otras especies contenidas en la matriz de la muestra.

Cuando se habla de muy selectivo nos referimos a la ausencia de interferencias, esto va a depender del método y de la
naturaleza de la matriz. Los métodos de espectroscopia atómica son un ejemplo de métodos muy selectivos, los de
espectroscopia nuclear lo son menos, los electroanaliticos son los que menos selectividad tienen, esto es debido a que
están basados en potenciales redox.
 PORCENTAJES

UNIDADES FÍSICAS

PARTES
SOLUCIONES DE LABORATORIO
RUIDO INSTRUMENTAL ANALÍTICO

RUIDO QUÍMICO
El ruido químico surge de una serie de variables incontrolables que afectan las
características químicas del sistema que se analiza.

Micro fluctuaciones de Humedad relativa Incidencia de luz

presión y temperatura (radiación)

Afectan constante Estratificación de Sistemas

de equilibro los sistemas fotosensibles

RUIDO INSTRUMENTAL
El ruido instrumental se relaciona con cada componente de un instrumento; es decir, con la fuente, el transductor de entrada,
los elementos que procesan la señal y el transductor de salida. Además, el ruido de cada uno de estos elementos puede ser de
varios tipos y puede surgir de varias fuentes. Así, al final se observa que el ruido es un compuesto complejo que, por lo
común, no se puede caracterizar por completo. Ciertas clases de ruido instrumental son reconocibles:

1) Ruido térmico o de Johnson; 2) Ruido de disparo; 3) Ruido fluctuante o 1/f, y 4) Ruido ambiental.
Amplificador operacional

Un amplificador operacional, a menudo

conocido op-amp por sus siglas en inglés
(operational amplifier) es un dispositivo
amplificador electrónico de alta ganancia
acoplado en corriente continua que tiene dos
entradas y una salida. En esta configuración, la
salida del dispositivo es, generalmente, de
cientos de miles de veces mayor que la
diferencia de potencial entre sus entradas.

Transductores de señal

La conversión analógica-digital consiste en la

transcripción de señales analógicas en señal
digital, con el propósito de facilitar su
procesamiento (codificación, compresión,
etcétera) y hacer la señal resultante (digital)
más inmune al ruido y otras interferencias a
las que son más sensibles las señales
analógicas
 Ruido térmico o de Johnson
El ruido térmico es causado por la agitación térmica de los electrones u otros portadores de carga en resistores, capacitores,
transductores de radiación, celdas electroquímicas y otros elementos resistivos de un instrumento. Esta agitación de
partículas cargadas es aleatoria y crea irregularidades de carga en forma periódica, las cuales a su vez originan fluctuaciones
de voltaje que aparecen después en la lectura como ruido.

Raíz cuadrática media

del voltaje de ruido
Constante de
Boltzmann 1,38x10-23 Temperatura
J/K en K
Variación de la frecuencia
(ancho de banda de un op-amp
Resistencia del (Hz)
elemento resistivo
en ohms
 Ruido de disparo
El ruido de disparo se encuentra siempre que los electrones u otras partículas cargadas cruzan una unión. En los circuitos
electrónicos típicos, estas uniones se encuentran en las interfases pn; en las fotoceldas y los tubos de vacío la unión es el
espacio evacuado entre el ánodo y el cátodo. Las corrientes comprenden una serie de eventos cuantizados, la transferencia
de electrones individuales a través de la unión. Estos eventos ocurren al azar, y la tasa a la cual se presentan está sujeta a
fluctuaciones estadísticas que se describen mediante la ecuación

Raíz cuadrática media

de la flactuación de la
corriente

Corriente directa Carga del electrón 1,60x10-19 C

promedio
 Ruido fluctuante o 1/f
El ruido fluctuante se caracteriza por tener una magnitud que es inversamente proporcional a la frecuencia de la señal
observada; a veces se denomina ruido 1/f (uno sobre f ) como una consecuencia de lo anterior. La causa del ruido
fluctuante no se entiende del todo; es ubicuo y es reconocible porque depende de la frecuencia. El ruido fluctuante se
vuelve insignificante a frecuencias menores a 100 Hz

Ruido ambiental
Relación Señal/Ruido y Criterios de Calidad
𝑆 𝑝𝑜𝑡𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑒ñ𝑎𝑙 Estadísticamente se establece que debe ser
= mínimo 3:1
𝑅 𝑝𝑜𝑡𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎𝑙 𝑑𝑒𝑙 𝑟𝑢𝑖𝑑𝑜
MEJORADORES DE LA SEÑAL

Amplificadores de Filtración Demodulación

Conexión a Amplificadores
diferencia y de Modulación
tierra y blindaje analógica sincrónica de cierre
instrumentación
Métodos con Programas (SOFTWARE)

Promedio de conjuntos
En el promedio de conjunto, conglomerados sucesivos de
información almacenados en la memoria como matrices se
recolectan y se suman punto por punto para hacer un
promedio, al cual se le llama a veces coadición. Después de
que la recolección y la suma están terminadas, los datos se
promedian dividiendo la suma de cada punto entre los
conjuntos de datos sumados.
Promedio por Grupos
Se trata de un procedimiento para uniformar las irregularidades e
intensificar la relación señal/ruido en una onda, y la suposición es
que estas irregularidades son resultado del ruido. Es decir, se supone
que la señal analítica analógica varía sólo lentamente con el tiempo y
que el promedio de una cantidad pequeña de puntos adyacentes es
una mejor medida de la señal que cualquiera de los puntos
individuales.
Filtración digital
Se obtiene con la ayuda de diversos procedimientos distintos numéricos muy bien caracterizados, sin olvidar el promedio de
conjunto
Criterios de selección de un método analítico
Para poder seleccionar correctamente un método analítico, es esencial definir con claridad la naturaleza del problema
(fase pre analítica), y esta definición requiere contestar las siguientes preguntas:

1.- ¿Qué exactitud se requiere?

2.- ¿De cuanta muestra se dispone?

3.- ¿En que intervalo de concentración está el analíto?

4.-¿Cuáles son las posibles interferencias para el analíto?

5.-¿Cuál es la naturaleza fisicoquímica de la matriz?

6.-¿Cuántas muestras hay que analizar?

Los parámetros de calidad más importantes y a tener en cuenta son:
· Precisión

· Exactitud
· Sensibilidad
· Limite de detección
· Intervalo de concentración aplicable
· Selectividad
Otros parámetros menos importantes son:
· Velocidad
· Facilidad y seguridad
· Habilidad o experiencia del operador
· Coste y disponibilidad del equipo necesario
· Coste de la muestra
· Contaminación en el análisis