TÉCNICAS PARA ESTUDIO DE CÉLULAS: TINCIÓN CELULAR

Daniela Jiménez, Gissel Quiñonez, Shirly López, Nora Gómez, Lizbeth Sánchez,

Michael Núñez

INTRODUCCIÓN los diferentes niveles de organización de

la materia. De aquí se hace necesario teñir

Las células son pequeñas y
las células puesto que son pequeñas,
complejas, las células miden
incoloras y traslúcidas. Una tinción es un
aproximadamente de 5 a 50 micras, por
proceso por el cual las moléculas de un
ello es difícil observar sus estructuras y
colorante se absorben a una superficie,
descubrir su composición molecular a
incrementando el contraste entre la célula
simple vista. Nuestra capacidad de ver los
y su entorno. El uso de colorantes permite
detalles estructurales de las mismas
cambiar el color de las células de los
depende de los instrumentos de que
microorganismos y poder realizar la
dispongamos. Para estudiar la estructura
observación en microscopio óptico.
de las células, tejidos, flagelos, esporas,

cápsulas, paredes celulares, entre otros De aquí se puede decir que los colorantes

que constituyen los componentes del se clasifican en:

cuerpo humano y organismos

• Colorantes naturales: animales y
pluricelulares, el hombre ha desarrollado
vegetales
diversos métodos y técnicas, y ha ido
• Colorantes sintéticos (colores de
perfeccionando los instrumentos
anilina): ácidos, básicos, neutros e
necesarios para conocer con más
indiferentes.
profundidad la morfología y función de
¿Qué es una tinción? Los colorantes más usados son:

azul de metileno, cristal violeta, safranina,

La tinción es un proceso por el
estos son catiónicos y se combinan
cual las moléculas de un colorante se
fuertemente con componentes celulares
absorben a una superficie. El uso de
cargados negativamente, como los ácidos
colorantes permite cambiar el color de las
nucleicos y los polisacáridos ácidos.
células de los microorganismos y poder

realizar la observación en microscopio Las células generalmente son

óptico. Dado que las bacterias son casi tratadas para coagular el protoplasma

incoloras, no presentan contraste con el antes de teñirlas, proceso conocido como

medio en el cual se encuentran fijación. Después de esta habitualmente se

suspendidas y no pueden observarse realiza la tinción. La fijación produce

claramente sin algún tratamiento previo. generalmente encogimiento de las células,

De acuerdo a la reacción que ocurre, la tinción por el contrario, hace que las

existen diferentes tipos de tinción: células parezcan mayores de lo que son

realmente.
· Simple: el colorante utilizado sirve

solo para denotar la morfología celular. Algunos colorantes teñirán mejor

solos después de que la célula haya sido

· Diferencial: el colorante utilizado
tratada con otra sustancia química, que no
pone de manifiesto diferencias entre
es un colorante por sí mismo. El
células bacterianas o entre partes de una
mordiente se combina con un
misma célula, estas técnicas utilizan más
constituyente celular y lo altera de manera
de un colorante o bien ciertos reactivos
que ahora sí podrá atacar el colorante.
complementarios para la tinción.
[ CITATION Qui14 \l 9226 ]
 celular y funcionan como poros a través

de los cuales las moléculas se pueden

Conceptos básicos.
difundir.
* Tinción primaria: es el
* Tinción Negativa: es una
colorante principal que se va usar para
técnica de microscopía que permite
teñir en un principio a las células.
contrastar las muestras mediante una
* Mordiente: es la sustancia
sustancia opaca a los fotones
que sirve para fijar los colorantes en la
(microscopía óptica) o a los electrones
tinción.
(microscopía electrónica).

* Agente decolorante: es como

* Preparación en fresco: La
su nombre lo indica, el agente que ayuda
forma más simple de preparar un
a decolorar una parte de las células que se
espécimen para su examen microscópico
han teñido.
es hacer una preparación en fresco. Una

* Tinción de contraste: es la preparación en fresco simple ("entre porta

sustancia que contra tiñe las células que y cubre") consiste en colocar una gota de

han sido previamente decoloradas y líquido con los microorganismos sobre un

además le da un color diferente de la portaobjetos y a continuación cubrirla con

primera vez que se tiño. un cubreobjetos.

* Porinas: Las porinas son * Peptidoglicano: El

proteínas con estructura barril β formadas peptidoglicano (PG) es una

por láminas β.Pertenecen a las proteínas macromolécula única, con enlaces

integrales de membrana, que son las que altamente entrecruzados, forma una bolsa

se ubican a través de una membrana que rodea a la membrana celular

bacteriana y que concede rigidez a la 3. Se agrega una gota de agua a

envoltura. la muestra y se le pone un

portaobjetos.
4. Se observa en el microscopio

Metodología: con aumentos 10x y 40x

5. Se le agrega una gota de lugol

Para poder familiarizarnos más en el borde del cubreobjetos y

con las tinciones simples, se realizaron se observa al microscopio

procesos con distintas muestras, nuevamente.

procediendo de la siguiente manera:

Tejido adiposo:

Cloroplastos en elodea:
1. Se toma una pequeña cantidad

1. Tomamos un pequeño trozo de de tejido animal grasoso (grasa

hoja de elodea. de pollo)

2. Se coloca en un portaobjetos, 2. Se coloca la muestra en un

se le agrega una gota agua portaobjetos y se le agrega un

destilada y se cubre con un poco de sudan III

3. Se cubre con un portaobjeto y
cubreobjetos.
3. La llevamos al microscopio y se lleva a observación con

la observamos con los objetivos de diferentes

objetivos de 10x y 40x aumentos.

Núcleos en células de cebolla:

1. Se toma un trozo del tejido

epidérmico de la cebolla.
2. Se coloca en un portaobjetos, Luego de realizar la práctica se logró

evitando que queden arrugas. observar diferentes muestras con total

nitidez, esto demuestra que el

microscopio es fundamental en la

observación de microrganismos, estos

fueron las imágenes que se obtuvieron:

Cloroplastos en elodea: 4x

Elodea 10x

10x

Tejido adiposo:

Elodea 40x

10x

100x

Núcleos en cebolla:
CONCLUSIÓN:
 Las tinciones son métodos simples

y eficaces para lograr una mejor

observación de las células, bacterias y

tejidos de los organismos, que, por ende

hace que los resultados de cualquier

procedimiento bacteriológico sean más

acertado y preciso. Además de lo anterior

mencionado, al existir diferentes tipos de

tinción, se podrán lograr diferentes

exámenes y resultados que sin estos

procedimientos sería demasiado

complicado y difícil, retrasando los

avances de cada laboratorio.

BIBLIOGRAFÍA:

Hylary, Q. (29 de Octubre de 2014). Microbiología: Tinción celular. Obtenido de

http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com.co/2014/10/metodos-y-tecnicas-de-
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Barboza, E., Parra, Y., & Mirenis, Á. (Noviembre de 2009). Monografias. Obtenido de
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L.Landolfi, M. (3 de Septiembre de 2011). Monografias. Obtenido de

http://www.monografias.com/trabajos16/microscopio/microscopio.shtml

Y si deseas más información

encuéntralo en las siguientes lecturas:

American Society for Microbiology.

1993. Methods of general microbiology.
Washington, D.C.

Balows, A.; Hausler, W. J. Herrmann, K. L.;

Isenberg, H. D. y Shadomy, H. J.
1991. Manual of clinical microbiology.
5ª ed. Washington D.C.: American
Society for microbiology.

Block, S. S. 1991 Disinfection, sterilization,

and preservation. Philadelphia: Lea aud
Febiger

James, J. y Tanke, H. J. 1991. Biomedical

light microscopy. Boston: Kluwer.