Pruebas generales para Carbohidratos

PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS

M. C. Martínez Martínez (103018011417)

H. D. Pajajoy Muñoz (1061815684)

Biología, Facultad de Ciencias Naturales Exactas y de la Educación, Universidad del Cauca, Popayán Colombia

Recibido: 13 de mayo de 2019

Resumen
Para esta práctica de laboratorio se trabajó con los siguientes carbohidratos almidón
(polisacárido), sacarosa, ribosa, lactosa (disacáridos), glucosa, galactosa, fructuosa
(monosacáridos) a los cuales se les realizaron pruebas como la de molish que evalúa la
existencias de hidratos de carbono en una sustancia, siendo en este caso positiva para
todos los reactivos; la prueba de seliwanoff tuvo resultados positivos en cetohexosas y
aldohexosas (sacarosa, ribosa, fructuosa), tornándose en un color rojo el producto de la
reacción; en la prueba de Bial aquellas muestras con el color verde se catalogan como
positivas, es decir, que contenían pentosas en su estructura; La prueba de benedict que
es específicamente positiva para azucares reductores fue positiva para todos los
monosacáridos y para cetohexosas como la fructuosa; también se realizó una prueba de
solución de yodo para polisacáridos en la cual el único que resulto positivo fue el
almidón gracias a su polisacárido lineal la amilasa; por último se trató las soluciones en
la prueba de barfoed, la cual es específica para monosacáridos, en este caso la glucosa,
galactosa, fructuosa.

INTRODUCCION polímeros que contienen hasta unos 10

Los carbohidratos son biomoléculas
compuestas por carbono hidrógeno y
oxígeno cuya función en los seres vivos
es proporcionar energía2; los
carbohidratos se clasifican en:
Carbohidratos simples conformados por
monosacáridos, que son aldehídos (con
un grupo funcional se denominan
aldosas) o cetonas polihidroxilados (con
un grupo funcional se denominan
cetosas); y Disacáridos formados por
dos monosacáridos unidos mediante un
enlace glucosídico. Cuando un
monosacárido está unido a través de su
átomo de carbono anomérico al grupo
hidroxilo del carbono 4 de otro
monosacárido, el enlace glucosídico se
denomina 1,4. 2
Carbohidratos complejos conformados
por polisacáridos que están formados
por grandes cantidades de
monosacáridos conectados por enlaces
glucosídico. Los glucanos más
pequeños, llamados oligosacáridos, son
1
o 15 monómeros y que con mayor
frecuencia se
encuentran unidos a polipéptidos en
ciertas glucoproteínas y a algunos
glucolípidos. 2
existen pruebas para clasificar
carbohidratos, entre ellas encontramos:
Prueba de molish: permite detectar la
presencia de hidratos de carbono en una
muestra; está basada en la formación de
furfural o derivados de éste (originado
por los ácidos concentrados que
provocan una deshidratación de los
azúcares). sirve también para el
reconocimiento general de
carbohidratos donde polisacáridos y
disacáridos se hidrolizan formando
monosacáridos que toman un color
púrpura violeta.6
Prueba de Seliwanoff: esta prueba es
específica para las cetosas. Las cetosas
se deshidratan más rápidamente que las
aldosas, dando furfurales. Estos se
 Título de la práctica

condensan con el resorcinol vasos de precipitado de 100 y 250 mL

produciendo un complejo coloreado. Si tubos de ensayo
el tiempo de ebullición se prolonga, gradilla
puede dar también positivo para otros pinzas de madera
azúcares. frasco lavador
Prueba de Bial: el reactivo contiene plancha de calentamiento
orcinol o ácido clorhídrico, el cual
forma complejos de coloración sólo con DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS
las pentosas.6
Prueba de Benedict: permite el Ecuaciones químicas, moléculas:
reconocimiento de carbohidratos
reductores, el de Benedict contiene ion Almidón
cúprico en medio alcalino que se reduce
hasta óxido cuproso en presencia de sacarosa
azúcares con el hidroxilo hemiacetálico
libre.6
Prueba de Yodo: La prueba del yodo es
una reacción química usada para
determinar la presencia o alteración de
almidón u otros polisacáridos.6
Prueba de Barfoed: permite diferenciar
Glucosa
entre monosacáridos y disacáridos
reductores, también contiene ion
cúprico que se reduce hasta óxido
cuproso más rápidamente con los
monosacáridos que con los disacáridos.6

METODOLOGÍA
para esta práctica se utilizaron
soluciones de los carbohidratos: Galactosa
almidón, sacarosa, glucosa, galactosa,
ribosa, fructosa, y una muestra
problema que consistió en la lactosa.
a estas muestras se las trato con los
reactivos de Molish, Benedict,
Seliwanoff, Bial, Yodo y Barfoed.
para cada prueba se utilizaron
cantidades diferentes de los reactivos
que están entre las 2 gotas y los dos
mililitros. así mismo la cantidad de las
soluciones varía de las 8 gotas a un
mililitro. Ribosa
para las pruebas de Seliwanoff, Bial,
Benedict y Barfoed se calentó agua de
manera que una vez ebullió se dispuso a
colocar las muestras durante los tiempos
determinados para cada una.
los materiales utilizados fueron:
pipetas graduadas de 1 y 5 mL

2
 Pruebas generales para Carbohidratos

Fructosa

Reacción de Bial o Orcinol

lactosa

Reacción de Molish

Reacción de Benedict

Reacción de Barfoed
RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH +
Cu2O↓ + 4H+

Reacción de Seliwanoff Prueba de Yodo

3
 Título de la práctica

explica que como en esta prueba no se

realizó un calentamiento prolongado
(más de 15 minutos), no se produjo
isomerización de la glucosa
(aldohexosa) en fructosa (cetohexosas).
la sacarosa da una reacción positiva
debido al hidrólisis ácida de su enlace
glicosídico, cuyos productos son la D-
glucosa y la D-fructosa.1
en la prueba para polisacáridos se
forman complejos coloreados con el
yodo, debido probablemente a la
Vista esquemática de una hélice de absorción del yodo en sus cadenas. La
amilosa, con iones I3− embebidos. amilosa del almidón por ser un
polisacárido lineal produce complejos
La siguiente tabla contiene los datos de un color azul intenso.1
obtenidos durante la práctica los azúcares reductores (monosacáridos
desarrollada en el laboratorio como la glucosa) fueron positivos para
la reacción de benedict puesto que
PRUEBAS pueden ser oxidados por agentes
oxidantes débiles como este reactivo.
Bial
benedict
Molish
seliwanoff

barfoed
carbohidratos

polisacáridos

también es posible observar que la

fructosa, (una cetohexosas) es capaz de
dar positivo, por las condiciones en que
se realiza la prueba: un medio alcalino
caliente la tautomeriza a glucosa (que es
Almidón P A P capaz de reducir al ion cúprico). los
Sacarosa P P M disacáridos como la sacarosa no dan
Glucosa P A P positivo porque los OH del C anomérico
Galactosa P P A P P están siendo utilizados en el enlace
Ribosa P P V glucosídico.2
fructuosa P P M P P en la prueba de Bial la aparición de un
Lactosa P A color o precipitado verde, indicó la
existencia de pentosas en la muestra. el
V=verde; A=amarillo; M=marrón;
furfural generado reacciona con el
P=positivo
orcinol para dar compuestos con este
color en un lapso de 2 a 5 min. 3
ANÁLISIS DE RESULTADOS
el reactivo de barfoed por ser
puesto que la prueba de molish es una
débilmente ácido es reducido solamente
prueba general para determinar si
por monosacáridos, los cuales forman
existen carbohidratos de cinco o más
como producto de reacción oxido
carbonos en una sustancia, los
cuproso.4
resultados obtenidos fueron todos
positivos, el ácido sulfúrico produce la
CONCLUSIONES
deshidratación del monosacárido y el
alfa-naftol la condensación del furfural.1
 Se logro identificar la presencia o
la prueba de seliwanoff dio positivo
ausencia de carbohidratos en las
para las cetohexosas y aldohexosas, el
diferentes muestras de la práctica.
producto de la deshidratación
 El tiempo de calentamiento
(hidroximetilfurfural) se forma
prolongado de las muestras puede
rápidamente para cetohexosas y más
lentamente para aldohexosas, esto

4

dar falsos positivos para presencia
de monosacáridos y polisacáridos.
 La prueba de Yodo no es una
reacción real
CONSULTAS COMPLEMENTARIAS
9.1Escribir todas las reacciones
químicas que se presentan durante la
práctica.
R/Se encuentran en “Resultados”
9.2¿Porque la fructosa da una prueba
positiva para el reactivo de Benedict el
cual es específico para azúcares
reductores?
R/la fructosa (una cetohexosa) es capaz
de dar positivo, esto ocurre debido a que
las condiciones en que se realiza la
prueba: en un medio alcalino caliente la
fructosa se tautomeriza (pasando por un
intermediario enólico) a glucosa y
manosa (que es capaz de reducir al ion
cúprico).
9.3¿Porque se dice que la maltosa y la
lactosa tienen un grupo aldehído
potencial?
R/
Β-O-galactopiranosil-(14)-
α-O-glucopiranósido
Lactosa: Es el disacárido que se
encuentra en la leche. La lactosa tiene
propiedades reductoras, se deduce que
la unión entre ambos monosacáridos no
afecta a los dos grupos aldehídos
potenciales (el C1 de la lactosa esta
conectado al C4 de la glucosa)
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Pruebas generales para Carbohidratos
α-O-glucopiranosil-(1-4)-β-O-
Glucopiranosido
Maltosa: Se presenta durante la
germinación de los cereales. Ello se
obtiene como producto de hidrolisis del
almidón de la malta por las enzimas
contenidas en ellas, y se llama también
azúcar de malto.
9.4¿porque el glucógeno y el almidón
dan resultados negativos como azucares
reductores?
R/no dan positivo para reductores ya
que estos no poseen un grupo carbonilo
intacto.
9.5¿Explique porque en la prueba de
Barfoed los disacáridos reaccionan más
lentamente que los monosacáridos?
R/porque en la reacción al utilizar
acetato cúprico y ácido acético en
solución ácida los monosacáridos son
capaces de reducir al cobre de manera
más rápida y en condiciones menos
drásticas que los disacáridos.
9.6¿que se deduce de la solubilidad del
ácido glucosacárido?
R/Un acido es considerado
tradicionalmente como cualquier
compuesto químico que cuando se
disuelve en agua produce una solución
con una actividad de catión hidronio
mayor que el agua pura, esto es un pH
menos que 7.
El grupo carboxilo -COOH confiere
carácter polar a los ácidos y permite la
formación de puentes de hidrogeno
entre la molécula de ácido carboxílico y
la molécula de agua. La presencia de
dos átomos de oxigeno en el grupo
carboxilo hace posible que dos
moléculas de acido se unan entre si por
puentes de hidrogeno doble, formando
un dinero cíclico; por lo tanto, la
solubilidad del acido glucosacarido es
casi nula en las bases diluidas.
BIBLIOGRAFÍA
1. Mora, S. Q. (2006). Manual de
experimentos de laboratorio
para bioquímica. EUNED.
 Título de la práctica

2. http://biblio3.url.edu.gt/Publi/Li
bros/2013/Bioquimica/10-O.pdf
citado el 11/05/2019 a las 6:15
pm
3. https://sites.google.com/site/bio
quia9/reaccion-de-benedict.
citado el 11/05/2019 a las 7:51
pm
4. http://carbohidratosdaniel.blogs
pot.com/ citado el 11/05/2019 a
las 8:08 pm
5. https://ciencias.ua.es/es/extensio
n-
universitaria/documentos/extensi
on-universitaria/ven-a-hacer-
practicas/2017/bioquimica-
identificacion-de-azucares.pdf
citado el 11/05/2019 a las 8:27
pm
6. http://avalon.utadeo.edu.co/com
unidades/estudiantes/ciencias_ba
sicas/organica/guia_7_carbohidr
atos.pdf
citado el 11/05/2019 a las 11:00
am