Título:

Examen Extraordinario

Alumnos: Rogelio Ruiz Ruiz

Semestre: Octavo.

Materia: Biorremediación.

Carrera: Tecnología Ambiental.

 Contaminación del suelo por metales pesados y metaloides (Derivado de Tiradero Clandestino)
 Problemática; Contaminación del suelo por metales pesados y metaloide (Tiradero clandestino)
Arsénico, bario, berilio, cadmio, cromo hexavalente, mercurio, níquel, plata, plomo, selenio, talio y/o
vanadio.

Toxicidad de los metales pesados en el suelo

Los metales pesados, son potencialmente contaminantes devastadores ya que contaminan el suelo y las
plantas cuando se absorben en altas concentraciones o se depositan en el suelo; en conjunto esta
contaminación afecta a los demás eslabones de las cadenas tróficas. Además los metales pesados participan
en varios procesos desde que son los incorporados en el suelo principalmente por actividades
antropogénicas; se pueden incorporar al ciclo del agua o acumularse en tejidos vegetales y animales o en el
suelo por el resultado de transformaciones químicas, vía proceso de adsorción, solubilización, precipitación
y cambios en el estado de oxidación [2].

La ubicación de mi caso de estudio se localiza en los límites del Municipio de Tlaxcala de Xicohténcatl y
San Juan Tototolac, presenta una Latitud de; 19º 20´.0.01oN , una Longitud de; 98o17´16.53´´O, y una
elevación de 2341 metros sobre el nivel del mar (Google earth, 2015). Los datos anteriores aunados a otros
factores del medio ambiente, hacen del entorno de mi caso de estudio, un terreno desigual, es decir, varea los
niveles del suelo (). No obstante, tocante a flora y fauna se encuentra rodeado de diversas especies como:
Arbustos, mezquites, agave, encinos, pinos etc., y de fauna como; coyotes, zorros, conejos, linces, gato
montés etc., haciendo del entorno de la problemática del suelo un lugar vulnerable. Por otra parte, cabe
mencionar que también se encuentran diversas barrancas, algunos mantos acuíferos cercanos (manantiales y
arroyos), por tan solo mencionar estos aspectos. Y por último, en relación a la actividad productiva dentro
de la zona no se registra ninguna, simplemente es un espacio donde se realiza la disposición final de
residuos sólidos urbanos, de manejo especial y peligrosos de manera clandestina.

Objetivo:
Identificar las características físico-químicas, y biológicas del suelo en donde se desarrolla la problemática
ambiental con el objeto de caracterizar el suelo, identificar los contaminantes y su cuantificación por medio
de técnicas de análisis en base a la Normatividad Mexicana, y así de esta manera aplicar las técnicas de
remediación y remoción adecuadas al caso de estudio con el propósito general de lograr el saneamiento del
suelo contaminando

 Técnicas de análisis para identificar las características fisicoquímicas y biológicas del suelo
 (CARACTERIZACIÓN DEL SUELO)
Tabla 1. Técnicas de análisis para identificar las características fisicoquímicas del suelo [2]

PARÁMETRO TÉCNICAS DE FUNDAMENTO

ANÁLISIS
El método potenciométrico o electroquímico para medir pH de
un suelo es el más utilizado. Con este método se mide el
potencial de un electrodo sensitivo a los iones H+ (electrodo de
vidrio) presentes en una solución problema; se usa como
referencia un electrodo cuya solución problema no se modifica
pH Método potenciometrico cuando cambia la concentración de los iones por medir, que es
generalmente un electrodo de calomelano o de Ag/AgCl. El
electrodo, a través de sus paredes, desarrolla un potencial
eléctrico. En la práctica se utilizan soluciones amortiguadoras, de
pH conocido, para calibrar el instrumento y luego comparar, ya
sea el potencial eléctrico o el pH directamente de la solución por
evaluar.
La humedad del suelo se calcula por la diferencia de peso entre
Humedad Método gravimétrico una misma muestra húmeda, y después de haberse secado en la
estufa hasta obtener un pesos constante.
Este método se basa en la teoría de la disociación electrolítica. Es
aplicable a aguas o extractos de suelo. El equipo para medir la
conductividad eléctrica es un conductímetro, que consiste en dos
electrodos colocados a una distancia fija y con líquido entre
ellos. Los electrodos son de platino y en ocasiones pueden llevar
Conductividad Conductimetro un recubrimiento de platino negro o grafito; estos se encuentran
sellados dentro de un tubo de plástico o vidrio (celda), de tal
eléctrica manera que este aparato puede ser sumergido en el líquido por
medir. La resistencia eléctrica a través de los electrodos se
registra a una temperatura estándar, generalmente 25ºC

Analizador de carbono
Carbono orgánico con una cámara de
Total combustión y un detector
de infrarrojo
La muestra de suelo es colocada dentro de la cámara de
combustión a una temperatura de 900ºC, proceso que provoca la
liberación de CO2 proveniente de todo el carbono presente en el
suelo. El CO2 es cuantificado con un detector de infrarrojo

Este método se basa en la extracción de las formas de fósforo

Fosforo Soluble
fácilmente solubles, principalmente fosfatos de calcio y una
fracción de los fosfatos de aluminio y fierro, con la combinación
Método de Bray de ácido clorhídrico y fluoruro de amonio. El fluoruro de amonio
disuelve los fosfatos debido a la formación de un ión complejo
con estos compuestos, cuando se encuentran en solución ácida.
Este método ha dado buenos resultados en suelos ácidos y
aceptables en suelos con pH neutros

Digestión de la muestra. La muestra de suelo se somete a una

digestión por calentamiento con ácido sulfúrico y por una mezcla
de sales que aceleran y facilitan tanto la oxidación de la materia

Nitrógeno total Método MicroKjeldahl
Método por extracción
Amonio con cloruro de potasio
intercambiable (KCl 1M) y
determinación por
electrodo de ión selectivo.
Textura del suelo Método de la pipeta
Intercambio Catiónico Método por acetato de
amonio
Fuente. INECC (2006)
Tabla 2. Técnicas de análisis para identificar las características biológicas del suelo [3]
orgánica como la conversión de todas las formas de nitrógeno en
N+3, que en medio ácido se encuentran en forma de radical
amonio (NH4 +); es decir, se llevan las formas orgánicas a
formas minerales de nitrógeno. Destilación. Una vez
transformado el nitrógeno en NH4 +, se expone a una base fuerte
como el hidróxido de sodio para formar hidróxido de amonio,
que por la acción del calor se descompone en amoniaco (NH3) y
agua. Valoración. El amoniaco desprendido por la reacción se
recoge en un Manual de técnicas de análisis de suelos volumen
conocido de solución valorada de ácido bórico y por
comparación con un blanco se determina la cantidad de ácido
que reaccionó con el NH3.
Se recupera el amonio extraíble con KCl 1 M y se cuantifica por
medio de un electrodo de ión selectivo, que consta de una
membrana hidrofó- bica permeable al gas, permitiendo separar la
solución de la muestra de la solución interna del electrodo (el
líquido no penetra la membrana). El amoniaco de la muestra en
solución se difunde a través de la membrana, hasta que la presión
parcial del amoniaco es la misma en ambos lados de la
membrana. Así, para las muestras la presión parcial del
amoniaco es proporcional a su concentración y ésta a su vez se
encuentra en equilibrio con el ión amonio.
El método de la pipeta es un procedimiento de muestreo directo
que consiste en tomar una submuestra (alícuota) de una
suspensión de suelo en agua, donde se está llevando a cabo un
proceso de sedimentación, Análisis físicos y químicos en suelo
determinando el tipo de partícula en función de su velocidad de
sedimentación. La submuestra es tomada a una profundidad h y a
un tiempo t, en el que todas las partículas con diámetro mayor o
igual que 0.002 mm han sedimentado, teniéndose en las alícuotas
únicamente partículas pertenecientes a la fracción arcillosa. El
método se basa en la Ley de Stokes
El método para la determinación consiste en la saturación de la
superficie de intercambio con un catión índice, el ión amonio;
lavado del exceso de saturante con alcohol; desplazamiento del
catión índice con potasio y determinación del amonio mediante
destilación. El amonio se emplea como catión índice debido a su
fácil determinación, poca presencia en los suelos y porque no
precipita al entrar en contacto con el suelo. La concentración
normal que se usa asegura una completa saturación de la
superficie de intercambio, y como está amortiguada a pH 7.0, se
logra mantener un cierto valor de pH. El lavado con alcohol
pretende desplazar el exceso de saturante y minimizar la pérdida
del amonio adsorbido
 PARÁMETRO TÉCNICAS DE ANÁLISIS FUNDAMENTO
El método de dilución en placa se fundamenta en que cualquier
célula viable inoculada en un medio de cultivo se multiplica y
produce datos de fácil identificación, como la formación de
colonias en placas de agar. Este método consiste en la
preparación de una serie de diluciones de una muestra de suelo
Cuenta de en un diluyente apropiado, esparciendo una alícuota de una
dilución sobre la superficie de un medio de cultivo sólido e
Microorganismos microorganismos viables incubando la placa de agar bajo condiciones ambientales
aerobios por dilución en placa apropiadas. La dilución debe permitir generar colonias
separadas, cada colonia puede proceder de una sola célula o de
una agrupación (unidad viable), la cual se contará como una
bacteria. Bajo este fundamento, estas placas pueden ser usadas
no sólo para el conteo de poblaciones microbianas, sino también
para el aislamiento de organismos. Un medio selectivo o no
selectivo puede ser usado dependiendo de la naturaleza del
microorganismo que se desea contar o aislar

Este método se basa en el fundamento de la dilución en placa

(6.1.1) y en este caso el crecimiento se debe a la capacidad de
los microorganismos heterótrofos de crecer bien en agar
nutritivo, debido a que contiene: ΠExtracto de carne. Extracto
acuoso de carne magra de res concentrado en pasta, que contiene
Técnica de cuenta por las sustancias solubles en agua de tejidos animales, entre ellas
carbohidratos, compuestos orgánicos nitrogenados, vitaminas
Bacterias totales por dilución en placa con agar solubles en agua y sales. Œ Peptona. Producto que resulta de la
dilución en placa nutritivo como medio de digestión de materiales proteínicos, por ejemplo carne, caseína y
gelatina. Es la fuente principal de nitrógeno orgánico; puede
crecimiento. contener también algunas vitaminas y algunas veces
carbohidratos.

Este método se basa en el fundamento de la dilución en placa

(6.1.1); sin embargo, en este caso una célula no da origen a una
Hongos totales por Técnica de cuenta por colonia, sino a una espora o una parte del hongo, basándose en la
dilución en placa dilución en placa habilidad de estos microorganismos para crecer en medios
vegetales (papa), así como en las propiedades tanto del rosa de
Bengala, de limitar el crecimiento de los hongos permitiendo su
conteo, como de la estreptomicina, de evitar el crecimiento
indeseable de bacterias.

El método consiste en la estimación del número de

microorganismos viables a partir de diluciones sucesivas (1/10)
partiendo de 1 g de suelo o sedimento en base húmeda o 1 ml de
agua; posteriormente, de tres o más de las diluciones se inoculan
tubos con medio de cultivo con sustratos y aceptores de
electrones específicos. En este método se asume que en las series
de diluciones los microorganismos se encuentran distribuidos al
Microorganismos Método por diluciones azar y que al menos un microorganismo generará crecimiento,
anaerobios sucesivas produciendo una respuesta positiva (turbidez, cambio de color
del medio, producción de algún metabolito específico). Esta
técnica se basa en la estimación de la densidad bacteriana por el
método estadístico de máxima probabilidad, utilizando la teoría
de las diluciones.

Fuente. INECC (2006)

  Técnicas de análisis para identificar los contaminantes y su cuantificación

Tabla 3. Técnicas de análisis para cuantificación e identificación de contaminantes [4]

Identificación de contaminantes por análisis de cuantificación

CONTAMINANTE
Métodos por espectrometría de Absorción atómica
Bario, Berilio, Cadmio, Níquel,
Plata, Plomo, Talio, Vanadio.
Tipo de Análisis para Alcance y aplicación
su cuantificación
Los metales en solución pueden ser fácilmente
determinados por espectrometría de absorción atómica por
flama (aspiración directa).El método es simple y rápido.
Análisis por flama Con excepción del análisis para constituyentes disuelto,
todas las muestras requieren digestión previa al análisis.
(aspiración directa)a Los límites de detección, la sensibilidad y los intervalos
óptimos de los metales varían con el tipo de matriz y el
modelo de espectrofotómetro.

Este procedimiento de aplica cuando la técnica de absorción

atómica por aspiración directa no provee la sensibilidad
Talio y Vanadio Análisis por Horno de adecuada. La prueba está sujeta a interferencias químicas.
Grafito a Se analiza la muestra por medio de adiciones estándar con
las precauciones y limitaciones de su uso.

Este procedimiento de aplica cuando la técnica de absorción

atómica por aspiración directa no provee la sensibilidad
Selenio y Arsénico Análisis de generación adecuada. La prueba está sujeta a interferencias químicas.
de Hidruros a Se analiza la muestra por medio de adiciones estándar con
las precauciones y limitaciones de su uso.

Este procedimiento de aplica cuando la técnica de absorción

atómica por aspiración directa no provee la sensibilidad
Mercurio Análisis por vapor de adecuada. La prueba está sujeta a interferencias químicas.
frio a Se analiza la muestra por medio de adiciones estándar con
las precauciones y limitaciones de su uso.

Nota. a Los análisis corresponden a las técnicas de análisis que se subdividen del método general por Espectrometría
de Absorción Atómica. Fuente. Norma Oficial Mexicana NOM-147-SEMARNAT/SSA1-2004, Que establece los
criterios para determinar las concentraciones de remediación de suelos contaminados por arsénico, bario, berilio,
cadmio, cromo hexavalente, mercurio, níquel, plata, plomo, selenio, talio y/o vanadio.

TIPOS DE MUESTREOS (Aplicables a mí caso de estudio) [5]

Muestreo a detalle (Determinar el área y el espesor del suelo contaminado)
Objetivo.
Determinar el volumen de suelo contaminado de acuerdo a las concentraciones de referencia establecidas en
las normas oficiales mexicanas aplicables.
 Muestreo exploratorio (Muestras de suelo representativas para establecer la presencia de
contaminación, así como su posible distribución horizontal y migración vertical)
Objetivo.
Obtener las muestras de suelo representativas para establecer las presencia de contaminación y en su caso la
distribución horizontal de la misma, y valorar su posible migración vertical.

Muestreo de fondo (Obtener muestras representativas de los suelos contiguos del área que se
presume contaminada que permitan determinar las concentraciones del suelo natural no afectado)

Objetivo.
Obtener muestras representativas de los suelos contiguos al área que se presume contaminada, que permitan
determinar las concentraciones de metales y metaloides en suelos no modificados por el ser humano. Con
ello se definirán los niveles de fondo locales que sirvan de referencia y representación del suelo natural no
afectado.
 Tomando en cuenta los tipos de análisis aplicados para la caracterización del suelo el resultado sería el siguiente:

Tabla 4. Caracterización de un suelo contaminado con metales y metaloides

Caracterización de un suelo contaminado con metales y metaloides

Análisis Suelo contaminado con metales y metaloides
(Arsénico, bario, berilio, cadmio, cromo hexavalente,
mercurio, níquel, plata, plomo, selenio, talio y/o
vanadio).
Conductividad eléctrica ( µS/m) 2.120
Densidad aparente (g/cm3) 1.857
Densidad real (g/cm3) 2.954
Fracción de carbono orgánico (%) 1.3938
pH 6.50
Porosidad 1.378
Fósforo (mg/kg) 7.0312 31.75 (Cu)
Granulometría (Cc) 0.6375
Heterótrofas que están dentro del intervalo 106-108 UFC/G
Conteo de bacterias
Nota. Cu =Cuantificación cualitativa, Cc= Coeficiente de curvatura. Fuente. Elaboración propia (JAGT, 2015)

Tabla 5. Grado de contaminación que presenta el suelo por tiradero clandestino en relación a cada contaminante
CONTAMINACIÓN DEL SUELO (Ubicación; TLAXCALA)
Límites Valores típicos Concentración

arámetro permisibles para suelos no obtenida por

Normatividad contaminados medio de Contaminación Contaminación Contaminación Contaminación

Espectrometría
Mexicana (Directivas de ligera alta inusualmente
por Absorción media
(mg/Kg) Kelly) alta
atómica (suelo
Suelo seco
seco)
rsénico 22 0-30 100 30-50 50-100 100-500 >500
Bario 5400 0-10 6000 10-50 50-100 100-200 >6000
Berilio 150 0-10 200 10-50 50-150 150-250 >250
Cadmio 37 0-1 50 1-3 3-10 10-50 >50
Mercurio 23 0-100 400 100-200 200-300 300-450 >450
Níquel 1600 0-20 300 20-50 50-200 200-1000 >1000
Plata 390 0-30 100 30-50 50-100 100-150 >150
Plomo 400 0-500 2000 500-1000 1000-2000 2000-1,0% >1%
Selenio 390 0-50 400 50-100 100-200 200-250 >250
Talio 5.2 0-60 60 60-100 100-150 150-250 >250
Vanadio 78 0-50 100 50-100 100-200 200-350 >350
Nota. Tome como referencia la Norma Oficial Mexicana NOM-147-SEMARNAT/SSA1-2004 y las Directivas de
Kelly ◊ Representa las diferencias en límites permisibles entre la normatividad mexicana y las directivas de Kelly. ◊
Significa el grado de contaminación que presenta cada metal o metaloide en el suelo. Fuente. Elaboración propia
(JAGT, 2015)
 Técnicas de remediación aplicable al caso de estudio

 Posible técnica de remediación de suelos

De acuerdo a (Volke y Velasco, 2002) las técnicas de remoción de contaminantes tanto orgánicos como
inorgánicos y su eficiencia dependerá del tipo de técnica de remediación a utilizar, tipo de contaminantes
presentes, características del suelo, tiempo en que se deberá hacer la degradación de contaminantes,
porcentaje de remoción requerida es decir que cantidad de contaminante se necesita remover para llegar
como mínimo al límite máximo permisible que marca la normatividad aplicable, residuos que se generarán y
personal necesario para su aplicación.

Dado que la problemática de la contaminación del suelo producido por un tiradero clandestino es un
problema aislado prácticamente, la mejor técnica de remoción aplicable es un TRATAMIENTO
BIOLOGICO ¿Por qué?
Primera razón. Porque los tratamientos biológicos implican utilizar organismos vivos como plantas,
hongos y bacterias, los cuales transforman y por tanto reducen el volumen o toxicidad de los contaminantes
presentes en el suelo.
Segunda razón. Porque como es un problema aislado, hay factibilidad de emplear microorganismos vivos
sin ninguna interferencia humana para la remoción de los contaminantes.
Por otra parte, hay otras razones por la cual la elijo:
 Es un conjunto de técnicas, consiste en el uso de plantas y sus microrganismos asociados para la
recuperación ambiental. Es una tecnología barata y menos invasiva ambientalmente que las
convencionales basada en ingeniería civil y procesos físico-químicos. Además puede utilizarse sobre
sustratos sólidos, líquidos y gaseosos
 Por otro lado, las plantas que se empleen en la remediación utilizan tres estrategias; Degradación,
Extracción y Contención/inmovilización.

Técnica de remoción de contaminantes

 FITORREMEDIACIÓN [6]

La fitorremediación aprovecha la capacidad de ciertas plantas para absorber, acumular, metabolizar,

volatilizar o estabilizar contaminantes presentes en el suelo, como: metales pesados.

Tabla 6. Ventajas y Desventajas de la Fitorremediación

Fuente. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo (2010)

Dentro del proceso de Fitorremediación hay mecanismos que se pueden emplear y son los siguientes:
Tabla 7. Mecanismos de fitorremediación
Proceso Mecanismo Función Contaminante

Permite inmovilizar contaminantes en el

suelo a través de su absorción y
toestabilización Complejación acumulación en las raíces o bien, por Orgánicos e Inorgánicos a
precipitación en la zona de la rizosfera.
Este proceso reduce la movilidad de los
contaminantes y evita su migración a las
aguas subterráneas o al aire

Consiste en la absorción de metales

contaminantes mediante las raíces de las
Fitoextracción Hiperacumulación plantas y su acumulación en tallos y hojas. Inorgánicosa
El primer paso para la aplicación de esta
técnica es la selección de las especies de
 planta más adecuada para los metales
presentes y las características del
emplazamiento.
Una vez completado el desarrollo
vegetativo de la planta el siguiente paso es
cortarlas y proceder a su incineración y
traslado de las cenizas a un vertedero de
seguridad. La fitoacumulación se puede
repetir ilimitadamente hasta que la
concentración remanente de metales en el
suelo esté dentro de los límites
considerados como aceptable

Se produce a medida que los árboles y

Volatilización a otras plantas en crecimiento absorben agua
tovolatilización través de las hojas junto con contaminantes orgánicos e Orgánicos e inorgánicosa
inorgánicos. Algunos de estos pueden
llegar hasta las hojas y evaporarse o
volatilizarse en la atmósfera

Las plantas y los microorganismos

asociados a ellas degradan los
Uso de plantas y contaminantes orgánicos en productos
itodegradación microorganismos inofensivos, o bien, mineralizarlos hasta
CO2 y H2O. En este proceso los
asociados para contaminantes son metabolizados dentro de Orgánicos
los tejidos vegetales y las plantas producen
degradar enzimas como la dehalogenasa y la
contaminantes oxigenasa, que ayudan a catalizar la
degradación

Utiliza las plantas para eliminar del medio

Uso de raíces para hídrico contaminantes a través de la raíz.
Rizofiltración absorber y adsorber En la Rizofiltración estas plantas se
cultivan de manera hidropónica. Cuando el
contaminantes sistema radicular está bien desarrollado, las Orgánicos e inorgánicosa
plantas se introducen en el agua
contaminada con metales, en donde las
raíces los absorben y acumulan.

Nota. a Cuando se habla de contaminantes Inorgánicos, se hace referencia a Hidrocarburos, metales pesados y
metaloides. Fuente. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo (2010).
 Figura 1.
Mecanismos involucrados en la fitorremediación. Fuente (Abedmen, 2015)

 Técnicas de análisis para garantizar las técnicas de remediación y su monitoreo

(O prueba que se necesita antes, durante y después de una tecnología de remediación para identificar si
el suelo fue remediado si o no)
Para analizar si el suelo Cambisol contaminado por un tiradero clandestino en Tlaxcala, después de aplicar
la técnica de remediación continua con cierto grado de toxicidad sí o no, es necesario aplicar un análisis
toxicológico para averiguar si se cumplió el objetivo de remediación del suelo. Por lo tanto, el análisis
aplicable a mí caso de estudio es BIOENSAYOS CON LOMBRICES.
BIEOENSAYOS ECOTOXICOLÓGICOS

Evaluación de la toxicidad de los suelos mediante bioensayos con lombrices [7]

La contaminación del suelo con metales pesados, puede afectar a las poblaciones de lombrices. Estos
contaminantes se acumulan en sus tejidos y pueden constituir un problema para el gran número de animales
que se alimentan de ellas, debido a su potencial biomagnificación. El bioensayo con lombrices se emplea
para evaluar la toxicidad del suelo por metales pesados y metaloides. Además esta prueba es útil para
monitorear la bioremediación de los suelos ya que la reducción de la contaminación no siempre viene
acompañada de una disminución de la toxicidad del suelo debido a la transferencia incompleta de los
contaminantes o a la formación de metabolitos más tóxicos.
PRUEBA DE MORTALIDAD EN LOMBRICES
(Mencionare de manera general en que consiste este método)

Fundamento del método

Este bioensayo es una prueba aguda, con exposición de 14 días, en la cual se mide la mortalidad a través de
la concentración letal media (CL50), la cual representa la concentración del suelo problema que ocasiona la
muerte (daño máximo) en el 50 % de las lombrices que han sido expuestas.

Tabla 8. Material, equipo y reactivos para bioensayo con lombrices

MATERIAL Y EQUIPO REACTIVOS

Recipientes de vidrio (diámetro
de 4.5 cm y altura de 7 cm) Agua desionizada
Guantes
Papel de aluminio
Papel filtro
Pinzas 2-cloroacetamida 99 %
Pipetas volumétricas (capacidad
de 1-100 ml)
Puntas para micro pipeta de 100 Soluciones amortiguadoras
a 1000 µL comerciales para medir pH
Tela sintética (organza) de 4, 7 y 10
Balanza analítica
Micro pipeta de 100
Fuente. INECC (2015) [5]

Soluciones
Solución stock de 2-cloroacetamida. Se pesan 225 mg de 2-cloroacetamida y se diluyen en 10 mL de agua (o
4.5 g en 200 mL de agua). Esta solución equivale a 22.5 mg de 2-cloroacetamida por mL de agua. Se
prepara únicamente la solución stock que se va utilizar en la prueba.
Resultados y Análisis

Primero se establece cuáles son los límites máximos permisibles de concentración de metales pesados en el
suelo.
Tabla 3. Límites máximos permisibles de concentración de metales en el suelo

Fuente. PROFEPA (2004)

Tabla 4. Concentración de referencias de contaminantes solubles (CR)

Fuente. PROFEPA (2004)

RESULTADOS ESPERADOS
 CUANTIFICACIÓN DE CONTAMINANTES

Tabla 5. Límites de detección estimados para Absorción atómica. Aspiración directa, HG, GH y VF

Nota. aTécnica de vapor frio, bMétodo de generación de Hidruros, (p) Procedimiento de Horno de Grafito con tubo
pirolítico. Fuente. PROFEPA (2004)

Tabla 6. Directivas de Kelly para la clasificación de suelos contaminados

CLASIFICACIÓN DE SUELOS CONTAMINADOS
Valores típicos Contaminación
Parámetro para suelos no Contaminación Contaminación Contaminación inusualmente
contaminados ligera alta alta
Arsénico 0-30 30-50 50-100 100-500 >500
Bario 0-10 10-50 50-100 100-200 >200
Berilio 0-10 10-50 50-150 150-250 >250
Cadmio 0-1 1-3 3-10 10-50 >50
Mercurio 0-100 100-200 200-300 300-450 >450
Níquel 0-20 20-50 50-200 200-1000 >1000
Plata 0-30 30-50 50-100 100-150 >150
Plomo 0-500 500-1000 1000-2000 2000-1,0% >1%
Selenio 0-50 50-100 100-200 200-250 >250
Talio 0-60 60-100 100-150 150-250 >250
 Vanadio 0-50 50-100 100-200 200-350 >350
Fuente. Universidad Técnica Federico Santa María (2011), [6].

Análisis

 En relación a la tabla 4. Se muestra cuáles son los límites máximos permisibles de los metales pesados en el
uso del suelo, ya sea de uso agrícola/residencial o uso industrial. No obstante, cuando el suelo se presume
contaminado teniendo una superficie menor o igual a 1000 m2, el responsable tiene que proceder a remediar a
las concentraciones de referencias totales (CRT) de las que se señalan en la tabla 4. Por ello, se procedió a
llevar a cabo un muestreo exploratorio conforme se establece en la Norma Mexicana NMX-AA-132-SCFI-
2006 Muestreo de Suelos para la Identificación y la Cuantificación de Metales y Metaloides, y Manejo de
la Muestra, y aplicar a las muestras de suelo los métodos analíticos. En relación a lo anterior para cumplir con
tal objetivo se procedió a llevar la cuantificación de los metales en los diferentes puntos descritos en el
muestreo de fondo, exploratorio y a detalle. Por lo tanto, los resultados que se obtuvieron corresponden a las
concentraciones iniciales totales (CIT) de los elementos normados.

 Por otro lado, los resultados que se muestran en la tabla 5, se llevaron a cabo por Métodos por espectrometría
de absorción atómica, para los límites de detección estimados. Mediante el método por flama (aspiración
directa) se determinaron las concentraciones de Ba, Be, Cd, Ag, Pb, Ni, TI y V presentes en el suelo
presuntamente contaminado.

Además los límites de detección, la sensibilidad y los intervalos óptimos de los metales varían con el tipo de
matriz y el modelo de espectrofotómetro de absorción atómica. Para la determinación de los contaminantes
TI y V se empleó el Horno de grafito. Y par la cuantificación del Arsénico y Selenio de aplico el método de
Generación de Hidruros. Por último, para el mercurio se utilizó el Método de Espectrometría por Absorción
Atómico por Vapor frio. Entonces de las maneras anteriores se mostró la manera de como poder cuantificar
los metales y metaloides presentes en el suelo, derivado de la contaminación por tiraderos clandestinos.

 No obstantes, las técnicas analíticas mencionadas anteriormente para la cuantificación o concentración de

metales y metaloides presentes en el suelo como contaminantes, son la base fundamental para llegar a la
conclusión del grado de contaminación que presenta el suelo (derivado de tiradero clandestino). Lo anterior
aunado a la tabla 6. De las directivas de Kelly para la clasificación de suelos contaminados. Llegamos a la
siguiente conclusión y lo plasmare mediante una tabla comparativa

Organismos de prueba
Para esta pruebas se usan lombrices de la especie E. andrei que presenten clitelo y con un peso promedio de
0.30 g. Estas lombrices se cultivan en contenedores o en lechos de 1.0 m de ancho por 1.5 m de largo, en un
sitio con sombra, rodeado de tela mosquitero para evitar que otros animales penetren y se alimenten de las
lombrices.
En el laboratorio son mantenidas en contenedores plásticos. Las lombrices pueden ser alimentadas con
estiércol equino o vacuno, o residuos agroindustriales, como cachaza o bagazo de caña de azúcar, así como
residuos de jardinería (con pH cercano a 7 y conductividad iónica menor a 6 mS). Siempre se debe
administrar el mismo tipo de alimento para evitar variaciones en el crecimiento de las lombrices (OECD,
1984; Cuevas Díaz et al., 2008). Se ajustan la humedad y el pH para que posteriormente las lombrices sean
depositadas.
Suelo
Se recomienda realizar los bioensayos inmediatamente después de la toma de muestras del suelo problema;
pero si esto no es posible, las muestras pueden ser preservadas a 4 ºC en la oscuridad hasta 15 días en
recipientes de vidrio. El suelo se pasa por una malla para tener un tamaño de partícula menor o igual a 4
mm, ya que en este caso los organismos se introducen en el suelo.
Para la prueba se requiere una cantidad total de 1000 g de suelo problema. Se requieren cuatro réplicas del
suelo problema, además de un control negativo (suelo no contaminado) y un control positivo (suelo con 2-
cloroacetamida) para comprobar la sensibilidad de las lombrices. El control negativo debe ser un suelo no
contaminado y con la misma textura que el suelo problema, al cual se le ajusta la humedad de la misma
forma en que se procedió para el suelo problema. También se puede utilizar como control negativo un suelo
artificial

Tabla 9. Resumen de las condiciones recomendadas para la prueba con lombriz tierra

Duración del bioensayo 14 días

Temperatura 22 ± 2 °C
Humedad del suelo 45%
pH 6.5-7
Contenedores de prueba Recipientes de vidrio
Cantidad total de suelo requerida 200 a 400 g
Cantidad de suelo requerida por réplica 50 a 100 g
Especie de prueba Eisenia andrei
Edad del organismo al inicio de la prueba Más de 2 meses
Número de organismo por réplica 10
Número de réplicas 4
Régimen Sin alimento
Respuesta a medir Supervivencia
Control negativo Suelo no contaminado
Control positivo 2-clorocetamida
Fuente. INECC (2015).

Por lo tanto, esta es la prueba de toxicidad que puedo emplear antes, durante y después de aplicar una
remediación. Esto me permitirá identificar si el proceso de remediación del suelo fue el apropiado, y sí fue el
apropiado, realmente está libre de peligro, es decir yo na hay concentraciones de metales pesados y
metaloides.
Resultados esperados; Técnica de remediación (FITORREMEDIACIÓN) y Bioensayos con lombrices

1º FITORREMEDIACIÓN (Plantas hiperacumuladoras) [8]

El proceso de fitorremediación se empleó en toda la extensión contaminada por metales pesados y
metaloides, originado por un tiradero clandestino. Para ello se emplearon plantas hiperacumuladoras. Esta
son plantas que pueden crecer y desarrollarse en suelos con altas concentraciones de metales pesados
pertenecen a una flora especializada, que coloniza suelos originarios de serpentina o ultramáficos.
Esas plantas son seleccionadas naturalmente por su alta tolerancia a un determinado metal (hipertolerancia).
En las siguientes tablas resumiremos los resultados obtenidos.

Figura 2. Respuestas típicas de las plantas frente a la presencia de metales pesados en el suelo. Fuente. AEET
(Asociación Española de Ecología Terrestre, 2007)

Tabla 10. Umbrales de concentración de metal en planta utilizados como criterio de hiperacumulación, y número de
taxones y familias de plantas hiperacumuladoras.
Fuente. AEET (Asociación Española de Ecología Terrestre, 2007)

Tabla 11. Contenido de metales pesados en algunas plantas hiperacumuladoras [9]

Fuente. Abenmen (2015)

Entonces podemos notar que muchas especies toleran las elevadas concentraciones de metales en el suelo
porque restringen su absorción y/o translocación hacia las hojas, lo que les permite mantener
concentraciones constantes y relativamente bajas en la biomasa aérea independientemente de la
concentración metálica del suelo en un intervalo amplio. Sin embargo, otras absorben los metales
activamente a partir del suelo y los acumulan en formas no tóxicas en su biomasa aérea (estrategia
acumuladora). Entre las acumuladoras se han reconocido diferentes grados de acumulación metálica, desde
pequeñas elevaciones sobre el nivel de fondo hasta concentraciones excepcionalmente elevadas de metales
pesados como el Ni, Zn y Co en su biomasa aérea sin mostrar ningún síntoma visible de toxicidad. De forma
general, las hiperacumuladoras alcanzan concentraciones de metales en hojas entre 10 y 100 veces las
concentraciones “normales”. Actualmente se utiliza el término hiperacumuladora de metales para designar
plantas que acumulan >10.000 mg kg-1 de Mn y Zn, >1.000 mg kg-1 de Co, Cu, Pb, Ni, As y Se y >100 mg
kg-1 de Cd

2º BIOENSAYOS CON LOMBRICES

Cálculos y resultados
Se calcula la concentración letal media (CL50) por el método de Probit o Spearman-Karbe recortado. Para
ello, se incluye el control y las réplicas.Mediante el Método Spearman-Karbe, se determinan los logaritmos
naturales de las concentraciones, y los datos de mortalidad se convierten en probabilidad considerando las
muertes y el número total de lombrices en la prueba; se establecen intervalos de los logaritmos de las
concentraciones. Para obtener la frecuencia relativa, se calcula la diferencia de las probabilidades de muerte
en el intervalo. Posteriormente se multiplica la frecuencia relativa por la media de la concentración de los
logaritmos del intervalo, y a la sumatoria se le aplica el antilogaritmo para obtener la CL50 con base en los
datos crudos. Hasta aquí se considera el método cuando la mortalidad aumenta conforme lo hacen las
concentraciones.

Entonces si lo mortalidad aumentan en las lombrices esos significa que el suelo no quedo completamente
remediado pues todavía presenta cierto grado de toxicidad para los microorganismos. El siguiente resultado
es una prueba con lombrices expuestas a concentraciones crecientes de metales y metaloides. Para ello, se
utilizaron 5 contenedores con 10 lombrices en cada uno. Se calculó el logaritmo natural (In) de las
concentraciones, y al final de la prueba se cuantificaron las lombrices muertas. La mortalidad se convirtió en
probabilidad en función del número total de lombrices en cada contenedor. En la siguiente tabla se resumen
los resultados obtenidos.

Tabla 12. Resultados obtenidos bioensayo con lombrices suelo contaminado con metales y metaloides

Contenedor
1 2 3 4 5

Concentración 10 50 200 800 300

(mg/kg)

Logaritmo
natural de la 2.303 3.912 5.298 6.685 8.006
concentración

Número de 10 10 10 10 10
 lombrices

Número de 0 2 6 10 10
muerte

Probabilidad
de muerte (p 0 0.2 0.6 1 1
muerte)
Fuente. INECC (2006) Evaluación de la toxicidad de los suelos mediante bioensayos con lombrices

Conclusión
He aprendido que el conocimiento de las técnicas de remediación es con la finalidad de tener las
herramientas necesarias para decidir cómo y de qué manera aplicar un método de saneamiento de suelos
contaminados, considerando las características particulares de cada sitio. Además es importante recordar que
para seleccionar una técnica de remediación primero se necesita conocer las características del suelo lo cual
se realizar mediante técnicas de análisis y tipos de muestreo, y así caracterizar el suelo para su remediación.
Por otra parte, en relación a los resultados obtenidos por la técnica de remediación por
FITORREMEDIACIÓN, sin duda alguna podemos decir que se obtuvieron resultados positivos ¿Por qué?
Porque se emplearon PLANTAS HIPERACUMULADORAS. El uso de este tipo de plantas es relevante en
el proceso de Fitoextracción de los metales y metaloides presentes en el suelo. Mencionamos lo anterior
porque las plantas hiperacumuladoras fueron capaces de acumular excesivas cantidades de contaminantes
en su follaje (es decir, > 1% del peso seco de la planta) como se mostró en tabla 10 y 11. De hecho
mostraron alta tolerancia a los metales pesados. La extensión de la contaminación que se presentó en mi
caso de estudio es de una hectárea y media de terreno contaminado. En toda esa superficie se sembraron
plantas hiperacumuladoras y se registró un descenso en la toxicidad del suelo, dado que las plantas
empezaban a acumular a cierto grado las concentraciones de los metales y metaloides. Entonces el uso de
plantas hiperacumuladoras ha dado lugar a la técnica conocida como Fitoextracción natural; el cultivo de
estas especies permite que el metal pesado sea extraído del suelo por la absorción vegetal y la siega posterior
de su biomasa aérea. Una importante limitación de la aplicación práctica de la mayoría de las especies
hiperacumuladoras en la Fitoextracción es su escasa biomasa y crecimiento lento, ya que la capacidad de
extracción de metal de una cosecha (rendimiento metálico) es el producto de la biomasa aérea y el contenido
de metal. El factor tiempo es, con mucho, el punto más crítico en la Fitoextracción. Ahora bien, en cuanto a
su viabilidad económica, podemos decir que el costo de implementación es muy bajo, dado que se trata de
un tratamiento biológico. El costo depende del área de contaminación, el tipo de contaminantes a
contrarrestar y otros factores más. Por lo tanto, sin importar, si somos participes o no de la contaminación
del suelo, todos somos responsables de velar por los intereses que hacen posible nuestra subsistencia en la
tierra (el suelo). No es momento de bajar la guardia, es tiempo de redoblar esfuerzos por implementar
estrategias de sustentabilidad en pos del cuidado y protección del medio ambiente.
Fuente de consulta

 [1] INEGI (2015). Cambisoles. UNIDADES Y SUBUNIDADES DE SUELO. Guía para la

Interpretación de cartografía y edafología. Recuperado de
http://www.inegi.org.mx/inegi/SPC/doc/INTERNET/EdafIII.pdf
 [2] INECC (2006). Análisis físicos y químicos en el suelo. [Tabla 1]TÉCNICAS DE ANÁLISIS.
Recuperado de http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones/libros/509/analisis.pdf
 [3] INECC (2006). Análisis Microbiológicos [Tabla 2]. TÉCNICAS DE ANÁLISIS. Recuperado de
http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones/libros/509/analisis2.pdf
 [4] PROFEPA (2007). NOM-147-SEMARNAT/SSA1-2004, Que establece criterios para
determinar las concentraciones de remediación de suelos contaminados por arsénico, bario, berilio,
cadmio, cromo hexavalente, mercurio, níquel, plata, plomo, selenio, talio y/o vanadio [Tabla 3 y 5].
NORMA OFICIAL MEXICANA. Recuperado de
http://www.profepa.gob.mx/innovaportal/file/1392/1/nom-147-semarnat_ssa1-2004.pdf
 [5] SEMARNAT (2006). Muestreo a detalle, exploratorio y de fondo. NMX-AA-132-SCFI-2006,
Muestreo de Suelos para la Identificación y la Cuantificación de Metales y Metaloides, y Manejo de
la Muestra. Recuperado de
http://biblioteca.semarnat.gob.mx/janium/Documentos/Ciga/agenda/PPD02/NMX132AA2006.pdf
 [6] UAEH (2010). Fitorremediación una alternativa para remediar la contaminación [Tabla 6 y
7]. Instituto de Ciencias Básicas e Ingeniería. Recuperado de