Grado 6

Ciencias Naturales
TEMA: ¿CÓMO PUEDO EXTRAER Y
¿De qué está hecho todo lo que nos SEPARAR LOS PIGMENTOS DE LAS
rodea?
HOJAS DE LAS PLANTAS?

Nombre: Grado:

INTRODUCCIÓN

Empezamos por observar y analizar el video “Cromatografía”.

Nos reunimos en grupos y respondemos los interrogantes y las situaciones problema
propuestas:

Análisis del experimento “Cromatografía”.

1. ¿Qué paso con los colores originales?

1
2. ¿Que colores subieron más rápido por la tira?

3. ¿Cómo podemos explicar que los pigmentos de cada tinta se ubican en las tiras en
distintas posiciones?

4. ¿Por qué cuando sumergimos el extremo de las tiras de papel con las muestras de
tinta en el alcohol, los colores se separan y extienden?

5. ¿Cuál es la función de las tintas en este experimento?

6. ¿Cuál es la función del papel filtro en este experimento?

7. ¿Cuál es la función del alcohol en este experimento?

2
8. ¿Por qué razones este experimento es un ejemplo sencillo del método cromatografía?

9. Según lo observado y analizado en el video, ¿para qué sirve la cromatografía?

Análisis de situaciones problema:

A continuación vamos analizar algunas situaciones problema, respondiendo a los
interrogantes y argumentando nuestras respuestas.

1. Hemos preparado una vinagreta (vinagre y aceite de oliva) para aderezar una
ensalada de vegetales. ¿Qué tipo de mezcla es? ¿Cómo podemos extraer el vinagre
y el aceite?

2. Tomamos una muestra de agua de mar. ¿Qué métodos podemos usar para separar
sus componentes?

3. Deseamos separar los componentes de una solución preparada disolviendo

removedor de esmalte (acetona) en agua. ¿Qué método podemos utilizar?

3
4. Colocamos tinta en agua. ¿Cómo podemos saber qué componentes tiene la tinta?

5. Hemos extraído extracto de hojas de perejil, de espinaca y de col, en diferentes

recipientes. ¿Qué método podemos utilizar para averiguar qué sustancias están
presentes en los extractos de estas plantas?

Al terminar socializamos las respuestas que hemos dado a los diferentes interrogantes
relacionados con el video “Cromatografía” y con las situaciones problema, recibimos
retroalimentación de parte del docente y de los compañeros de clase.

Actividad 1: La cromatografía como método de

separación de mezclas
En la naturaleza observamos hojas, flores y frutos de las plantas, de diversos colores,
especialmente el color verde es el más abundante en los vegetales, seguramente
alguna vez nos hemos preguntado ¿qué sustancias son las que dan color a las plantas?
Sabemos que las células vegetales tienen cloroplastos, organelos que se aprecian de
color verde porque contienen pigmentos como: clorofila a, clorofila b y cromoplastos
que contienen pigmentos como beta carotenos, xantofilas y antocianinas, cuyas
características comparamos en la tabla 1.

4
Tabla 1. Características de los pigmentos.

Pigmentos Características

Clorofila Posee un átomo central de Magnesio en un anillo de porfirina

junto a un alcohol insaturado de nombre fitol, en el carbono 3 la
clorofila a, de color verde azulado, tiene un grupo metilo (-CH3),
mientras que la clorofila b, de color verde amarillento, tiene un
grupo aldehído (-CHO); la clorofila b tiene mayor polaridad que
la a.

Carotenos Son hidrocarburos, formados por carbono e hidrógeno, se

disuelven en solventes no polares, sus colores van desde el
amarillo hasta el anaranjado, son abundantes el beta caroteno
y el alfa caroteno. El caroteno más importante es el beta
caroteno. Los carotenoides en las plantas cumplen funciones
como fotoprotectores de la clorofila, enzimas y lípidos y como
pigmentos accesorios en la fotosíntesis, porque forman parte
de los complejos clorofila-proteína, encargados de realizar el
transporte electrónico y la conversión de energía luminosa en
biomasa.

Xantofilas Son derivados oxigenados de los carotenos, son solubles en

alcohol, por lo general amarillas, las más abundantes son la
luteína y violaxantina.

Antocianinas Son pigmentos de las flores y en algunas ocasiones de hojas,

tallos y raíces de los vegetales, en una gama que va desde el
rojo hasta el azul. Actualmente tienen gran uso como colorantes
naturales y antioxidantes.

1.1 CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL

Entendamos que las técnicas cromatográficas representan

una de las herramientas más importantes para el científico, por
ejemplo, la introducción de la cromatografía bidimensional
en papel, es considerada por muchos autores, como una
herramienta tan útil como el microscopio, figura 1..
Figura 1. Microscopio.

5

Figura 2. Cromatografía sobre papel.
Figura 3. El solvente sube por el papel.
Figura 4. Separación de componentes.
Figura 5. Cromatograma pigmentos
vegetales.
La cromatografía (del griego chroma = color y graphos =
escritura), se relaciona con los pigmentos fotosintéticos. En
1906, el botánico ruso Tswett, publicó un procedimiento para
separar un extracto vegetal a través de una columna rellena
con carbonato de calcio, obtuvo pigmentos de diferentes
colores que inspiraron el nombre del procedimiento y
dieron inicio a una metodología para separar e identificar
sustancias complejas, muy importantes en la ciencia, por
ejemplo, cromatografía sobre papel, figura 2.
La Unión Internacional de Química Pura y Aplicada IUPAC,
define la cromatografía como un método físico de separación,
mediante el cual, los componentes de una mezcla se
separan por distribución entre dos fases, la fase estacionaria
(FE) y la fase móvil (FM). El proceso de separación obedece
al equilibrio entre las fuerzas de propulsión promovidas por
la fase móvil y las fuerzas de retención generadas por la fase
estacionaria, figura 3.
Cada sustancia tiene una migración diferencial, según sus
características físicas y las fuerzas intermoleculares que
establezca con las dos fases.
Los pigmentos fotosintéticos se separan mediante
cromatografía sobre papel, figura 4, a través de un mecanismo
de adsorción física, según la polaridad de cada pigmento y
las fuerzas intermoleculares que establecen con los grupos
hidroxilo libres de la celulosa que constituye el papel y con
la estructura del disolvente de la fase móvil.
En el cromatograma de la figura 5, observamos que la
clorofila b por ser más polar se adhiere intensamente y más
rápido; los carotenos son menos fuertes para interactuar con
el papel, quedan disueltos en la fase móvil y son arrastrados
por ella con un retardo mayor.
El disolvente o eluyente que constituye la fase móvil,
actúa como fuerza propulsora y con su estructura química
contribuye a que los pigmentos se separen mediante
sucesivos procesos de adsorción-desorción.
6
Los procesos de separación dependen del equilibrio entre las fuerzas intermoleculares
entre el soluto, la fase estacionaria y la fase móvil.

Para extraer los pigmentos se utiliza acetona, porque es polar y tiene amplio margen de
solubilización. El proceso de extracción se debe realizar de forma rápida, en un ambiente
fresco, con luz tenue.

La identificación de los pigmentos a partir del cromatograma, se lleva a cabo mediante

el parámetro Rf, factor de retardo o de retención, el cual relaciona la distancia recorrida
por cada pigmento y la del eluyente, según la ecuación:

Rf = distancia recorrida por el pigmento

distancia reorrida por el eluyente

Luego de analizar el video “Cromatografía sobre papel”, respondemos las preguntas

siguientes:

1. ¿En qué consiste el proceso de cromatografía?

2. ¿Por qué los pigmentos vegetales se separan cuando realizamos la cromatografía

sobre papel?

3. ¿Cómo podemos explicar que en el cromatograma obtenido, cada pigmento se

encuentre a una distancia diferente?

7
4. ¿Qué función cumple el eluyente en el método de cromatografía?

5. ¿Qué importancia tiene en la cromatografía el parámetro Rf?

6. ¿Por qué se utiliza la acetona para extraer los pigmentos de las hojas?

7. ¿Por qué se considera la cromatografía como una de las herramientas más

importantes para la ciencia actual?

8. Qué semejanzas encontramos entre los procesos analizados en los videos

“Cromatografía” y “Cromatografía sobre papel”.

8
Al terminar, socializamos las respuestas y bajo la orientación del docente valoramos la
importancia de aprender acerca de la cromatografía como método de separación de
mezclas.

1.2 ¿CÓMO PODEMOS SEPARAR LOS PIGMENTOS DE LAS HOJAS DE ESPINACA

POR CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL?

Vamos a lograr la extracción de los pigmentos de las hojas de espinaca (Spinacea

oleracea L.) mediante extracción directa ascendente, utilizando una mezcla de hexano-
acetona como eluyente.

1.2.1 Materiales y reactivos

Hojas frescas de espinaca, tijeras, toallas de papel para cocina, papel aluminio, 2 gramos
de sulfato de magnesio, 10 gramos de arena silícea, mortero y mango, embudo de
filtración con papel filtro, erlenmeyer de 250 ml.

9
Disolvente de extracción de pigmentos: 8 ml de acetona; eluyente: 40 mL de una
mezcla de hexano-acetona (8,5 de hexano por 1,5 de acetona, volumen a volumen);
papel de filtro Whatman N°1, o similar, de 5 x 21 centímetros, en su defecto filtros
de papel para café; 2 Potes de vidrio de 20, 5 m de alto por 7 cm de diámetro, los
rotulamos 1 y 2; pequeña varilla de madera o un lápiz para sostener el papel filtro; cinta
adhesiva para sostener el papel filtro unido al trozo de madera o lápiz; capilares de
vidrio o micropipetas, o en su defecto pitillos de pequeño diámetro; pipeta graduada de
10 ml; balanza; cámara fotográfica o celular.

10
1.2.2 procedimiento
Se recomienda a los estudiantes tomar fotos o grabar videos de cada etapa del proceso,
para documentar el video o presentación que deben elaborar posteriormente en la
tarea.

Paso 7. Maceramos muy bien hasta obtener una pasta uniforme.

¿Cómo es el aspecto de la pasta obtenida?

11
¿Para qué agregamos acetona a la pasta obtenida?

¿Por qué es necesario tapar la muestra?

¿Qué aspecto tiene la mezcla obtenida?

¿Qué aspecto tiene la muestra filtrada obtenida?

¿Qué hemos extraído en la muestra filtrada obtenida?

12
¿Para qué trazamos la línea en el borde inferior del papel?

¿Qué observamos en el papel?

13
¿En qué orden aparecen los pigmentos en el papel?

¿Qué pigmentos hemos podido identificar?

¿En qué orden aparecen los pigmentos obtenidos?

¿Cómo podemos explicar el orden en que aparecen los pigmentos en el papel?

14
1.2.3 separación de pigmentos vegetales por cromatografia sobre papel realizada en casa
En caso de no poder realizar la práctica en la Institución Educativa, podemos realizarla
en casa, de la siguiente manera:

1.2.3.1 materiales
• Mortero o machaca ajos
• Tijeras
• 2 Papeles de filtro para café
• Alcohol etílico o etanol
• Arena lavada
• 1 Frasco o vaso de vidrio de boca ancha, transparente.
• Embudo
• Hojas de espinaca o de col

1.2.3.2 procedimiento
• Quitar las nervaduras a las hojas y cortarlas en trozos pequeños dentro del mortero
o machaca ajos.
• Colocar un poco de arena lavada dentro del mortero y macerar las hojas con
ayuda del mango del mortero.
• Añadir un poco de etanol de manera que se cubra la muestra de las hojas trituradas,
macerar hasta que el líquido adquiera un color verde intenso
• Acomodar el papel de filtro para café sobre el embudo y colocar el embudo sobre
el frasco o vaso de vidrio.
• Depositar la mezcla sobre el papel de filtro, recogiendo el filtrado de pigmentos
vegetales en el frasco o vaso de vidrio.
• Introducir el segundo papel de filtro en el frasco que contiene el extracto de
pigmentos vegetales, de manera que la parte ancha quede hacia abajo y se
sostenga en posición vertical sobre la muestra de pigmentos vegetales.
• Dejar en reposo por unos 30 minutos.
• Extraer el papel y dejar secar.
• Observar el resultado del cromatograma.
• Analizar los resultados.
• Respondemos las preguntas propuestas a lo largo del procedimiento 1.2.2.

1.2.4 evaluación del cromatograma e identificación de pigmentos

Al finalizar el proceso de secado del papel, Identificamos los pigmentos encontrados
con la ayuda del cromatograma de la figura 5.
La separación mediante cromatografía sobre papel de los pigmentos fotosintéticos

15
 de las plantas analizadas, trascurre a través de un proceso de adsorción, el cual
depende de la polaridad de cada pigmento y del tipo de fuerzas intermoleculares
establecidas con la estructura del papel y del eluyente.

Ahora analizamos la relación entre los pigmentos y la clasificación de las plantas.

1.3 LOS PIGMENTOS Y LA CLASIFICACIÓN DE LAS PLANTAS

Figura 6. Variedad de pigmentos en las plantas.

Los pigmentos son compuestos químicos que confieren color porque pueden reflejar
o transmitir la luz visible. El color de un pigmento está determinado por la absorción
selectiva de determinadas longitudes de onda de la luz y la reflexión de otras. Los
cloroplastos son organelos que contienen clorofila a y b (color verde), los cromoplastos
contienen otros pigmentos como xantofilas (colores amarillos), carotenos (colores
anaranjados) y antocianinas (colores violetas y azules).

Los pigmentos fotosintéticos constituyen la base de la vida sobre el planeta Tierra,

porque son los encargados de captar la energía lumínica transformándola en energía

16
química a través del proceso de fotosíntesis.

Los pigmentos primarios tienen como función principal captar la energía lumínica, la
bacterioclorofila en procariotas y la clorofila a en eucariotas.

Los pigmentos accesorios, carotenos, xantofilas y antocianinas, tienen como función

ampliar el espectro de absorción de los pigmentos primarios y protegerlos de la luz
excesiva.

En las tablas 2 y 3, podemos apreciar los pigmentos primarios y accesorios presentes en

los diferentes organismos fotosintéticos.

Tabla 2. Pigmentos en Procariotas.

Pigmento Pigmentos Longitud de onda

Procariotas
primario accesorios absorbida

Bacterias Bacterioclorofila a
Bacterioclorofila a Azul-violeta a rojo
purpúreas Bacterioclorofila b

Bacterias verdes
Bacterioclorofila a Bacterioclorofila a Azul a rojo
sulfúreas

Violeta-azul a
Ficocianina
anaranjado-rojo

Clorofila a Ficocianina Naranja

Cianobacterias
Aloficocianina Verde

Rojo

17
Tabla 3. Pigmentos en Eucariotas.

Pigmento Pigmentos Longitud de onda

Eucariotas
primario accesorios absorbida

Violeta-azul a
Ficocianina
anaranjado-rojo

Algas rojas Clorofila a Ficocianina Naranja

Aloficocianina Verde

Rojo

Algas marrones Clorofila a Clorofila c Violeta-azul a rojo

Violeta-azul a
Clorofila b
anaranjado-rojo
Algas verdes,
musgos y plantas Clorofila a Carotenos alfa y
vasculares beta Azul-verde
Xantofilas

Los pigmentos clorofílicos, clorofilas a y

b, cuya estructura molecular se aprecia
en la figura 7, son los más abundantes en
la tierra, deben su color a la capacidad de
absorber la longitud de onda de la luz roja
y azul, transmitiendo los demás colores, los
cuales observamos en distintas tonalidades
de verde.

Figura 7. Clorofilas a y b.

18
 Los carotenoides, figura 8, comprenden
los carotenos y las xantofilas, cumplen la
función de ser pigmentos accesorios en la
captación de energía lumínica y la de ser
moléculas capaces de disipar la energía
excedente, evitando daños para las plantas.
Figura 8. Carotenoides.

Las algas verdes presentan similitud con las plantas terrestres en su metabolismo,
tipos de pigmentos fotosintéticos, clorofilas a y b, así como en su estructura celular, lo
cual evidencia el origen de las plantas terrestres a partir de este grupo. Se distribuyen
ampliamente en todos los ambientes acuáticos, poseen un cloroplasto bien definido,
con un color verde intenso.

El color que presenta un determinado órgano

Figura 9. Variedad de pigmentos en los frutos.
vegetal, como el fruto, figura 9, depende
generalmente del predominio de uno u
otro pigmento o la combinación de ellos. El
color del pigmento está determinado por la
longitud de onda no absorbida y que por lo
tanto refleja. Los pigmentos negros absorben
todas las longitudes de onda que les llegan,
mientras que los pigmentos blancos reflejan
prácticamente toda la energía que les llega,
cada pigmento tiene un espectro de absorción
característico.

Los sistemas naturales de clasificación se basan esencialmente en estudios comparativos

de características morfológicas y anatómicas, algunas muy generales, para clasificar en
las categorías más grandes Reino, división, clase, orden y otras más específicas, para
agrupar en familias, géneros, especies.

19
 A partir del desarrollo de la química de productos
naturales, botánicos y químicos sugirieron
la posibilidad de caracterizar y clasificar las
plantas basándose en sus constituyentes
químicos. El desarrollo de los métodos de
investigación química, como la cromatografía,
han contribuido al desarrollo de la Quimio
Taxonomía, figura 10, clasificación con base en
las estructuras moleculares de las plantas.
Figura 10. Quimio taxonomía.

El análisis de la composición química específica es importante en la taxonomía y

sistemática de especies no solamente de plantas sino de todos los seres vivos.

La presencia de pigmentos predominantes en los seres vivos, ha tenido influencia en

los nombres de categorías taxonómicas y en su clasificación taxonómica, como en la
taxonomía de las algas.

Las algas constituyen parte esencial de los ecosistemas acuáticos, realizan fotosíntesis
convirtiendo la energía solar en energía química, representada en la productividad
primaria, toman gas carbónico convirtiéndolo en materia orgánica o biomasa, la cual
se constituye en la base de la cadena alimenticia en los ecosistemas acuáticos; reciclan
nutrientes y producen oxígeno, determinando la productividad del ecosistema.

Las algas azul verdosas o cianobacterias,

Figura 11. Alga azul verdosa.
figura 11, son organismos muy antiguos, son
procarióticas, poseen clorofila a y pueden
hacer fotosíntesis, se distribuyen en ambientes
variados como fuentes termales, en el suelo,
en el hielo, sobre superficies húmedas de
rocas y árboles; son las responsables de la
acumulación de oxígeno en la atmósfera de la
tierra, tienen la capacidad de fijar el nitrógeno
en el agua, a partir del nitrógeno gaseoso de la
atmósfera, por lo cual influyen en la fertilidad
de los suelos.

20

Figura 12. Bosques de algas pardas.
Las algas pardas deben su nombre a su
coloración predominante, determinada
por las xantofilas como fucoxantina y
flavoxantina, poseen también los pigmentos
clorofila a, c, beta caroteno, forman grandes
bosques submarinos, como se aprecia en la
figura 12.

Las algas rojas, son muy diversas y

Figura 13. Jardín de algas rojas.
dominantes en el agua del mar, poseen
un pigmento fotosintético característico
llamado ficobilina (ficoeritrina y ficocianina)
que le da el color rojo; contienen además
otros pigmentos como carotenos
(anaranjados) y xantofilas (amarillos), dando
la apariencia de un jardín acuático, como se
observa en la figura 13.

A continuación, como ejemplos de Quimio taxonomía, en la Tabla 4, se muestra la

clasificación de las algas y del orden Caryophyllalles, especificando los pigmentos
vegetales, sustancias que reservan y que están presentes en su pared celular, como
criterios tenidos en cuenta en su taxonomía.

21
Tabla 4. Ejemplos de Quimio taxonomía.

Tipo de Sustancias de
Taxonomía Pared celular
pigmento reserva

División Clorófitas

Almidón similar
Clorofilas a y Celulosa, en algunos
a plantas
b, carotenos. grupos sílice.
terrestres.

Figura 14. Algas verdes.

División Euglenofitas

Almidón
Clorofilas a y
paramilo Ausente
b, carotenos.
(glucopiranósido)

Figura 15. Euglena.

División Crisófitas

Clorofilas a y Aceite de
Celulosa y sílice.
c, xantofilas. crisolaminarina

Figura 16. Diatomeas.

22
 División Feófitas

Clorofila ay c, Manitol, Celulosa, ácido

fucoxantina. laminarina. algínico.

Figura 17. Algas pardas.

División Rodófitas

Clorofila
Almidón de
a y d,
florideas Celulosa, pectinas,
ficoeritrina,
(parecido al algunas CaCO3.
fucixantina,
glucógeno).
carotenos.

Figura 18. Algas rojas.

La mayoría de sus
familias producen
División Angiospermas betalaínas,
Orden Caryophyllales pigmentos
nitrogenados
que actúan como
Almidón y
Betalaínas pigmentos rojos
azúcares.
y amarillos.
La remolacha
debe su color a
Figura 19. Remolacha. los pigmentos
betacianina y
betaxantina.

23
1.4 INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DE LA PRÁCTICA

Luego del análisis anterior, utilizando la técnica de mesa redonda, socializamos los
resultados obtenidos en la práctica, comparándolos con los que obtuvieron los demás
grupos de trabajo, contrastándolos con la información presentada por el docente en
la explicación sobre Quimio Taxonomía y consultamos acerca de las características
e importancia de los pigmentos vegetales que identificamos en el procedimiento de
laboratorio realizado ya sea en la institución educativa o en casa.

1.5 JUGUEMOS A IDENTIFICAR PIGMENTOS EN LAS PLANTAS

Vamos a observar imágenes de partes de algunas plantas identificando el nombre del

pigmento predominante en cada una:

Tabla 5. Identifiquemos pigmentos en las plantas.

IMAGEN CARACTERÍSTICAS PIGMENTO

PREDOMINANTE

Clorofilas

Nombre común: Frambueso

Nombre científico: Rubus idaeus Xantofilas
Arbusto perenne de hasta 2,5 metros
de altura.
Su fruto es de sabor fuerte y dulce,
contiene ácido elágico, beneficioso Carotenos
en la prevención de cáncer.
Figura 20. Frambuesa. Antocianinas

Clorofilas

Existen unas 7000 especies de

algas verdes, unas 800 de ellas Xantofilas
son marinas, hay algunas que viven
varios años, otras son estacionales,
en condiciones favorables originan Carotenos
mareas verdes.

Figura 21. Algas verdes. Antocianinas

24
 Clorofilas

Nombre común: Girasol

Nombre científico: Helianthus annuus Xantofilas
Planta herbácea, alimenticia,
oleaginosa y ornamental.
Gira según la posición del sol, debido Carotenos
a que tiene fototropismo positivo.

Figura 22. Girasol. Antocianinas

Clorofilas

Nombre común: Papaya

Nombre científico: Carica papaya Xantofilas
El tronco no posee ramas.
El fruto es una baya ovoide oblonga,
carnosa y jugosa, las semillas son de
color negro. Carotenos
Es alimenticia.
Figura 23. Papaya. Antocianinas

Consulta acerca de los usos e importancia en la actualidad de cada uno de los

ejemplos del interactivo.

1.6 TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

Sabemos que cromatografía significa gráfica de colores y que actualmente la

cromatografía comprende un grupo de técnicas que se utilizan para identificar
sustancias mediante la separación de los componentes de mezclas y la purificación
de compuestos, lo que hace que sea una técnica muy valiosa tanto en la investigación
científica como en la industria.

Aunque existen varias técnicas, todas tienen una fase estacionaria y una fase móvil. La
fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido que permanece fijo o en la misma
posición y la fase móvil puede ser un líquido o un gas que se desplaza o mueve a través
de una superficie y de la fase estacionaria.

Las sustancias que constituyen las muestras analizadas interaccionan tanto con la fase
estacionaria como con la fase móvil, de manera que la rapidez en su desplazamiento
depende de estas interacciones, cuando se analiza una mezcla, cada componente se
mueve diferente.

25
Según el tipo de equilibrio involucrado, el cual es determinado por la fase estacionaria
utilizada, la cromatografía puede ser de:

• Adsorción
• Partición
• Intercambio iónico
• Exclusión
• Afinidad

1.6.1 cromatografia de adsorción

Es una de las técnicas más empleadas para la separación de mezclas en sus componentes
puros, purificación de un compuesto y comparación de compuestos que se creen
idénticos.

La fase estacionaria es un sólido en el que los componentes de la muestra son adsorbidos.

El adsorbente a emplear debe tener las siguientes características:

• Insoluble en el disolvente elegido.

• No debe reaccionar con la sustancia a separar.

Figura 24. Características de la fase estacionario o adsorbente.

26
• No debe actuar como catalizador.
• Debe tener una composición uniforme y ser incoloro, con el fin de poder localizar
visualmente los diferentes compuestos en caso de que sean coloreados.
• El tamaño de sus partículas influye en el grado de separación, cuanto menor sea
el tamaño de sus partículas, menor es la velocidad d emigración y mayor es la
separación.
• Los adsorbentes muy activos establecen interacciones relativamente intensas
con las moléculas del soluto, haciendo que su paso a lo largo de la superficie del
adsorbente sea relativamente lento.
• Los dos adsorbentes más corrientes son: la alúmina que es muy activo y el gel de
sílice que tiene una actividad intermedia.

Figura 25. Características de la Fase móvil o disolvente.

Para que el proceso ocurra se requiere la presencia de un disolvente, o mezcla de

disolventes,

La fase móvil puede ser un líquido (cromatografía líquido – sólido), o un gas (cromatografía
gas – sólido), el disolvente o mezcla de disolventes interaccionan con el adsorbente
y los compuestos de la muestra; esta interacción triple entre muestra, disolvente y
adsorbente, establece las proporciones relativas en que los componentes de la muestra
se fijan y migran a través del adsorbente, determinando la separación entre los mismos.

La polaridad del disolvente influye en la efectividad del proceso, el cambio de un

disolvente menos polar a otro de mayor polaridad, ocasiona una atracción relativamente
mayor de la muestra analizada, por parte del disolvente, favoreciendo que migre en
mayor grado a través del adsorbente.

27
Son ejemplo de disolventes: hexano, éter de petróleo, ciclo hexano, sulfuro de carbono,
tetracloruro de carbono, etc.

En cuanto a los componentes de la muestra, entre más polaridad tengan mayor es su

capacidad de adsorción, se ha establecido de mayor a menor capacidad de adsorción:

1. Ácidos carboxílicos
2. Alcoholes, aminas y tiol
3. Aldehídos, cetonas y ésteres
4. Haluros orgánicos
5. Hidrocarburos no saturados, a mayor insaturación mayor capacidad de adsorción
6. Hidrocarburos saturados.

Figura 25. Características de la Fase móvil o disolvente.

Este tipo de cromatografía se basa en el diferente grado de adsorción de cada compuesto

orgánico sobre la superficie de una sustancia químicamente inerte, denominada
adsorbente, de manera que la muestra analizada se ve atraída a zonas polares de la
superficie del adsorbente por fuerzas electrostáticas, quedando reversiblemente ligado
a la misma.

Si los componentes de la muestra analizada no son coloreados, generalmente se usa

una lámpara ultravioleta porque muchas sustancias que son incoloras a la luz ordinaria
presentan una fuerte fluorescencia a la luz ultravioleta, o un revelador que es un reactivo
con el que los componentes de la muestra adsorbidos formen cierta coloración,
permitiendo su detección.

Se puede llevar a cabo mediante cromatografía en columna, en capa fina, en papel, etc.

28
Los componentes de la muestra analizada se distribuyen entre dos fases a través de la
combinación de los procesos de adsorción y desorción.

Figura 27. Detección de componentes de la muestra analizada.

1.6.2 cromatografía de partición

En la cromatografía de partición líquido-líquido, los solutos se reparten entre una fase

móvil líquida y otra fase estacionaria líquida soportada sobre un sólido inerte, que no se
mezclan entre sí, es decir son inmiscibles, por consiguiente los solutos se separan por
su solubilidad.

Figura 28. Cromatografía de partición.

29
La fase estacionaria es un líquido soportado en un sólido inerte.

La fase móvil puede ser un líquido (cromatografía de partición líquido – líquido), o un gas
(cromatografía de partición gas – líquido, GLC).

Por ejemplo la cromatografía sobre papel es un tipo de cromatografía de partición en la

cual la fase estacionaria es una capa de agua adsorbida en una hoja de papel de celulosa.
Es una técnica sencilla que permite analizar pequeñas cantidades de muestra.

En la cromatografía en capa fina, la fase estacionaria se extiende sobre un soporte inerte

(silica).

Tabla 6. Cromatografía de partición.

Tipo de fase Tipo de fase Aparato para la Tipo de

estacionaria móvil fase estacionaria cromatografía
Principio
cromatográfico
Cromatografía de Gas Columna Gas – sólido GC /
adsorción GSC
Competencia entre un Líquido Columna Cromatografía
sólido adsorbente y la líquida de alto
fase móvil rendimiento
HPLC
Capa plana Capa fina TLC
Papel PC
Cromatografía de Gas Columna Gas – líquido GC
partición / GLC
Competencia entre una Fluido
fase estacionaria líquida supercrítico SFC
y la fase móvil Líquido Columna Líquido – Líquido
LC
Cromatografía
líquida de alto
rendimiento
HPLC

30
 Cromatografía de Líquido Columna Intercambio
intercambio iónico iónico IEC
Competencia entre una Intercambio
fase estacionaria de iónico de alto
intercambio iónico y rendimiento
una fase móvil líquida HPIC
Cromatografía de Líquido Columna Exclusión
penetración molecular o
Competencia entre una filtración en gel
matriz de polímero y GPC
una fase móvil líquida

La cromatografía de gases es la técnica a elegir para separar compuestos orgánicos

térmicamente estables y volátiles.

La cromatografía de líquidos de alto rendimiento HPLC, es capaz de separar

macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos
y grupos polifuncionales de alto peso molecular. La HPLC ofrece las siguientes ventajas
sobre la cromatografía de gas:

• No está limitada por la volatilidad o estabilidad térmica de las muestras.

• Fase móvil líquida interactiva en adición a una fase estacionaria activa.
• La separación cromatográfica en HPLC resulta de las interacciones específicas entre
las moléculas de la muestra con ambas fases, móvil y estacionaria.
• Ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, permitiendo mayor variedad de
interacciones selectivas y mayores posibilidades de separación.
• Es fácil recobrar la muestra en la HPLC.
• Cuando se han separado las fracciones, se recolectan en forma sencilla colocando
un recipiente abierto al final de la columna.
• Los componentes separados son fácilmente aislados de la fase móvil.

En la cromatografía de fase normal, una fase estacionaria polar (como agua, metanol),
se usa con una fase estacionaria no polar (como hexano); lo cual favorece que los
compuestos polares sean retenidos y los no polares sean eluidos.

En la cromatografía por fase reversa, se utiliza una fase estacionaria no polar con una
fase móvil polar, esto favorece que los solutos no polares sean retenidos y los solutos
polares eluidos.

31
 Figura 29. Cromatografía de partición en fase normal y fase reversa.

En la actualidad, existen también otros dos tipos de cromatografía de partición líquido-

líquido, las cuáles se establecen según la relación entre el sólido soporte inerte y la fase
líquida estacionaria activa: Fase estacionaria adsorbida y fase estacionaria ligada.

Figura 30. Fase estacionaria adsorbida.

En la fase estacionaria adsorbida, ocurre una interacción fisicoquímica del disolvente

con los sitios activos del sólido soporte.

32
 Figura 31. Fase estacionaria ligada.

En la fase estacionaria ligada, se establece un anclaje químico entre el sólido soporte y

las moléculas de la fase estacionaria líquida.

La cromatografía de partición en fase invertida o reversa con empleo de fases ligadas,

es la más ventajosa y la más empleada.

1.6.3 cromatografia de intercambio iónico

La cromatografía de intercambio iónico es un método que permite la separación de

moléculas con base en sus propiedades de carga eléctrica. Se compone de dos fases: la
fase estacionaria o intercambiador iónico y la fase móvil. La fase estacionaria insoluble
lleva en la superficie cargas electrostáticas fijas, que retienen contraiones móviles que
pueden intercambiarse por iones de la fase móvil, la cual suele ser una disolución acuosa
con cantidades moderadas de metanol u otro disolvente orgánico miscible con agua
que contiene especies iónicas generalmente en forma de buffer, cuyos iones compiten
con los analitos o sustancias de la muestra por los sitios activos de la fase estacionaria.

La separación depende de la adsorción reversible de

moléculas de soluto cargadas a una resina con grupos
iónicos que poseen carga opuesta.

El mecanismo de separación se base en un equilibrio

de intercambio iónico, que generalmente ocurre en
cinco etapas:
Figura 32. Cromatografía de intercambio iónico.

33
• Primera etapa: apropiadas de pH y fuerza iónica, permitiendo la unión de las
moléculas de soluto; los grupos que se intercambian están asociados con sus
respectivos contra-iones.

• Segunda etapa: Aplicación de la muestra y su adsorción, las moléculas del soluto

intercambian cargas y se unen reversiblemente al gel. Las sustancias que no se unen
al gel se eluyen de la cama del intercambiador.

• Tercera etapa: Desorción de la muestra cambiando las condiciones de elusión, puede

ser aumentando la fuerza iónico del eluyente o cambiando su pH.

• Cuarta etapa: Remoción de sustancias no eluídas.

• Quinta etapa: Regreso al equilibrio de las condiciones iniciales para la siguiente

purificación.

Un intercambiador iónico consiste de una matriz sólida insoluble a la cual se unen de

forma covalente grupos cargados que se asocian a contra-iones móviles. Los contra-
iones se intercambian reversiblemente con otros iones de la misma carga sin que la
matriz se altere.

La matriz puede estar cargada positiva o negativamente y los contra-iones también,

si los intercambiadores están cargados positivamente tienen contra-iones cargados
negativamente (aniones) disponibles para ser intercambiados que se llaman
intercambiadores aniónicos; si los intercambiadores están cargados negativamente
tienen contra-iones cargados positivamente (cationes) y se denominan intercambiadores
catiónicos.

La matriz puede estar constituida de compuestos inorgánicos, resinas sintéticas o

polisacáridos. Las características que tenga la matriz determinan sus propiedades
cromatográficas, eficiencia, capacidad, recuperación, estabilidad química, fuerza
mecánica y fluidez.

La naturaleza de la matriz afecta su comportamiento hacia sustancias biológicas y el

mantenimiento de la actividad biológica.

La presencia de grupos cargados es una propiedad fundamental de un intercambiador

iónico, el tipo de grupo determina el tipo y fuerza del intercambiador iónico; el número

34
total y la disponibilidad determina la capacidad. Son ejemplo de intercambiadores
aniónicos, dietilaminoetil (DEAE), Aminoetil cuaternario (AEC), Amonio cuaternario y
de intercambiadores catiónicos, carboximetil (CM), sulfopropil (SP), metil sulfonato (S).
Los intercambiadores iónicos fuertes se ionizan completamente mientras que los
intercambiadores iónicos débiles solo se ionizan parcialmente.

1.6.4 Cromatografía De Filtración En Gel O Exclusión Molecular Por Tamaño

Es una técnica de separación valiosa por su sencillez

y eficacia para separar mezclas complejas de
macromoléculas, se puede utilizar con fines analíticos,
por ejemplo para determinar pesos moleculares de
sustancias.

Permite separar moléculas solvatadas de acuerdo a su

tamaña y habilidad para penetrar la estructura tamiz de
Figura 33. Cromatografía de filtración en gel. la fase estacionaria. La capacidad separadora reside en

el gel cuya matriz consta de un gran número de esferas microscópicas, constituidas por
largas cadenas de polímeros, unidas entre sí por enlaces químicos, formando una red
tridimensional.

En el interior de una columna de cromatografía se pueden distinguir varios volúmenes:

Figura 34.Volúmenes columna cromatográfica.

35
• Volumen total, Vt, es el volumen que ocupa el cilindro de gel hidratado.
• Volumen de vacío, Vo, es el volumen existente entre las esferas de gel.
• Volumen ocupado por las esferas de gel, es igual a Vt – Vo.

Las moléculas de la muestra se separan de la siguiente manera:

• Las moléculas de muy pequeño tamaño penetran en el interior de las moléculas que
componen el gel y solo se extraen de la columna cuando ha pasado a través de ella
un volumen de líquido igual a su volumen total, Vt.
• Las moléculas cuyo tamaño es mayor que el de los poros de las esferas de gel, no
pueden penetrar en su interior y atraviesan la columna recorriendo únicamente el
volumen vacío, Vo, siendo las primeras en salir de la columna.
• Las moléculas de tamaño intermedio, presentan una mayor o menor facilidad
para difundir al interior de las esferas en función de su tamaño, siendo extraídas
fraccionadamente.

Cuanto mayor es una molécula, menor es su capacidad para acceder al interior de

las esferas del gel, y por tanto, menor es el volumen de líquido que se requiere para
extraerla de la columna.

La separación en la cromatografía de exclusión por tamaño se realiza por las diferencias

en el tamaño de las diferentes moléculas y su habilidad para penetrar los poros de la
fase estacionaria a diferentes tamaños y se usa para separar macromoléculas de origen
biológico y la purificación de polímeros orgánicos sintéticos.

1.6.5 cromatografia de afinidad

Utiliza interacciones altamente específicas entre un tipo de moléculas del soluto y

una segunda molécula unida covalentemente (inmovilizada) a la fase estacionaria, por
ejemplo, la molécula inmovilizada puede ser un anticuerpo específico para una proteína
determinada. Al pasar a través de la columna, una mezcla cruda que contiene varias
proteínas, sólo una proteína reacciona con el anticuerpo unido a la columna; después se
lavan los demás solutos y la proteína que se desea separar es desplazada del anticuerpo
cambiando el pH, la fuerza iónica o la polaridad.

36
 Figura 35. Cromatografía de afinidad.

Son ejemplo de interacciones biológicas típicas en la cromatografía de afinidad, las

siguientes:

• Enzima – sustrato análogo, inhibidor, cofactor.

• Anticuerpo – antígeno, virus, célula.
• Lecitina – polisacárido, glicoproteína, receptor de superficie celular, célula.
• Ácido nucléico – secuencia base complementaria, histonas, polimerasa de ácidos
nucleicos, proteína de unión al DNA.
• Hormona, vitamina – receptor, proteína acarreadora.
• Glutatión – glutatión -S-transferasa o proteínas de fusión GST.
• Iones metálicos – proteínas de fusión poli (his), proteínas nativas con histidina,
residuos de cisteína y/o triptófano en sus superficies.

La matriz es un soporte inerte al cual un ligando se acopla directa o indirectamente.

El ligando es la molécula que se une en forma reversible a moléculas específicas o a
un grupo de moléculas, permitiendo la purificación por cromatografía de afinidad. La
selección del ligando está influenciada por dos factores:

• Afinidad de unión específica y reversible para la sustancia blanco.

• Presencia de grupos químicamente modificables que permitan ser unidos a la matriz
sin destruir su capacidad de unión.

La cromatografía de adsorción es adecuada para analizar moléculas ionizantes, insolubles

en agua, hidrocarburos y compuestos polifuncionales polares. Esta cromatografía no se
ve influenciada por el peso molecular de las sustancias sino por los grupos funcionales
específicos.

En la actualidad las técnicas de cromatografía son herramientas imprescindibles para la

ciencia, la tecnología y la industria en general.

37
 Resumen.

Vamos a completar los conceptos fundamentales que se relacionan con la unidad de

aprendizaje, al terminar confrontamos los conceptos que hemos dado con el Glosario;
este ejercicio nos permitirá realizar aprehensión de los conceptos básicos relacionados
con el método de cromatografía.

Tabla 7. Cromatografía

Conceptos Definiciones

Figura 36. Cromatografía

Figura 37. Fase estacionaria

Figura 38. Fase móvil o eluyente

38
 Figura 39. Adsorción

Distancia recorrida por el pigmento

Rf= distancia recorrida por el eluyente

Figura 40. Factor de retardo

39
Glosario

TÉRMINO DEFINICIÓN

Adsorción Capacidad de las superficies para fijar moléculas.

Cromatografía La cromatografía (del griego chroma = color y graphos =

escritura), se relaciona con los pigmentos fotosintéticos.
Comprende un conjunto de técnicas de separación
de mezclas complejas en disolución, basadas en las
diferentes velocidades con las que se mueven los
componentes de la mezcla analizada, a través de una
fase estacionaria en interacción con una fase móvil.
La muestra analizada interacciona tanto con la fase
estacionaria como con la fase móvil. La naturaleza de
las interacciones depende de las propiedades de las
sustancias analizadas, como de la composición de las
fases estacionaria y móvil.

Cromatografía de adsorción Tipo de cromatografía que se basa en el diferente

grado de adsorción de cada compuesto orgánico sobre
la superficie de una sustancia químicamente inerte,
denominada adsorbente, de manera que la muestra
analizada se ve atraída a zonas polares de la superficie
del adsorbente por fuerzas electrostáticas, quedando
reversiblemente ligado a la misma.

Cromatografía de afinidad Este tipo de cromatografía, utiliza interacciones

altamente específicas entre un tipo de moléculas del
soluto y una segunda molécula unida covalentemente
(inmovilizada) a la fase estacionaria, por ejemplo,
la molécula inmovilizada puede ser un anticuerpo
específico para una proteína determinada. Al pasar a
través de la columna, una mezcla cruda que contiene
varias proteínas, sólo una proteína reacciona con el
anticuerpo unido a la columna; después se lavan los
demás solutos y la proteína que se desea separar es
desplazada del anticuerpo cambiando el pH, la fuerza
iónica o la polaridad.

Cromatografía de filtración en gel o En este tipo de cromatografía, la separación de

exclusión molecular por tamaño
los componentes de la muestra se realiza por las
diferencias en el tamaño de las diferentes moléculas
y su habilidad para penetrar los poros de la fase
estacionaria a diferentes tamaños y se usa para separar
macromoléculas de origen biológico y la purificación de
polímeros orgánicos sintéticos.

Cromatografía de intercambio Es un tipo de cromatografía que permite la separación

de moléculas con base en sus propiedades de carga
iónico eléctrica.

40
Cromatografía de partición líquido -
líquido
En este tipo de cromatografía los solutos se reparten
entre una fase móvil líquida y otra fase estacionaria
líquida soportada sobre un sólido inerte que no
se mezclan entre sí, es decir son inmiscibles, por
consiguiente los solutos se separan por su solubilidad

Cromatograma Representación gráfica de los resultados obtenidos en

la cromatografía.

Desorción Emisión de un fluido previamente absorbido por un

material.

Disolvente Es toda sustancia capaz de solubilizar a otra, recibe

este nombre la fase líquida móvil en cromatografía de
líquidos.

Factor de retención Relaciona la distancia recorrida por cada pigmento y la

del eluyente, según la ecuación:

Distancia recorrida por el pigmento

Rf= distancia recorrida por el eluyente

Fase estacionaria Puede ser un sólido o líquido que se queda fijo en la

misma posición. También se conoce con el nombre de
fase inmovilizada.

Fase móvil Puede ser un líquido o gas que corre a través de una
superficie y de la fase estacionaria. También se conoce
con el nombre de eluyente.

Intercambiadores aniónicos Son portadores de grupos con cargas positivas que

unen aniones de forma reversible.

Intercambiadores catiónicos Son portadores de grupos con carga negativa que unen
cationes de modo reversible.

Ligando Es la molécula que se une reversiblemente a moléculas

específicas o grupos de moléculas.

Matriz Es un soporte inerte al cual un ligando puede ser directa

o indirectamente acoplado.

Muestra Es la mezcla que va a ser analizada mediante la técnica

de cromatografía.

Soluto Es cada uno de los componentes de la muestra que va

a ser separado.

Tiempo de retención Es el tiempo característico que tarda una sustancia

particular en pasar a través del sistema cromatográfico.

41
 Tarea.
Vamos a elaborar por grupos de trabajo, un video o presentación que incluya:

• El análisis de la cromatografía sobre papel como método para realizar la separación

de los pigmentos vegetales, utilizando las imágenes o videos de la práctica de
laboratorio, los hallazgos que realizamos en la práctica, y la consulta sobre los
pigmentos vegetales.
• La indagación de un ejemplo a nivel científico, tecnológico, industrial o cotidiano, en
los que se aplique la técnica cromatográfica asignada por el docente a cada grupo.

La sustentación de los trabajos se realizará en la siguiente clase y se seleccionarán los

mejores trabajos, los cuales serán publicados en el sitio web del colegio y en las redes
sociales.

42
LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Microscopio.
Pixabay. (s.f.). Pixabay. Recuperado el 04 de Mayo de 2015, de Pixabay: http://pixabay.
com/en/microscope-slide-research-close-up-275984/

Figura 2. Cromatografía sobre papel.

Machado, N. (12 de 02 de 2012). YouTube. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de YouTube:
https://www.youtube.com/watch?v=ztCDpu83mec

Figura 3. El solvente sube por el papel.

Machado, N. (12 de 02 de 2012). YouTube. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de YouTube:
https://www.youtube.com/watch?v=ztCDpu83mec

Figura 4. Separación de componentes.

Machado, N. (12 de 02 de 2012). YouTube. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de YouTube:
https://www.youtube.com/watch?v=ztCDpu83mec

Figura 5. Cromatograma pigmentos vegetales.

Machado, N. (12 de 02 de 2012). YouTube. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de YouTube:
https://www.youtube.com/watch?v=ztCDpu83mec

Figura 6. Variedad de pigmentos en las plantas

Metros Cúbicos. (25 de Marzo de 2013). Metros Cúbicos. Recuperado el 21 de Mayo
de 2015, de Metros Cúbicos: http://www.metroscubicos.com/articulo/decoracion-y-
hogar/2012/08/20/trucos-caseros-para-tener-un-jardn-sano.

Figura 7. Clorofilas a y b.
Recursos CNICE. (s.f.). Recursos CNICE. Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de Recursos
CNICE: http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/Fisiologia_
celular/contenidos8.

Figura 8. Carotenoides.
Interempresas. (s.f.). Interempresas. Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de Interempresas:
http://www.interempresas.net/Horticola/Articulos/108217-Sustancias-fitoquimicas-
de-frutas-y-hortalizas-su-posible-papel-benficioso-para-la-salud.html

43
Figura 9. Variedad de pigmentos en los frutos.
Recetas de cocina. (18 de Agosto de 2010). Recetas de cocina. Recuperado el 4 de Mayo
de 2015, de Recetas de cocina: http://recetasdecocina.info/tag/frutos-secos/

Figura 10. Quimio Taxonomía.

Palimpalen. (s.f.). Palimpalen. Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de Palimpalen: http://
www.palimpalem.com/4/InfoMicro/

Figura 11. Alga azul verdosa.

Ejemplo de. (s.f.). Ejemplo de. Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de Ejemplo de: http://
www.ejemplode.com/36-biologia/1017-las_algas_verdeazules.html

Figura 12. Bosque de algas pardas.

Garzón, J. (s.f.). Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de http://www.granadasubmarina.
org/art.php?id=Jorge%20Garz%F3n%20Guti%E9rrez&idMedio=2401

Figura 13. Jardín de algas rojas.

Wallpaper Stock. (s.f.). Wallpaper Stock. Recuperado el 4 de Mayo de 2015,
de Wallpaper Stock: http://wallpaperstock.net/bosque-de-algas-marinas_
wallpapers_3285_1600x1200_1.html

Figura 14. Algas verdes.

Acuariofilia Madrid. (Febrero de 2013). Acuariofilia Madrid. Recuperado el 4 de Mayo
de 2015, de Acuariofilia Madrid: http://acuariofiliamadrid.org/Thread-ALGAS-
FILAMENTOSAS

Figura 15. Euglena.

Biología I. (s.f.). Biología I. Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de Biología I: http://
cienciasnaturalesyexperimentales.mex.tl/965874_RESUMEN-BLOQUE-V-
BIODIVERSIDAD.html

Figura 16. Diatomeas.

Ministerio de Educación España. (s.f.). Ministerio de Educación España. Recuperado el
4 de Mayo de 2015, de Ministerio de Educación España: http://recursos.cnice.mec.es/
biosfera/alumno/2bachillerato/micro/contenidos8.htm

Figura 17. Algas pardas.

Ministerio de Educación España. (s.f.). Ministerio de Educación España. Recuperado el

44
4 de Mayo de 2015, de Ministerio de Educación España: http://recursos.cnice.mec.es/
biosfera/alumno/2bachillerato/micro/contenidos8.htm

Figura 18. Algas rojas.

Ministerio de Educación España. (s.f.). Ministerio de Educación España. Recuperado el
4 de Mayo de 2015, de Ministerio de Educación España: http://recursos.cnice.mec.es/
biosfera/alumno/2bachillerato/micro/contenidos8.htm

Figura 19. Remolacha.

Salud Viva. (s.f.). Salud Viva. Recuperado el 4 de Mayo de 2015, de Salud Viva: http://
www.saludviva.es/home/137-remolacha-en-polvo.html

Figura 20. Frambuesa.

Pixabay. (2015). Pixabay. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de Pixabay: http://pixabay.
com/en/raspberry-berry-fruit-red-close-up-582834/

Figura 21. Algas verdes.

Pixabay. (2015). Pixabay. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de Pixabay: http://pixabay.
com/en/green-stone-trough-chao-gou-672984/

Figura 22. Girasol.

Flickr. (26 de Febrero de 2009). Flickr. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de Flickr:
https://www.flickr.com/photos/mamjodh/3311477776/galleries/

Figura 23. Papaya.

Pixabay. (2015). Pixabay. Recuperado el 26 de Abril de 2015, de Pixabay: http://pixabay.
com/en/fruit-papaya-food-653553/

Figura 24. Características de la fase estacionario o adsorbente.

Creación propia.

Figura 25. Características de la Fase móvil o disolvente.

Creación propia.

Figura 26. Interacción triple: muestra, disolvente, adsorbente.

Creación propia.

Figura 27. Detección de componentes de la muestra analizada.

Creación propia.

45
Figura 28. Cromatografía de partición.
Creación propia.

Figura 29. Cromatografía de partición en fase normal y fase reversa.

Creación propia.

Figura 30. Fase estacionaria adsorbida.

Creación propia.

Figura 31. Fase estacionaria ligada.

Creación propia.

Figura 32. Cromatografía de intercambio iónico.

Creación propia.

Figura 33. Cromatografía de filtración en gel.

Creación propia.

Figura 34. Volúmenes columna cromatográfica.

Alvarez, C., Díaz Zegarra, G., Hollman, L., & Maccuso, S. (s.f.). Educación Argentina.
Recuperado el 7 de Mayo de 2015, de Educación Argentina: http://ufq.unq.edu.ar/
Docencia-Virtual/BQblog/Cromatografia%20de%20intercambio%20ionico.pdf

Figura 35. Cromatografía de afinidad.

Creación propia.

Figura 36. Cromatografía.

Química Recreativa. (s.f.). Química Recreativa. Recuperado el 21 de Mayo de 2015, de
Química Recreativa: http://www.quimicarecreativa.org/cromatintas1.html

Figura 37. Fase estacionaria.

Educamix. (s.f.). Educamix. Recuperado el 21 de Mayo de 2015, de Educamix: http://www.
educamix.com/educacion/3_eso_materiales/b_ii/actividades/act_cromatografia.htm

Figura 38. Fase móvil o eluyente.

El Bibliote. (s.f.). El Bibliote. Recuperado el 21 de Mayo de 2015, de El Bibliote: http://
elbibliote.com/resources/Temas/html/49.php

46
Figura 39. Adsorción.
Creación propia.

Figura 40. Factor de retardo.

Creación propia.

LISTAS DE TABLAS

Tabla 1. Características de los pigmentos.

Creación propia.

Tabla 2. Pigmentos en Procariotas.

Reol, E. M. (2003). Los pigmentos fotosintéticos, algo más que la captación de luz para
la fotosíntesis. Revista Ecosistemas 12(1)., 45-51.

Tabla 3. Pigmentos en Eucariotas.

Reol, E. M. (2003). Los pigmentos fotosintéticos, algo más que la captación de luz para
la fotosíntesis. Revista Ecosistemas 12(1)., 45-51.

Tabla 4. Ejemplos de Quimio taxonomía.

Creación propia.

Tabla 5. Identifiquemos pigmentos en las plantas.

Creación propia.

Tabla 6. Cromatografía de partición.

Romero, A. (2002). Cromatografía. México: Instituto de Biotecnología UNAM.

Tabla 7. Cromatografía.
Creación propia.

47