TALLER 1

ANGIE DANIELA BALLESTEROS SOTO

BEATRIZ BARRIOS MENDOZA
VIANEDIS EMERI ROMERO
VALENTINA NIÑO DOMINGUEZ
JUNIOR ALEXANDER ORTIZ BALLESTEROS

EDUARDO ENRIQUE THORRENS ROMERO

BACTERIOLOGO

UNIVERSIDAD DE CORDOBA
FACULDAD CIENCIAS DE LA SALUD
BACTERIOLOGIA
MONTERIA 2018-II
 CUESTIONARIO
1. Consultar diferencias y similitudes entre células eucariotas y procariotas.
2. Consultar diferencias y similitudes entre célula animal y vegetal.
3. Explicar el proceso de tinción de Gram y Zielth neelsen.
4. Diferencias entre técnica de tinción de ziel Neelsen y kinyow.
5. Explicar el fundamento de la coloración de Gram.
6. Consultar en que consistió la teoría de los dominios para la clasificación de
la vida y la teoría de los reinos quienes las enunciaron.
 RESPUESTAS
1. Las células de los animales, plantas y hongos son eucariotas (palabra de
origen griego que significa núcleo verdadero) mientras que las bacterias y
algas azul-verdosas son miembros de las procariotas (del griego núcleo
primitivo)
Similitudes
 Las dos tienen pared celular, membrana plasmática, núcleo plasma,
organelos y ADN.
 Tanto células eucariotas como procariotas están subdivididas en célula
animal y vegetal.
Diferencias
 Las procariotas no tienen un núcleo definido, las eucariotas sí.
 Los cromosomas de las eucariotas son varios y lineales, el de las
procariotas es único y circular.
 La división celular de las procariotas es a través de fusión binaria y la de las
procariotas es por medio de la meiosis y mitosis.
 En la organización citoplasmática las procariotas no tienen mitocondrias,
nucléolos, retículo endoplasmático ni aparato de Golgi, mientras que las
eucariotas si cuentan con ellos.
 Los ribosomas de las eucariotas son de tipo 80S y los de las procariotas de
70S.
 Aunque las dos tienen pared celular, la de las celulas procariotas esta
compuesta por peptidoglucanos y lipopolisacáridos, en cambio la de las
células eucariotas esta formada por celulosa o quitina en hongos.
 Los órganos de movilidad en las eucariotas son los cilios y flagelos, en las
procariotas solo los flagelos.

2. Diferencias y similitudes entre la célula animal y vegetal

CÉLULA VEGETAL
CÉLULA ANIMAL
Ausente Presente (hecha de celulosa)
Pared celular
Las células Por otro lado, las células vegetales
Forma animales tienden tienden a ser rectangulares.
a ser redondas e
irregulares.
Vacuolas Poseen una o Poseen una sola vacuola. Ésta
 más pequeñas suele ser muy grande, tanto así que
vacuolas. Éstas por lo general ocupa el 90% del
suelen ser volumen de la célula.
mucho más
pequeñas que
las de las células
vegetales.
Centriolos Los centriolos Los centriolos sólo están presentes
están presentes en las plantas de existencias más
en todas las sencillas.
células animales.
Cloroplastos Las células Las células vegetales si tienen
animales no cloroplastos, pues ellas fabrican su
tienen propio alimento.
cloroplastos.
Citoplasma Presente entre el Presente entre el núcleo y la
núcleo y la membrana plasmática. Dentro de
membrana éste “habitan” la mayoría de los
plasmática. orgánulos celulares.
Dentro de éste
“habitan” la
mayoría de los
orgánulos
celulares.
Ribosomas Presente Presente
Mitocondria Presente Presente
Plástidos/ Plastidios/ Plastos Presentes Presentes
Retículo endoplásmico (rugoso y Presentes Presentes
liso)
Aparato de Golgi Presente Presente
Membrana plasmática Sólo se le puede Se le localiza tanto en la pared
encontrar en la como en la membrana celular.
membrana
celular.
Microfilamentos Presentes Presentes
Flagelos Sólo algunas Sólo algunas células tienen flagelo,
células tienen no todas.
 flagelo, no todas.
Lisosomas Presentes en el Pueden existir, pero no son
citoplasma. evidentes.
Núcleo Presente Presente
Cilios Presente Presente en muy pocas células
vegetales.

3. Técnica de tinción de Gram: esta tinción se realiza a través de un

extendido previamente fijado con el método de koch.
 cubrir la superficie del preparado con cristal violeta o violeta de
genciana y dejar en contacto durante un minuto (coloración primaria)
 lavar con abundante agua
 cubrir con lugol durante un minuto (mordiente)
 lavar con abundante agua
 inclinar el portaobjetos y dejar gotear el alcohol acetona hasta que el
preparado deje de perder color (decolorante)
 lavar con abundante agua
 cubrir el preparado con fucsina básica durante un minuto
(contracolor)
 lavar con abundante agua
 dejar secar el preparado
 observar al microscopio con el objetivo de inmersión
Técnica de tinción de Ziehl Neelsen: esta tinción se realiza a través de un
extendido previamente fijado con el método de koch.
 Cubrir el preparado con carbolfucsina (colorante primario más un
primer mordiente)
 Pasar un hisopo encendido por debajo del portaobjetos hasta llegar
solo a la emisión de vapores, durante 5 minutos (calor: mordiente
físico o segundo mordiente)
 Lavar con abundante agua
 Inclinar el portaobjeto y dejar caer gota a gota el acido alcohol hasta
que el preparado deje de perder color (decolorantes: acido sulfúrico
al 3% en alcohol etílico)
 Lavar con abundante agua
 Cubrir el preparado con azul de metileno durante 1 minuto
(contracolor)
 Lavar con abundante agua
 Dejar secar el preparado
 Observar al microscopio con el objetivo de inmersión
4. las técnicas te tinción de Zielh Neelsen y Kinyoun son muy similares, solo varían
en tres aspectos básicos: en la técnica de Kinyoun no se calienta el colorante
principal, (no utiliza calor como segundo mordiente), el acido utilizado para
decolorar es más débil y no se decolora con alcohol.
Las dos técnicas tienen la misma sensibilidad y especificidad, pero, la de Neelsen
se utiliza para diagnosticar bacterias del género mycobacterium, y algunas
especies de nocardia, corinebacterium y actino-mycetes. La de Kinyoun (método
frio) requiere menos tiempo, es de ejecución mas sencilla y se utiliza para
diferenciar el género mycobacterium del género nocardia.
5. Fundamento de la coloración de Gram
La afinidad grampositiva o gramnegativa de las bacterias depende de la
composición y estructura química de la pared celular.
Al observar el preparado con el microscopio, después de realizar los primeros 4
paso, todas las bacterias se ven de color violeta. Luego de aplicar el decolorante
algunas bacterias conservan el color, mientras que otras se decoloran. Las que
mantienen el color violeta se denominan grampositivas y las que lo pierden se
llaman gramnegativas. Esto se debe a que el alcohol acetona (decolorante)
desorganiza la membrana externa de las gramnegativas (constituida
principalmente por lipoproteínas y lipopolisacáridos) y permite la salida del
colorante primario, de modo que los microorganismos quedan desprovistos de
color. Al agregar el contracolor estos se tiñen de color rojo.
Lo que le permite a la tinción de Gram ser tan útil en la actualidad es la capacidad
de clasificar dos tipos de bacterias con una característica muy importante si de
tratamiento bacteriano estamos hablando, con esto nos referimos a la pared
celular y sus componentes.
La pared celular de una bacteria es una estructura muy importante, ya que
además de proteger y mantener todos los organelos celulares juntos también
realiza respiración celular transporte de nutrientes, síntesis de proteínas entre
otras actividades celulares; por lo tanto, tener un antibiótico que pueda destruir,
atacar, debilitar o inhibir la pared celular de una bacteria nos permitiría acabar con
la misma. Es aquí donde entra la tinción de Gram el darnos la posibilidad de saber
la composición de la pared de una bacteria nos permite saber que se debería usar
para combatirla. Aunque en un principio no se sabía que lo que coloreaba la
tinción era eso ni como lo hacía, ahora que ya sabemos su funcionamiento y
fundamento podemos explicar este proceso de forma detallada.
Porqué toma un color u otro las bacterias presentes en nuestra muestra
dependerá de la reacción que tenga la pared bacteriana con los colorantes, los
reactivos usados son lugol, cristal violeta, y safranina estos compuestos usados
correctamente son los que determinan el éxito de la tinción de Gram, cuando la
bacteria se expone a estos compuestos pueden pasar dos cosas:
La tinción es positiva, esto significa que el colorante principal (cristal violeta) y el
lugol formaron un complejo cristal violeta-yodo este se incrusta en la pared, el
porqué de esto es que hay una gran cantidad de peptidoglicano enlazados en la
pared, además de ácido lipoteicoico y es en este espacio donde el complejo se
incrusta, pero para que se retenga ahí se debe agregar alcohol-acetona esta
solución deshidrata la pared cerrando poros y eliminando membranas
circundantes que pueden tener las bacterias, al cerrarse los poros el complejo
queda atrapado y luego de esto es observable una coloración morada o azulada.
Si la tinción es negativa, en este caso pasara algo parecido como en el primero, al
inicio se formara el complejo cristal violeta-yodo y se unirán con los
peptidoglicanos de la pared en la bacteria pero es aquí donde se diferencia la
bacteria Gram positiva de una Gram negativa al ser estructuralmente diferentes en
la gran negativa la cantidad de peptidoglicano es mucho menor además de que en
la negativa hay es una cantidad notable de lipopolisacáridos además de un
espacio periplasmatico entre membrana y membrana; de igual la bacteria se va
teñir de azul o violeta pero cuando se adhiera el alcohol este desestabiliza y
desordena la membrana lipoproteica de la Gram negativa y decolorará la bacteria
y no se teñirá del color morado de la Gram positiva, pero gracias a que usamos un
colorante de contraste en este caso la safranina o la fucsina. la Gram negativa se
teñirá de un color rosado mientras que la positiva no se teñirá debido que los
poros ya se cerraron y ya hay un compuesto adherido a la pared luego de esto
podrá ser observado.
Físicamente hablando podemos decir que en la positiva si se une el complejo
cristal violeta-yodo porque al estar enlazados los peptidoglicanos el complejo
puede entrar más fácil y al cerrar los poros con el alcohol este complejo queda
atrapado y es observable, y que en las negativas ante la ausencia de la capa de
peptidoglicano el complejo no se une y por ende es la safranina la que se adhiere
más fácil a la membrana fina que posee. Pero químicamente el proceso tiene una
explicación más lógica, el ácido teicoico es de carga negativa y en general la
carga de la pared de una bacteriana es negativa, el cristal violeta tiene afinidad por
la carga negativa por ende la unión de estos compuestos es más afín, de igual
forma la safranina que es un catión tiende a unirse a elementos con cargas
negativas como lo son los lipopolisacáridos que hay en las membranas.
TEORIA DE LOS TRES DOMINIOS
La teoría de los tres dominios, teoría cladista o de árbol único de la vida, es un
sistema de clasificación, enunciado por Carl Woese en 1990 en donde clasifica la
vida en tres grandes grupos: las bacterias, las eucariotas y las arqueas.
Todos los experimentos se centran en la obtención de nuevas secuencias génicas
y en el análisis en el marco de la filogenia molecular.
Para enunciar esta teoría se basó en las diferencias que encontraba en la
secuencia del ARN ribosomal microsubunitario, el cual pensó Woese que sería un
excelente indicador del grado de parentesco entre dos seres vivos. En esta teoría
Woese consideraba que sin transferencia lateral hubiese surgido evolución.
Se enuncia que, en el ancestro común de los tres dominios, no era más que un
conglomerado diverso de células primitivas que evolucionaron hasta que se
cortaron los lazos y se formaron comunidades distintas, que a su vez terminaron
por formar: bacterias, eukaryae y archaea.
Esta teoría representaba en una estructura ramificada acepta que las eucariotas
adquieran de las bacterias las mitocondrias y cloroplastos (T. endosimbionte).
Incluye una extensa trama de enlaces transversales entre ramas, que simbolizan
el alto grado de transferencia lateral.
Se caracteriza por carecer de una célula única en la raíz, sintetizando que los tres
dominios se formaron probablemente de células primitivas que fueron
evolucionando.

TEORIA DE LOS CINCO REINOS

Fue enunciada por Robert Whittaker en 1969. Divide los seres vivos en los reinos:
Mónera: bacterias
Protistas: algas y protozoarios
Mycota: fungi- hongos
Metaphyta: plantae
Maetazoa: animales

En primera instancia los clasifico en tres grupos, según los niveles tróficos tales
como:
Productores: plantas
Consumidores: animales
Descomponedores: hongos y bacterias
Luego añadió dos reinos as complementando el sistema que se conoce
actualmente.
Este sistema de clasificación toma en cuenta propiedades fundamentales de los
seres vivos tales como: estructuras celulares, número de células, modo de
alimentación y forma de vida. Whittaker empezó a desarrollar esta teoría desde
1957 y duro 12 años para enunciarla. Su teoría queda resumida así:
Reino Mónera: fue el último en descubrir. Reunió a todos los procariotas
Reino protista: agrupa a todos los eucariotas unicelulares
Reino Mycota: eucariotas pluricelulares
Reino Metaphyta: eucariotas con pared celular y cloroplastos
Reino Metazoa: eucariotas sin pared celular ni cloroplastos

BIBLIOGRAFÍA
Madigan, J.M. Martinko y Parker J. Broca, Biología de los Microorganismos,
Prentice Hall, Madrid, (2004)
Negroni M. Microbiología estomatológica, fundamentos y guía práctica. Editorial
medica PANAMERICANA. 2009; segunda edición: 546-547
Galindo A, Avendaño R, Angulo A. Biología básica. María Álvarez Vega. 2009; 8th
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López L, Hernández M, Colín C, Ortega S, Cerón G, Franco R, Tinciones básicas
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López-Jácome, L. E., Hernández-Durán, M., Colín-Castro, C. A., Ortega-Peña, S.,
Cerón-González, G., & Franco-Cendejas, R. (2014). Las tinciones básicas en el
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Pellicer, A. G. Tinción de Gram. 2013
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