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ESPERMIOGRAMA

También conocido como espermiograma la cual Es una determinación que se realizan en el


laboratorio del semen.

Estudios que se le realizan al semen:

- Espermatograma
- Espermocultivo
- Recuperación de espermatozoides móviles
- Pruebas de viabilidad
- Pruebas de integridad del acrosoma
- Determinación de anticuerpos anti espermáticos

Condiciones que debe de tener en cuenta un paciente para la realización del espermiograma:

1- Abstinencia sexual: tener entre 3-5 días


- Ideal: 3 días
- Mínima: 2 días
- Máximo 6 días
2- Abstinencia alcohólica: ya que interfiere con el metabolismo, por lo que se recomienda
que la abstinencia sea entre 3-5 días.
3- No debe de tener fiebre, gripe, ni ningún proceso viral o bacteriano
4- Como se debe de tomar la muestra: la muestra se toma realizando la masturbación ya que
es la técnica más indicada para la obtención de la muestra y se debe de recolectar en un
colector estéril para exámenes de orina. Además se puede emplear el coito interrupto
pero no es recomendada, y los preservativos (condón) siempre u cuando no tenga
antiespermatides o sustancias toxicas que puedan matar a los espermatozoides.
5- Entregar la muestra en el laboratorio en un periodo no mayor de 1 hora (entre 1-2h)
después de haber sido tomada. Debe ser procesada inmediatamente, cuidando la
integridad del semen. Y así obtener resultados satisfactorios.
6- La muestra debe de ser protegidas de temperaturas extremas (≤20 0C ≥400C).
7- Antes de realizar la masturbación el paciente debe de tener en cuenta una buena higiene,
es necesario que se higienice los genitales con agua y jabón, se seque bien con una toalla
sin usar. Antes de proceder a la obtención de la muestra, lavarse y secarse correctamente
las manos.
8- Si la muestra es solamente para espermograma el paciente debe de orinar completamente
en la mañana. Cuando se mandar a realizar un espermocultivo (en busca de infección)
generalmente se recomienda que el paciente no orine completamente.
Si manda a realizar espermograma y espermocultivo se recomiendo que el paciente
primeramente se realice el espermograma y luego de 3 días se realice el espermocultivo.
Para poder obtener un volumen de eyaculación adecuado para cada determinación.
9- El paciente debe de obtener la muestra completa, sin descartar ninguna porción, (de no
ser así debe de ser notificado), con la técnica adecuada y evitando que entre agua en el
recipiente recolector, para que no exista alteración de la muestra. La primera porción del
semen es la que contiene mayor contenido de espermatozoides.
10- Manejar la muestra con precaución recordando que se puede transmitir a partir de ella
HIV, Hepatitis B, Virus Herpes.
11- Se debe de entregar al paciente las condiciones a seguir para la obtención de la muestra.
Para evitar un error en la fase pre-analítica.

Recepción y Conservación de la muestra

*En el laboratorio clínico se debe:

1- Rotular la muestra perfectamente


2- Mantenerla a temperatura ambiente
3- Manejar la muestra con precaución

*El semen es considerado normal cuando tiene:

1- Más de 20 millones de espermatozoides en centímetro cubico


2- Más de 50% de espermatozoides móviles y por lo menos 30% traslativos rápidos.
3- Menos de 30% de los espermatozoides con forma y tamaño normales

* El semen se considera anormal cuando tiene:

1- Azoospermia: ausencia de espermatozoides


2- Oligosospermia: disminución del número de espermatozoides
3- Astenozoospermia: disminución de la movilidad
4- Teratozoozpermia: alteración de la morfología de los espermatozoides
5- Oligoastenoteratozoospermia: la presencia de las tres alteraciones, es decir diminución en
el número de espermatozoides, de movilidad y alteración morfológica de los
espermatozoides.

Valores de referencia de las variables del semen según la OMS

volumen 2 ml o +
PH 7.2-7.8
Concentración de espermatozoides 20X106 espz/ml o +
Total de eyaculado 40 X106 espz/ml o +
Motilidad 50% o + progresión lineal (categoría a+b) 25% o
más con progresión lineal rápida (categoría)
Morfología 30% o + con morfología anormal
Viabilidad 75% vivos o + (no se colorean)
Leucocitos ≤1 X106ml
Zinc 2.4µmol o + por eyaculado
α-glucosidasa neutra 2 o + mU + por eyaculado
Ácido cítrico total 52 µmol + por eyaculado
Fosfatasa acido total 200U + por eyaculado
Fructosa total 13 µmol o + por eyaculado

Examen macroscópico

1- Aspecto Heterogéneo: semen recién eyaculado (el esperma es heterogéneo)


Homogéneo: a medida que pasa el tiempo se torna homogéneo

2- Licuefacción: uniformidad u homogenización del semen proceso que dura 60h no se reporta.
3- Color: blanco amarillento o blanco grisáceo. Rojo cuando esta la presencia de hematíes.
4- Volumen: 2ml – 8 ml
5- Consistencia o Viscosidad: altera la movilidad de los espermatozoides y la concentración, se
puede determinar de 2 manera:
 Con una pipeta donde se aspira la muestra, luego dejar caer 1 gota en un papel y se
observa si la gota al caer se forma de manera uniforme es compacta de lo contrario si no
se forma quiere decir que la muestra no tiene una buena consistencia
 Con una varilla de vidrio se mezcla la muestra contenida en el recolector donde se debe
observar la formación de un filamento el cual no debe ser mayor a 2cm
6- Ph: 7.2 – 8, es decir es alcalina, se agrega 1 gota al papel de Ph donde se va a observar un
viraje y va indicar cuál es el pH de la muestra, se puede indicar el Ph con numero o por un
cambio de color del papel.

Examen microscópico

1- Estudio de la motilidad
- Realizarse en las primeras 2 horas de haberse producido el eyaculado.
- La Movilidad se divide en 4 categorías
a. Movilidad progresiva rápida
b. Movilidad progresiva lenta lineal o no
c. Movilidad no progresiva
d. Inmovilidad
Técnicas del estudio de la motilidad
- Se agrega una pequeña cantidad de semen 10µL en un portaobjeto luego se cubre con un
cubreobjeto 22x22mm.
- Se observa al microscopio con objetivo de 40x y
- Se cuentan los espermatozoides hasta completar 100 por cada campo.(10campos)
- Se reportan los % de cada categoría
2- Recuento de espermatozoides
- Refleja el estado de espermatozoides
- Se considera normal ≥40.000.000 de espermatozoides
Técnica
- Se prepara una dilución de la muestra 1:10, 1:20, 1:50 el diluente que se utiliza es
solución inmovilizada.
- Se lleva la cámara de Neubauer con la muestra diluida. Se observa con objetivo de 100X
cuando se realiza el contaje.
- Se deja reposar de 1-5min en cámara húmeda.
- El recuento de espermatozoides se realiza en el cuadro central, se cuentan ambas cámara
del hematimetro y se saca el promedio.
Ejemplo: la muestra diluida (1:20) y se
Dilución Numero de cuadros grandes contaron 162 y 170 espermatozoides en 10
Semen + diluyente Contados cuadros grandes de cada cámara; la
1+9 25 10 5 concentración de espermatozoides de la
1+19 10 4 2
muestra es de 83x106 espermatozoides/ml
1+49 5 2 1
2 0.8 0.4
(166/2). Si deseo obtener la concentración de espermatozoides por eyaculado se multiplica por el
volumen total de la eyaculación en ml.
3- Morfología de los espermatozoides
 OMS referencia hace 30% o más de los espermatozoides deben de ser normales
- Técnica: se realiza un frotis o extendido al que se le aplicara una tinción.
- Tinciones: método Giemsa, Papanicolaou, tinción de Bryan-Leishman o la tinción de Shorr
- Para el reporte se toman en cuenta las siguientes alteraciones:
a. Defecto del tamaño y forma de la cabeza
b. Defecto del cuello y pieza media
c. Defecto de la cola
d. Las gotas citoplasmáticas ≥de 1/3 de la superficie de la cabeza, se observa por
microscopia electrónica.
- Se reporta en %
4- Aglutinación de los espermatozoides
- La aglutinación puede ser cabeza con cabeza, cola con cola o cualquier otra combinación
(el cuello de uno con la cabeza de otro).
- Se considera normal siempre que no afecta a más de 10% de los espermatozoides de lo
contrario está relacionado con un proceso infeccioso e inmunológico, que este
presentando el paciente.
- La adherencia de los espermatozoides móviles o inmóviles con sustancias como células,
moco y dendritos no se considera aglutinación.
5- Viabilidad del espermatozoides
- OMS como referencia 75% o más de los espermatozoides deben de estar vivos.
- Se emplea las tinciones supravitales (se utiliza para colorear las membranas internas de la
célula muertas, en este caso sería espermatozoides muertos. Para asi poder diferenciarlos
de los espermatozoides vivos)eosina o una combinación eosina y nigrosina.
- Tinción: tinción con eosina (tinción supravital)
a- Mezclar 1 gota (15µl) de semen fresco con 1 gota de solución de eosina al 5% en un
portaobjeto y lubricarse con el cubreobjeto.
b- Luego de 1 o 2 min se observa la lámina con 40X con luz intensa o contraste de fase.
c- Cuéntense los espermatozoides no teñidos (vivos) y los teñidos (muertos)
d- Se reporta el % de espermatozoides vivos y muertos.
6- Otras células en el semen
- Células epiteliales de la uretra
- Células espermatogenicas (células inmaduras del espermatozoides)
- Leucocitos (≤1.000.000/ml) indica una sepsis seminal por la que es recomendable realizar
un espermocultivo.

Examen de bioquímica
- Plasma seminal
- Volumen de eyaculado (≤1.5ml)
- Rápida disminución de la movilidad de los espermatozoides
- Cuando se investigan efectos de medicamentos tóxicos u otros factores sobre la función de
las glándulas sexuales accesorias.
1- Capacidad secretora de la próstata va hacer evaluada por:
Zinc, ácido cítrico, y las fosfatasa acida reflejan la secreción de la próstata
2- Capacidad secretora de las vesículas seminales
La concentración de fructosa en el semen refleja la capacidad secretora de las
vesículas seminales.
3- Capacidad secretora del epidídimo
Anteriormente era la L-carnitina, ahora se emplea α-glucosidasa y la α-glucosidasa
neutral, más específica para el epidídimo para evaluar la función de esa glándula.

Test Funcionales Especiales (no son comunes)

- MOST: Evalúa la resistencia de los espermatozoides al someterlos a un estrés térmico


(cuanto resisten al calor y viéndose afectada la movilidad) y su efecto en la movilidad de
los mismos.
- Test hiposmotico: Evalúa la integridad anatofuncional de la membrana
- Test cromatina: Evalúa el grado de condensación de la cromatina en los espermatozoides.
- SWIM UP: Para la obtención de los espermatozoides más rápidos y con mejor posibilidades
de la fecundación (se emplea en clínicas de fertilidad, donde se le suministran
tratamientos a los pacientes para que la movilidad sea más rápida).
- Kruger: Morfología por criterios estrictos
- Detención de anticuerpos antiespermático: se realiza ante la sospecha de infertilidad
inmunológica.
- Test de Sims-Hubner: Evalúa la capacidad de migración, longevidad de los espermatozoides
y cuanto duran en el conducto cervical, y la posibilidad de estos a ascender hacia la vía
genital superior.
- Pruebas de integridad de acrosoma: se emplea la microscopia electrónica.
 *se hace con la finalidad de conocer la finalidad de conocer la capacidad de
penetración de espermatozoides en el ovulo.
 *se puede realizar mediante una tinción que nos permita ve la condiciones del
acrosoma, si está intacto o no.
 De acuerdo a los resultados se asume los siguientes:
≥40% acrosoma intacto (NORMAL)
14-40% de acrosoma intacto (podrían ocurrir fallas en la fecundación)
≤44% de acrosomia intacto (fallas importantes de fecundación)
- Recuperación de espermatozoides motiles (si se recupera es mucho más fácil que sede la
fecundación)
 Para obtener espermatozoides con movilidad rápida por medio de gradientes de
densidad o migración ascendente
 Ayuda a decidir cuál es la mayor técnica de reproducción asistida para indicar el
tratamiento
 Criterios empleado para el reporte (GENTIFER Y UNIFERTES):
o ≥20millones de espermatozoides motiles recuperados : NORMAL
o 6-20millones de espermatozoides motiles recuperados se recomienda
INSEMINACIÓN
o 1-6millones de espermatozoides motiles recuperados se recomienda
FERTILIZACIÓN INVITRO
o ≤1millon de espermatozoides motiles recuperado se recomienda ICSI
(inyección intracitoplasmatica de espermatozoides en el ovulo).

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