Pruebas generales para Carbohidratos

PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS

M. C. Martínez Martínez (103018011417)

H. D. Pajajoy Muñoz (1061815684)

Biología, Facultad de Ciencias Naturales Exactas y de la Educación, Universidad del Cauca, Popayán Colombia

Recibido: 13 de mayo de 2019

Resumen
Para esta práctica de laboratorio se trabajó con los siguientes carbohidratos almidón
(polisacárido), sacarosa, ribosa, lactosa (disacáridos), glucosa, galactosa, fructuosa
(monosacáridos) a los cuales se les realizaron pruebas como la de molish que evalúa la
existencias de hidratos de carbono en una sustancia, siendo en este caso positiva para
todos los reactivos; la prueba de seliwanoff tuvo resultados positivos en cetohexosas y
aldohexosas (sacarosa, ribosa, fructuosa), tornándose en un color rojo el producto de la
reacción; en la prueba de Bial aquellas muestras con el color verde se catalogan como
positivas, es decir, que contenían pentosas en su estructura; La prueba de benedict que es
específicamente positiva para azucares reductores fue positiva para todos los
monosacáridos y para cetohexosas como la fructuosa; también se realizó una prueba de
solución de yodo para polisacáridos en la cual el único que resulto positivo fue el almidón
gracias a su polisacárido lineal la amilasa; por último se trató las soluciones en la prueba
de barfoed, la cual es específica para monosacáridos, en este caso la glucosa, galactosa,
fructuosa.

INTRODUCCION contienen hasta unos 10 o 15 monómeros

Los carbohidratos son biomoléculas
compuestas por carbono hidrógeno y
oxígeno cuya función en los seres vivos
es proporcionar energía2; los
carbohidratos se clasifican en:
Carbohidratos simples conformados por
monosacáridos, que son aldehídos (con
un grupo funcional se denominan
aldosas) o cetonas polihidroxilados (con
un grupo funcional se denominan
cetosas); y Disacáridos formados por dos
monosacáridos unidos mediante un
enlace glucosídico. Cuando un
monosacárido está unido a través de su
átomo de carbono anomérico al grupo
hidroxilo del carbono 4 de otro
monosacárido, el enlace glucosídico se
denomina 1,4. 2
Carbohidratos complejos conformados
por polisacáridos que están formados por
grandes cantidades de monosacáridos
conectados por enlaces glucosídico. Los
glucanos más pequeños, llamados
oligosacáridos, son polímeros que
1
y que con mayor frecuencia se
encuentran unidos a polipéptidos en
ciertas glucoproteínas y a algunos
glucolípidos. 2
existen pruebas para clasificar
carbohidratos, entre ellas encontramos:
Prueba de molish: permite detectar la
presencia de hidratos de carbono en una
muestra; está basada en la formación de
furfural o derivados de éste (originado
por los ácidos concentrados que
provocan una deshidratación de los
azúcares). sirve también para el
reconocimiento general de carbohidratos
donde polisacáridos y disacáridos se
hidrolizan formando monosacáridos que
toman un color púrpura violeta.6
Prueba de Seliwanoff: esta prueba es
específica para las cetosas. Las cetosas
se deshidratan más rápidamente que las
aldosas, dando furfurales. Estos se
condensan con el resorcinol produciendo
un complejo coloreado. Si el tiempo de
 Título de la práctica

ebullición se prolonga, puede dar frasco lavador

también positivo para otros azúcares. plancha de calentamiento
Prueba de Bial: el reactivo contiene
orcinol o ácido clorhídrico, el cual forma DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS
complejos de coloración sólo con las
pentosas.6 Ecuaciones químicas, moléculas:
Prueba de Benedict: permite el
reconocimiento de carbohidratos Almidón
reductores, el de Benedict contiene ion
cúprico en medio alcalino que se reduce
hasta óxido cuproso en presencia de
azúcares con el hidroxilo hemiacetálico
libre.6
Prueba de Yodo: La prueba del yodo es
una reacción química usada para
determinar la presencia o alteración de
almidón u otros polisacáridos.6
Prueba de Barfoed: permite diferenciar
entre monosacáridos y disacáridos sacarosa
reductores, también contiene ion cúprico
que se reduce hasta óxido cuproso más
rápidamente con los monosacáridos que
con los disacáridos.6

METODOLOGÍA
para esta práctica se utilizaron
soluciones de los carbohidratos:
almidón, sacarosa, glucosa, galactosa,
ribosa, fructosa, y una muestra problema
que consistió en la lactosa. Glucosa
a estas muestras se las trato con los
reactivos de Molish, Benedict,
Seliwanoff, Bial, Yodo y Barfoed.
para cada prueba se utilizaron cantidades
diferentes de los reactivos que están
entre las 2 gotas y los dos mililitros. así
mismo la cantidad de las soluciones varía
de las 8 gotas a un mililitro.
para las pruebas de Seliwanoff, Bial, Galactosa
Benedict y Barfoed se calentó agua de
manera que una vez ebullió se dispuso a
colocar las muestras durante los tiempos
determinados para cada una.
los materiales utilizados fueron:
pipetas graduadas de 1 y 5 mL
vasos de precipitado de 100 y 250 mL
tubos de ensayo
gradilla
pinzas de madera

2
 Pruebas generales para Carbohidratos

Reacción de Seliwanoff
Ribosa

Fructosa

Reacción de Bial o Orcinol

lactosa

Reacción de Molish
Reacción de Benedict

Reacción de Barfoed
RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH +
Cu2O↓ + 4H+

3
 Título de la práctica

Prueba de Yodo rápidamente para cetohexosas y más

lentamente para aldohexosas, esto
explica que como en esta prueba no se
realizó un calentamiento prolongado
(más de 15 minutos), no se produjo
isomerización de la glucosa
(aldohexosa) en fructosa (cetohexosas).
la sacarosa da una reacción positiva
debido al hidrólisis ácida de su enlace
glicosídico, cuyos productos son la D-
glucosa y la D-fructosa.1
en la prueba para polisacáridos se forman
complejos coloreados con el yodo,
debido probablemente a la absorción del
Vista esquemática de una hélice de yodo en sus cadenas. La amilosa del
amilosa, con iones I3− embebidos. almidón por ser un polisacárido lineal
produce complejos de un color azul
La siguiente tabla contiene los datos intenso.1
obtenidos durante la práctica los azúcares reductores (monosacáridos
desarrollada en el laboratorio como la glucosa) fueron positivos para la
reacción de benedict puesto que pueden
PRUEBAS ser oxidados por agentes oxidantes
débiles como este reactivo. también es
carbohidratos

posible observar que la fructosa, (una

polisacáridos
seliwanoff

cetohexosas) es capaz de dar positivo,

benedict

barfoed

por las condiciones en que se realiza la

Molish

prueba: un medio alcalino caliente la

Bial

tautomeriza a glucosa (que es capaz de

Almidón P A P reducir al ion cúprico). los disacáridos
Sacarosa P P M como la sacarosa no dan positivo porque
Glucosa P A P los OH del C anomérico están siendo
Galactosa P P A P P utilizados en el enlace glucosídico.2
Ribosa P P V en la prueba de Bial la aparición de un
color o precipitado verde, indicó la
fructuosa P P M P P
existencia de pentosas en la muestra. el
Lactosa P A
furfural generado reacciona con el
V=verde; A=amarillo; M=marrón;
orcinol para dar compuestos con este
P=positivo
color en un lapso de 2 a 5 min. 3
el reactivo de barfoed por ser débilmente
ANÁLISIS DE RESULTADOS
ácido es reducido solamente por
puesto que la prueba de molish es una
monosacáridos, los cuales forman como
prueba general para determinar si existen
producto de reacción oxido cuproso.4
carbohidratos de cinco o más carbonos
en una sustancia, los resultados
CONCLUSIONES
obtenidos fueron todos positivos, el
ácido sulfúrico produce la
 Se logro identificar la presencia o
deshidratación del monosacárido y el
ausencia de carbohidratos en las
alfa-naftol la condensación del furfural.1
diferentes muestras de la práctica.
la prueba de seliwanoff dio positivo para
 El tiempo de calentamiento
las cetohexosas y aldohexosas, el
prolongado de las muestras puede
producto de la deshidratación
(hidroximetilfurfural) se forma

4

dar falsos positivos para presencia de
monosacáridos y polisacáridos.
 La prueba de Yodo no es una
reacción real
CONSULTAS COMPLEMENTARIAS
9.1Escribir todas las reacciones químicas
que se presentan durante la práctica.
R/Se encuentran en “Resultados”
9.2¿Porque la fructosa da una prueba
positiva para el reactivo de Benedict el
cual es específico para azúcares
reductores?
R/la fructosa (una cetohexosa) es capaz
de dar positivo, esto ocurre debido a que
las condiciones en que se realiza la
prueba: en un medio alcalino caliente la
fructosa se tautomeriza (pasando por un
intermediario enólico) a glucosa y
manosa (que es capaz de reducir al ion
cúprico).
9.3¿Porque se dice que la maltosa y la
lactosa tienen un grupo aldehído
potencial?
R/
Β-O-galactopiranosil-(14)-
α-O-glucopiranósido
Lactosa: Es el disacárido que se
encuentra en la leche. La lactosa tiene
propiedades reductoras, se deduce que la
unión entre ambos monosacáridos no
afecta a los dos grupos aldehídos
potenciales (el C1 de la lactosa esta
conectado al C4 de la glucosa)
5
Pruebas generales para Carbohidratos
α-O-glucopiranosil-(1-4)-β-O-
Glucopiranosido
Maltosa: Se presenta durante la
germinación de los cereales. Ello se
obtiene como producto de hidrolisis del
almidón de la malta por las enzimas
contenidas en ellas, y se llama también
azúcar de malto.
9.4¿porque el glucógeno y el almidón
dan resultados negativos como azucares
reductores?
R/no dan positivo para reductores ya que
estos no poseen un grupo carbonilo
intacto.
9.5¿Explique porque en la prueba de
Barfoed los disacáridos reaccionan más
lentamente que los monosacáridos?
R/porque en la reacción al utilizar
acetato cúprico y ácido acético en
solución ácida los monosacáridos son
capaces de reducir al cobre de manera
más rápida y en condiciones menos
drásticas que los disacáridos.
9.6¿que se deduce de la solubilidad del
ácido glucosacárido?
R/Un acido es considerado
tradicionalmente como cualquier
compuesto químico que cuando se
disuelve en agua produce una solución
con una actividad de catión hidronio
mayor que el agua pura, esto es un pH
menos que 7.
El grupo carboxilo -COOH confiere
carácter polar a los ácidos y permite la
formación de puentes de hidrogeno entre
la molécula de ácido carboxílico y la
molécula de agua. La presencia de dos
átomos de oxigeno en el grupo carboxilo
hace posible que dos moléculas de acido
se unan entre si por puentes de hidrogeno
doble, formando un dinero cíclico; por lo
tanto, la solubilidad del acido
glucosacarido es casi nula en las bases
diluidas.
BIBLIOGRAFÍA
1. Mora, S. Q. (2006). Manual de
experimentos de laboratorio
para bioquímica. EUNED.
 Título de la práctica

2. http://biblio3.url.edu.gt/Publi/Li
bros/2013/Bioquimica/10-O.pdf
citado el 11/05/2019 a las 6:15
pm
3. https://sites.google.com/site/bioq
uia9/reaccion-de-benedict.
citado el 11/05/2019 a las 7:51
pm
4. http://carbohidratosdaniel.blogs
pot.com/ citado el 11/05/2019 a
las 8:08 pm
5. https://ciencias.ua.es/es/extensio
n-
universitaria/documentos/extensi
on-universitaria/ven-a-hacer-
practicas/2017/bioquimica-
identificacion-de-azucares.pdf
citado el 11/05/2019 a las 8:27
pm
6. http://avalon.utadeo.edu.co/com
unidades/estudiantes/ciencias_ba
sicas/organica/guia_7_carbohidr
atos.pdf
citado el 11/05/2019 a las 11:00
am