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Departament de Genètica i Microbiologia

Dr. Antonio Barbadilla


3.4 nm

Departament de Genètica i Microbiologia Tema 3: Mitosis y meiosis 2

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Empaquetamiento del DNA
en el cromosoma eucariótico

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Topografía de los cromosomas metafásicos
Tamaño del cromosoma
Posición del centrómero
Metacéntrico
Submetacéntrico
Acrocéntrico
Telocéntrico

Distribución de la heterocromatina
Eucromatina
Heterocromatina

Distribución (patrón) de bandas:


bandas Q (Quinacrina), G
(Giemsa) y R (Giemsa inversa)

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Cariotipo - Idiograma

Cariotipo Idiograma

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Fluorescent In-Situ Hybridization (FISH)

FISH de cromosomas humanos – “Chromosome Painting" ->


Pintado cromosómico
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Fluorescent In-Situ Hybridization (FISH)

FISH de cromosomas humanos – “Chromosome Painting" ->


Pintado cromosómico
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Organización del
material hereditario
en procariotas (E.
coli )

Plegado en 40
dominios (100kb c/u)
aprox.

Territorios cromosómicos
en fibroblastos humanos
(hibridación in situ)
CROMOSOMAS HOMÓLOGOS

Ubicación de los genes


en el mismo lugar Locus
(locus, loci) Alelo
Gen

Cada gen puede tener muchas


formas alternativas (alelos)
gonosomas
Los cromosomas sexuales no son
iguales morfológicamente, ni
presentan el mismo contenido
genético

Autosomas Sexuales

A A A a A

Homocigotos Heterocigotos Hemicigotos


Número de cromosomas (2n) de
algunas especies

Especie 2n

Ser humano (Homo sapiens) 46


Guisante (Pisum sativum) 14
Mosca fruta (Drosophila melanogaster) 8
Ratón doméstico (Mus musculus) 40
Lombriz intestinal (Ascaris) 2
Paloma (Columba livia) 80
Boa constrictor (Constrictor constrictor) 36
Grillo (Gryllus domesticus) 22
Azucena de trompeta (Lilium longiflorum) 24
Helecho indio (Ophioglossum reticulatum) 1260

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¿Cómo se transmiten los
cromosomas a las células
hijas ?
En la década 1870-80, nuevas técnicas citológicas, el desarrollo del
micrótomo y de las lentes de inmersión en aceite, condujeron al
descubrimiento de la fecundación, la fusión de los núcleos del óvulo y
del esperma para formar el núcleo del huevo y la mitosis. En 1884
Carl Nägeli enuncia la teoría del idioplasma, que establece que el
núcleo celular es el vehículo de la herencia. En 1883 van Beneden,
trabajando en el nemátodo Ascaris, descubre la meiosis y reconoce
la individualidad de los cromosomas. T. Boveri, en un programa de
investigación que se inicia en 1888 y acaba en 1909, demuestra que
los cromosomas mantienen su estabilidad entre generaciones. A
partir de 1880 había un acuerdo general Historia
que eldematerial
la genética:
hereditario
residía en los cromosomas -aDescubrimiento
pesar que mitosis
esto yno meiosis
estuvo
completamente claro hasta 1916.
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Ciclo celular

Ciclo celular y su relación


con la mitosis y meiosis

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Cromosoma metafásico El cromosoma
formado por dos cromátidas en las células hijas
hermanas: DNA duplicado tras la segregación
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MITOSIS
cell division control 2
CDK1 en humanos

Principales cambios citológicos:

1. Ruptura de la envoltura nuclearFosforilación de


la lámina B
2. Condensación de los cromosomas Fosforilación FPM
de histona H1
3. Conformación del huso mitótico Acumulación en
centrosomas
1. Fosforilación de la lámina B

LBR: Receptor de Lámina B


S-P-T-R
(Secuencia consenso)
2. Fosforilación de histona H1

H1.4: human

CDK1 or cell division cycle protein


2 homolog is a highly conserved
protein that functions as a The H1 linker histones: multifunctional proteins beyond the
serine/threonine kinase
nucleosomal core particle
(Hergeth y Schneider, 2015)
The role of mitotic kinases in coupling the centrosome cycle with the assembly of the
mitotic spindle
Wang et al., 2014

(linker)
3. Conformación del huso
mitótico (el complejo
cdc2/ciclina se
acumula en el núcleo
y en los centrosomas)

Autophosphorylation for stabilizer


degradation and to prevent
centriole reduplication Cep152/192 are responsible for the recruitment of Plk4 to initiate
centriole duplication. Then, Cep135, SAS6, STIL and CPAP form
the structural basis which is tightly regulated by APC/C, SCF-
FBXW5 and Plk4.
cdc2
5

Disgregación del huso mitótico


Procesos para salir de mitosis Descondensación de cromosomas
Citoquinesis

¿Cómo se logra?
- Degradación de ciclinas mitóticas vía proteasoma
mediante APC
- Inhibición de CDK por el inhibidor Sic1
•Dura la mitad de la mitosis
•Migración de pares de centriolos
a extremos opuestos.
•La envoltura nuclear comienza a
desensamblarse (fosforilación de
láminas nucleares)
•Desintegración de los nucleolos
•Cromátides hermanas juntas por
cohesinas

•Migración de cromosomas al plano


ecuatorial por unión al cinetocoro
•Unidos al huso, la cohesina es
degradada por la separasa

•Fase de menor duración


•Migración de las cromátides a los
(anillo contráctil polos de las células por proteínas
periférico) motoras

•Cariocinesis y citocinesis
•Inversión de procesos de profase
Función de las cohesinas
Securin
Ser/Thr-protein kinase
(polo-like) CPA
+cdc20
Arquitectura del cinetocoro
El más simple es de levaduras formado por 38 proteínas
Localizado en el centrómero
C. interno se organiza sobre secuencias de ADN satélite y persiste a través del
ciclo celular
C. externo con muchos componentes dinámicos presente sólo durante la
división celular.

Cenp(s)

Fibras del huso


Fuerza motora de la segregación

Imagen de célula humana con


microtúbulos en verde,
cromosomas (DNA) en azul, y
cinetocoro en rojo

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¿Cómo reconoce el huso acromático la región centromérica?
La secuencia de ADN centromérica es muy variable entre especies.
Incluso puede diferir entre dos cromosomas en una misma célula.

Gen CENP-A
conservado
entre especies

Repeticiones de 171 pb,


cuya longitud puede llegar
a los 5Mpb

Giunta, Funabiki. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017: 114(8):1928-1933.


Acción de Proteínas motoras
Ubicación de
Actina/Miosina

Despolimerización inducida por disminución de la actividad


enzimática de Cdk1/ciclina B por degradación de esta última
MEIOSIS
Sinapsis

Bivalente
(Tétrada)
Proceso de división celular que
resulta en células hijas haploides
con solo un miembro de cada par
de cromosomas

Diada División reduccional

División ecuacional

Intercambio
Diversidad genética por
Mónada distribución diferente de alelos intercromosómi
en comparación con la célula co
inicial Recombinación
homóloga
Hechos que caracterizan la fase inicial (Profase I):

1. La cromatina sufre engrosamientos y espiralizaciones


dando lugar a cromosomas visibles. Cada cromosoma
consiste de una estructura doble dada la acción de la
cohesina.

2. Sinapsis entre cromosomas homólogos.

3. Entrecruzamiento entre pares homólogos.


CIGOTENO DIPLOTENO

LEPTOTENO PAQUITENO DIACINESIS


Primera división meiótica trigo (2n = 44).
Fluorescencia de hibridación in situ.
A)Metafase mitótica.
B)Núcleo en interfase premeiótica. Territorios
nucleares separados. Telómeros (tel) dispersos
Triticum vulgare por todo el núcleo.
C)Leptotena. Cromosomas permanecen separados.
Tels agrupándose en el ramillete.
D)Transición entre leptotena y cigotena. Ramillete
completamente organizado, cromosomas
descondensados.
E)Cigotena. Sinapsis parcial, concretamente en el
lazo situado a la derecha del núcleo, más grueso
que el resto. Los telómeros aparecen más
dispersos.
F) Paquitena. Sinapsis completa y telómeros
dispersos. Única señal telomérica por par de
homólogos.
G)Diplotena. Mayor condensación. Cromosomas
apareados, pero las señales teloméricas dobles.
H)Diacinesis. Bivalentes muy condensados con
homólogos unidos por quiasmas.
I) Metafase I.
J) Anafase I. Separación de homólogos.
K)Telofase I. Reorganización de los dos núcleos
hijos.
telómeros

A)Metafase mitótica.
B)Núcleo en interfase premeiótica. Territorios cromosómicos separados.
Telómeros (tel) dispersos por todo el núcleo.
C) Leptotena. Cromosomas permanecen separados. Telómeros agrupándose
en el ramillete.
D) Transición entre leptotena y cigotena. Ramillete completamente organizado,
cromosomas descondensados.
E) Cigotena. Sinapsis parcial, concretamente en el lazo situado a la derecha
del núcleo, más grueso que el resto. Los telómeros aparecen más dispersos.
F) Paquitena. Sinapsis completa y telómeros dispersos. Única señal
telomérica por par de homólogos.
G) Diplotena. Mayor condensación. Cromosomas apareados, pero las señales
teloméricas dobles.
H) Diacinesis. Bivalentes muy condensados con homólogos unidos por
quiasmas.
I) Metafase I.
J) Anafase I. Separación de homólogos.
K) Telofase I. Reorganización de los dos núcleos hijos.
Segunda división meiótica en trigo. A) Células resultantes de Meiosis I. Cada
núcleo contiene un cromosoma con dos cromátidas. B) Profase II. La
cromatina se condensa en ambas células. C) Metafase II. Los cromosomas
se disponen en la placa ecuatorial en ambas células. D) Anafase II.
Separación de las cromátidas de cada cromosoma hacia polos
opuestos. E) Telofase II. Formación de dos núcleos por célula. F) Productos
de meiosis.
SUN-1 COMPLEJO SINAPTONÉMICO
Microtúbulos ZYG-12
DINEINA

Centro de
apareamiento

Estabilización de la unión entre


homólogos para facilitar la
recombinación

Elementos laterales

100 nm
Filamentos transversos
Elemento central

Procesos fundamentales en Meiosis:


1. Reconocimiento de homólogos
2. Sinapsis
3er proceso fundamental en meiosis:
Recombinación
- Rupturas dobles en leptoteno por Spo11
(Act. Topoisomerasa II)
- Corrección de rupturas en cigoteno y
paquiteno (recombinasas Rad51 y Dmc1)
- Invasión del cromosoma homólogo para
copiar el fragmento

Bivalentes en diplotena del saltamontes


(Eyprepocnemis plorans), mostrando
quiasmas (flechas).

Microfotografía electrónicas de complejos


sinaptonémicos de tomate, mostrando
nódulos de recombinación. A) Bivalentes en
cigotena. B) Bivalente en paquitena
Meiosis y entrecruzamiento

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La conducta paralela de los
genes y cromosomas
En 1902 Walter Sutton se percató de que la segregación de los
factores mendelianos (alelos) era consistente con la
segregación de los cromosomas durante la meiosis
•Los genes y los cromosomas ocurren a pares
En la primera década del siglo XX se produce la síntesis de los trabajos genéticos (de hibridación
experimental) y citológicos. Esta síntesis simboliza la mayoría de edad de la Genética, iniciándose
como ciencia propia e independiente. El siglo empieza con el redescubrimiento de las leyes de
•Tanto los alelos como los cromosomas homólogos
Mendel por los trabajos de 3 botánicos: Carl Correns, Hugo de Vries y Eric Von Tschermak, a
las que el británico William Bateson dará un gran impulso. Se produce una integración inmediata
segregan en la proporción 1:1 en los gametos
de los estudios genéticos y citológicos. En 1902, T. Boveri y W. Sutton se percatan, de forma
independiente, de la existencia de un estrecho paralelismo entre los principios mendelianos recién
descubiertos y la conducta de los cromosomas en la meiosis. En 1905 Bateson acuñó (en 1901
había introducido los términos alelomorfo, homocigoto y heterocigoto) el término genética para
•Genes distintos y pares distintos de cromosomas
designar "la ciencia dedicada al estudio de los fenómenos de la herencia y de la variación". En
homólogos segregan independientemente
1909 el danés Wilhelm Johannsen introduce el término gen como "un término útil como expresión
para los factores unitarios... que se ha demostrado que están en los gametos por los
Sutton, W. S.modernos
investigadores 1903. The delchromosomes
mendelismo". in heredity. Biological Bulletin, 4:231-251

Historia de la genética: El nacimiento de la ciencia de la genética al principio del siglo XX


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Teoría cromosómica de la herencia

•Los genes se encuentran en los cromosomas

•El lugar que ocupa un gen en un cromosoma


se denomina locus (loci)

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La base cromosómica de
las leyes mendelianas
•Las leyes de Mendel son un reflejo directo de la conducta de los
cromosomas durante la meiosis
•El movimiento de los cromosomas determina los alelos que portarán
los gametos
• Primera ley de Mendel Principio de la uniformidad de los híbridos
de la primera generación filial
• Segunda ley de Mendel (segregación 1:1) se explica por la
migración aleatoria de los cromosomas homólogos a polos opuestos
durante la anafase I de la meiosis
•Tercera ley de Mendel (transmisión independiente) se explica por
el alineamiento aleatorio de cada par de cromosomas homólogos
durante la metafase I de la meiosis

•Las leyes de Mendel se dará en todos aquellos organismos que sufren


la reducción meiótica
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Cromosomas
homólogos en
metafase
A A a a

Nótese que (1) cada gen tiene cuatro copias debido a


que el material genético se ha duplicado para llevar a
cabo la mitosis (o la meiosis) y (2) cada alelo de un
heterocigoto se encuentra en un cromosoma homólogo

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Factores mendelianos Par cromosomas homólogos en
metafase I meiosis

Ley de la
segregación 1:1

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Factores mendelianos

Cromosomas

A
A
a
a

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Ley de transmisión independiente

Factores mendelianos Cromosomas

A B A b

a b a B

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Teoría cromosómica de la herencia
Los genes mendelianos residen en los cromosomas y la
conducta de éstos durante la meiosis explican las leyes de
transmisión mendelianas

A B
A
B
a b
a
b

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Departament de Genètica i Microbiologia Tema 3: Mitosis y meiosis 50

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Objetivos tema
Mitosis y meiosis
Deberán quedar bien claros los siguientes puntos

•Cromosomas: topografía, comparación, idiograma

•Mitosis y meiosis: similitudes y diferencias

•Paralelismo entre la conducta de los cromosomas en la meiosis


y las leyes de Mendel

•La teoría cromosómica de la herencia

•Ciclos biológicos

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Topografía de los cromosomas metafásicos
Banda Colorante Zona identificada

G Giemsa Replicación tardía


Tamaño del cromosoma
Posición
R del
Tto centrómero
solución salina a altas temperaturas y Replicación temprana (patrón reverso)
Metacéntrico
giemsa

Submetacéntrico
Acrocéntrico
Q Quinacrina (adición previa de agente Segmentos ricos en GC
Telocéntrico
alquilante)

Distribución
C
de la heterocromatina
Tto con hidróxido de sodio, solución salina y
giemsa
Detección de regiones heterocromáticas:
regiones centroméricas y pericentroméricas.
Eucromatina
Heterocromatina

Distribución
T
de bandas:
Variante de las bandas R, tto por mayor Porción distal
tiempo de los cromosomas

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Regla para contar cromosomas y
moléculas de DNA

•Número de cromosomas

Número de centrómeros funcionales

•Número de móleculas de DNA

Número de cromátidas

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Mitosis y Meiosis:

La mitosis es la solución al problema de


la división celular y la constancia en el
número de cromosomas de las células
hijas

La meiosis resuelve el problema de la


presencia de dos padres (progenitores)
en los organismos sexuales y la
constancia del número de cromosomas
entre generaciones
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- ¿Por qué inicia la mitosis?
- ¿En qué cosiste el FPM?
- ¿Qué son las cdc’s? ¿Cuál es su función?

Tyr15

Fosfatasa de tirosina
(Cdc25)
PROFASE I
Cromómeros
Número característico
Tamaño y posición en
cada cromosoma

Formados por ruptura y


reunión de cromátides no
hermanas

Cohesina
Cromosomas adquieren el
nivel máximo de
condensación
Tétrada Al final, inicia la formación
del huso
¿Qué organismos
presentarán una
herencia
mendeliana?

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Las leyes de Mendel se aplicarán a cualquier eucariota que
tenga una meiosis regular

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Las leyes de Mendel se aplicarán a cualquier
eucariota que tenga una meiosis regular
Ciclo diploide: mayoría animales
Animal
2n 2n adulto

Meiosis Meiosis

n Gametos n

2n
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Ciclo haploide: hongos
Células
n n haploides

2n

Meiosis

Esporas
n n n n
sexuales
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Ciclo haplo-diplonte: plantas

n n

Mitosis:
2n gametofito
Mitosis: multicelular
esporofito
multicelular
Meiosis
Esporas
n n n n sexuales

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• En las siguientes direcciones encontrarás animaciones sobre la mitosis y la meisosis

• Ciclo celular y su relación con la mitosis y meiosis (intenta averiguar el número de


móleculas de DNA por cada par de cromosomas homólogos en las distintas fases
del ciclo celular)
• Animaciones de la Meiosis
• Mitosis vs Meiosis (anota y memoriza las diferencias entre ambos procesos)
• Cromosomas (id al apartado 6: la interpretación cromosómica de las leyes de
mendel). Observa que la conducta de los cromosomas sólo explica dos leyes
mendelianas y no tres

• Lee este interesante ensayo del estudiante Óscar García Blay del curso 2014-15 que propone
una nomenclatura para distinguir entre tetroplodía y DNA duplicado en la fase G2 4n vs 2n2c,
o tetrapolidía versus DNA duplicado en fase G2 del ciclo celular: una clarificación conceptual

• Practica con los dedos el comportamiento de los


cromosomas en la mitosis y la meiosis (como indica la figura)

• Descubre porqué la planta Hieracium pilosella que


Nägeli dijo a Mendel de estudiar no seguía la leyes de Mendel

• Practica ejercicios en el aula permanente de genética

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