11. Transcripción y traducción de la información genética.

Biología celular y molecular:

PhD Carlos Guillermo Quiroz Carrillo
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RNA polimerasas

• RNA poli I
• RNAr 45S
• RNA poli II
• RNAm
• miRNA
• Mayoria RNApn
• RNA poli III
• RNAr 5S
• RNAt
• RNApc
• Minoria RNApn
 Factores transcripcionales
• Transcripciones de los RNAm
Factor de transcripción Factor de elongación Secuencia de termino
Específicos Basales SII ????????????
TFIID, TFIIA, SIII (elongina)
TFIIB, TFIIF, TFIIE, TFIIH V= 50 nucleótidos/s

Regulador ------Promotor------- -------------------------Codificador-------------------------------

Amplificador CAAT TATA Exón 1 Exón 3
Inhibidor
-75 -25 +1 Intrón 1 Exón 2 Intrón 2 Exón 3 Intrón 3 AATAA

TFIID
TBP (Proteína de unión a TATA)
Deforma cromatina
TFIIA une TATA con TFIID (TBP)
TAF (Factor asociado a TBP)
TFIIB estimula la formación del complejo
Recluta a la RNApol unida
de pre iniciación
a otros factores de transcrición
 Factores transcripcionales
• RNA pol II es fosforilado por TFIIH. El P proviene de un ATP (TFIIB)
• RNA pol II libre (sin factores )abre las hebras de DNA
• Transcriptos primarios = RNA het.
(RNAhn)
 Regulación de los RNAm

• Transcipción
• FTE (R)➔FTB (P) ➔ RNApol II
• Procesamiento del Transcripto primario
• Exportación y supervivencia del RNAm
• Traducción
• Degradación de las proteínas sintetizadas
 Regulación de transcripción

• Interacción 20 aa con 20 nt (regulador o promotor)

• Hélice vuelta hélice

• Cremallera de leucina
 Regulación de transcripción

• Dedos de zinc

• Hélice bucle hélice

 Regulación de transcripción
Enrollamiento, metilación, fosforilación y acetilación
• Histonas
• Influenciados por los Factores de transcripción basales (P)
• Acetilación, desfosforilación y demetilación ➔ ↓ enrollamiento
• Combinación de efectos (código histónico)
• DNA
• Metilación de promotor (CG) ➔ inactivación del gen
• (5ta base metilcitosina-mC) ➔mC-G
• Impronta genómica ( http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-02551999000400011 )
• Cromosoma X (Cuerpos de Barr)
• ↑Compactado
• Metilación DNA
• ↑ Metilación del DNA ➔ ↑ inactividad transcripción
• Unión de ARNxist al DNA del cromosoma X
 Transcripción del RNA 45S- (28S, 18S y 5,8S)
P P P
• RNA pol I
• 200 copias del gen- Nucleolo
• FT
• SL1-Promotor 18S 5,8S 28S
• 1 TBP
• 3 TAF
• UBF - Regulador
• Terminación
• Poli T
P
 Transcripción del RNA 5S

• RNA pol III

• 2000 copias
• FT- Promotor
• TFIIIA
• TFIIIB- TAF TBP
• TFIIIC
TTTT
5’ Amplificador
Inhibidor Promotor 3’
Regulador -------------------------Codificador-------------------------------
 Transcripción del RNAt

• RNA pol III

• 10-100 copias
• FT-Promotor
• TFIIIB
• TFIIIC

TTTT
5’ Exon 1 Promotor Exon2 3’
-------------------------Codificador-------------------------------
 Transcripción del RNApn

• RNA pol II - III

• FT
• SNAPc
• TBP – TATA o PSE (Promotor)
• RNApn y RNApno derivan de intrones
------Promotor------- -----------Codificador-----------------
5’ OCT PSE TATA 3’
 Transcripción del RNAxist, RNAte y miRNA

• RNAxist
• Solo se producen en los cuerpos de Barr
• RNAte
• RNA pol II
• miRNA
• RNA pol II
• Junto con el RNAm
 Procesamiento del RNA
5’ Metilación de adeninas 3’

Se metila el 0,1% de las adeninas de los exones

 CAP y Poli A

CAP (To 30nt) Poli A

• 7 metilGuanosina
• 250 adeninas
• GTP – 5’
• Adic. 5’ • AAUAAA- Señal de
• Unión trifosfato poliadenización
• Unión C5-C5 ➔ 3’
• Metilación del GTP adicionado y • Factores CPSF, CSTF, CFI y CFII
del 2 nt • Corta 20 nt después de la señal
• Evita degradación de poliA, desconecta del DNA
• Necesario para retirar los intrones • Poli A poli
• Necesario para unión • Protege 3´y permite salir del
RNAm-ribosoma (Traducción)
nucleo
 Corte y empalmes

5’ 3’

RNPpn
(ARNpn)
U1, U2, U4, U5 y U6

3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’

U4-U6
5’ 3´
GU YNYUR AY AG
U2

U1 U5
 Regulación del procesamiento RNAm

• Corte y poli A – dif lugares

• Cortes y empalmes en lugares alternativos
• Intrones
• Control de la salida de los RNAm al citosol
• Tamaño
• Degradación
 Procesamiento RNAr 45S

• Sin CAP ni poli A

• Nucleolo ➔ Citosol
• Eliminación de los
espaciadores
• Metilacion antes del
corte
• RNPpno
• U3, U8 y U22
• Chaperonas
• Metilación ➔ mA, mC,
mG, seudoUridinas (Ψ)
 Procesamiento RNAr 5S y RNAt
• RNAr 5S
• Lugar diferente del resto RNAr

• RNAt
• Remoción de intron
• Cambios químicos de los nt
• A.- mA, inosinas (I)
• C.- mC
• G.- mG
• U.- seudoUridinas (Ψ), riboTimidinas (T), dihidroUridinas (D)
• Reemplazo de poli A por CCA
 Procesamiento RNA pequeños

• RNApn
• Trimetilación en el citosol
• Se unen a las proteínas Sm y regresan al núcleo
• RNApc - rec. señal
• Se unen bases complementarias entre si
• Se une a la proteína PRS
• RNAxist, RNAte y miRNA
• RNAxist.- permanece en el cromosoma X
• RNAte.- permanece en el núcleo unido a la telomerasa
• miRNA.- origina transcriptos primarios con secuencias invertidas
• Union con el complejo RISC
 RNAt

• 31 tipos unidos a 20 aa
• Triplete inicial AUG ➔ metionina = codón de iniciación
• 5’ ➔ 3’
• CBP (proteína de unión con cap) –Citoplasma
 RNAt
Aminoacil-RNAt sintetasa

Asa T
SeudoUridinas (Ψ)
RiboTimidinas (T) Asa D
Derivados U Dihidrouridinas (D)
Asa variable

Asa
 Ribosomas

NH2

50 Proteínas
5s L1-L50

33 Proteínas
S1-S33
 Síntesis proteica

TERMINO
Factores de
terminación
UAA
UGA
UAG
Iniciación

ALargamiento
 Regulación genética postranscripcionales

• miARN-bloqueo
• IF2 +P bloquea
• Degradación de RNAm y proteínas
• RNAm largos ➔ Poliproteínas