UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

CURSO: QUÍMICA ANALÍTICA – LABORATORIO

INFORME DE LA PRÁCTICA N° 09

TÍTULO: ESPECTROSCOPIA UV-VIS

Alumno Código
Paucar Altamirano, Víctor 20160137
Rosas Delgado, Karla 20160140

 Horario de práctica: Jueves 11:00 am – 13:00 pm

 Fecha de la práctica: 8 de noviembre del 2018

 Fecha del informe: 15 de noviembre del 2018

LA MOLINA – LIMA – PERÚ

OBJETIVOS

 Construir una curva de calibración absorbancia vs longitud de onda.

 Obtener la ecuación que indique la curva de calibración absorbancia vs
concentración.

RESUMEN

En la presente práctica determinaremos la ecuación que indique la curva de

calibración absorbancia vs concentración, previo reconocimiento del equipo y de una
calibración en curva de absorbancia vs longitud de onda.

Primero, llenar una cubeta de permanganato de potasio. Se introduce la cubeta en el

espectrofotómetro UV-VIS. Se marca el 0 en absorbancia para cada medida. En total
se toman 41 medias, para absorbancia vs longitud de onda.
Para la curva de calibración absorbancia vs concentración, se tiene permanganato a
diferentes concentraciones según se indica en las tablas.

Concluimos que, según la curva de calibración absorbancia vs concentración, la

ecuación obtenida es y = 0.3265x - 0.0065.

INTRODUCCIÓN

La presente práctica tuvo como finalidad hacer el uso del espectrofotómetro UV-VIS,
un instrumento que permite medir la absorbancia. Se basa en la absortividad molar y
la longitud de onda de máxima absorbancia, la cual depende de cada sustancia y varía
con la longitud de onda. La absorbancia varía en forma directamente proporcional con
la concentración de la sustancia absorbente a una determinada longitud de onda.
Una curva de calibración o curva estándar, se determina, experimentalmente,
preparando una serie de soluciones de concentración conocida y midiendo la
absorbancia de cada una de ellas a la longitud de onda de máxima absorbancia. Con
los datos obtenidos se construyen curvas de absorción-concentración. La relación
absorbancia vs distancia de recorrido de la radiación o concentración es lineal,
mientras que con la transmitancia no lo es.
PARTE EXPERIMENTAL

 Reconocimiento del equipo: Espectrofotómetro UV-VIS

 Toma de datos para espectros de absorción: absorbancia vs longitud de onda

Llenar una cubeta de

permanganato de potasio
40 s para tomar el primer
dato de absortividad molar

Se introduce la cubeta en el
espectrofotómetro UV-VIS. Se
marca el 0 en absorbancia para
cada medida. En total se toman 41
medias.

El procedimiento para cada

medida: 20 s para marcar 0,
y 20 s de espera.
Resultados:

λ Logitud de onda (nm) A Absorbancia

400 0.183
405 0.118
410 0.08
415 0.055
420 0.046
425 0.052
430 0.065
435 0.056
440 0.117
445 0.159
450 0.219
455 0.297
460 0.372
465 0.489
470 0.667
475 0.792
480 0.947
485 1.214
490 1.465
495 1.609
500 1.922
505 2.345
510 2.436
515 2.422
520 2.723
525 3.01
530 3.01
535 2.984
540 2.984
545 2.959
550 2.443
555 2.107
560 1.831
565 1.757
570 1.692
575 1.335
580 0.876
585 0.568
590 0.406
595 0.346
600 0.315
  Absorción vs longitud de onda

3.5

2.5
Absorbancia

1.5

0.5

0
400 450 500 550 600
Longitud de Onda (nm)

 Toma de datos para curva de calibración: absorbancia vs concentración (λ =

528 nm)

Ml de 0.5 1 2 3 4 5
permanganato
Conc. Estándar 0.0001 0.0002 0.0004 0.0006 0.0008 0.001
Abs 0.155 0.321 0.65 0.973 1.293 1.63

Curva de calibración:
DISCUSIONES

En la gráfica de espectro de absorción se puede ver que, en el rango establecido de

longitud de onda (400 a 600 nm), la muestra estudiada presenta una gran absortibidad
en la longitud más pequeña. A medida que se van aumentando las longitudes esta va
disminuyendo para luego tener una segunda elevación al ser el λ =528 nm. Después
de ello se aprecia la caída progresiva de la curva. Con esta observación podemos
decir que convendría trabajar la muestra en bandas de luz UV al tener mejor
absortibidad que en el espectro de luz visible (rango establecido).
Con respecto a la curva estándar se puede ver que nos salió un ajuste muy bueno
debido a que el R nos sale 1, esto quiere decir que la calibración ha sido buena y que
los datos que obtengamos al medir la absorbancia de cualquier sustancia que
contenga permanganato de potasio va a ser confiable utilizando esa ecuación

CONCLUSIONES

 Concluimos que, según la curva de calibración absorbancia vs concentración,

la ecuación obtenida es y =1632.7x – 0.0065

BIBLIOGRAFÍA

 https://www.liceoagb.es/quimiorg/docencia/textos/TEMA5.pdf

 https://www.uv.es/qflab/2016_17/descargas/cuadernillos/qf1/castellano/T
eoria/Absorbancia.pdf

 Rayleight, 2007.

 Bermejo, 2010.

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál fue el propósito e hipótesis de la practica ?

Reconocer y calibrar un conductimetro y determinar TDS de muestras acuosas
Construir una curva de valoración conductimetrica acido-base
2. ¿cree usted que ha logrado esta competencia?
No logramos calibrar un conductimetro ya que nos lo dieron calibrado y por el
escaso tiempo que teníamos para realizar el experimento, se logro construir
una curva de valoración conductimetrica con los datos obtenidos en el
experimento los datos se obtuvieron mediante procedimiento de titulación.
3. Tipos de celdas conductimetricas aplicaciones
Se clasifican en:
Según el proceso tenemos Celdas Voltaicas ó Galvánicas Electrolíticas y
Según su forma
 4. ¿Cuál es el propósito e hipótesis de la práctica #9?
Propósito:
 Calcular la absortividad molar y longitud de máxima absorbancia de un
cromófono a partir de un espectro de absorción.
 Construir la curva de calibración.
Hipótesis:
 La absortividad molar y la longitud de onda de máxima absorbancia depende
de cada sustancia.
 La absorbancia varía en forma directamente proporcional con la concentración
de la sustancia absorbente a una determinada longitud de onda.

5. ¿Cree usted que ha logrado esa competencia?

Considerando el protocolo de cada actividad, el equipo de espectroscopia y dichos
reactivos que se emplearon, se logró determinar los datos para cada unidad
correspondida y de esa manera construir la curva de calibración.
6. Explique la espectroscopia de absorción molecular UV-VIS. Aplicaciones
La espectroscopia UV-VISIBLE se basa en la absorción de radiación UV-VISIBLE por
un analito. Se origina un estado excitado y luego elimina su exceso de energía en
forma de calor.
7. ¿Qué son los colores complementarios?
Son dos colores que al ser mezclados en una proporción determinada, el resultado de
la mezcla es un color neutral (gris, blanco y negro). Los colores complementarios
indican la porción del espectro que es absorbida.
8. Explique la Ley de Lambert y la Ley de Beer. Defina transmitancia y
absorbancia y ¿Cuál es la relación entre ellos?

 Ley de Lambert: Se da la relación entre la absorción de la radiación y espesor

del medio absorbante.

 Ley de Beer: Se da la relación entre la concentración de la especie absorbante

y la radiación absorbida. La ley de Beer considera :
- La radiación es monocromática.
- Los centros absorbantes son independientes.
- La sección transversal entre la radiación y la materia es la absorción.
- El único mecanismo entre la radiación y la materia es la absorción.

Transmitancia: Se define como la fracción de luz incidente a una longitud de onda

especificada que pasa a través de una muestra.

Absorbancia: Es la cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra. Se define

como la intensidad después de haber habido la absorción y la intensidad de la luz que
se hace incidir sobre la muestra.

9. A que se refiere la naturaleza dual de la radiación electromagnética.

¿Cuáles son las regiones de le espectro electromagnético? ¿Cuáles la
ecuación que relaciona la velocidad de la luz con la frecuencia de la
radiación? ¿Cuál es la ecuación de Planck?

Se refiere a que posee un comportamiento corpuscular y ondulatorio. Corpuscular, es

decir como partícula, pues la energía se transmite como paquete de energía llamado
fotones. Ondulatorio, porque la forma en la que se mueven y oscilan en todas las
direcciones es en ondas.

Regiones del espectro:

Ecuación de Planck:

Ecuación que relaciona la velocidad de la luz con la frecuencia:

10. Dibuje los componentes generales de un espectrofotómetro de absorción

molecular. Indique cual es la función de cada uno.
  Espectrómetro:

Produce un rango deseado de longitud de onda de luz. Primero un colimador (lente)

transmite un haz recto de luz (fotones) que pasa a través de un monocromador
(prisma) para dividirlo en varias componentes de longitudes de onda (espectro).
Entonces un selector de longitud de onda (ranura) transmite sólo las longitudes de
onda deseadas.

 Fotómetro:

Después de que el rango deseado de longitud de onda de luz pasa a través de la

solución muestra en la cubeta, el fotómetro detecta la cantidad de fotones que se
absorbe y luego envía una señal a un galvanómetro o una pantalla digital.

 Fuente de luz:

La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones:
estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida.

 Monocromador:

El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se

reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de
dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que
lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el
cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige
hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.

 Detector:

El detector es el encargado de captar la radiación y, a su vez, dejarla en evidencia

para su estudio posterior. Existen dos tipos:

a) los que responden a fotones

b) los que responden al calor

 Fotodetectores:

En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para

percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro
visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes móviles del equipo.

 Celdas:
Son los recipientes donde se depositan las muestras líquidas a analizar. El material del
cual están hechas varía de acuerdo a la región que se esté trabajando; son de vidrio o
plástico si se trabaja en la región visible, de cuarzo si se trabaja en la ultravioleta y
de NaCl si se trabaja la región de infrarrojo.

11. ¿Qué es un espectro de absorción; como se construye y que información

permite obtener? Dibuje y explique.

El espectro de absorción de una materia muestra la fracción de la radiación

electromagnética incidente que un material absorbe dentro de un rango
de frecuencias. Es, en cierto sentido, el opuesto de un espectro de emisión.
Cada elemento químico posee líneas de absorción en algunas longitudes de onda,
hecho que está asociado a las diferencias de energía de sus distintos orbitales
atómicos. De hecho, se emplea el espectro de absorción para identificar los elementos
componentes de algunas muestras, como líquidos y gases; más allá, se puede
emplear para determinar la estructura de compuestos orgánicos. Un ejemplo de las
implicaciones de un espectro de absorción es que aquel objeto que lo haga con los
colores azul, verde y amarillo aparecerá de color rojo cuando incida sobre la luz
blanca. Cuando incide una luz a un metal al superar su energía umbral saca un
electrón, si la energía es superior la energía que sobra se convierte en energía
cinética.
 12. ¿Qué es una curva de calibración y como se construye? ¿Como
demuestra si la relación es lineal o cumple con la ley de Lambert y Beer?
Una curva de calibración es la representación gráfica de una señal que se mide en
función de la concentración de un analito. La calibración incluye la selección de un
modelo para estimar los parámetros que permitan determinar la linealidad de esa
curva. Y, en consecuencia, la capacidad de un método analítico para obtener
resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto
en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo.
La curva de calibrado se construye midiendo la señal analítica en cada uno de los
patrones previamente elaborados. En el eje de ordenadas se asigna el valor de la
señal medida y en el eje de abscisas la concentración del patrón. De esta forma
podemos señalar puntos en la gráfica según las coordenadas (concentración (x), señal
(y)).

A estos puntos podemos aplicar la regresión lineal, generalmente mediante el ajuste

por mínimos cuadrados, para obtener la recta que los relaciona y su función.