UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO-PUNO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGRONOMICA

TRABAJO ENCARGADO SEMESTRE:I .2019

ESCUELA PROFESIONAL: ingeniería agronómica
DE: Álvarez peralta Amílcar
PARA: Ing. Alonso Astete Maldonado
ASUNTO: entrega de trabajo encargado
TEMA: normas, instrumentos del mega laboratorio, UNA PUNO
CURSO: biotecnología
1. TITULO

NORMAS, INSTRUMENTOS DEL MEGANABORATORIO, UNA PUNO

2. MARCO TEORICO

2.1. Normas generales

 No fumes, comas o bebas en el laboratorio.

 Utiliza una bata y tenla siempre bien abrochada, así protegerás tu ropa.
 Guarda tus prendas de abrigo y los objetos personales en un armario o taquilla
y no los dejes nunca sobre la mesa de trabajo.
 No lleves bufandas, pañuelos largos ni prendas u objetos que dificulten tu
movilidad.
 Procura no andar de un lado para otro sin motivo y, sobre todo, no corras dentro
del laboratorio.
 Si tienes el cabello largo, recógetelo.
 Dispón sobre la mesa sólo los libros y cuadernos que sean necesarios.
 Ten siempre tus manos limpias y secas. Si tienes alguna herida, tápala.
 No pruebes ni ingieras los productos.
 En caso de producirse un accidente, quemadura o lesión, comunícalo
inmediatamente al profesor.
 Recuerda dónde está situado el botiquín.
 Mantén el área de trabajo limpia y ordenada.

2.2. Normas para manipular instrumentos y productos

 Antes de manipular un aparato o montaje eléctrico, desconéctalo de la red

eléctrica.
 No pongas en funcionamiento un circuito eléctrico sin que el profesor haya
revisado la instalación.
 No utilices ninguna herramienta o máquina sin conocer su uso, funcionamiento
y normas de seguridad específicas.
 Maneja con especial cuidado el material frágil, por ejemplo, el vidrio.
 Informa al profesor del material roto o averiado.
 Fíjate en los signos de peligrosidad que aparecen en los frascos de los productos
químicos.
 Lávate las manos con jabón después de tocar cualquier producto químico.
 Al acabar la práctica, limpia y ordena el material utilizado.
  Si te salpicas accidentalmente, lava la zona afectada con agua abundante. Si
salpicas la mesa, límpiala con agua y sécala después con un paño.
 Evita el contacto con fuentes de calor. No manipules cerca de ellas sustancias
inflamables. Para sujetar el instrumental de vidrio y retirarlo del fuego, utiliza
pinzas de madera. Cuando calientes los tubos de ensayo con la ayuda de dichas
pinzas, procura darles cierta inclinación. Nunca mires directamente al interior
del tubo por su abertura ni dirijas esta hacia algún compañero. (ver imagen)

 Todos los productos inflamables deben almacenarse en un lugar adecuado y

separados de los ácidos, las bases y los reactivos oxidantes.
 Los ácidos y las bases fuertes han de manejarse con mucha precaución, ya que
la mayoría son corrosivos y, si caen sobre la piel o la ropa, pueden producir
heridas y quemaduras importantes.
 Si tienes que mezclar algún ácido (por ejemplo, ácido sulfúrico) con agua, añade
el ácido sobre el agua, nunca al contrario, pues el ácido «saltaría» y podría
provocarte quemaduras en la cara y los ojos.
 No dejes destapados los frascos ni aspires su contenido. Muchas sustancias
líquidas (alcohol, éter, cloroformo, amoníaco...) emiten vapores tóxicos.

2.3. EQUIPOS DE PROTECCION PERSONAL

• Protección de la vía respiratoria:

 EPI´s dependientes del medio ambiente

 EPI´s independientes del medio ambiente

• Protección de la vía dérmica y parenteral:

 Guantes
 Ropa de protección

• Protección de la vía conjuntiva:

 Protecciones oculares
 Pantallas o viseras faciales
 Capuz (respiratoria y conjuntiva)
• Protección total:

 Traje de aislamiento

2.4. MANTENIMIENTO DE LABORATORIO:

Mantenimiento preventivo y correctivo del equipo de laboratorio puede definirse como la

programación de actividades de inspección de los equipos, tanto de funcionamiento como de
limpieza y calibración, que deben llevarse a cabo en forma periódica con base en un plan de
aseguramiento y control de calidad.

1. Su propósito es prevenir las fallas, manteniendo la óptima operación. La característica

principal de este tipo de mantenimiento de equipos de laboratorio es la de inspeccionarlos,
detectar las fallas en su fase inicial y corregirlas en el momento oportuno.

2. Con un buen mantenimiento preventivo se obtiene experiencia en diagnóstico de fallas y del

tiempo de operación seguro de un equipo. Los responsables de la operación deben desarrollar
un programa de mantenimiento preventivo basado en un esquema de aseguramiento y control
de calidad para mantener operando correctamente los equipos con la finalidad de reducir la
pérdida de información, previniendo reparaciones, el deterioro de los equipos y evitando gastos
extraordinarios. Esto debe arrancar desde la instalación de equipos de laboratorio.

3. El programa de mantenimiento y calibración de equipos de laboratorio debe incluir, además

de las estaciones de medición con todos sus equipos (de calibración y periféricos, fuentes de
energía, sistemas de iluminación y de control de condiciones ambientales), a las instalaciones
centrales (centro de control, laboratorios, áreas de mantenimiento y de almacenamiento de
partes, consumibles y equipos).

4. La aplicación del programa de mantenimiento es un proceso dinámico que debe actualizarse

en la etapa de familiarización con equipo de laboratorio cuando se adquieren nuevos modelos
o cuando hay cambios.

5. En general en los mantenimientos preventivos se deben incorporar todos los registros

documentados de las actividades de rutina, de las calibraciones e inspecciones, así como de las
acciones de mantenimiento correctivo realizadas debido a fallas o a eventos no programados.

2.4.1. Los programas de mantenimiento preventivo deben incluir elementos tales

como:
• Inventarios de equipo por organización.

• Listas de partes y refacciones por equipo, incluyendo datos de los proveedores.

• Frecuencia de inspección / mantenimiento por equipo.

2.4.2. Programas de calibración.

• Programas de sustitución de equipos.

• Lugares y responsables de reparación de equipos.

• Contratos de servicios.

• Registros mensuales de las actividades de prueba, inspección y mantenimiento.

• Formatos de verificación y recepción de consumibles, refacciones y equipos.

• Requisiciones y/o órdenes de compra.

• Registros sobre movimiento o cambio de ubicación de equipos.

 El trabajo de laboratorio debe tomarse enserio.

 Usar bata de algodón preferente, por que de otro material arde con facilidad.

 Usar mascarilla para trabajar con sustancias toxicas, volátiles para e

v i t a r i n t o x i c a c i o n e s p o r inhalación.

 Usar gafas, lentes o careta para proteger la cara y los ojos.

 Usar guantes de asbesto al manejar sustancias calientes para protegerse de quemaduras.

 Usar zapatos antiderrapantes.

 No fumar.

 No probar los reactivos.

 No jugar, caminar, no correr en el laboratorio para evitar accidentes.

 Trabajar con el pelo recogido.

 Evitar las visitas por que distraen.

 Evitar realizar trabajos ajenos al laboratorio.

 No trabajar solo.

 Conocer donde esta las salidas de emergencia.

 Conocer donde esta el equipo de seguridad.

 El lugar de trabajo debe estar organizado y limpio.

 Realizar el experimento hasta que se este seguro del plan por seguir.

 Registrar todos los sucesos del experimento, aun los accidentes que hayan ocurrido.

 Evitar mezclar reactivos solo por curiosidad.

 Conocer los riesgos que implica el equipo y las sustancias químicas con que se trabaja.

 Cuando se trabaja con sustancias químicas, debe evitarse tocar ojos

y c a r a h a s t a d e s p u é s d e haberse lavado las manos.

 Manipular los reactivos sólidos con una espátula; nunca con la mano directamente.

 Evitar transportar sustancias químicas innecesariamente.


 Si algún reactivo se ha derramado, limpiar inmediatamente.

 Realizar el trabajo de laboratorio con pequeñas cantidades de reactivos para evitar riesgos.

 Vaciar los reactivos líquidos con un agitador para evitar escurrimientos en los frascos.

 Evitar almacenar sustancias dentro de la campana.

2.4.3. Etiquetar correctamente los reactivos preparados en laboratorio con los

siguientes datos:

a. Nombre y concentración del reactivo

b. Fecha de preparación

c. Nombre de quien lo preparo

d. Letrero de prevención

 No debe usarse ningún reactivo sin etiqueta y esta se debe leer antes de utilizar
el reactivo para evitar confusiones.

 Evitar regresar pequeños residuos de reactivos al frasco original para evitar contaminarlo.

 Procurar mezclar sustancias que produzcan una reacción en baños de hielo.

 Procurar trabajar con soluciones diluidas de ácidos y bases.

 Los reactivos deben tomarse de un mismo recipiente hasta que se acabe y

deben almacenarse adecuadamente según su naturaleza química.
 Almacenar en un refrigerador las sustancias inestables.

 Calentar a baño maría sustancias volátiles e inflamables para evitar incendios.

 Tener en el laboratorio una cantidad mínima de sustancias líquidas inflamables

para aminorar los riesgos que estas producen.

 Cuando las sustancias son explosivas, trabajar en el orden de microgramos.

 Almacenar sustancias inflamables en un gabinete a prueba de fuego.

 Las sustancias químicas de mal olor deben estar en un solo sitio ventilado.

 Trabajar con sustancias volátiles lejos del fuego.

 Mantener limpias las botellas que contienen reactivos.

 No calentar ningún líquido en sistemas cerrados por que pueden explotar.

 Almacenar el tubo de vidrio en forma horizontal para disminuir la probabilidad de ruptura.

 Nunca colocar objetos calientes sobre una superficie combustible.

 Estudiar la distribución de los aparatos en el laboratorio.

 Evitar colocar el equipo en las orillas de la mesa.

 Desechar todo el material de vidrio o porcelana estrellado o roto.

 No guardar lápices afilados, objetos cortantes o punzantes en la bata.

 Eliminar tapones de corcho o hule con residuos de vidrio roto.

 Utilizar una lima triangular para cortar vidrio y se debe redondear con calor.

 Usar la perilla de seguridad cuando se utilice pipeta.

 Lavar las manos al terminar el trabajo, limpiar el equipo y material y colocarlos en su lugar.

 Tener en un lugar visible los números de emergencia.

 Reportar al personal autorizado cualquier anomalía o accidente.

 Revisar periódicamente el extinguidos y le material del botiquín.

 Revisar que existe información acerca de qué hacer en caso de accidentes.

 Debe asignarse un sitio exclusivo para basura y deshechos sólidos.

 Almacenar los reactivos líquidos de desecho en frascos a fin de darles un

tratamiento adecuado y evitar así la contaminación del ambiente.
 Verter sustancias ácidas o básicas en la tarja y hacer correr suficiente agua, si
es que no hay otra opción para eliminar los desechos.

 Establecer un sistema para la seguridad y cuidados de los ecosistemas, con base

en los desechos del laboratorio.

 Hablar en el laboratorio está permitido, pero sin distraerse.

 Se debe evitar trabajar cuando se está fatigado por ser esta una de
l a s p r i n c i p a l e s c a u s a s d e accidentes.

3. RESULTADOS:
3.1. EQUIPOS DE LABORATORIO EN CULTIVO INVITRO:
3.1.1. MATERIAL Y EQUIPO DE LABORATORIO.

Para el desarrollo de la investigación y docencia, en el campo del cultivo de tejidos, se requieren

de materiales que permitan la preparación de fórmulas nutrimentales con el objetivo de cultivar
tejidos, órganos y células vegetales in vitro. Es muy importante que los materiales y equipos de
uso común en el laboratorio se identifiquen por su nombre correcto y uso especifico que tiene
cada uno, pero mas importante es saber manejarlo correctamente en el momento oportuno,
teniendo en cuenta los cuidados y normas especiales para el uso de aquellos que así lo
requieran. Los instrumentos y útiles de laboratorio están constituidos de materiales diversos y
se clasifican de la siguiente manera:

3.1.2. MATERIAL DE VIDRIO:

El instrumental de vidrio usado para realizar investigaciones o reacciones químicas debe ser
fabricado con materiales resistentes a la acción de los agentes químicos. Se utiliza bastante
material de vidrio en la preparación de medio de cultivo y en la siembra de tejidos vegetales. El
material que se seleccione deberá ser de alta calidad, resistente a altas temperaturas y a ácidos
y no liberar sustancia alguna, especialmente aquélla que es utilizada en la conservación de
soluciones madres. El vidrio corriente no sirve para la fabricación de instrumentos de laboratorio
por ser muy frágil y vulnerable a los agentes químicos y físicos. Por tal razón se construyen de
cristal de vidrio, pudiendo ser este de vidrio grueso o delgado.
 3.2. INSTRUMENTOS Y APARATOS:

Para el cultivo de tejidos hay pocos aparatos e instrumentos diseñados especialmente para este
propósito. Sin embargo, se pueden escoger varios instrumentos médicos, así como también
muchos aparatos de microbiología.
 3.3. LABORATORIO DE CULTIVO DE TEJIDOS:

El Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales (CVT) ofrece a productores de plantas bajo

condiciones de invernadero, viveristas, florerías, universidades e institutos, la micropropagación
de plantas de interés comercial o de investigación con protocolos ya establecidos, la obtención
de protocolos para micropropagar diferentes especies, la producción de células en suspensión
para diversos estudios, la transformación genética a través de biobalística y Agrobacterium
tumefasciens, el diseño de laboratorios para la micropropagación y asesorías en planeación de
producción bajo condiciones in vitro.

El Laboratorio de CTV tiene la capacidad de escalamiento de producción de plantas de hasta 10

mil especímenes y entrega de las mismas bajo condiciones in vitro, así como entregas periódicas
de células en suspensión de hasta 15 litros, protocolos variantes según las especies con la
posibilidad de realizar tres a la vez y la transformación genética de hasta cinco especies
simultáneamente.
Este laboratorio cuenta con cuartos de incubación con ambiente controlado de fotoperiodo y
temperatura, campanas de flujo laminar, autoclaves verticales, refrigeradores, balanzas,
microscopio óptico, cámara de baja presión para bombardeo de micropartículas, tanque de
helio, bomba de vacío y agitadores con incubación.
 3.4. TECNICAS DE ESTERILIZACION:

las condiciones de esterilidad de este son fundamentales de importancia porque todos los
medios empleados contienen nutrientes, los cuales facilitan el crecimiento de muchas bacterias
y hongos. El crecimiento abundante de ellos destruiría el crecimiento más lento de los tejidos
vegetales; aun los contaminantes con crecimiento lento son indeseables, pues pueden producir
toxinas que afectan el crecimiento de las células vegetales, por estas razones, el material
vegetativo se desinfecta superficialmente antes de iniciar un cultivo in vitro y todo el manejo de
los tejidos se hace en condiciones asépticas en una cámara de flujo laminar de aire, en áreas
especificas para este propósito.

3.4.1. ESTERILIZACION POR IRRADIACION.

Ayerbe Mateo (1990) La esterilización de medios nutritivos por irradiación (los rayos gamma),
no se usa casi nunca en cultivo de tejidos, ya que resulta muy cara si se compara con el
procedimiento habitual de la autoclave. Aunque la esterilización por rayos gamma es tan eficaz
como la realizada en autoclave, el crecimiento vegetal que se obtiene es significativamente
menor en los medios esterilizados de esta forma. Cuando se esterilizan tubos, cajas u otros
recipientes de plástico donde la utilización del autoclave es imposible, se emplea casi siempre
la esterilización por radiación gamma.

3.4.2. ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN.

Ayerbe Mateo (1990), en la esterilización por filtración (las soluciones, medios liquidos,etc.
Pasan a través de un filtro de membranas) son retenidas todas las partículas, microorganismos
y virus que son mayores que el correspondiente poro del filtro. La esterilización por filtrado se
utiliza generalmente cuando se quiera añadir a un medio nutritivo una sustancia termolabil “x”,
se recomienda un filtro de nitrato o acetato de celulosa. Antes se utilizaba frecuentemente vacío
en la esterilización por filtrado, el liquido se filtraba bajo vacío, a través de una membrana, en
un matraz Buchner, y se utilizaban en el proceso bombas de vacío. Hoy en día la solución que va
a ser filtrada es ayudada generalmente por presión producida por aire o por la misma jeringa.

4. CONCLUSIONES.

 La visita al mega laboratorio dentro de las instalaciones de la UNA-PUNO, fue de gran

importancia, ya que permite tener un amplio conocimiento sobre los materiales que se
usa, tanto como los equipos que se usa y su aplicación en los diferentes temas de
investigación para solucionar o experimentar temas de interés regional y nacional.
 Las normas de seguridad y el uso de los EPPs son vitales para el operario ya que
resguarda su integridad personal, por otra parte las normas de seguridad y uso de los
reactivos, materiales son imprescindibles, para la operación de una prueba.
 Los materiales presentados en el mega laboratorio son de equipos que permiten que
se tenga mas fácil temas de investigación en un amplio campo de su aplicación, sea en
todos los sectores que concierne el tema abordado.
5. BIBLIOGRAFIA:

 Hurtado y Merino M.E. 1987. Cultivo de tejidos vegetales. Edit. Trillas. México.
 Barba Alvarez. 1988. Cultivo de tejidos vegetales. Edit. Trillas.
 Agramonte, D; Peñalver, F y Dita, M (1998) Aclimatización En: Pérez, JN (Ed) Propagación
y Mejora de plantas por biotecnología. Instituto de biotecnología de las plantas, santa
Clara, Villa Clara, Cuba.
 Hartmann, CH (1985) Propagación de plantas, principios y prácticas. Compañía Editorial
Continental, M FAO 1988 Mulberrycultivation. Boletín de servicios agrícolas de la FAO.
 http://www.inia.org.uy/publicaciones/documentos/lb/ad/2004/ad_382.pdf
 http://www.youtube.com/watch?v=T8xVOskdrE0
 http://www.youtube.com/watch?v=W6_H92iDU3w
 http://www.fagro.edu.uy/fisveg/docencia/cursos%20posgrado%20y%20optativos/curs
o20de20micropropagacion/mateoricos/Micropropagacin202009.pdf