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Eficiencia de la hidrodestilación asistida por ósmosis para la extracción de

aceites esenciales de

especias de orégano (Origanum vulgare subsp. viride)

Seyed Mohammad Bagher Hashemi1

Nooshin Nikmaram2

Sara Esteghlal3

Amin Mousavi

Khaneghah4*

Mehrdad Niakousari3

Francisco J. Barba 5

Shahin Roohinejad6,7

Mohamed

Koubaa 8*

1 Departamento de Ciencia y Tecnología de los Alimentos, Facultad de Agricultura,

Universidad de Fasa, Fasa, Irán
2 Departamento de Ciencia y Tecnología de los Alimentos, Universidad Islámica Azad,
Sabzevar, Irán
3 Departamento de Ciencia y Tecnología de los Alimentos, Facultad de Agricultura,
Universidad de Shiraz, Shiraz, Irán
4 Departamento de Ciencias de la Alimentación, Facultad de Ingeniería Alimentaria,
Universidad de Campinas (UNICAMP),
Calle Monteiro-Lobato 80. Apartado postal: 6121. Código postal: 13083-862,
Campinas, São Paulo, Brasil
5 Área de Nutrición y Ciencias de la Alimentación, Facultad de Farmacia, Universitat
de València, Avda. Vicent Andrés Estellés, s/n
46100 Burjassot, Valencia, España
6 Burn and Wound Healing Research Center, Division of Food and Nutrition, Shiraz
University of Medical
Sciences, Shiraz, Irán
7 Departamento de Tecnología de Alimentos e Ingeniería de Bioprocesos, Max
Rubner-Institut, Instituto Federal de Investigación del
Nutrición y alimentación, Haid-und-Neu-Straße 9, 76131 Karlsruhe, Alemania
8 Departamento de Ingeniería de Procesos Industriales, Laboratorio Integrado de
Transformación de Materiales
Renovables (UTC/ESCOM, EA 4297 TIMR), Universidad Tecnológica de Compiègne,
Centre de Recherche de
Royallieu, CS 60319, 60203 Compiègne Cedex, Francia
*Autores Correspondientes:
Amin Mousavi Khaneghah, Ph.D
Correo electrónico: mousavi@fea.unicamp.br
Teléfono: +55(19) 3521-0091

Mohamed Koubaa, Ph.D

Email:koubaa.mohamed@gmail.com
Teléfono: +33 3 44 23 88 41
Título de la carrera: Extracción por calentamiento óhmico del aceite esencial de
orégano

Resumen
El objetivo de este trabajo era investigar los efectos de la calefacción óhmica asistida.
hidrodestilación (OAHD), aplicada a diferentes voltajes (100, 150, y 200) V, en los
características cualitativas y cuantitativas del aceite esencial extraído de la hierba de
orégano
(Origanum vulgare subsp. viride), comparado con una hidrodestilación convencional
(HD)
procedimiento. Las composiciones de los aceites esenciales extraídos (utilizando
OAHD y HD) fueron
se evaluará mediante cromatografía de gases - espectrometría de masas (GC-MS). A
2,2-difenil-1-
picrylhydrazyl free radical (DPPH) method was applied in order to evaluate antioxidant
actividad. La actividad antimicrobiana así como la mínima concentración inhibitoria
(MIC) de las muestras contra Bacillus cereus, Escherichia coli O157:H7,
Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus fueron
determinado. Entre los 50 compuestos identificados, el timol y el 4-terpineol fueron los
más comunes.
abundantes componentes independientemente de la técnica utilizada (OAHD o HD).
No
se observaron diferencias significativas entre los métodos de EH y OAHD (todos los
voltajes) en
en términos de rendimiento de extracción, y entre HD y OAHD (a 100 V) en términos
de antioxidantes.
(los valores de concentración de media inhibición (IC50) fueron 33,4 μg/mL y 31,2
μg/mL,
respectivamente). Sin embargo, el tiempo de extracción se redujo significativamente
cuando la OAHD
se utilizó la extracción en comparación con la EH. Para la actividad antimicrobiana, los
valores de MIC
indicó una mayor actividad inhibitoria contra S. aureus y B. cereus (con CMI similar).
de 6,25 g/mL) que P. aeruginosa (25 g/mL). Sin embargo, ninguna influencia
significativa
entre las diferentes tensiones aplicadas y los dos métodos de extracción.
Por lo tanto, el OAHD podría utilizarse como método de extracción "verde" en
comparación con la EH.

Palabras clave: Aceite esencial; Origanum vulgare; hidrodestilación asistida por

óhmicos;
hidrodestilación convencional.

Relevancia industrial
La producción de aceites esenciales a escala industrial se realiza principalmente
mediante
método convencional de hidrodestilación. Sin embargo, la creciente necesidad de
aplicar más
Los procesos de extracción eficientes y sostenibles han llevado a los investigadores a
evaluar nuevos métodos alternativos no convencionales con el fin de reemplazar los
existentes. Entre los no
tecnologías convencionales aplicadas a la extracción de aceites esenciales de
materiales vegetales, óhmicos-
La hidrodestilación asistida tiene un gran potencial. Permite reducir el tiempo de
extracción en comparación con la hidrodestilación convencional, lo que reduce
significativamente el consumo de energía. La aplicación de la tecnología de
hidrodestilación asistida por ósmosis en las industrias productoras de aceites
esenciales es, por lo tanto, de gran importancia.
1. Introducción
El orégano (Origanum vulgare) es una de las especias más consumidas en todo el
mundo debido a que
alto contenido en aceite esencial, que puede proporcionar el sabor deseado en los
platos tradicionales
(Lukas, Schmiderer y Novak, 2015). De acuerdo con Ietswaart (1980), hay seis
subespecie (subespecie) de O. vulgare (gracile subespecie (Kock), glandulosum
subespecie (Desfon-)
taines), hirtum subsp. (Link), vulgare L. subsp., virens subsp.
y viride subsp. (Boissier) Hayek). Tres subespecies comunes (viride, vulgare y
gracile) están creciendo en Irán, que se identifican de acuerdo a algunas diferencias
en sus
morfología. Por ejemplo, inflorescencias compactas, brácteas de color verde y corola
blanca
para las subespecies virales, mientras que las inflorescencias compactas y las
brácteas de color púrpura
y corola para vulgare subsp. (Andi, Vahideh, Zabihollah, & Javad, 2011).
El aceite esencial extraído de esta especie ha sido ampliamente utilizado como
remedio popular debido a
sus actividades antimicrobianas, antimutagénicas y antioxidantes (Bakkali, Averbeck,
Averbeck, & Idaomar, 2008; De Martino, De Feo, Formisano, Mignola, & Senatore,
2009).
Propiedades antioxidantes y eliminadoras de radicales libres de los extractos de
orégano (p.e...,
aceite esencial) han sido bien documentados en la literatura (Botsoglou, Govaris,
Botsoglou, Grigoropoulou y Papageorgiou, 2003; Henn et al., 2010; Martucci, Gende,
Neira, & Ruseckaite, 2015), y atrajo el interés tanto de investigadores académicos
como de
industria alimentaria (Hussain et al., 2011). Además, los antimicrobianos y
antiparasitarios
propiedades fueron demostradas por el aceite esencial de orégano (Béjaoui,
Chaabane, Jemli,
Boulila, & Boussaid, 2013; Shafaghat, 2011). Debido a los numerosos métodos de
extracción aplicados, la evaluación de la calidad y cantidad de los aceites esenciales
extraídos es
importante en aras de la comparación.
La hidrodestilación se considera el método más utilizado para la extracción de
aceites esenciales de plantas. Aunque se utiliza ampliamente, esta técnica requiere
mucho tiempo y dinero.
generalmente conduce a la degradación de las moléculas más termolábiles. Para
superar estos
se han introducido numerosos enfoques y técnicas, entre ellos los óhmicos.
calentamiento, extracción por solvente presurizado y extracción asistida por
microondas (Golmakani &
Rezaei, 2008 ; Binello et al., 2014).
El calentamiento óhmico es considerado como una tecnología innovadora, y se aplicó
en una amplia gama de aplicaciones.
gama de aplicaciones (por ejemplo, escaldado, evaporación, deshidratación,
fermentación, extracción,
y esterilización) (Knirsch, Alves dos Santos, Martins de Oliveira Soares Vicente, &
Vessoni Penna, 2010). En este método, el calor se produce en forma de energía
interna
transformación dentro del material (Sastry & Barach, 2000), constituyendo así una de
las
principales ventajas frente a la calefacción convencional (Sastry, 2004). Otras ventajas
reducir el tiempo de extracción, reducir el consumo de energía, mejorar la calidad de
vida de las personas y el medio ambiente.
rendimiento de extracción y conservación de las moléculas más termolábiles (Pathak,
2011;
Rostagno & Prado, 2013; Dom, 2014). Por lo tanto, este método fue exitoso
aplicado para la extracción de aceites esenciales de numerosas especies de hierbas
como Zataria
multiflora Boiss (tomillo Shirazi) (Gavahian et al., 2011), Thymus vulgaris L. (Gavahian,
Farahnaky, Javidnia, & Majzoobi, 2012), Mentha piperita (Gavahian, Farahnaky,
Farhoosh, Javidnia y Shahidi, 2015; Gavahian, Farhoosh, Javidnia y Shahidi, &
Farahnaky, 2015), y Prangos ferulacea Lindle (Seidi Damyeh & Niakousari, 2016).

Hasta donde sabemos, no se ha llevado a cabo ningún trabajo de investigación para

comparar los métodos de hidrodestilación (HD) e hidrodestilación asistida por óhmicos
(OAHD) para los siguientes fines
extracción de aceite esencial de la planta de orégano. El objetivo de este estudio fue
evaluar
el impacto de las diferentes tensiones óhmicas en las características cuantitativas y
cualitativas
de aceite esencial de Origanum vulgare (subsp. viride). La cinética y los rendimientos
de la extracción,
la composición y las actividades antioxidantes, así como las actividades
antimicrobianas del
se compararon los aceites esenciales extraídos (por HD y OAHD).

2. Materiales y métodos
2.1. Material vegetal
Orégano seco (O. vulgare subsp. viride) planta (cultivada, 12 % de humedad, seca)
(30-40) °C durante tres días) se obtuvo de la Universidad de Ferdowsi, de
Mashhad (Khorasan Razavi, Irán) en septiembre de 2015. Los materiales vegetales se
guardaban en el
oscuro a 4 °C antes de su uso.

2.2. Extracción de aceites esenciales

2.2.1. Extracción por hidrodestilación convencional
La muestra de orégano (20 g) fue suspendida en 500 mL de agua destilada y luego
hidrodestilada.
durante 2 h en un aparato Clevenger totalmente de vidrio (Figura 1a), como se
describió anteriormente (La
Comisión de Farmacopea Británica, 1988). La muestra de aceite esencial seco se
obtuvo utilizando
anhidro y se mantuvo en frascos sellados en el frigorífico (4 °C) hasta su análisis.

2.2.2. Extracción de hidrodestilación asistida por óhmicos (OAHD)

La extracción de aceite esencial de orégano con OAHD se realizó a diferentes voltajes
(100-200) V. La unidad de extracción incluía una cámara de teflón en forma cilíndrica
(7-cm
diámetro interior y 25 cm de longitud), y estaba equipado con dos electrodos hechos
de
titanio (Figura 1b). La especificación de un sistema totalmente automatizado para el
control de
voltaje (0-300) V, corriente (0-16) A, y temperatura, datos de registro permitidos
durante el
experimento. Un aparato de vidrio tipo Clevenger fue unido a la extracción.
de la cámara. se cargaron en la cámara 20 g de material vegetal en forma seca, y
la suficiente conductividad eléctrica entre los dos electrodos fue proporcionada por la
adición
de 500 ml de solución de NaCl (2,85 % p/v). La temperatura requerida de la solución,
hasta
hasta el punto de ebullición, se logró aplicando voltajes constantes (100-200) V.
Después de que el
recogida del aceite esencial extraído, un paso de secado sobre el sulfato de sodio
anhidro
y las muestras obtenidas se conservaron en frascos sellados en el frigorífico (4 °C).
hasta una evaluación más detallada.

2.3. Análisis de aceites esenciales

El EO extraído por HD convencional y OAHD fue analizado por gas
cromatografía - espectrometría de masas (GC-MS) (6890N, Agilent Technologies, Palo
Alto,
CA, EE.UU.). El horno estaba equipado con un HP-5MS (Agilent Technologies,
Palo Alto, CA, USA) columna capilar (30 m de longitud, 0,25 mm de diámetro interno, y
0,25-μm espesor de la película). Las muestras se diluyeron en n-hexano (1:10, v/v), y
luego 1 μL
fue inyectado con una proporción de 1:10. El inyector se ha ajustado a 290 °C y el gas
portador
La velocidad (de helio) se ajustó a 0.8 mL/min. La temperatura inicial del horno era de
ajustada a 50 °C y mantenida durante 5 minutos, luego elevada a 240 °C a 3 °C /min,
seguida de una subida adicional a 300 °C a 5 °C /min. Se permitió una retención final
de 3 minutos para una
limpieza de columnas. Para la evaluación de los Estados miembros, se utilizó la
ionización por impacto de electrones a 70 eV, y
los análisis se realizaron en modo de escaneo completo. La composición de los
aceites esenciales era la siguiente
se identifican comparando sus patrones de fragmentación del espectro de masas con
los de otros espectros similares
compuestos de una base de datos (biblioteca Wiley/NBS), así como comparando su
retención
con los de la literatura. Por cada compuesto identificado en el cromatograma,
se determinó el porcentaje de la superficie del pico en relación con la superficie total
del pico, y
reportada como cantidad relativa de ese compuesto (Hashemi et al., 2015).

2.4. Conductividad eléctrica

La ecuación (1) se utilizó para calcular la conductividad eléctrica (σ) (S/m) a partir de
los siguientes datos
de la tensión y la corriente aplicadas (Zell, Lyng, Cronin y Morgan, 2009).
La Ecuación (1)
donde σ es la Conductividad Eléctrica (S/m), I es la intensidad de la corriente (A), V es
la tensión
(V), L es la distancia entre los electrodos (m), y A es la superficie del electrodo.
(m2).

2.5. Determinación del rendimiento de aceites esenciales

El rendimiento de extracción (Y) de EO se determinó según la ecuación (2).
La Ecuación (2)
donde mo es la masa del aceite esencial extraído (g), y mh es la masa de hierba (g)
utilizada
para la extracción.

2.6. Análisis de datos cinéticos

Tasas constantes de extracción (k1: tasa de extracción constante primaria y k2: tasa
de extracción secundaria)
tasa de extracción constante (mL/min) y capacidad de extracción (S; mL) se calcularon
a partir de
el gráfico del aceite esencial extraído en función del tiempo.

2.7. Propiedades antioxidantes de los aceites esenciales

DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazilo) capacidad de absorción de radicales libres de los
productos esenciales.
se probó el aceite como se describió anteriormente (Burits & Bucar, 2000). El
experimento del blanco
se realizó en las mismas condiciones, con metanol en lugar de aceite esencial.
La actividad de búsqueda se determinó de acuerdo con la ecuación (3).
La Ecuación (3)

donde Ablank es la absorbancia del blanco, y es la absorbancia del ensayo.

Asample

compuesto.
La concentración de aceite esencial que proporciona una inhibición del 50 % (IC50) se
calculó a partir de los siguientes datos
gráfico del porcentaje de inhibición frente a la concentración de aceite esencial.
Butilado
hidroxianisol (BHT) se utilizó como control positivo para facilitar la comparación, y
todas las
se realizaron por triplicado.

2.8. Cepas bacterianas y condiciones de cultivo

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923,
Salmonella typhimurium ATCC 14028, Escherichia coli O157:H7 ATCC 3515), y
Bacillus cereus ATCC 10876 fue suministrado por la Escuela de Veterinaria de la
Universidad de Shiraz, Irán. Todas las cepas utilizadas se mantuvieron en una
solución de glicerol al 20 % en agua a -80 °C. El
se reactivaron en el caldo de soja de la tripticasa (Himedia, India) y se incubaron en
aeróbico a 37 °C durante la noche. Las tres veces cultivadas en caldo medio fueron
para todas las cepas antes de los experimentos. La concentración mínima de
inhibición
(MIC) se midieron como se describió anteriormente (Hajlaoui et al., 2010). Bacteriano
se prepararon inoculos a partir de cultivos de caldo de 14 h y las suspensiones se
ajustaron a 0,5
Normas de turbidez de McFarland, aproximadamente 2 × 107 CFU/mL. Soluciones
madre de
el aceite esencial se preparó en un 10 % de dimetilsulfóxido, con la concentración más
alta
(100 mg/mL) para ser probado.

2.9. Análisis estadístico

Los resultados obtenidos se analizaron estadísticamente mediante un análisis
unidireccional de la varianza.
(ANOVA), y las diferencias significativas entre los grupos se definieron por las
prueba de rango múltiple y prueba t. Todos los análisis estadísticos se realizaron
utilizando SPSS
software v.20. Las diferencias de medias se consideraron significativas cuando
p<0,05.

3. Resultados y Discusión
3.1. Análisis de la composición de los aceites esenciales
Las composiciones de los aceites esenciales extraídos por ambos métodos (HD y
OAHD)
se evaluaron utilizando GC-MS. Cincuenta compuestos fueron identificados
independientemente de los
técnica utilizada y el voltaje aplicado para el OAHD, siendo el aceite esencial
predominante extraído de O. vulgare subsp. viride thymol (28-32) %, 4-terpineol (10-
12) %, y α-
terpineno (7,5-10) % (Tabla 1).

Al aplicar 200 V para OAHD, cantidades más altas de los compuestos antes
mencionados
en comparación con la EH. Por ejemplo, el timol (el monoterpeno más abundante en el
extracto) presentó (32±1) % en OAHD EO (a 200 V), comparado con el
(28,1±0,5) % en extracto HD. El segundo compuesto más abundante fue el 4-terpineol,
con
(12,1±1,1) % y (10,2±0,5) % en OAHD (200 V) y HD EO, respectivamente. En otro
estudio realizado por Sarikurkcu et al (2015), timol (58,31 %) y linalool (96,31 %)
son los dos componentes principales de los aceites esenciales extraídos de Origanum
vulgare subsp. vulgare y Origanum vulgare subsp. hirtum por HD, respectivamente. El
las variaciones observadas en la composición de los aceites esenciales entre especies
de orégano es
atribuido principalmente a la morfología de la planta, a las condiciones climáticas, a la
la ubicación geográfica de los sitios de recolección y el estadio vegetativo, así como
algunas características genéticas de la especie.
y factores ambientales (Bisht, Chanotiya, Rana, & Semwal, 2009; Karamanos &
Sotiropoulou, 2013; Loizzo et al., 2009). Por otra parte, se observaron diferencias en la
composición de los aceites esenciales, según el método de extracción (Mirhosseini,
Rahimmalek, Pirbalouti y Taghipoor, 2015) y de un año para otro (Mechergui,
Jaouadi, Coelho y Khouja, 2016). Generalmente, el calentamiento óhmico preserva un
sabor más alto
calidad, lo que podría proporcionar el aroma natural del aceite esencial de hierbas en
comparación con el aceite esencial de HD
(Gavahian et al., 2014). Sin embargo, la técnica de extracción tuvo una influencia
significativa en
la extracción de los compuestos individuales. Por ejemplo, para 13 compuestos
detectados,
se informaron valores más altos para los extractos de OAHD en comparación con los
de la EH, que podrían ser
explicado por la alta eficiencia energética y la menor degradación mediante
calentamiento óhmico.

3.2. Conductividad eléctrica

La conductividad eléctrica puede ser considerada como el parámetro principal que
determina la tasa de
un tratamiento de calentamiento óhmico (Assiry, Sastry y Samaranayake, 2006). Los
resultados de las mediciones de σ durante la extracción de calor óhmico a diferentes
voltajes fueron presentados en
Figura 2. Los resultados muestran que existe una tendencia similar en todas las
tensiones aplicadas, en las que σ
aumenta con el incremento de la temperatura y luego, después de una ligera caída, se
mantiene en un valor de
nivel constante. Resultados similares fueron obtenidos por Hashemi, Niakousari,
Zandi, & Saharkhiz
(2016) para la extracción de aceites esenciales de Zenyan (Carum copticum) mediante
ultrasonidos
hidrodestilación óhmica, con una correlación positiva entre σ y la temperatura.
De acuerdo con los resultados obtenidos, voltajes más bajos conducen a valores más
altos. De hecho, el
El valor máximo de σ (≈0.03 S/m) se obtuvo a 100 V y 150 V, frente a 0.012 S/m.
obtenido a 200 V.

3.3. Comparación de rendimientos de extracción y cinética de extracción

Cuando se evaluaron los parámetros cinéticos, se descubrió que tanto la extracción
(HD vs OAHD) o los diferentes voltajes aplicados (100-200) V no mostraron
cualquier influencia significativa (p>0,05) en los rendimientos de extracción, siendo la
capacidad de extracción
≈1.1-1.2 mL (Tabla 2). Los rendimientos de extracción de HD y OAHD fueron (9.5±0.8)
%y
(10,6±0,4) %, respectivamente. Estos resultados concuerdan con los hallazgos de
Gavahian et al.
(2012), que encontró un mayor rendimiento de aceite esencial extraído de T. vulgaris
L. por la OAHD,
en comparación con la HD convencional. Resultados similares fueron encontrados por
Hashemi et al.
(2016) para la extracción de aceite esencial de Zenyan (Carum copticum) mediante
ultrasonidos
método de hidrodestilación óhmica, con un rendimiento de extracción de (21±0,8) %,
en comparación con (18±0,6)
usando HD.
Se mostró la cantidad de aceite esencial extraído a lo largo del tiempo utilizando HD
convencional.
en la figura 3a. La comparación de los resultados obtenidos utilizando OAHD a
diferentes voltajes
(Figura 3b, 3c, y 3d, para 200 V, 150 V, y 100 V, respectivamente) demostraron que el
método de extracción tuvo un gran impacto en la concentración de EO extraído. De
hecho, el
El tiempo transcurrido para obtener 1,1 mL de aceite esencial utilizando HD
convencional fue de 95 min,
mientras que sólo 26 minutos fueron suficientes para obtener la misma cantidad
utilizando OAHD (200 V).
Un tiempo de extracción más corto asociado con la técnica de calentamiento óhmico
podría correlacionarse con
un inicio más rápido en el proceso de extracción (debido a la electroporación) y una
mayor tasa de la
aumento de la temperatura para alcanzar el punto de ebullición. De hecho, cuando la
electricidad pasa a través
un material vegetal, la energía eléctrica se disipa en forma de calor, lo que resulta en
un aumento de
de forma rápida y uniforme. Como se resume en la Tabla 2, incremento de voltaje
resultaron en mayores tasas de extracción primaria y secundaria, con mayores niveles
de k1 (primario y secundario).
constante de extracción) en todas las tensiones, en comparación con k2 (extracción
secundaria constante).
tipo de cambio). Los resultados obtenidos estuvieron de acuerdo con los hallazgos de
Gavahian et al. (2012).
Como se muestra en la Figura 3b-d, un voltaje más alto resultó en un incremento de
temperatura más rápido y
por lo tanto, una mayor tasa de extracción. Estos resultados confirmaron los obtenidos
por Srikalong,
Makrudin, Sampavamontri, & Kovitthaya (2011), quienes reportaron que el mayor
voltaje en
El tratamiento de calentamiento óhmico podría aumentar la temperatura de extracción,
y conducir a la obtención de
un mayor rendimiento de jugo de guayaba. De acuerdo con los datos que figuran en el
cuadro 2, una importante
se observó una disminución en el tiempo de extracción al aumentar los voltajes. Por
ejemplo,
para extraer 1.2 mL de aceite esencial por OAHD, los tiempos de extracción a 100 V,
150 V, y
200 V fueron 77 min, 68 min y 31 min, respectivamente. Este hecho puede atribuirse a
Tiempo de extracción de inicio más temprano (te) por un calentamiento más rápido,
cuando se aplican voltajes más altos.
(Tabla 2). Estos resultados coinciden con las investigaciones realizadas anteriormente
por Golmakani
& Rezaei (2008) para la extracción de aceites esenciales de Thymus vulgaris L., y por
Gavahian, Farhoosh, et al. (2015) para la extracción de aceites esenciales de M.
piperita L.
(6,2 min a 220 V y 2,5 min a 380 V).

3.4. Actividad antioxidante y antimicrobiana de los aceites esenciales

La figura 4 muestra los valores IC50 de los aceites esenciales extraídos utilizando
OAHD y
convencional HD. IC50 de 33,4 μg/mL para el aceite esencial obtenido por la EH,
que era superior a la obtenida utilizando OAHD a 150 V y 200 V, pero no
significativamente diferente de la obtenida utilizando OAHD a 100 V (IC50 de 31,2
μg/mL).
Aunque los valores observados fueron altos, la actividad antioxidante de los aceites
esenciales fue
inferior al obtenido con BHA (IC50 = 18,3 μg/mL), pero aún comparable. El
la actividad antioxidante de los AE depende de la presencia de componentes capaces
de apagar
radicales de peroxilo. Los componentes más relevantes que imparten actividad
antioxidante a un OE
son los que tienen una fracción fenólica (como el carvacrol, el timol y el eugenol) y los
siguientes
que posee la estructura ciclohexadienílica (como γ-terpinene) (Hashemi et al., 2015).
Por lo tanto, la actividad antioxidante del aceite esencial de orégano podría estar
asociada con un alto contenido de
contenido de estos componentes.
En cuanto a las actividades antimicrobianas, según la Tabla 3, el aceite esencial de
orégano fue
más eficaz para inhibir el crecimiento de bacterias grampositivas que las
gramnegativas
de los otros. De hecho, la inhibición fue más pronunciada para S. aureus y B. cereus
(similares
MIC de 6,25 g/mL), que el observado para P. aeruginosa (valor MIC de 25
g/mL). El aceite esencial extraído presentaba efectos inhibitorios contra el S.
typhimurium
y E. coli O157:H7 con valores de MIC de 12,5 g/mL. Eficacia antimicrobiana del
orégano
aceite esencial contra varios patógenos como Bacillus subtilis, B. cereus, Clostridium
botulinum, E. coli, Enterococcus faecalis, S. aureus, Listeria monocytogenes,
Pseudomonas aeruginosa y Salmonella spp. han sido previamente reportadas
(Perricone
et al., 2015). Se informó que la actividad antimicrobiana de O. vulgare estaba asociada
con la
compuestos fenólicos como el carvacrol y el timol (Esen, Azaz, Kurkcuoglu, Baser, &
Tinmaz, 2007). Otro estudio fue realizado por Béjaoui et al. (2013), quienes
demostraron que
la actividad antibacteriana del aceite esencial extraído de O. vulgare subsp.
glandulosum
Desf. contra S. aureus, B. subtilis, E. coli, S. typhimurium y P. aeruginosa. El
actividad antibacteriana contra E. coli y S. typhimurium (MIC = 250 μg/mL) fue
confirmada. La actividad inhibitoria de los aceites esenciales varía según el tipo de
bacterias
y el tipo de aceites esenciales. En general, las bacterias grampositivas son más
susceptibles
a los antimicrobianos, como los aceites esenciales, que las bacterias gramnegativas.
Este
la observación podría estar relacionada con la falta de una membrana externa en las
bacterias grampositivas
(Burt, 2004). Sobre el impacto de los métodos de extracción y las tensiones aplicadas,
no se observaron diferencias significativas entre los métodos de EH y OAHD y entre
los voltajes aplicados para OAHD.

4. 4. Conclusiones
Los métodos convencionales de hidrodestilación e hidrodestilación asistida por
óhmicos fueron
utilizado para extraer el aceite esencial del orégano (Origanum vulgare subsp. viride).
Aunque un
se observó un rendimiento de extracción similar para la OAHD, este método
presentaba algunas ventajas
en comparación con la alta definición, incluyendo un tiempo de extracción más corto,
un menor consumo de energía, y
degradación mínima del compuesto, junto con propiedades antioxidantes similares.
Además, el
los aceites esenciales extraídos mostraron grandes propiedades antioxidantes
demostradas a través de la prueba de actividad de eliminación de radicales libres
DPPH, y una potente actividad antimicrobiana contra los agentes patógenos
cepas bacterianas. Los resultados de este estudio podrían ser utilizados en diferentes
alimentos y
las industrias farmacéuticas, que buscan formas más"verdes" de extraer productos
naturales.
moléculas antioxidantes de hierbas. Además, el coste reducido de la extracción es
claramente
valioso para el método propuesto por la OAHD en términos de energía y tiempo. Este
método es
de fácil aplicación y de fácil comprensión en cuanto a los pasos de funcionamiento que
deben seguirse.
realizado. Por lo tanto, podría aplicarse en la industria alimentaria.

Conflicto de intereses
Los autores declaran que no existe ningún conflicto de intereses.

Agradecimientos
Amin Mousavi Khaneghah fue apoyado por CNPq-TWAS Postgraduate Fellowship
Subvención #3240274290 durante este proyecto.
Nooshin Nikmaram reconoce al miembro del Young Researchers and Elite Club,
Sucursal de Sabzevar, Universidad Islámica Azad, Sabzevar, Irán

Leyendas de las figuras

Figura 1. Montaje experimental para la extracción de aceites esenciales de plantas de
orégano. A.
Hidrodestilación convencional. B. Hidrodestilación asistida por óhmicos.

Figura 2. Medición de la conductividad eléctrica (σ) durante la extracción de aceites

esenciales mediante
hidrodestilación asistida por ósmosis a 100 V (a), 150 V (b) y 200 V (c). Líneas
continuas
se dan para guiar el ojo.

Figura 3. Volumen de aceite esencial (mL) y perfiles de temperatura de extracción (b,

c, d) en forma de
función del tiempo (min) para la hidrodestilación (a) y la hidrodestilación asistida por
óhmicos (200
V b), 150 V c) y 100 V d)). Las líneas de guión indican la temperatura de extracción.
Continuo
se dan líneas para guiar el ojo.

Figura 4. Concentraciones de media inhibición (IC50) de DPPH por el aceite esencial

de O. vulgare
subsp. viride en diferentes métodos de extracción. OAHD; hidrodestilación asistida por
óhmicos,
HD; hidrodestilación. Letras minúsculas similares indican que no hay diferencias
significativas
(p>0.05).