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PRÁCTICA Nº 09
FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

I. INTRODUCCIÓN
El término cinética enzimática implica el estudio de la velocidad de una
reacción catalizada por una enzima y los efectos que pueden tener factores
como los inhibidores. Uno de los principales estudios que se realizan en una
enzima es medir el efecto en la velocidad de la reacción cuando se modifican
las concentraciones del sustrato y se mantienen constantes la concentración
de enzima, el pH, la fuerza iónica del medio, la temperatura, entre otros.
Se evalúa la influencia de estos factores en la reacción catalizada por
enzimas con la finalidad de determinar los intermediarios en una reacción y
el papel que juegan en la reacción enzimática, es decir, para predecir
mecanismos de reacción. Es esencial entender estos mecanismos para
desarrollar nuevas herramientas moleculares, por ejemplo, para combatir
enfermedades en las que se conoce a la enzima que la produce. También es
usual medir la actividad enzimática con diferentes sustratos para entender su
especificidad o bien, medir la actividad de la enzima de diferentes tejidos u
organismos para entender cómo las diferencias en actividad están
relacionadas con la función y/o la fisiología del organismo del que proceden.
II. OBJETIVOS
 Comprobar la reacción sobre el peróxido de hidrógeno por acción de
la enzima catalasa, presente en tejidos animales y vegetales
determinando los productos de reacción.
 Estudiar algunos factores que afectan la actividad enzimática, como
la temperatura, el pH, la concentración del sustrato y de la enzima y
la presencia de inhibidores.
 Confrontar los conocimientos teóricos adquiridos en clases con las
actividades experimentales en el laboratorio.
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III. MATERIALES Y REACTIVOS

 Tubos de ensayo
 Vasos de precipitado de 250 ml
 Estufa
 Agitadores
 Papel tornasol o indicador de pH
 Ácido clorhídrico 0.1 N
 Hidróxido de sodio 0.1 N
 Mortero y mango
 Hígado de res
 Papa cruda
 Cuchilla
 Solución de peróxido de hidrógeno (Agua oxigeno)
 Cebada en remojo
 Hielo
 Almidón

IV. PROCEDIMIENTO

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Tubo 1: 5 ml de Extracto de papa

Acción de la temperatura en
la catalasa de la papa e
hígado:
Macerar un trozo de papa en
15 ml de agua y recoger el
extracto.
e hígado + 3 ml de Peróxido de
hidrógeno al 3%
Tubo 2: 5 ml de Extracto de papa
e hígado + hielo= temperatura de
5°c+ 3 ml de Peróxido de
hidrógeno al 3%
Tubo 3: 5 ml de Extracto de papa
e hígado + Ebullir= 84°c + 3 ml
de Peróxido de hidrógeno al 3%

Tubo 3: 10 ml de agua + AM 3%

Repetir el procedimiento anterior

reemplazando la papa por
hígado.
Realizar las anotaciones
respectivas y analizar los
resultados.

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Tubo 1: 5 ml de Extracto de papa

Influencia del pH en la acción
de la catalasa de la papa:
Macerar un trozo de papa en 15
ml de agua y recoger el extracto.
+ 2 ml de ácido clorhídrico al
0.1N + 3 ml de Peróxido de
hidrógeno al 3%
Tubo 2: 5 ml de Extracto de papa
+ 2 ml de solución de hidróxido
de sodio + 3 ml de Peróxido de
hidrógeno al 3%

Tubo 3: 5 ml de Extracto de papa

+ 3 ml de Peróxido de hidrógeno
al 3%

Tubo 3: 10 ml de agua + AM 3%
Realizar las anotaciones
respectivas a la toma de pH con
papel indicador y analizar los
resultados.

INFLUENCIA DE LA SUPERFICIE DE LA MUESTRA DEL HÍGADO EN

SU ACCIÓN ENZIMÁTICA
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Porción de hígado 1: Macerar +

3 ml de Peróxido de hidrógeno
Comparar las reacciones de los
Porción de hígado 2: Dividir en dos montajes.
trozos + 3 ml de Peróxido de
hidrógeno

V. RESULTADOS:

VI. DISCUSIÓN O COMENTARIOS:

VII. CONCLUSIONES:

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Actividad:

 Explicar sobre los tipos de inhibición enzimática y otros factores que afectan la
actividad enzimática.