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CUESTIONARIO

¿Qué significa la signatura propia de las enzimas de restricción?


El nombre de la enzima de restricción tiene su origen según la bacteria de la cual ha
sido obtenida.
Su nombre se compone de la siguiente información: Género y especie, cepa, número de
endonucleasa de restricción extraída de la misma bacteria .
Por ejemplo: EcoRI
“Eco” viene del género y la especie, en este caso: Escherichia coli
R: viene de la cepa RY12
I: Ya que ha sido la primera ER obtenida de esta bacteria

¿Cómo se protege el ADN endógeno (propio) del ataque de las enzimas de Restricción
en Bacterias?
• Para responder esta pregunta primero es necesario empezar hablando por las
endonucleasas de restricción. Estas son enzimas que cortan la doble hélice de
DNA en una secuencia específica. Estas provienen de bacterias y posteriormente
son sometidas a procesos de clonación. Las endonucleasas de restricción forman
parte de un mecanismo de Restricción-Modificación; Restricción por las
endonucleasas que cortan el DNA rompiendo los enlaces fosfodiester y
Modificación porque modifica el DNA por metilación a través de metilasas.
Siendo así, cada enzima de restricción va acompañada por una metilasa, ambas
reconocen la misma secuencia específica. Ambas enzimas reconocen la misma
secuencia de bases. Sin embargo, La modificación por metilación en la doble
hélice de DNA evita que la enzima de restricción corte la molécula de ADN. De
esta manera las bacterias se protegen de atacar con sus propias enzimas su
propio ADN, tanto genómico como plasmídico .

¿Qué tipo de corte pueden generar estas enzimas, existe alguna aplicación basada en
ellos?
Dependiendo el tipo de enzimas de restricción generan distintos cortes. Existen 3 tipos
de enzimas de restricción, de tipo I,II,III.
Las enzimas de restricción de tipo I y III estas son las enzimas de restricción encargadas
de cortar y metilas. No cortan el DNA en una región específica sino en lugares alejados
a la secuencia de reconocimiento puede ser arriba o abajo, antes o después pero no en el
lugar preciso.
La enzima de restricción tipo II en cambio, corta en región específica en un punto
específico, esta solo tiene actividad de restricción.

Ahora bien, las enzimas de restricción pueden producir cortes generando dos tipos de
extremos: romos y cohesivos. Los extremos romos se dan cuando se produce un solo
corte en una sola región de DNA y los extremos cohesivos se producen de manera
“escalonada”, y pueden cortar en dos puntos distintos.
Las aplicaciones de las enzimas de restricción pueden ser:
- la elaboración de mapas de restricción
- fragmentar ADN para someterlo posteriormente a procesos de clonación
- fragmentar ADN para someterlo posteriormente al proceso de electroforesis
- Generación de fragmentos para posteriormente usarlos comos sondas
Describa brevemente un artículo científico en donde se utilizaron RFLPs en la
metodología, (no más de 10 renglones).

Suárez-Moreno, Odelaisy, Montero Lagos, Grisel, Maestre Mesa, Jorge Luis, Díaz
Pérez, Manuel, & Lugo Suárez, Odisney. (2004). Uso del análisis de restricción
en el control de calidad de cepa del biolarvicida cubano BACTIVEC. Revista
Cubana de Medicina Tropical, 56(2), 145-147. Recuperado en 19 de noviembre
de 2018, de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375-
07602004000200011&lng=es&tlng=es.

En esta investigación se analizó las caracteristicas del genoma de la cepa utilizada para
la producción de biolarvicida Bactivec, medicamento utilizado para combatir
enfermedades tropicales. A través de la comparación de distintos patrones de
digestión de diferentes cepas; con el fin de asegurar el control de calidad del
producto. La digestión del DNA cromosomal fue realizado con las enzimas HindIII y
EcoRI. El resultado fue que en todos los casos analizados existió el mismo patrón
de restricción, demostrando así la estabilidad genética que tiene la biolarvicida
Bactivec. Además estos resultados podrán servir como referencias para la posterior
comparación con otras cepas u organismos en estudios posteriores y para asegurar
la efectividad del medicamento.