Introducción

Debido al pequeño tamaño de la mayoría de los microorganismos, se

requiere de un microscopio óptico, ya sea de campo claro, en el que la
observación de células vivas es limitada debido a que las células son
incoloras y permiten el paso de una gran cantidad de luz. La observación de
muestras teñidas es más recomendable.
La muestra se prepara haciendo una extensión de los microorganismos
sobre una superficie transparente, en la cual se fijan y se tiñen los
microorganismos. De acuerdo al número de soluciones colorantes y a los
objetivos de estudio se pueden realizar diferentes tipos de tinciones como
lo son: simple, diferencial, negativa y selectiva.
El microscopio es un instrumento óptico que genera imágenes ampliadas
de objetos y así poder percibir los detalles que a simple vista no se
distingue. Al observar una estructura en el microscopio óptico la luz
atraviesa la muestra dando lugar a la formación de imágenes que son
ampliadas por las lentes del microscopio

Objetivos
El objetivo de la preparación de muestras para microscopía
óptica es permitir que las estructuras de los materiales se
revelen con suficiente claridad de modo que las características
de interés sean descritas, grabadas y caracterizadas en detalles
visibles a una escala menor que la agudeza visual del ojo
humano. La escala última de observación estará limitada por la
resolución del sistema de imagen del microscopio.
Aprender las técnicas de preparación de muestras, de fijación y
de coloración más utilizadas en el estudio microscópico de
cultivos bacterianos, obtenidos de medios sólidos y líquidos.
Identificar las principales formas bacterianas y la importancia de
tinciones simples en la caracterización morfológica de estos
microrganismos.
Bueno es esta oportunidad solo hablaremos dos formar o tipos de
preparación de muestras que son:

La coloración simple
La tinción puede ser uniforme o presentar algunos gránulos en su interior.
Utiliza un solo colorante (violeta de genciana, azul de metileno, fascina
diluida). La tinción simple se utiliza para destacar el microorganismo
completo para que se vean las formas y las estructuras celulares básicas.
En esta preparación de muestra se lleva acabo procedimientos los cuales
son los siguientes. En este caso nuestra muestra fue una suspensión de
agua estancada

1. Primero tenemos que limpiar la lámina portaobjetos.

2. Echamos unas gotas de agua estancada en la lámina porta objetos.

3. Después con nuestra asa

bacteriológica (ojo el asa debe de estas
esterilizada) hacemos la extensión y
fijación con la ayuda del fuego.
4. Una vez fijada la muestra echamos el colorante (puede ser azul de
metileno, safranina, alcohol acetona,
cristal violeta, entre otros) y esperamos
de dos a tres minutos para que el
colorante haga efecto.

5. Quitamos el exceso de colorante en la lámina porta objetos con un

poco de agua y la dejamos secar para luego
echar el alcohol yodado.

Lllk

6. Después de haber echado el aceite (alcohol

yodado) nuestra muestra ya está lista para
llevar al microscopio.
Prueba en fresco
Esta es más sencilla por lo que tiene menos pasos. Aquí también
utilizamos al agua estancada
1.Limpiar la lámina porta objetos

2. Echamos el agua estancada en la lámina

pota objetos

3. Después solamente dejamos caer una

laminilla en sima de tal manera que la
muestra quede en medio de la lámina y la
laminilla.

4.Luego solamente lo llevamos al

microscopio y observamos.
 Conclusiones
 En la preparación de las muestras aprendimos que siguiendo
todo el paso correcto podemos lograr visualizar mejor los diferentes
microrganismos en el microscopio.

 También pudimos darnos cuenta que no es tan fácil encontrar

los microrganismos en el microscopio como criamos ya esto no solo
depende saber utilizarlo bien, sino que también depende de cómo
elaboramos nuestra muestra.

 También pudimos aprender que al momento de lavar nuestra

lamina para desechar el exceso de colorante el chorro no debe de
dar directamente en la muestra ya que puede llevársela.