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UNIVERSIDAD NACIONAL

“JORGE BASADRE GROHOMANN“


Facultad De Ciencias Agropecuarias
Escuela De Ingeniería
En Industrias Alimentarias

NUMERACION DE MICROORGANISMOS
AEROBIOS MESOFILOS VIABLES

PROFESORA: Amelia Castro G.

ALUMNO: Richard Klever Santos Alarcón

CÓDIGO: 2014-111003

DÍA Y HORA: Lunes de 11:00am – 1:00pm

TACNA - PERU
I. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

La aceptabilidad de un proceso es frecuentemente el


aspecto más difícil del análisis de alimentos. Los
análisis microbiológicos de los alimentos son una
herramienta eficaz en esta evaluación, pero la
interpretación de los resultados de laboratorio
obtenidos en microbiología es, frecuentemente, el más
difícil y complejo aspecto de todo el proceso de
evaluación, donde entran en juego el criterio
profesional y las circunstancias que rodean al hecho
(brote, control de rutina, toma de muestra en línea de
proceso o en punto de venta, producto listo para
consumo, etc.).

Para una adecuada interpretación de estos


resultados es importante establecer qué resultados son
alcanzables y/ o esperables.
Este indicador el RTBAMV es el más importante para
calificar la correcta manipulación de la materia prima
durante todo el proceso de producción y el buen uso de
la BPM hasta obtener el producto alimenticio final.

II. OBJETIVOS

 Conocer el método para determinar microorganismos


aerobios mesófilos viables.

III. MATERIALES Y EQUIPOS


1. MATERIALES

- Agua destilada.
- Matraz
- Algodón
- Muestra (sándwich)
- Estufa
- Agua peptonada
- Mechero
2. EQUIPOS

- Placas Petri
- Pipetas bacteriológicas de 1 y 10ml
- Baño de agua regulado a 44- 46°C para mantener el
agar licuado
- Baño de agua regulado a 29-31ºC
- Contador de colonias
- Agar Plate Count

IV. PROCEDIMIENTO

1. Preparar la muestra.

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2. Pipetear por duplicado a placas de Petri estériles


alícuotas de 1 ml a partir de dilución 10-1 10-2 10-3
10-4 10-5 10-6
Se sugiere esta serie de diluciones cuando no se
conoce el rango aproximado del número de bacterias.
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3. Agregar rápidamente a las placas de Petri 15ml de


agar licuado y temperatura entre la preparación de
la dilución y la dilución del agar no debe
transcurrir más de 10 minutos.

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4. Mezclar inmediatamente la alícuota con el agar


mediante movimientos de vaivén y rotación de las
placas Petri. Una secuencia satisfactoria de paso
es la siguiente:
4.1. Mover la placa de arriba abajo 5 veces en una
dirección
4.2. Rotar 5veces la placa en sentido de las agujas
del reloj.
4.3. Mover la placa 5 veces en la dirección que
haga ángulo recto al usado en el primer
tiempo
4.4. Rotar la placa en sentido inverso al de las
agujas del reloj.

5. Como control de esterilidad, adicionar a placas


Petri, agar sin inocular y agar inoculado con el
diluyente.

6. Una vez solidificado el agar, invertir las placas e


incubarlas a 29-311C durante 48 +/-3 horas.

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7. Computo del recuento estándar en placas

7.1. Seleccionar 2placas correspondientes a una


dilución que contenga entre 30 y 300colonias
utilizando un contador de colonias
7.2. Si las placas de diluciones consecutivas
presentan menores que 30 y mayores que 300,
tomar el promedio de los 2 recuentos.
7.3. Si el número de colonias de las placas de 2
diluciones consecutivas están dentro del rango
de 30-300, computar el recuento para cada una
de las diluciones y establecer la relación de
los 2 recuentos. Si el cociente es menor que
2, reportar el promedio de los 2 valores,
pero, si el recuento mayor cociente 2 veces o
más que al menor, en este caso se reportara en
recuento del menor.
7.4. Multiplicar por el factor de dilución
reciproco de la dilución utilizada. Reportar
el resultado como número de microorganismos
aerobios mesófilos por gramo o mililitro según
el caso.

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8. Cómputo del estimado de recuentos estándar en


placas.

Si la placa de las diluciones muestran más de 300


colonias, dividir cada duplicado de las placas de
la dilución más alta en secciones radiales
convenientes (2, 4, 8.) y contar todas las colonias
en una o más secciones. Multiplicar el total en
cada caso por el factor apropiado para obtener el
número de colonias por cada placa. Promediar los
estimados de las 2 placas duplicadas y multiplicar
por la dilución correspondiente. Reportar el
resultado como estimado del número.

Si no hubiese colonias en placas de mayor


concentración, reportar el estimado como menor que
la inversa de la dilución.
V. RESULTADOS

Se deberá reportar únicamente 2 dígitos


significativos, ellos son el primero y el segundo
(comenzando por la izquierda) del promedio de los
recuentos. Los demás dígitos se reemplazaran por cero.
Ejemplo:
523.000 se reportara 520.000 = 〖52x10〗^4 ufc/g o ml
de alimento según el caso.
Si el tercer digito de la izquierda es 5 o mayor que
5, adicionar una unidad al segundo dígito (redondear)

Si el recuento en placa se utiliza para determinar


la aceptación o rechazo de un lote de alimentos,
únicamente se considera el recuento estándar en placa,
nunca el estimado del recuento, éste es útil solamente
como una aproximación primaria en la determinación de
la calidad microbiológica de un alimento.

GRUPO N° 01:

Placas recogidas para el conteo -3 y -4:

- Placa-3 = 49 colonias  49 000 +


- Placa-4 = 03 colonias  30 000
79 000 ÷ 2
= 39 500
GRUPO N° 02:

Placas recogidas para el conteo -4 y -5:

- Placa -4 = 232 colonias  2 320 000 +


- Placa -5 = 13 colonias1  300 000
3 620 000 ÷ 2
= 1 810 000

GRUPO N° 03:

Placas recogidas para el conteo -4 y -5:

- Placa -4 = 18 colonias  180 000 +


- Placa -5 = 01 colonias  100 000
280 000 ÷ 2
= 39 500

VI. RECOMENDACIONES

 Siempre es recomendable esterilizar la zona o


área de trabajo.

 Cada vez que se trabaje con los instrumentos de


vidrio esterilizaremos con el mechero antes de
usar para evitar contaminar.

 Al extraer la muestra u otro fluido, etc debemos


mantener la pipeta de manera vertical para que la
medida del volumen sea exacta.

VII. BIBLIOGRAFÍA

http://www.mastgrp.com/IFUS/IFU342_SPA.pdf

http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20
general/14-valores%20de%20referencia.htm

http://www.digesa.sld.pe/norma_consulta/Proy_RM615-
2003.pdf