Sie sind auf Seite 1von 13

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA

FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA DE INDUSTRIAS


ALIMENTARIAS

Informes de practicas
BIOQUÍMICA DE ALIMENTOS

Apellidos y Nombres: Soto Cusi, Diana Eusebia

Código: 20150853

Grupo: Viernes 15:40 a 17:30 hrs

AREQUIPA – PERÚ
2018
INTRODUCCIÓN

INSTRUCCIONES PARA LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

1. Es obligatoria la asistencia a clases de laboratorio


2. Tolerancia de 15 minutos en casos muy excepcionales.
3. 03 faltas se considera abandono del curso
4. Terminada cada clase de laboratorio, se tomaran 5 preguntas al azar, para
verificar el aprendizaje de todos los alumnos.
5. La asistencia a los laboratorios es con mandil limpio, manos y uñas limpias,
cabello recogido.
6. Antes de realizar las prácticas el alumno debe leer su guía de prácticas e
informarse de diferentes fuentes bibliográficas con el fin de ampliar sus
conocimientos e interés del tema de cada práctica.
7. Es necesario prever con anticipación la implementación de material, insumos y
otros necesarios para la realización del proceso tecnológico de cada práctica.
8. Con el fin de que tenga un mayor interés y aprendizaje en laboratorio, la guía está
diseñada para que en plena práctica el alumno vaya completando los diagramas
de flujo y anote las observaciones, debiendo así terminar su práctica. Es
imprescindible de que todo el equipo e instrumental, así como la mesa de trabajo
estén limpios y despejados de prendas de vestir u otros objetos innecesarios.
9. Tanto al inicio como al final se tendrá el laboratorio completamente limpio y
ordenado.

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
PRACTICA N° 2
ESTUDIO DEL BOMBEO DE PROTONES POR LEVADURAS

I. OBJETIVOS
 Relacionar el consumo de glucosa con los cambios de pH producidos por las levaduras.
II. MARCO TEÓRICO

Las levaduras son hongos microscópicos (unicelulares) son importantes por su capacidad
para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos cuerpos orgánicos. Las
levaduras utilizan diversas fuentes de carbono como los aminoácidos, los carbohidratos,
además de cierta acción por parte del nitrógeno y de algunas vitaminas. De la segunda
fuente se pueden mencionar a la glucosa, fructosa, galactosa y manosa; la maltosa y la
sacarosa. El metabolismo energético es la base de las funciones celulares. Una adecuada
transferencia de electrones a través de una serie de reacciones de óxido reducción,
garantiza la obtención de sustratos energéticos necesarios para el óptimo funcionamiento
de las células. Para su funcionamiento las células requieren de energía bioquímica (ATP) la
cual consiste en oxidar o fermentar la glucosa y así obtener energía para la célula, lo cual se
le conoce como glucolisis, y de una fuente de potencial reductor (NADPH2 ó NADH2). El uso
intensivo de ambas permite obtener el gran nivel de organización y estructura que
caracteriza a los organismos.
La síntesis de ATP y potencial reductor se acopla al metabolismo energético de las células,
es decir, depende de la fotosíntesis y la respiración. En particular la generación de ATP
requiere de la actividad de una clase especial de proteínas asociadas a membranas llamadas
bombas de protones, cuya función es transportar protones (H+) hacia volúmenes
específicos de las células. Esta actividad crea un gradiente de concentración de H+ lo
bastante extenso como para establecer un diferencial de potencial que produce energía
libre capaz de desarrollar.

III. MATERIALES Y REACTIVOS


• Tres vasos de precipitado de 100 mL.
• Pipetas de 5 y 10 mL.
• Potenciómetro o tiras indicadoras de pH.
• Piceta para enjuagar el electrodo del potenciómetro.
• Levadura seca comercial (Fleischmann).
• Solución de glucosa (10%)
• Agua destilada.

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Disolver 2g de levadura en 10mL de agua destilada
2. Agregue 10mL de agua destilada.
3. Determinar el pH de la solución y repetir la medición dos veces más con
intervalos de 3 minutos para obtener la línea basal.
4. Adicionar 5 ml de glucosa a 10 %, agitar y medir el pH.
5. Determinar el pH de la solución cada 5 minutos 4 veces, y luego cada 10
minutos 2 veces más.
V. RESULTADOS
Tabla 1: Línea basal

Tiempo Minutos pH metro Papel indicador


1 0
2 3
3 6

Tabla 2. Levadura + Glucosa cada 5 minutos


Tiempo Minutos pH metro Papel indicador
1 0
2 5
3 10
4 15
5 20

Tabla 3. Levadura + Glucosa cada 10 minutos

Tiempo Minutos pH metro Papel indicador


6 30
7 40

Observaciones
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
Graficar los valores de las lecturas de pH contra tiempo para la línea base.

Discusión de resultados
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

Graficar los valores de las lecturas de pH contra tiempo: levadura + glucosa


para cada 3 y 5 minutos.

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
Discusión de resultados
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

VI. CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

VII. RECOMENDACIONES
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

VIII. CUESTIONARIO
Desarrolle bioenergética y estequiometria para los flujos de iones en la membrana
plasmática de la levadura.
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

IX. BIBLIOGRAFÍA
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________

X. ANEXOS

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
PRACTICA N° 3
ACTIVIDAD DE LA ATP DE LA MEMBRANA CELULAR DE LA
LEVADURA

I. OBJETIVOS
 Utilizará a las levaduras como modelo del metabolismo de la glucosa en las células para
la producción de ATP.
II. MARCO TEÓRICO
El ATP (adenosina trifosfato), químicamente es un nucleótido formado por una base
nitrogenada, la molécula de adenina, unida a un azúcar de 5-carbonos, la ribosa y a tres
grupos fosfatos. El ATP puede actuar como transportador de energía química, en cientos
de reacciones celulares, por lo que se le considera como un compuesto rico en energía; ya
que muestra una gran disminución de energía química cuando participa en reacciones
hidrolíticas. La energía que se libera cuando se hidroliza el ATP, es utilizada en la síntesis
de biomoléculas, en el transporte activo de iones en contra de un gradiente de
concentración, en movimientos de ciclosis citoplasmática, en la contracción muscular, en
la emisión de luz por bacterias, luciérnagas y en el movimiento de flagelos y cilios. El ATP a
nivel celular funciona como una batería, que almacena energía por períodos cortos de
tiempo; en otras palabras, se puede considerar como la moneda de intercambio de energía
de la célula.
La energía liberada cuando se hidroliza enzimáticamente el ATP, convirtiéndose en ADP y
Pi, se utiliza para mover reacciones endergónicas (que requieren energía) de biosíntesis
en cualquier parte de la célula. Estos procesos juegan una parte vital en establecer orden
biológico. La energía liberada es de aproximadamente 7,3 Kcal/mol.
La proteína ATPasa, presente en la membrana plasmática de la levadura, consume
aproximadamente del 1’ al 15% del ATP que produce la levadura durante su
crecimiento. Por cada molécula de ATP que degrada a ADP, se transporta al emdio
externo un protón (H+), lo que genera el gradiente electroquímico. La adición de
glucosa a las levaduras produce que se incremente de dos a tres veces la actividad
de la ATPasa de la membrana plasmática, con la consiguiente disminución del pH
en el medio extracelular.
III. MATERIALES Y REACTIVOS
 Levadura seca comercial (Fleischmann)
 Solución de glucosa al 20%

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
 Solución de azida de sodio 0,4M
 Agua destilada
 Solución indicadora: rojo congo al 0,4%en agua
 Tubos de ensayo
 Gradilla para tubos de ensayo
 Pipetas de 2mL y 5mL.
 Pera para pipetear
 Recipiente para baño de agua
 Mechero
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. Disuelva 2g de levadura en 10mL de agua destilada y deje reposar por 15
minutos.
2. Agregue 10mL de agua destilada.
3. Centrifugue durante dos minutos a 3000rpm.
4. Elimine el sobrenadante.
5. Disuelva el precipitado en 20mL de agua destilada.
6. Repita el paso 3 y 4.
7. Disuelva el precipitado en 10mL de agua.
8. Rotule tres tubos de ensayo del 1 al 3. El tubo 1 es el control.
9. En cada tubo vierta agua destilada en las siguientes cantidades:
 Tubo 1: 7mL
 Tubo 2: 2mL
 Tubo 3: 1mL
10. Agregue 5mL de glucosa al contenido de los tubos 2 y 3.
11. Agregue 1mL de acida de sodio al tubo 3.
12. Vierta 2mL de la suspensión de levaduras (preparadas en el punto 7) en todos
los tubos.
13. Mezcle bien todos los tubos.
14. Caliente los tubos en un baño de agua a 37°Cpor una hora.
15. Agregue 3 gotas de la solución indicadora a todos los tubos.
16. Observe el cambio de color y anote sus resultados.

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
V. RESULTADOS
Complete el siguiente cuadro. Cambio de pH en el medio producido por las células
de levadura en presencia de glucosa. Analice y justifique los resultados.

Tubo Observaciones

VI. CONCLUSIONES
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

VII. RECOMENDACIONES
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

VIII. CUESTIONARIO
Las levaduras poseen una ATPasa de protones en la membrana mitocondrial
que se encarga de sintetizar ATP y que tienen otra ATPasa de protones en la
membrana plasmática cuya función es similar a la bomba de Na+/K+ en las
células de los mamíferos. Describa cada una de ellas.
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
IX. BIBLIOGRAFÍA
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

X. ANEXOS

BIOQUIMICA DE ALIMENTOS
BIOQUIMICA DE ALIMENTOS