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RESUMEN
En esta práctica de laboratorio se comprobó experimentalmente la actividad enzimática por medio de 3 experimentos.
Para el primer experimento se observó la acción catalítica de la catalasa presente en el hígado y la peroxidasa presente en
la papa al descomponer el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. Además, por medio de un calentamiento, se
comprobó el efecto de la temperatura sobre la actividad de las enzimas. Para el segundo experimento se comprobó la
hidrólisis enzimática por acción de la amilasa salival y se observó el efecto del pH sobre la acción catalítica de la misma.
El tercer experimento permitió comparar la acción catalítica de la amilasa presente en la sangre con la de un catalizador
inorgánico como el bióxido de manganeso (MnO2) al descomponer el peróxido de hidrógeno y finalmente se observó el
efecto de la temperatura sobre cada uno de los catalizadores.
2.3.2. ¿Cuál es la naturaleza química de la 2.3.5. Teniendo en cuenta las reacciones con las
sustancia que cataliza las anteriores muestras enzimáticas ¿quiénes presentan
reacciones? ¿hubo desprendimiento de calor? desprendimiento de oxígeno? ¿cuál de estos dos
Explicar tejidos presentan mayor actividad? Describa el
orden de actividad en orden decreciente.
Las sustancias que catalizan las anteriores
reacciones son la catalasa y la peroxidasa. Estas Ambas muestras presentan desprendimiento de
son enzimas orgánicas. En ambas reacciones se oxígeno, sin embargo, la muestra de hígado
observó desprendimiento de calor. Debido a que evidencia mayor desprendimiento de oxígeno.
la enzima actúa como catalizador la velocidad de Esto se debe a que el tejido animal presenta
reacción aumenta, por tanto, se descompone el mayor actividad enzimática, por tanto, la
peróxido lo cual conlleva a un rompimiento de velocidad de reacción va a ser mayor y a su vez,
los enlaces, de tal forma que se libera energía. Se se presenta mayor desprendimiento de oxígeno
evidenció mayor desprendimiento de calor en la en comparación a la muestra de papa.
muestra que contenía hígado, lo cual puede
deberse a que el tejido animal presenta mayor 2.3.6. En algunas oportunidades usamos agua
complejidad a nivel biológico y por tanto hay oxigenada como antiséptico y se observa que al
mayor presencia de estos catalizadores momento de aplicarla en una herida se produce
biológicos. burbujas, ¿qué es lo que indica esto?
Durante los procesos metabólicos, las células de Se añadió 1mL de la disolución de saliva 1:5 y
nuestro organismo producen desechos, entre 1:10 con intervalo de segundos. Posteriormente
ellos el peróxido de hidrógeno. Dado su carácter se añadió a cada tubo 3 gotas de lugol, se
oxidante y, para evitar que las células sean mezclaron y se agitaron, observando las
dañadas, es necesario que se deshagan diferentes coloraciones.
rápidamente de él. Esto lo logran gracias a una
enzima llamada catalasa que cataliza su 3.3 PREGUNTAS DE EVALUACIÓN Y
descomposición en oxígeno y agua. Cuando se CONSULTA
aplica agua oxigenada en una herida, la catalasa
no identifica el origen del peróxido y, por tanto, 3.3.1. ¿Cómo explicaría el hecho de que la
la enzima actúa descomponiendo el peróxido en amilasa de la salival actúa sobre el almidón en
agua y oxígeno reflejándose en forma de la boca, pero no en el estómago?
burbujas. [10]
En el cuerpo humano las enzimas dan su
3. EXPERIMENTO 2. ACCIÓN rendimiento óptimo con un pH de 6-8, en
CATALÍTICA DE LA AMILASA particular el pH óptimo de la amilasa es de 6.9.
SALIVAL En el estómago, un epitelio glandular cubre la
pared estomacal interna en donde sus células
3.1 OBJETIVOS secretan unos dos litros de moco, ácido
clorhídrico (HCl), pepsinógenos y otros
● Comprobar la hidrólisis enzimática por componentes del fluido gástrico. Este fluido
acción de la amilasa salival. tiene un pH de 2, así, la acidez elevada desdobla
● Deducir el pH óptimo en el cual actúa la las enzimas alterando su forma y por tanto su
amilasa salival. acción catalítica se ve inhibida, contrario a lo que
sucede en la boca ya que esta posee un pH entre
3.2 MATERIALES Y 5,6 - 7,9, luego se encuentra en condiciones
PROCEDIMIENTO óptimas dentro de las cuales puede actuar
Disolución amilasa salival 1:5 y 1:10 normalmente.
Disolución de NaCl 0.9%
Disolución de amilosa 1% (almidón) 3.3.2 Explique por qué en las reacciones
Disolución de yodo o lugol enzimáticas puede haber liberación de energía
Disoluciones a pH diferentes: en forma de calor (exergónicas) o puede ocurrir
Disolución de HNO3 (pH=0.97) reacciones endergónicas.
NaOH 1M (pH=12.65)
Las enzimas frecuentemente actúan por
Disolución de BaCl2 (pH= 5.97)
acoplamiento de una reacción endergónica con
una reacción exergónica mediante la hidrólisis de
Para esta segunda parte de la práctica, se extrajo
ATP. [11]
la muestra de saliva, la cual se procedió a diluir
El acoplamiento de reacciones es cuando una
en agua en cantidades de 1:5 y a 1:10,
reacción energéticamente favorable (como la
depositadas en tubos de ensayo. Además, se
hidrólisis de ATP) se vincula directamente con
disponía de 6 tubos de ensayo, 3 para la dilución
una reacción energéticamente desfavorable
de 1:5 y 3 para la dilución 1:10, los cuales se
(endergónica). La vinculación suele ocurrir
rotularon de la siguiente manera: a los dos
mediante un compuesto intermedio compartido,
marcados con el número 1, y se les añadió 4 mL
lo que significa que el producto de una reacción
de HNO3 (pH=0.97). A los tubos marcados con
es "tomado" y utilizado como reactivo en la
el número 2, se les añadió 4 mL de BaCl2 (pH=
segunda reacción. [12]
5.97) y a los marcados con el número 3, se les
añadió 4 mL de NaOH (pH=12.65).
3.3.3. ¿Qué otros factores además de la
Posteriormente, se añadió a cada uno de los tubos
temperatura y pH influyen en la actividad de
de ensayo, 2 mL de NaCl (al 0.9%) y 4 mL de
una enzima?
solución de almidón (al 1%), se agitó y se
mezcló, sin observar cambios significativos.
La actividad enzimática puede verse afectada 4.2 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
además de la temperatura y pH por factores
como, la cantidad de enzima, cantidad de ● Peróxido de hidrógeno (H202)
sustrato, el tiempo de reacción, presencia de ● Sangre (como fuente de catalasa)
cofactores, presencia de modulares y por la ● Papa (como fuente de catalasa)
presencia de inhibidores. [13] ● Bióxido de Manganeso (MnO2)
4.1 OBJETIVOS