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instituto INCITEMA?
Fijación
Deshidratación
Secado de punto critico
Metalización
Evaporización
El uso de uno u otro pretratamiento dependerá del carácter de la muestra, es decir, si esta es
biológica o no biológica:
No es necesario procesar la muestra al utilizar el modo de bajo vacío. Las muestras pueden estar
hidratadas, no requieren fijación, ni recubrimientos conductores (se pueden observar a
presiones de hasta 270Pa), se debe controlar los niveles de humedad y vacío, las muestras
pueden sumergirse en nitrógeno líquido antes de introducirse en la cámara y con la platina de
enfriamiento es posible montar las muestras en agua y congelarlas en la plataforma.
Las muestras deben secarse y estabilizarse químicamente mediante los siguientes tratamientos
para muestras en general.
Deshidratación, las muestras de tejidos o estructuras blandas que se van a analizar mediante
SEM, deben ser deshidratadas antes de su introducción al microscopio para evitar cambios
morfológicos causados por una deshidratación repentina, razón por la cual, es recomendable
realizar progresivamente lavados, con una serie de alcohol etílico de graduación creciente (50%,
70%…100%), dejando actuar el alcohol por períodos de 15 minutos. Posteriormente es
recomendable pasar la muestra por el secador de punto crítico.
Secado de punto crítico, la baja presión en la cámara hará que cualquier líquido volátil se
evapore y emigre súbitamente; esto unido a las fuerzas de tensión superficial asociadas a la
salida del agua de la muestra alteran, deforman y/o destruyen su estructura. Una solución a este
inconveniente es que durante el proceso de secado debe pasarse el límite entre la fase “líquido-
gas”. Esto se logra mediante el secado de punto crítico, en el cual el líquido pasa directamente
a la fase gaseosa.
Esparcir una pequeña cantidad de muestra en etanol y llevar a ultrasonido, luego calentar el pin,
colocar una gota de la suspensión en el pin, el secado rápido del etanol dispersa el polvo
homogéneamente sobre la superficie del pin, ahora ara la contramuestra (muestra control), se
puede hacer la dispersión simplemente sobre cinta conductora (No recomendable para
imágenes de alta calidad),de acuerdo a lo que desee observarse es posible hacer el montaje de
la muestra particulada en resina epóxica y tratarse posteriormente como una muestra
metalográfica.
Se les debe realizar recubrimiento para hacer conductiva la superficie de la muestra, suprimir la
electricidad estática y reducir el deterioro por radiación. Algunas muestras pueden requerir
cortes por ultramicrótomo, de acuerdo al objetivo del estudio.
Algunos electrones primarios son reflejados o retrodispersados tras interactuar con los átomos
de la muestra. La intensidad de emisión de estos electrones está directamente relacionada con
el número atómico medio de los átomos de la muestra (Z promedio), así los átomos más pesados
producen mayor cantidad de electrones retrodispersados, permitiendo la obtención de
imágenes planas de composición y topografía de la superficie BEI (Backscattered Electron
Image), en resumen, menor resolución de imagen pero mayor contraste para obtener la
topografía de la superficie.
Además de la imagen de las muestras analizadas ¿que otro tipo de información brinda
el microscopio SEM?
El microscopio SEM proporciona obtener información morfológica, topográfica y composicional
de las muestras los cuales permiten la observación, caracterización y microanálisis superficial de
materiales tanto orgánicos como inorgánicos.
¿Cuál es la diferencia entre la microscopia SEM y TEM?, ¿cuál cree usted que le
brindaría mayor información en su campo de desempeño profesional y por qué?
¿Cuáles son los servicios que le brinda el instituto INCITEMA a usted y la comunidad
en general?
¿Cuáles son las técnicas de análisis instrumental de las que dispone actualmente el
INCITEMA y cuál es el valor promedio de cada análisis?
REFERENCIAS
http://www.uptc.edu.co/direccion_investigaciones/inst_investigacion/incitema/index.html
https://investigaciones.uniandes.edu.co/microscopio-electronico-de-barrido-meb/