UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

Nombre: Cinthya Masapanta Jacho

Paralelo: 2

Efectos de las modificaciones heterólogas de tRNA (ARN de transferencia) en la producción

de proteínas que contienen aminoácidos no canónicos
RESUMEN
La síntesis de proteínas con aminoácidos no canónicos (ncAAs) permite la creación de
biomateriales basados en proteínas con diversas propiedades químicas nuevas que
pueden ser atractivas para la ciencia de los materiales. Los métodos actuales para la
producción a gran escala de proteínas que contienen ncAA, frecuentemente llevados a
cabo en Escherichia coli, implican el uso de sintetasasas aminoacil-tRNA ortogonales
(o-aaRSs) y tRNAs (o-tRNAs). Aunque los o-tRNAs están diseñados para ser
ortogonales a los aaRSs endógenos, su ortogonalidad a los componentes del
metabolismo de E. coli permanece en gran parte inexplorada. Se investigó
sistemáticamente cómo la maquinaria de modificación de E. coli tRNA afecta la
eficiencia y ortogonalidad de o-tRNASep utilizado para la producción de proteínas con
la O-fosfosfoserina ncAA (Sep). La incorporación de Sep en una proteína verde
fluorescente (GFP) en 42 cepas de E. coli con deleciones de genes únicos de
modificación de tRNA identificó varios genes que afectan la actividad del o-tRNA. La
eliminación de la cisteína desulfurasa (iscS) aumentó el rendimiento de la GFP que
contiene Sep más de ocho veces, mientras que la sobreexpresión de la
dimetililtransferasa MiaA y la pseudouridina sintasa TruB mejoró la especificidad de la
incorporación de Sep. Estos resultados destacan la importancia de las modificaciones de
tRNA para la biosíntesis de proteínas que contienen ncAAs, y proporcionan un marco
novedoso para la optimización de o-tRNAs.

1. CONCLUSIONES
1.1. Los materiales proteinogénicos han sido diseñados a partir de pequeño número de bloques
a través de los veinte aminoácidos canónicos.
1.2. Genéticamente los aminoácidos no canónicos (ncAAs) ampliaron las funcionalidades
químicas de las proteínas naturales y permitieron el diseño de polipéptidos.
1.3. La eficiencia de un sistema de traducción diseñado para sintetizar proteínas con Sep (O-
fosfoserina) fue evaluada en una serie de cepas de E. coli con deleciones de genes únicos
responsables de las modificaciones de nucleótidos de los tRNAs, identificó varios errores que
afectan al O-tRNAs.
2. COMENTARIO
La relación que tiene con la Ingeniería Química se basa en la aplicación de la bioquímica
molecular mediante la síntesis de los aminoácidos no canónicos para la obtención de
biomateriales a través del cultivo de cepas E. coli impidiendo la síntesis homogénea de las
proteínas que permite la optimización de la transferencia de ARN.

BIBLIOGRAFÍA.
Crnković, A., Vargas-Rodriguez, O., Merkuryev, A., & Söll, D. (2018). Effects of
heterologous tRNA modifications on the production of proteins containing
noncanonical amino acids. Bioengineering, 5(1), 11.