Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
ﮐ ﺎر
• ﺗﺻور ﮐﻧﯾد در ﺳﯾﮑل ٢۵از PCRھﺳﺗﯾم
• ﻋﻼوه ﺑر ﻣﺧﻠوط واﮐﻧش ،ﺣدود ١،٠٠٠،٠٠٠
ﻧﺳﺧﮫ از ﻣﺣﺻول دارﯾم
• در ﺳﯾﮑل ٢٣ ،٢۴و ٢٢ﭼﮫ ﺗﻌداد دارﯾم؟
• ۵٠٠،٠٠٠
• ٢۵٠،٠٠٠
• ١٢۵،٠٠٠
1
6/3/19
1800000
?
1600000
1200000
1000000
800000
ﺑﺎ ﭘﯾﺷرﻓت واﮐﻧش ،ﺗﻌداد
ﻧﺳﺧﮫ ھﺎ اﻓزاﯾش ﻣﯽ ﯾﺎﺑد ،اﻣﺎ
ﺗﺎ ﮐﺟﺎ؟؟
600000
400000
200000
0
5000000
4500000
4000000
3500000
• ﺑﺎ ﭘﯾﺷرﻓت واﮐﻧش ،ﭘﯾدا ﮐردن
3000000 ﭘراﯾﻣر و ﺳﺎﯾر اﺟزای واﮐﻧش
2500000
ﺑرای ﺗﮑﺛﯾر دﺷوار ﻣﯽ ﺷود و
2000000
ﻓﺎز ﻟﮕﺎرﯾﺗﻣﯽ ﻧﯾز از ﭘﯾﺷرﻓت
ﺑﺎز ﻣﯽ ﻣﺎﻧد.
1500000
1000000
• ﭘس ﻓرض ﻣﯽ ﮐﻧﯾم ﮐﮫ ﻣﻧﺣﻧﯽ
واﮐﻧش از ﺳﯾﮑل ٢۵ﺑﮫ ﺑﻌد
دارای ﭼﻧﯾن ﺷﮑﻠﯽ ﻣﯽ ﺷود.
500000
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
2
6/3/19
ﺑﻧﺎﺑر اﯾن ،اﮔر ﺑﺎ ﻣﻘدار DNAﭼﮭﺎر ﺑراﺑر ﮐﻣﺗر ﺷروع ﮐﻧﯾم )ﻟوﻟﮫ ،(Bدﻗﯾﻘﺎ دو ﺳﯾﮑل دﯾرﺗر ﺑﮫ ﻣﻘدار ﻟوﻟﮫ Aﻣﯾرﺳﯾم
5000000
4500000
4000000
3500000
Cycle ﻟوﻟﮫ B ﻟوﻟﮫ A
2500000
24 500,000 2,000,000
1500000
1000000
500000
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
3
6/3/19
5000000
4500000
4000000
3500000
Cycle ﻟوﻟﮫ C
3000000
26 250,000
2000000
1500000
27 500,000
1000000
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
اﮔر ﺑﺎ ٨ﺑراﺑر DNAﮐﻣﺗر ﺷروع ﮐﻧﯾم ) ،(Cﻣﻧﺣﻧﯽ دﻗﯾﻘﺎ ٣ﺳﯾﮑل دﯾر ﺗر ﺑﮫ ﺷﮑل ﻟوﻟﮫ Aدر ﻣﯽ آﯾد
ﻣﺤﺎﺳﺒﮫ ی ﻣﻘﺪار
• ﻣوﻗﻌﯾﺗﯽ ﮐﮫ در آن ،ﻣﻘدار
5000000
4500000
2500000
23 25 28 Ct
2000000 • اﯾن ﻋدد ) ،(Ctﺑر اﺳﺎس ﻓرﻣول
1500000 زﯾر ،ﻧﺳﺑت ﻣﺳﺗﻘﯾم ﺑﺎ ﻣﻘدار اوﻟﯾﮫ
1000000
DNAدارد.
500000 Quantity = 2^Ct
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
4
6/3/19
5
6/3/19
3’ 5’
5’ 3’
Extension
3’
ID ID Taq 5’
5’
5’
5’ ID ID ID 3’
Taq
Apply Excitation
Intercalating Dyes
Wavelength
l l l
3’
ID Taq 5’
5’ ID ID ID ID
5’
ID ID ID ID
Taq 3’
l
l
Repeat
6
6/3/19
Actual Data
c366939
7
6/3/19
• Food testing
üPercent GMO food ﺑرای ﺳﻧﺟش ﭘروﻓﺎﯾل ﺑﯾﺎن ﯾﮏ ژن ﺑﮫ ﮐﺎر ﻣﯾرود
ﮐﮫ ﯾﮏ ژن آﻧﺗﯽ ﺗوﻣور اﺳتBRCA1 ﻣﺛﻼ ژن
• Animal and plant breeding
üGene copy number
8
6/3/19
• ﻫﻨﮕﺎم ﻋﻔﻮﻧﺖ ﺑﺎﮐﺘﺮی ﺑﻪ وﯾﺮوس ،ﺑﺨﺸﯽ از ژﻧﻮم وﯾﺮوس در ﺑﺎﮐﺘﺮی ذﺧﯿﺮه ﻣﯽ ﺷﻮد.
• ﺗﻮاﻟﯽ ﻫﺎی ﺑﺮﯾﺪه ﺷﺪه ﺑﺼﻮرت ﺧﻮﺷﻪ دﻧﺒﺎل ﻫﻢ ذﺧﯿﺮه ﻣﯽ ﺷﻮﻧﺪ
• آﻧﺰﯾﻢ Cas9ﯾﮏ ﻧﻮﮐﻠﺌﺎز اﺳﺖ و ﻫﺮﺟﺎ را ﮐﻪ RNAراﻫﻨﻤﺎﯾﯽ ﮐﻨﺪ ﺑﺮش ﻣﯽ دﻫﺪ )ﯾﮏ
ﮐﻤﭙﻠﮑﺲ ﻫﻤﮑﺎری (RNA-Protein
9
6/3/19
220
10
6/3/19
221
11
6/3/19
• ﺳﺎدﮔﯽ اﯾﻦ ﺳﯿﺴﺘﻢ ﺑﺎ ﻓﻘﻂ ۳ﻋﻨﺼﺮ ) ،(Cas9, crRNA and tracrRNAآن را ﺑﺮای ﮐﺎر آزﻣﺎﯾﺸﮕﺎﻫﯽ ﺳﺎده ﮐﺮده اﺳﺖ.
• ادﻏﺎم crRNAو ) tracrRNAﺷﮑﻞ ﺳﻤﺖ ﭼﭗ( و ﺗﺒﺪﯾﻞ آن ﺑﻪ ﯾﮏ ﻣﻠﮑﻮل ﺳﻨﺘﺰ ﺷﺪه ی ،sgRNAﺑﺎﻋﺚ ﺳﺎده ﺷﺪن ﺑﺸﺘﺮ اﯾﻦ
ﺳﯿﺴﺘﻢ ﺷﺪه اﺳﺖ
• RNAی راھﻧﻣﺎ ﺑﮭﻣﯾن ﺻورت ﺑرای ژن ھﺎی ﻧﺎﻗص ﻣﮭﻧدﺳﯽ ﻣﯽ ﺷود و ﻣﯽ ﺗواﻧد ﺑﺎ
ﺗواﻟﯽ ﺧﺎﺻﯽ از ﺑﺎزھﺎی DNAی ﻣﯾزﺑﺎن ﻣﮑﻣل ﺷود
• ھﻧﮕﺎﻣﯽ ﮐﮫ Cas9ﺑﮫ DNAﻣﺗﺻل ﻣﯽ ﺷود و آن را ﺑرش ﻣﯽ دھد ،ﻣﮑﺎﻧﯾزم ﺑدن ﺑﮫ اﯾن
آﺳﯾب آﮔﺎه ﺷده و درﺻدد رﻓﻊ و ﺗرﻣﯾم آن ﺑر ﻣﯽ آﯾد.
• در ﻧﺗﯾﺟﮫ ﺑدن ﺑﮫ واﺳطﮫ ی اﯾن ﺳﯾﺳﺗم ﺷﻧﺎﺳﺎﯾﯽ ﺧود را اﺻﻼح ﮐرده و اﯾراد ژﻧﺗﯾﮑﯽ
ﺑرطرف ﻣﯽ ﺷود.
12
6/3/19
13