UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

“Formando líderes para la construcción de un nuevo país en paz”

ARTÍCULOS

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS.

Luis Antonio Reyes1

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Programa de Química, Facultad de Ciencias Básicas, Laboratorio de Bioquímica Básica, Universidad de
Pamplona, Kilómetro 1, vía a Bucaramanga, Pamplona – Colombia

Resumen
En esta práctica se llevó el reconocimiento de carbohidratos en distintas muestras como en las
muestras de glucosa y almidón, suministradas por reactivos y en endulzante sin azúcar comercial, el
reconocimiento se llevó a cabo mediante ocho reacciones distintas (Molisch, Braun, Barfoed,
Seliwanoff, Tollens, Benedict, Bial y Fehling), estas pruebas son de carácter colorimétrica, ya que
depende del color al final de la reacción se indicaba si la prueba era positiva o negativa.

Palabras clave: Carbohidratos, Reconocimiento, Reacciones.

1. Introducción

Los carbohidratos o sacáridos y azúcares son

compuestos que requieren esencialmente todos los
organismos vivos y además constituyen la clase más
abundante de moléculas biológicas, sus funciones
principales en los seres vivos son el brindar energía
inmediata y estructural. Como ejemplo, las formas
biológicas primarias de almacenamiento y consumo
de energía; la celulosa cumple con una función
estructural al formar parte de la pared de las células
vegetales, mientras que la quitina es el principal
constituyente del exoesqueleto de los artrópodos. 1
Los sacáridos son polihidroxialdehídos o
polihidroxicetonas derivados de polihidroxialcoholes
con por lo menos 3 átomos de carbono. 2 Los
carbohidratos son químicamente mas simples que los
ácidos nucleótidos o los aminoácidos, dado que solo
contienen solo tres elementos (Carbono, Hidrogeno,
Oxigeno) que se encuentran combinados de acuerdo
de la formula Cn(H2O)n, donde n es igual o superior a
3. 3.4.
Ilustración 1. Estructura de un Carbohidrato (α-D-
glucopiranosa).
Los carbohidratos se pueden clasificar en tres grandes
grupos, relacionado con el numero de subunidades de
azúcares simples que los conforman:
- Monosacáridos: Son los más sencillos, se les
denominan también como azucares simples,
compuestos de una sola unidad de
polihidroxialdehído o polihidroxicetona y
dado que, por medio de procesos de
hidrólisis, no pueden originar otros azucares
simples. Los monosacáridos mas abundantes
son las que contienen 5 (Pentosas) y 6
(Hexosas) carbonos.

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- Oligosacáridos: Están compuestos por 2 a 9
moléculas de monosacáridos, que cuando se
hidrolizan se liberan. Los oligosacáridos se
encuentran con frecuencia unidos a proteínas,
formando las glucoproteínas.
- Polisacáridos: Estos se encuentran formando
polímeros, de grandes cadenas de alto peso
molecular, son la mayor parte de
carbohidratos que se encuentra en la
naturaleza. Se clasifican en
homopolisacáridos, si todos los
monosacáridos son iguales y
heteropolisacáridos si están compuestos por
2 o más monosacáridos distintos. 5
Glucosa.
Es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6.
Es una hexosa, contiene 6 átomos de carbono, y es
una aldosa, esto es, el grupo carbonilo está en el
extremo de la molécula (un aldehído). Es una forma
de azúcar que se encuentra libre en las frutas y en la
miel. Es un isómero de la galactosa, con diferente
posición relativa de los grupos -OH y =O.
Ilustración 2. Estructura de la Glucosa.
La glucosa es el compuesto orgánico más abundante
de la naturaleza. Es la fuente primaria de síntesis de
energía de las células, mediante su oxidación
catabólica, y es el componente principal de polímeros
de importancia estructural como la celulosa y de
polímeros de almacenamiento energético como el
almidón y el glucógeno.
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Almidón.
Es el carbohidrato de almacenamiento mas
importante en las plantas. Este es compuesto de dos
polímeros que son la amilosa y amilopectina. El
contenido de estas varía dependiendo de la fuente del
almidón y se controla genéticamente.
Ilustración 3.Estructuras: a) Amilosa. b) Amilopectina.
La amilosa es un polímero lineal de unidades de
glucosa unidas por uniones α1-4 con un número de
unidades que pueden alcanzar el millón de unidades.
La amilopectina es mucho mas grande y ramificada,
su unidad monomérica es la glucosa unida por enlaces
α1-4 pero presenta ramificaciones α1-6 cada 24-30
unidades de glucosa. 5
2. Sección experimental
Se llevo a cabo el reconocimiento en tres muestras:
Glucosa suministrada por reactivos.
Almidón suministrado por reactivos.
Endulzante artificial comercial (Incauca con Stevia).
a. Reacción de Molisch.
En tres tubos de ensayo distintos se agregó una
pequeña cantidad de las muestras, junto con 2mL de
agua destilada, luego se le adiciono a cada uno 2mL
de reactivo de Molisch agitándolo constantemente
para posteriormente se le suministro por la pared del
tubo de manera cuidadosa 2mL de ácido sulfúrico,
para que no se mezclara.
También se llevó a cabo un ensayo con las dos
muestras, pero se le adiciono 2ml de α-naftol en vez
2
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del reactivo y luego de agitar también se le adiciono A las soluciones de las muestras se le adiciono 2mL
acido lentamente. de reactivo Fehling A y 2mL de reactivo de Fehling
B, se le proporciono agitación y luego calentamiento
b. Reacción de Braun. por 3 minutos.

Nuevamente en tres tubos distintos cada uno con un

poco de muestra y unos mililitros de agua destilada,
se le suministro 2mL de ácido pícrico saturado, se
agito vigorosamente para luego adicionar 2mL de
carbonato de sodio, para después llevarlo a calentar a
ebullición.
c. Reacción de Bial.
A los tubos con muestra y agua destilada se le agrego
2mL del reactivo de vial y se colocaron a calentar en
baño maría por un tiempo de 5 minutos.
3. Resultados y discusión
Reacción de Molisch.
En esta prueba nos sirve para identificar
carbohidratos en soluciones por lo tanto era obvio
que en las tres muestras nos daría positivo que fue la
presencia del anillo de color oscuro.
Las dos pruebas dieron resultados similares, la
diferencia seria la intensidad del color de la reacción.

d. Reacción de Barfoed. Esta reacción ocurre mediante la hidrolizacion de los

En los tubos de las muestras con agua destilada se le
adiciono 2mL del reactivo de Barfoed, se dejó
calentando en baño maría por 3 minutos y se dejó
enfriar luego.
encales glicosídicos de los carbohidratos que
posteriormente se deshidratan dando furfural que
luego combinado con el α-Naftol nos da el anillo
color oscuro.

e. Prueba de Seliwanoff. 1 2 3

A la muestra se le adiciono 2mL de la solución de

Seliwanoff (resorcinol/HCl), luego se calentó en
baño maría hasta ebullición.

f. Reacción de Benedict.

En los tubos de las muestras con agua destilada se le Figura 1. Reacción de Molisch con reactivo de Molisch.
adiciono 3mL reactivo de Benedict, se agito 1.Glucosa. 2. Endulzante. 3.Almidon.
vigorosamente para luego llevarlo a calentamiento en
baño maría. 1 2 3

g. Prueba de Tollens.

Alas muestras con agua destilada se les proporciono

2mL del reactivo de Tollens y se llevó luego a calentar
a ebullición.

h. Reacción de Fehling.
Figura 2. Reacción de Molisch con α -naftol. 1.Glucosa. 2.
Endulzante. 3.Almidon.
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Reacción de Braun. 1 2 3

Esta prueba nos otorga la información que si un

carbohidrato es azúcar reductor en un medio básico
que lo proporciona el carbonato de sodio.
En esta prueba se indica un positivo, cuando la
solución pasa de color amarrillo a un color rojo.
Estos nos indica que la muestra de glucosa da
positivo en la prueba, mientras que la solución del
endulzante después de un lapso de tiempo se estaba Figura 4. Reacción de Bial. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
tornando color amarrillo-rojizo, por otro lado, la 3.Almidon.
muestra del almidón si nos indica negativo y refleja
Reacción de Barfoed.
que no es azúcar reductor.
Esta reacción nos indica el reconocimiento de
monosacáridos, dado que son estos los que pueden
1 2 3 reducir el Cu2+ a Cu+ y este se reduce a acido
fosfomolibdico que es color azul oscuro, pero con
precipitado rojo.

En la prueba las tres muestras presentaron el color

azul pero la única solución que presento el
precipitado fue la de la glucosa, que es en sí un
monosacárido.

1 2 3
Figura 3. Reacción de Braun. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
3.Almidon.

Reacción de Bial.

Esta reacción si da positivo nos indica la presencia de

pentosas en las muestras y nos damos cuenta por el
color azul-verdoso que presenta la muestra.
Esta prueba las 3 muestras nos indican negativo para
la reacción de Bial, reflejando que en su estructura no
poseen pentosas, como también se puede comprobar
en caso de la glucosa con la ilustración 2 y en el caso
del almidón con la ilustración 3.
Figura 5. Reacción de Barfoed. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
3.Almidon.
Prueba de Seliwanoff.
Esta prueba sirve como separación, dado que nos
plantea la identificación de aldosas y cetosas, al
indicar positivo nos señala la presencia de cetosas en
las muestras, ya que estas deshidratan más rápido

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dando derivados de furfural que se condensan con el
resorcinol para formar un complejo rojo.
En la prueba el almidón y la glucosa indican cetosas,
mientras que el negativo que presenta el endulzante
nos señala aldosas en su estructura.
1 2 3
Figura 6. Reacción de Seliwanoff. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
3.Almidon.
Reacción de Benedict.
Esta prueba puede acoplarse a la prueba de Braun
para determinar si una muestra es un azúcar reductor
o no. Nos indica positiva la prueba si la muestra se
vuelve de un color o tonalidad rojiza y de tonalidades
naranjada o verdoso si es muestra pequeña.
Al igual que la prueba de Braun, nos dio positivo las
muestras de la glucosa y del endulzante, mientras que
la del almidón fue negativa al igual que en la prueba
anterior.
1 2 3 La única que nos dio positivo en esta prueba fue la
Figura 7. Reacción de Benedict. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
3.Almidon.
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Reacción de Tollens.
Esta prueba también puede acoplarse o ser análoga a
la prueba de Selivanoff, ya que esta prueba indica la
presencia de galactosa o derivadas pentosas de esta.
El positivo en la prueba se refleja en el color rojo que
se da en la solución.
En esta prueba las tres soluciones nos indico negativo
para la presencia de galactosa en las muestras.
1 2 3
Figura 8. Reacción de Tollens. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
3.Almidon.
Reacción de Fehling.
Esta es otra prueba para determinar azucares
reductores, mediante el poder reductor que presente
el grupo carbonilo, esta prueba da positivo con un
color rojizo en la muestra y sirve, aunque haya poca
muestra.
glucosa, que es la dio positivo en las otras dos pruebas
que también identificaban azucares reductores.
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[3] D. Voet, J. G. Voet; Bioquímica; Ed. Médica

2 3 Panamericana, 2006. P. 371.
1
[4] D. Voet, J. G. Voet, C. W. Pratt; Fundamentos
De Bioquimica; Ed. Médica Panamericana, 2007.
P. 207.
[5] J. Fornaguera. G. Gómez; Bioquímica: la Ciencia
de la Vida; EUNED; p. 161-170.
[6] Campbell, Neil A.; Reece, Jane B.; Biología.; Ed.
Médica Panamericana. 2007.
[7] M. L. Pabón Restrepo; Notas de clase.
Bioquímica rumina; Univ. Nacional de Colombia,
2004.
Figura 9. Reacción de Fehling. 1.Glucosa. 2. Endulzante.
3.Almidon.

4. Conclusiones

Al igual que con aminoácidos y proteínas, en los

carbohidratos también hay una reacción que nos
indica la presencia de estos en una muestra problema,
en este caso es la prueba de Molisch.

Hay tres pruebas que pueden acoplarse para

garantizar o decir si un carbohidrato es un azúcar
reductor, que, al verificar en las tres (Braun, Benedict,
Fehling), se puede afirmar que lo es, como en el caso
de la glucosa en esta práctica.

También es esencial la prueba para separar los dos

tipos de carbohidratos que son aldosas y cetosas, que
se puede realizar gracias a la prueba de Seliwonoff,
que indica que en la muestra hay cetosas. Si una
prueba da positivo en cetosas, se le puede realizar
enseguida la prueba con Tollens para saber si la
muestra cuenta con galactosas o derivadas de esta.

También esta la prueba para conocer si en su

estructura un carbohidrato es monosacárido o no
(Barfoed), y también nos indica si su ciclación se da
en pentosas (Bial).

5. Referencias

[1] Alberts, Bruce (1992). Biología molecular de la

célula. Omega. p. 46.
[2] S. Quesada. Mora; Manual de experimentos de
laboratorio para bioquímica; EUNED. P. 87.
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