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RESUMEN
En esta práctica de laboratorio se empleó la técnica de cromatografía para la purficación e identificación de cada
uno de los componentes principales de un extracto de espinaca, empleando silica gel como fase estacionaria y
varias mezclas de elución a diferentes proporciones de hexano:acetona. La identificaciòn de dichos componentes
se hizo por medio de la cromatografìa de capa fina teniendo en cuenta el desplazamiento que cada componenete
presentaba con respecto al frente del eluyente, el cual consistía en una mezcla 70:30, para asi determinar sus
factores de retención (Rf)
Palabras claves: Cromatografía, silica gel, factor de retención, polaridad, adsorción, absorción
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1
Imagen 1. Placa cromatografica realizada en el
En la tabla 1 se reportan las distancias recorridas por laboratorio
cada uno de los compuestos y el valor obtenido de su
Rf
0
Hexano (No
polar) Calculo 1. Valores para los Rf’s, basados en la
ecuación para el calculo del factor de retención
𝟒, 𝟏
𝑹𝒇 𝒄𝒂𝒓𝒐𝒕𝒆𝒏𝒐 = = 𝟎, 𝟔𝟗
𝟓, 𝟗
Acetona 2,72
(polar) 𝟐, 𝟒
𝑹𝒇 𝒙𝒂𝒏𝒕𝒐𝒇𝒊𝒍𝒂 = = 𝟎, 𝟒𝟏
𝟓, 𝟗
𝟏, 𝟔
𝑹𝒇 𝒄𝒍𝒐𝒓𝒐𝒇𝒊𝒍𝒂 𝜶 = = 𝟎, 𝟐𝟕
𝟓, 𝟗
2
𝟏, 𝟒 disolvente de fase móvil. Así tenemos que la clorofila β
𝑹𝒇 𝒄𝒍𝒐𝒓𝒐𝒇𝒊𝒍𝒂 𝜷 = = 𝟎, 𝟐𝟒 es más polar que la clorofila α, se adsorbe más
𝟓, 𝟗
intensamente más intensamente y presenta un factor de
DISCUSIÓN DE RESULTADOS retención (Rf) menor. Los carotenos por su parte son
hidrocarburos, y aunque la deslocalización de
Para la cromatografía de columna se uso para la fase electrones provoca fuerzas de Van der Whaals, no son
movil la mezcla de hexano y acetona. La razón por la suficientemente fuertes como para interactuar con la
que se uso una mezcla de un disolvente apolar y uno fase estacionaria, por lo que quedan disueltos en la fase
con pequeña porción polar (compuesto apolar hexano, movil y se arrastran con esta, presentando un mayor
compuesto con pequeña porción polar, acetona. Ver factor de retención (Rf).
tabla 2) como eluyente se debio a que la muestra de Así tenemos que la separación de componentes de la
espinaca estaba conformada por compuestos de baja mezcla se determina por las interacciones polares
polaridad y estos se retienen en la fase estacionaria. En (dipolo – dipolo o fuerzas de Van der Waals) de los
la practica el eluyente por su estructura química componentes de la misma con fases estacionaria y
contribuye a que los pigmentos se separen mediante móvil.
equilibrios sucesivos de adsorción, de no ser así las
clorofilas no se separarían ya que cuentan con REFERENCIAS
estructura similar (clorofila α con un radical metilo, y,
clorofila β con un grupo aldehido) que provoca una Chang, R., & College, W. (1999). Quimica. Quimica
mayor polaridad de clorofila β con respecto a la clorofila Septima edicion (Vol. 2).
α. De aquí tenemos que el pigmento verde claro https://doi.org/10.1036/0072410671
(clorofila β) es más de mayor polaridad y el pigmento Yurkanis Bruice, P. (1998). Organic chemistry. Chem.
naranja (caroteno) es el de menor polaridad. Eur. J., 1256. Retrieved from
De esta manera, las moleculas del soluto se absorben http://books.google.com/books?id=dk9QfRo6dVkC&pri
en la fase estacionaria, y mientras se produce la elución ntsec=frontcover\npapers://aff9d36b-a394-43cd-9752-
van siendo desplazadas por las moleculas del 0304ca342eae/Paper/p748
disolvente de la fase movil. Los componentes del soluto Valderruten, N. E. (2009). Práctica 1: PURIFICACIÓN
más polares se retienen más rapidos que aquellos con DE ÁCIDO BENZOICO POR RECRISTALIZACIÓN Y
menos polaridad. SUBLIMACIÓN Y. Cali: FACULTAD DE CIENCIAS
Con todo esto tambien podemos determinar que las NATURALES ICESI.
interacciones formadas entre los pigmentos más
polares son del tipo dipolo – dipolo inducido. Mientras http://es.scribd.com/doc/35958862/Cromatografia-de-
que los pigmentos menos polares y la fase movil son del Capa-FinaRecuperadoel 1 de Abril del 2017
tipo de fuerzas de Van der Waals.
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neuro
CONCLUSIONES bioquimica/libros/celular/cromatografia.htmRecuperado
el 1 de Abril del 2017
La separación de pigmentos mediante mediante
cromatografía se da por medio de un mecanismo de http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia
adsorción, donde se establecen equilibros de adsorción /parametros Recuperadoel 1 de Abril del 2017
– desorción que depende de la polaridad de los
pigmentos y el tipo de fuerzas establecer con los
componentes de la fase estacionaria y la estructura del