Manual Biologia de Eucariotes

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
UNIDAD PROFESIONAL
INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA
ACADEMIA DE BIOLOGÍA
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE

BIOLOGÍA DE EUCARIONTES
M. en C. María de Lourdes Sánchez García

Primera edición: 2007 M. en E. Maira Jiménez Ríos
Revisión: Enero de 2017 Ing. Marcelo Robles Medina
I.B.T. Adán Mauricio Espinoza Martínez
M. en C. Ilse Yazmín Arciniega Carreón
M. en C. Alberto Castillo Ortiz
PRÓLOGO
El presente manual reúne un grupo de actividades de laboratorio que buscan ilustrar sólo algunos de los
comportamientos más sobresalientes de la biología de las células eucariotas.
Las prácticas de laboratorio están planeadas para que el estudiante trabaje sobre el desarrollo de
habilidades como la observación, la manipulación de objetos e instrumentos, el ordenamiento y el análisis
de datos, la discusión de la información y la integración de las experiencias adquiridas a lo largo de una o
varias prácticas y sesiones. Este manual consta de once prácticas las cuales fueron diseñadas asumiendo
que hay alumnos que no están familiarizados con el tipo de material, técnicas e instrumentos que se
utilizan en ellas.
Existe una adecuada correspondencia entre el contenido del presente Manual con respecto de la parte
teórica de la asignatura, lo que permite encontrar una mejor comprensión de las observaciones generadas
por el desarrollo de cada una de las prácticas.
La práctica 1 trata sobre el Método Científico, ya que su entendimiento y aplicación resulta de suma
importancia en el planteamiento de hipótesis y el diseño de experimentos en el área científica. La práctica
2, aborda la revisión del manejo del instrumento emblemático de la Biología, el microscopio, sobre el cual
recae la responsabilidad de gran parte del conocimiento celular actual. En las prácticas 3 y 4 se hace una
revisión general comparativa de las características detectadas con el microscopio compuesto de los
tejidos y las células de animales y vegetales, respectivamente. Las prácticas 5, 6 y 7 se refieren a algunos
aspectos de la dinámica funcional de la célula. En la 5, se evidencia una de las principales funciones de la
membrana plasmática de las células en su relación con el entorno. En las prácticas 6 y 7 se ponen en
relieve las funciones catabólicas y anabólicas, respectivamente.
La práctica número 8 lleva al alumno a conocer las técnicas de separación del ácido desoxirribonucleico
(ADN) y aplicar una de carácter netamente “casero”. En la práctica 9 se identifica la forma en la que se
dividen las células somáticas y la importantísima transferencia de la información genética de las mismas
hacia las células hijas, observándose las distintas etapas del ciclo celular y particularmente, las fases de la
mitosis en células vegetales.
La práctica 10 conduce al alumno a la identificación y comparación de estructuras reproductoras de un

reino interesante como es de los hongos, el Reino Fungi. Finalmente, la práctica 11 involucra el trabajo
con organismos unicelulares y coloniales tan diversos como son las algas y los protozoarios, ambos
representantes del Reino Protoctista.
Esperamos que este conjunto de actividades, genere en los alumnos experiencias de aprendizaje tan
significativas que coadyuven a incrementar sus conocimientos y cumplan sus expectativas al cursar esta
asignatura.
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ÍNDICE
Reglamento de Laboratorio…………………………………………………..…………...………………… i
Instrucciones generales……………………………………………………………………………………… iii
Práctica 1. Método Científico………………………………………………………………………………... 1
Práctica 2. Microscopía………………………………………………………………………………………. 4
Práctica 3. Observación de células y tejidos animales…………………….…………………………… 9
Práctica 4. Observación de células y tejidos vegetales………………………………………………... 12
Práctica 5. Transporte a través de la membrana………………………………………………………… 16
Práctica 6. Fermentación……………………………………………………………...…………..…………. 21
Práctica 7. Fotosíntesis: Aislamiento de cloroplastos y Reacción de Hill………………………….. 25
Práctica 8. Obtención de ADN (Método casero)…………………………………………………………. 31
Práctica 9. Mitosis……………………………………………………………………………………….…….. 35
Práctica 10. Observación de Hongos………………...……………………………………………………. 39
Práctica 11. Observación de Algas y Protozoarios……….…………………………..………………… 44

Apéndice………………………………………………………………………………………………………… 48
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Manual de Practicas de Laboratorio de Biología de Eucariotes
UPIBI-IPN
REGLAMENTO DE LABORATORIO
Uno de los objetivos del trabajo de laboratorio es que, a través de los experimentos y procedimientos
aplicados, se adquieran habilidades y destrezas en el manejo de técnicas, de datos, de equipos y de
instrumentos de laboratorio.
El trabajo en el laboratorio requiere disciplina y orden, y es necesario que se lea cuidadosamente cada una
de las prácticas antes de cada sesión. Durante el desarrollo de las mismas, se debe poner atención a las
instrucciones del (la) profesor(a), ya que de esto depende la obtención de buenos resultados.
Las normas mínimas de seguridad que se deben seguir son las siguientes:
1. Al ingresar al laboratorio, el (la) alumno(a) deberá portar bata limpia debidamente abotonada.
2. Para aprobar el curso de laboratorio se deberá cubrir al menos el 80 % de asistencia, así como el 80 %
de las prácticas aprobadas, obteniendo un promedio mínimo de 6.
En caso de adeudar teoría, sólo se respetará la calificación con un promedio mínimo de 8.0, la cual
se guardará durante un semestre posterior al cursado, en el de reprobar laboratorio se procederá
de la misma manera.
3. La asistencia con puntualidad al laboratorio es imprescindible, no habrá retardos y tendrá falta quien
no llegue a la hora establecida. Se darán 10 minutos de tolerancia y se pasará lista de asistencia.
4. En caso de llegar después de la hora de tolerancia, ya no se le permitirá la entrada y se considerará como
inasistencia.
5. Las faltas al laboratorio se calificarán con cero. Éstas se justificarán a criterio del profesor responsable
de la práctica correspondiente, mediante los comprobantes que presente el (la) alumno(a). Para la
evaluación de los alumnos con falta solo se tomará en cuenta la calificación del reporte de la
práctica. Para el resto se calificará el reporte, y el examen antes del inicio de la misma, así como el
trabajo en el laboratorio.
6. En el laboratorio se debe guardar el comportamiento adecuado para evitar accidentes, puesto que es un
lugar de trabajo donde se manejan aparatos y equipos delicados y costosos y, en algunas ocasiones,
sustancias peligrosas.
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7. Por razones de seguridad, queda estrictamente prohibido comer, fumar, masticar chicle, pintarse ojos,
cara y uñas e ingerir todo tipo de bebidas dentro del laboratorio, así como el uso de teléfonos celulares
aparatos de audio, gorras y bufandas.
8. Se debe tener cuidado con el manejo de sustancias y organismos, por lo tanto, es necesario tomar las
debidas precauciones, asegurándose de lavarse las manos al inicio y al final de la sesión de laboratorio.
9. Durante la sesión de laboratorio, queda prohibida la entrada a personas ajenas al grupo. De igual forma,
se prohíbe cualquier interrupción durante la misma.
10. El (la) alumno(a) deberá llenar un formato para solicitar el material de laboratorio, teniendo cuidado de
revisar que el material recibido esté en buen estado, y en caso contrario, deberá reportarlo al (a la)
técnico docente o al profesor responsable, al momento de entregar el formato con su credencial.
11. Al inicia y final de la práctica deberá limpiar su mesa de laboratorio con una franela.
12. Una vez terminada la práctica, el material utilizado durante su desarrollo, deberá entregarse
limpio, seco y en buen estado dentro de la canastilla donde le fue entregado.
13. El material y equipo roto, deteriorado o extraviado, deberá ser repuesto por la persona o equipo
de personas responsables de él, a más tardar dos semanas después de la práctica.
14. El (la) alumno(a) no deberá abandonar el laboratorio por ningún motivo, antes de que concluya
la práctica, a menos que el (la) profesor(a) lo autorice, en caso contrario se le cancelará su
asistencia.
15. Ningún(a) alumno(a) podrá permanecer en el laboratorio después de concluida la sesión práctica.
16. La entrada de los (las) alumnos (alumnas) al laboratorio en horas que no correspondan a la sesión,
estará condicionada a la autorización y tiempo libre del (la) profesor(a) responsable de la práctica.
17. Es obligatorio el uso en cada sesión del Manual de Prácticas de Laboratorio, debidamente engargolado.
El registro de datos y observaciones de cada práctica deberá hacerse en el mismo manual, el cual deberá
imprimirse sólo por una cara, con la finalidad de ser utilizado también como bitácora.
18. El reporte de la práctica deberá entregarse en un cuaderno profesional exclusivo para laboratorio de
biología de eucariontes y forrado de un color determinado en clase, debidamente etiquetado y de manera
personal.
19. El reporte de la práctica se elaborará con tinta y los diagramas y esquemas a colores.
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INSTRUCCIONES GENERALES
1) El material que será utilizado de manera individual en cada sesión de laboratorio es el siguiente:
Bata limpia, dos trozo de franela blanca de 40X40 cm, marcador indeleble, manual de prácticas
engargolado y una fotografía infantil para su hoja de control (entregada a más tardar en la segunda
sesión).
2) Cada equipo deberá traer:

Papel higiénico, masking tape, 2 agujas de disección, 1 caja de cubreobjetos y 1 caja de portaobjetos,
pinzas de punta roma, papel seda, medio metro de manta de cielo, tijeras y 1 cutter o navaja de un solo
filo.
3) De igual forma deberán traer por grupo:

1 caja de lancetas, un candado, un rollo de papel aluminio, medio litro de cloro, jabón líquido para
manos y una caja de lancetas.
4) El (la) alumno(a) leerá cuidadosamente el procedimiento de cada práctica que se vaya a realizar, con
el propósito de conocer los elementos teóricos y las instrucciones para el desarrollo experimental. En
caso de duda, consultará al (la) profesor(a) responsable de ella.
5) El (la) alumno(a) verificará que el material y el equipo que se requiere para el desarrollo de la práctica
esté disponible y bajo las condiciones necesarias. En caso de alguna omisión, informará de inmediato
al (la) profesor(a) o al (la) técnico docente.
6) El (la) alumno(a) realizará, bajo la guía del (la) profesor(a), el desarrollo experimental de cada práctica,
siguiendo el procedimiento indicado en el manual y anotará todos los detalles, observaciones y
resultados en su manual (bitácora).
7) Al concluir el desarrollo experimental y el análisis de resultados por parte de los profesores y los
alumnos, realizará el reporte anotando: el objetivo u objetivos de la práctica, los resultados obtenidos y
su análisis, la conclusión y bibliografía.
8) La evaluación final de cada práctica desarrollada se hará basándose en 3 aspectos (se muestran los
valores de cada uno de ellos inmediatamente):
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Trabajo en el laboratorio 4.0 puntos

Examen de la práctica 2.0 puntos
Informe de la práctica 4.0 puntos
9) Para la evaluación del trabajo en el laboratorio, se considerarán los siguientes aspectos:
Participación y desempeño de las actividades 3.0 puntos
Bitácora completa y actualizada 1.0 puntos
10) Al finalizar cada práctica se deberá elaborar un informe escrito, de manera conjunta por los integrantes
de cada equipo, que deberá contener las siguientes secciones y cuyo valor en puntos se indica
enseguida:
Objetivos y bibliografía 0.5 puntos

Resultados 1.0 puntos
Análisis de resultados 1.5 puntos
Conclusiones 1.0 puntos
11) El informe de la práctica será entregado al (la) profesor(a) responsable de la misma, una semana
después de concluida la sesión o sesiones correspondientes. El informe solamente deberá de
contener los puntos arriba mencionados (objetivos, resultados, análisis de resultados,
conclusiones y bibliografía). Por ningún motivo no se incluirá ni transcribirá del manual de
prácticas el marco teórico, ni cuestionarios.
12) El (la) profesor(a) responsable de cada mesa revisará que todos los integrantes de cada equipo,
cuenten con su bitácora completa y actualizada. El profesor responsable de calificar el reporte decidirá
si revisa uno o todos los reportes del equipo.
13) El laboratorio representará el 30 % de la calificación global de la asignatura.
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PRÁCTICA 1
MÉTODO CIENTÍFICO
1. INTRODUCCIÓN
La ciencia contiene un cuerpo de conocimientos e involucra un proceso que los cuestiona y que además
genera nuevos conocimientos, ya sea para satisfacción intelectual o con el fin práctico de transformar
nuestra realidad, lo cual se efectúa a través de un consenso de experiencias enunciadas en lenguaje preciso
y disponible a la discusión pública. También involucra metodologías surgidas de la experiencia, las cuales,
al igual que el conocimiento científico, están permanentemente en discusión en cuanto a su efectividad y
secuencia, predominando el criterio de que el mejor método es aquel que se practica y no el que se mantiene
en el terreno teórico.
Generalmente se habla de un método científico, lo cual es incorrecto, ya que en este caso son importantes
tanto los resultados como la práctica en sí y el método que se utiliza está más en la experiencia del
investigador o en la complejidad y avance del área de conocimiento, o incluso en los requisitos que nos
establecen los limitantes de una investigación.
El método científico experimental incluye una secuencia lógica de pasos, que nos son útiles en la
resolución de un problema y abarca los siguientes puntos (complete las definiciones que sean
necesarias):
Enumera y explica los pasos del método científico experimental____________________________

__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
Da un ejemplo utilizando los pasos anteriores

__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
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Es importante aclarar que estos pasos no son una serie de reglas infalibles e inflexibles que solucionan un
problema. Las investigaciones científicas, dependiendo de sus objetivos, tratarán los primeros tres o todos
los puntos del método.
A fin de cuentas, la metodología de la investigación científica, así como la presentación de un trabajo

científico, permite sistematizar la obtención y reporte de conocimientos, para poder optimar los recursos con
los que contamos y lograr una mejor comunicación.
Hay que aclarar que el método científico, no es infalible ni obligado, es conveniente, busca minimizar errores,
dar guías generales de procedimientos. Por otro lado el método, también es una continua confrontación
dialéctica de hecho-teoría, empirismo-racionalismo, objetividad-subjetividad, determinismo-indeterminismo,
esencia-contingencia, inducción-deducción, individual-grupal, análisis-síntesis, reduccionismo-
expansionismo, concreto-abstracto, racional-irracional.
El valor de una hipótesis reside en la capacidad para establecer relaciones entre los hechos, y de esa
manera permite explicarnos por qué se producen, para explicar fenómenos o nuestro fenómeno estudiado.
La hipótesis tiene como funciones: La generalización de experiencias; el desencadenamiento de inferencias;

dar una guía de investigación y; ayuda a dar interpretaciones de los hechos y fenómenos.
Por último, como un aspecto formal importante de marcar: Las hipótesis se rechazan (lo que implica que
nuestra predicción pudiese tener una variable aún no considerada) o NO se rechazan.
2. OBJETIVO
El alumno comprende y aplica los pasos del Método Científico experimental en el desarrollo de la práctica o
investigación.
Que el alumno proponga y realice un experimento con enfoque biológico en la segunda sesión utilizando el
método científico experimental (lo más sencillo posible).
3. MATERIAL POR EQUIPO
Experimento
Apio con tallo
Azul de metileno 0.25%
1 Vaso de precipitados de 250 mL
1 Lámpara
1 Regla
1 Cuter o navaja
1 Refrigerador
1 caja de Petri
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4. PROCEDIMIENTO
● Desprender dos tallos de apio y colocar cada uno en 1 matraz de 250mL con 100 mL de azul de metileno
al 0.02%, durante 50 minutos.
● Colocar uno de los matraces con los tallos de apio a una temperatura de 25°C y luz intensa, el otro vaso
con el tallo de apio se colocará en refrigeración 4°C y oscuridad.
● Dejar transcurrir 50 minutos bajo esas condiciones.
● Transcurrido el tiempo, realizar cortes de 0.3cm del tallo y observar si los haces vasculares se encuentran
teñidos.
● Continúa haciendo cortes hasta observar la mitad de los haces vasculares teñidos y la otra mitad no,
cuando se llegue a este punto medir la longitud que recorrió el colorante a través de los haces vasculares.
● Reportar tus experiencias aplicando el método científico.
5. RESULTADOS Y OBSERVACIONES
De acuerdo al experimento o proyectos realizados, se anotan los datos obtenidos en bitácora. Deberá incluir
esquemas, gráficas cálculos, y fotografías. (TODOS LOS ESQUEMAS O DIBUJOS SE REALIZAN A
COLOR, SON INDISPENSABLES Y LAS FOTOGRAFIAS SON COMPLEMENTO).
6. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Previa revisión del punto anterior, se hará un análisis minucioso de los resultados teniendo como
antecedente los conceptos teóricos; lo cual implica: proponer, cambiar o aceptar la hipótesis planteada,
justificando adecuadamente las propuestas.
7. CONCLUSIONES
Se establecen con base en los objetivos, hipótesis planteadas y resultados obtenidos.
8. BIBLIOGRAFÍA
8.1. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA (TRES CITAS BIBLIOGRÁFICAS)
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PRÁCTICA 2
MICROSCOPÍA
1. INTRODUCCIÓN
Con la construcción de los primeros microscopios los naturalistas formaron, por primera vez, dos grandes
grupos de seres vivos: El de los macroscópicos y el de los microscópicos. Al emplear el microscopio
compuesto se cultivó el pensamiento científico para construir la “Teoría Celular” y con ésta explicar parte de
la naturaleza de la materia viva. Pudieron iniciarse y desarrollarse varias ramas importantes de la Biología,
las principales fueron la Histología, la Microbiología y la Biología Celular.
La función básica del microscopio es permitir observar una imagen considerablemente aumentada de
organismos, algunas partes específicas de éstos, de las células y las estructuras celulares. Un microscopio
se denomina compuesto debido a que emplea dos lentes o más para amplificar y obtener una imagen del
objeto de estudio. En cambio, a un microscopio que emplea sólo una lente se le considera simple, tal es el
caso de la lupa.
Los microscopios compuestos que funcionan empleando luz poseen, en general, tres sistemas: El
Mecánico, el Óptico y el de Iluminación. A continuación complemente las partes que conforman cada
sistema, así como las funciones de las mismas:
Sistema Mecánico:
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
Sistema Óptico
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
Sistema de Iluminación
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
La iluminación de las muestras es determinante para su correcta observación, posterior análisis e impresión
permanente (microfotografía).
Describe la iluminación Köhler, así como los pasos para realizarla:

_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
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1.1. Cálculo de aumentos o amplificación
Aumento Total = (Aumento del Objetivo) X (Aumento del Ocular)
Ejemplo: (10X) * (10X) = 100X
Así se tiene que con un ocular de 10X, según los objetivos utilizados, los aumentos son los indicados en la
Tabla 1.
Tabla 1. Cálculo de los aumentos o amplificaciones
Objetivo Ocular Aumento Total
(SD
Seco Débil 10X 10X 100X
)
Seco
(SF) 40X 10X 400X
Fuerte
Inmersión 100X 10X 1000X
1.2. Microscopio Estereoscópico
También conocido como Microscopio de Disección o de Epiiluminación, debido a que la iluminación se puede
hacer directamente sobre el objeto que se observa. Este microscopio es usado en Biología para observar
directamente disecciones y piezas biológicas grandes de las que se obtienen imágenes en tercera
dimensión.
Partes del Microscopio Estereoscópico: Consta de un sistema mecánico y un sistema óptico.
Describe las partes y función de cada uno de los sistemas.
a) Sistema Mecánico:
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
b) Sistema Óptico:
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
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2. OBJETIVOS
2.1. Aprender el cuidado y uso adecuado de los microscopios compuesto y estereoscópico, para la
observación de material biológico.
2.2. Identificar las partes de los microscopios compuesto y estereoscópico.
2.3. Realizar la iluminación de Köhler para iluminar las preparaciones adecuadamente.
2.4. Seguir la secuencia de pasos para obtener un óptimo enfoque visual.
2.5. Observar y esquematizar preparaciones fijas y temporales de material biológico.
2.6. Realizar la limpieza y cuidados correctos del microscopio, antes y después de usarlo.
Tabla 2. Material requerido para la práctica de “Microscopía”

No. Material o Equipo Cantidad No. Material o Equipo Cantidad
1 Microscopio compuesto 1
(pza) 8 Microscopio estereoscópico 1
(pza)
2 Portaobjetos 10 9 Torundas en alcohol 3
3 Cubreobjetos 10 10 Franela y manta de cielo 1
4 Caja de Petri 1 11 Preparaciones fijas (tejido animal y vegetal) 4
5 Agujas de disección 4 12 Insectos, flores, hojas, levaduras
6 Block de papel seda 1 13 Papel impreso con letras pequeñas
7 Navaja con un solo filo 2 14 Cinta adhesiva transparente
4. PROCEDIMIENTO
Siempre atienda las indicaciones del (la) docente.
Iluminación de Köhler
4.1. Al recibir el microscopio compuesto revisar que esté completo y proceder a limpiar los sistemas
mecánico y de iluminación con la franela.
4.2. Efectuar la identificación de los componentes de los tres sistemas, con la ayuda del docente.
4.3. Realizar la Técnica de Köhler para la correcta iluminación del campo visual.
4.4. Observar cada una de las preparaciones proporcionadas a Seco Débil (S.D. o 10X), y a Seco
Fuerte (S.F. o 40X).
4.5. Siguiendo las indicaciones del profesor has una preparación con tres letras del papel impreso.
4.6. Realizar esquemas de las observaciones, y con la ayuda del(a) docente identificar las
estructuras celulares y consultar con la bibliografía sugerida.
4.7. Al concluir el trabajo, limpiar correctamente el microscopio y entregarlo con cuidado al técnico
docente del laboratorio.
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Para trabajar con el microscopio estereoscópico realiza lo siguiente:
4.8. Identificar las partes del microscopio estereoscópico.

4.9. Observar ejemplares como hojas, flores, insectos, arañas pequeñas o cualquier otro organismo
que te sea proporcionado, siguiendo los pasos que se describen a continuación:
i. Ajustar los oculares a la distancia que hay entre sus ojos.

ii. Colocar cada ejemplar en el interior de una caja de Petri, centrarlo sobre la platina y haga
incidir la luz de la lámpara sobre él.
iii. Acercar el objetivo al ejemplar por observar, luego subirlo poco a poco, por medio del
tornillo de enfoque, hasta obtener la imagen tridimensional precisa.
iv. Iluminar el organismo desde diferentes direcciones, y realizar los esquemas
correspondientes.
5.1. Construir un cuadro sinóptico anotando los componentes y sus funciones, de los sistemas
mecánico, óptico y de iluminación de cada uno de los microscopios empleados en la práctica.
5.2. Realizar en cuadros como los siguientes, los dibujos de los organismos y de las estructuras
celulares observadas, anotando sus nombres. Las imágenes digitalizadas (fotografías) NO
SON ACEPTADAS en los informes, si a estos les faltan los dibujos hechos por los alumnos.
Microscopio compuesto
Nombre de la muestra S.D. (10X) S.F. (40X)
Microscopio estereoscópico
Nombre de la muestra IMAGEN
GUIA PARA LA ELABORACION DEL ANALISIS DE RESULTADOS (NO CONTESTAR ESTE
RUBRO EN FORMA DE CUESTIONARIO, es sólo una ayuda para poder desarrollar la actividad)
6.1. Desde el punto de vista óptico, ¿qué tipo de imagen es la que se percibe a través del
microscopio compuesto?
6.2. Describa el procedimiento para calcular el número de veces que está amplificada una imagen
vista al microscopio.
6.3. Escriba cinco medidas preventivas para mantener un microscopio en óptimas condiciones de
servicio.
6.4. Anote las diferencias básicas entre las imágenes observadas en los dos tipos de microscopios
que empleó.
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6.5. Defina los siguientes términos:

- Microscopio
- Poder de resolución
- Aumento
- Apertura numérica
- Índice de refracción
7. CONCLUSIONES
Exprese sus conclusiones en relación con lo que logró hacer y observar con el microscopio y las facilidades
que representa este instrumento para el conocimiento de organismos y/o estructuras muy pequeñas.
8. BIBLIOGRAFÍA
8.1. BIBLIOGRAFÍA SUGERIDA, NO EXCLUSIVA
Chen A. Julian. 1993. Introduction to scaning teaching microscopy. Oxford University. New York.
González-Morán G. 1996. Técnicas en biología celular. AGT Editor. México.
Slaytr.M. Elizaberth. 1992. Light and electron microscopy. Cambridge University. New York.
8.2. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA
8
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PRÁCTICA 3
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS Y TEJIDOS ANIMALES
1. INTRODUCCIÓN
Una vez establecidos los postulados de la Teoría Celular se procedió a conocer más acerca de la célula.
Uno de los caminos fue saber de qué y cómo estaba constituido el interior de la célula, conocer si entre la
forma y la función había alguna relación. Así como contestar preguntas fundamentales, tales como ¿podría
mantenerse la vida en los componentes aislados de la célula? ¿Se podrían aislar los organelos sin dañarlos?
Con el avance de la microscopía, de las técnicas químicas de tinción, de las pruebas bioquímicas, del
fraccionamiento celular y aislamiento de organelos, se pudieron conocer algunos procesos que han
permitido avanzar en el entendimiento de cómo trabajan los distintos tipos de células.
Las células animales son las estructuras que más se han estudiado por razones de conveniencia
operacional, pues se usan para generar conocimiento y desentrañar los enigmas concernientes a los seres
humanos. Entre los organelos que constituyen a las células animales están la membrana plasmática, el
retículo endoplásmico rugoso y liso, el aparato de Golgi, el núcleo, el nucléolo, los ribosomas, las
mitocondrias y algunas vesículas de secreción.
La morfología celular y la predominancia de algunos de los organelos en las células animales, depende de
su grado de diferenciación y la función que desempeñen. Por ejemplo, las células del hígado se encuentran
organizadas como glándulas secretoras, con apariencia y distribución completamente diferentes a las
células musculares, mismas que presentan gran cantidad de mitocondrias. Los eritrocitos, contenidos en la
sangre, han perdido su núcleo celular por el alto nivel de diferenciación alcanzado. En contraparte, las
células de la médula ósea están poco diferenciadas, pues de ellas se derivan diversas estirpes celulares.
Realiza un cuadro comparativo entre los diferentes tipos de tejidos animales.

Tejido Forma celular Ubicación Función
Epitelial
Conectivo
Nervioso
Muscular
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2. OBJETIVOS
2.1. Identificar y describir algunos de los componentes o estructura de células que forman parte de
los tejidos animales.
2.2. Contrastar la diversidad de la forma celular.
Tabla 1. Material requerido para la práctica de “Observación de Células y Tejidos Animales”

Cantidad Cantidad
No. Material o Equipo No. Material o Equipo
(pza) (pza)
Preparaciones fijas de células de origen
1 Microscopio compuesto 1 8 Varias
animal
2 Portaobjetos 10 9 Pipetas Pasteur 5
3 Cubreobjetos 10 10 Torundas en alcohol 3
4 Caja Petri 2 11 Franela o manta de cielo 1
5 Agujas de disección 2 12 Frasco con xilol o alcohol etílico 1
6 Block de papel seda 1 13 Kit para tinción de WRIGHT® 1
7 Navaja con un solo filo 1
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Observe cada preparación a seco débil (SD) y seco fuerte (SF) e identifique los tipos celulares
y localice la membrana, el núcleo y secciones del citoplasma.
4.2. Compare las siluetas celulares para apreciar la diversidad de formas.
4.3. Distinga el arreglo celular en conjunto y relaciónelo con algunos aspectos de la función, según
el órgano al que pertenece.
4.4. Realice dibujos de cada tipo de célula observada.
4.5. Realice preparaciones frescas y frotis de tejido sanguíneo.
● Poner una gota de sangre fresca de aproximadamente 3mm de diámetro en un extremo del
portaobjetos.
● Colocar otro portaobjetos por delante de la gota, en un ángulo de 30 a 45° y dejar que la
sangre se extienda en el ángulo formado por los dos portaobjetos.
● Empuja el segundo portaobjetos a una velocidad constante hacia el otro extremo.
● Coloca la preparación hacia arriba sobre un puente de tinción y cúbrela totalmente con
colorante durante 3 a 4 minutos.
● Agregar suavemente Buffer de fosfatos en la misma cantidad que el colorante y mezclar
soplando sobre la superficie pero evitando derrames. Dejar 5-10 minutos hasta que
aparezca una escarcha metálica.
● Quitar el colorante con agua corriente de la llave colocando el portaobjetos en forma vertical
hasta que haya desaparecido el exceso (30 segundos).
● Secar al aire en posición vertical sobre papel absorbente.
4.6. Observe al microscopio a SD y SF y realice dibujos de cada tipo de células observadas.
4.7. Realice preparaciones frescas de la mucosa bucal, agregando colorante.
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Con un palillo, raspa las paredes dentro de tu boca, en un porta objetos arrastra el palillo y ve
girándolo. Deja secar “al aire sobre el puente de tinción, una vez seca la muestra, colócale tres
gotitas de azul de metileno y deja reposar de 3 a 5 minutos, lava el exceso con agua corriente
de la llave. Deja secar el portaobjetos en forma horizontal sobre papel absorbente.
4.8. Observe al microscopio a SD y SF y realice dibujos de cada tipo de células observadas.
RESULTADOS
Presente en un cuadro comparativo, los dibujos de las células observadas, indicando los nombres de las
estructuras, así como la relación de la función y el tipo de tejido al que pertenecen.
Complemente las imágenes con ilustraciones de organelos obtenidas con otros tipos de microscopios.

5.1. Deduzca las relaciones entre la forma y la función celular de los materiales observados.
5.2. Consulte bibliografía especializada y describa el proceso que tiene lugar en alguna de las
técnicas empleadas en microscopía para observar la estructura fina de los organelos.
6. CONCLUSIONES
Comente sobre la relación con las propiedades que tienen los órganos, tejidos y células (el tamaño, forma,
densidad y características químicas), y lo que pudo observar y deducir en cuanto a la posibilidad de
identificarlos por medio de diversas técnicas de laboratorio.
7. BIBLIOGRAFÍA
7.1. BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA, NO EXCLUSIVA
Berkaloff Andre. 1980. Biología y fisiología celular. Editorial Omega. España.

Ross – Pawlina. Histología. Texto y Atlas color con Biología Celular y Molecular. 5ª edición. Ed. Médica
Panamericana.
Geneser, Finn. 1998. Atlas color de Histología. Ed. Médica Panamericana.
7.2. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
11
UPIBI-IPN
PRÁCTICA 4
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS Y TEJIDOS VEGETALES
1. INTRODUCCIÓN
Desde el inicio de la microscopía, los tejidos y células vegetales fueron amplia e intensamente estudiados.
Representaban un tipo de material muy accesible y diverso aunque aparentemente menos llamativo que las
células animales. Poco a poco fue interesando la multiplicidad de formas y arreglos que presentan, a la par
de reconocer la riqueza de sus propiedades para beneficio de los requerimientos de los seres humanos.
Las células vegetales tienen contornos geométricos y poseen algunos organelos únicos que las caracterizan
y distinguen de las células animales, tales como pared celular, cloroplastos y enormes vacuolas. Por lo tanto
las técnicas para su obtención y estudio son diferentes. Asimismo, los tejidos vegetales están formados por
una diversidad de células que muestran morfologías de acuerdo con su localización y función, además
pueden carecer de los organelos característicos de las células vegetales (los cloroplastos), debido a su
diferenciación.
Las células vegetales que conforman un órgano, como una hoja, son:
1. Células cilíndricas en uno o varios estratos que constituyen la epidermis. Los organelos que
se observan son el núcleo y la pared celular.
2. Células con pared primaria, ovaladas o redondas, con dimensiones mayores a las de la
epidermis, con gran contenido de vacuolas y cloroplastos, son las células del parénquima. El
parénquima puede ser esponjoso o en empalizada, pueden encontrarse espacios sin células
(espacios de aire), o con gran cantidad de cloroplastos y en estratos.
3. Células que conforman a los estomas, con funciones diversas y especializadas, sus formas
recuerdan a semillas del frijol. En ellas se observan su núcleo, varias vacuolas pequeñas,
cloroplastos y la pared celular.
4. Células de los haces vasculares, que son de dos tipos:
a. Traqueidas: Células muertas (es decir, sin protoplasto, con sólo la pared celular
secundaria), delgadas y largas, con pared celular secundaria en la cual se observan
sitios puntuales sin engrosamiento secundario. Su disposición es tal que forman tubos
que atraviesan todo el cuerpo de la planta, desde la raíz hasta las yemas apicales. En
un corte longitudinal, las traqueidas se observan como largas espirales hialinos
(refringentes). El xilema está formado por estas células.
b. Vasos: Células vivas del floema. Se caracterizan por ser cortas, anchas (a diferencia de
las del xilema) y con poros descritos por la falta de pared secundaria en sitios
específicos. Se observa su núcleo muy reducido en la periferia de la célula.
5. Células que se modifican para dar origen a pelos radiculares, presentan gran cantidad de
vacuolas.
6. Células de esclerénquima, en las que es conspicua la pared secundaria, describiendo formas
poliédricas, con grandes vacuolas y núcleo pequeño en la periferia celular.
12
UPIBI-IPN
A continuación, elabora un cuadro comparativo de los tejidos vegetales

Tejido Forma Ubicación Función
Meristemático
Almacenamiento
Protección y
Sostén
Conducción
Las células de algunas especies vegetales están especializadas para almacenar productos de la
fotosíntesis. Por ejemplo, los amiloplastos de los tubérculos de papa se encargan de concentrar el almidón
sintetizado. Asimismo, existen plastidios en las semillas en los que se guardan los lípidos, derivados del
anabolismo celular. Estos organelos son los más abundantes en las células de estos órganos y tejidos
vegetales. Las macromoléculas contenidas en los plastidios (almidón y lípidos), pueden ser evidenciadas
diferencialmente con métodos para constituyentes celulares (con yodo y el colorante Sudán III).
2. OBJETIVOS
2.1. Identificar y describir algunos de los componentes o estructuras celulares que forman parte de
los tejidos vegetales.
2.2. Contrastar la diversidad de la forma celular.
2.3. Identificar algunos de los organelos más grandes de las células vegetales.
13
UPIBI-IPN
Tabla 1. Material y reactivos requerido para la práctica de “Observación de células y tejidos vegetales”
Cantida
Cantidad
No. Material o Equipo d No. Material o Equipo
(pza)
(pza)
Cacahuates, nueces o almendras
1 Microscopio compuesto 1 10 3 c/u
(no procesados)
2 Caja de Petri 1 11 Fragmento de corcho 1
3 Agujas de disección 2 12 Cebolla (blanca o morada) 1
4 Navaja con un solo filo 1 13 Rama de apio (fresca) 1
5 Portaobjetos 5 14 papa chica (cruda y fresca) 1
6 cubreobjetos 5 15 Rama de Elodea sp (fresca) 1
7 Pipeta Pasteur 1 16 Agua desionizada 100 ml
8 Azul de Metileno 5 gotas 17 Lugol 5 gota
9 Colorante Sudán III 5 gotas
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Con extremo cuidado (para evitar heridas), hacer cortes lo más delgados y transparentes
posible de cada material biológico solicitado y colocarlos sobre un portaobjetos.
4.2. A los cortes de corcho, apio y hoja de Elodea, adicionar una gota de agua, cubrir la preparación
con un cubreobjetos y obsérvalas al microscopio.
4.3. A los cortes de cacahuate, nuez y/o almendra, agregar una gota de Sudán III, deja actuar un
minuto y enjuagar con agua, colocar el cubreobjetos y observar al microscopio.
4.4. Al corte de papa agregar una gota de lugol, dejar actuar medio minuto y enjuagar con agua,
colocar el cubreobjetos y observar al microscopio.
4.5. Separar una de las hojas internas de la cebolla y desprender la tenue membrana que está
adherida por su cara interior, colocar el fragmento de membrana en un portaobjetos con unas
gotas de agua desionizada, estirar el trozo de epidermis, con ayuda de dos agujas de disección.
Escurrir el agua, añadir dos gotas de azul de metileno y dejar actuar durante 5 minutos
aproximadamente. ¡No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporación
del mismo! Eliminar el exceso de colorante con abundante agua desionizada, colocar el
cubreobjetos y observa al microscopio.
4.6. Observar todas las preparaciones a S.D. (10X) y S.F. (40X).
4.7. Esquematizar a color las estructuras identificadas y escribe sus nombres.
Elabora el Diagrama de Bloques:
14
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5. RESULTADOS
5.1. Presentar, de manera ordenada y con nombres, los dibujos de los organelos y células
observadas, como se muestra en la Tabla 2.
Tabla 2. Formato de referencia para reportar el resultado 5.1.

Material Observado Colorante empleado S.D. (10X) S.F. (40X)
5.2. Complementar las imágenes con ilustraciones fotográficas de organelos obtenidas con otros
tipos de microscopios.

6.1. Comentar las posibles razones por las cuales sólo se observan estructuras como: Pared
celular; núcleo; cloroplastos y vacuolas.
6.2. Describir la forma en que funcionan los colorantes Sudán III, Azul de Metileno y Lugol.
6.3. Describir, de manera comparativa, la forma celular del material observado.
7. CONCLUSIONES
7.1. Elaborar las conclusiones a partir de la comparación de la forma celular con respecto a las
células de origen animal.
7.2. Comentar la relación entre las propiedades de las estructuras observadas y sus funciones de
importancia para la célula vegetal.
8. BIBLIOGRAFÍA
8.1. SUGERIDA, NO EXCLUSIVA
Paniagua, R. 2007. Citología e Histología Vegetal y Animal. 4ª edición. Ed. McGraw Hill. España.
15
UPIBI-IPN
PRÁCTICA 5
TRANSPORTE A TRAVÉS DE LA MEMBRANA
1. INTRODUCCIÓN
En todas las células y organismos unicelulares existe intercambio de materia, energía e información
genética. La membrana citoplasmática es la estructura celular responsable de lo que ingresa y sale de la
célula. Ésta es un organelo universal en todas las células, sin ella no podrían mantener su integridad como
un sistema químico coordinado. La membrana está formada por moléculas con propiedades fisicoquímicas
anfipáticas, es decir, que consisten de una parte que es hidrofóbica (insoluble en agua) y otra parte que es
hidrofílica (soluble en agua). Éstas son los fosfolípidos, mismos que se organizan en dos capas (bicapas).
REALIZA EL ESQUEMA O DIBUJO DE LA MEMBRANA CELULAR
Las membranas poseen propiedades que las caracterizan, ellas son asimétricas (sus dos superficies no son
idénticas), presentan fluidez (permite gran movilidad molecular) y funcionan seleccionando lo que transita a
través de ellas. Siendo ésta última propiedad determinante para la fisiología de la célula. La selectividad de
la membrana se debe a que tienen proteínas especializadas insertadas en ellas, que sirven para transportar
moléculas específicas de un lado a otro. Las proteínas transportadoras de la membrana determinan qué
moléculas entran y salen a la célula. Gracias a ellas y dependiendo de su tipo, la célula requerirá o no de
energía para el transporte de elementos y de pequeñas moléculas. Los procesos que se verifican en las
membranas celulares son la ósmosis, la difusión y el transporte activo, mismos que generan cambios
celulares en el aspecto de las células, tamaño y comportamiento.
2. OBJETIVOS
2.1. Identificar los cambios celulares debidos a los modificadores de la membrana citoplasmática.
2.2. Describir el modo de actuar de las soluciones salinas sobre el aspecto celular y la dinámica de
algunos organelos como los cloroplastos, y algunas células como los eritrocitos.
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Tabla 1. Material y reactivos requerido para la práctica de “Transporte a través de membrana”

Cantidad Cantidad
(pza) (pza)
1 Microscopio óptico 1 12 Cubreobjetos 6
2 tubos de ensayo 3 13 Vaso de precipitados de 150 mL 1
3 Tubo falcon sin fondo 1 14 Probeta de 250 mL 1
4 Tira de masking tape (15 cm) 1 15 Torundas en alcohol 3
5 Pipeta Pasteur 2 16 Rama de Elodea sp (fresca) 1
6 Ligas 4 17 Solución salina al 0.85%, 20 mL
7 Palitos de madera 2 18 Solución salina al 2% 20 mL
8 Pipeta de 1 mL 1 19 Solución salina al 10% 80 mL
9 Pipeta de 10 mL 1 20 Nitrato de plata 15 gotas
10 Lanceta estéril 3 21 Agua desionizada 50 mL
11 Portaobjetos 6 Colodión de 6 cm (membrana
22 6
biológica)
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Ósmosis en un tubo
4.1.1. En un tubo sin fondo, colocar en uno de los extremos un trozo de Colodión y asegúralo
con las ligas. ¡Tener cuidado de no tocar con los dedos el centro de la membrana para
no taponarla!
4.1.2. Agregar al tubo, 3 mL de agua desionizada.
4.1.3. A lo largo de la tira de “masking tape” solicitada, elaborar con un marcador indeleble,
una graduación en centímetros y milímetros y adherirla al tubo, de tal manera que
coincida la graduación inferior de la tira, con el nivel inicial que alcanza la solución
dentro del mismo.
4.1.4. Introducir el tubo al vaso de precipitados de 150 mL, el cual contiene 80 mL de solución
salina al 10%.
4.1.5. A intervalos de 30 minutos, medir el nivel de la solución en el interior del tubo hasta
completar dos horas. Registrar los datos en la tabla 2.
4.1.6. Después de la última medición extraer del tubo 1 mL de la solución, colocarla en un
pozo de la placa para prueba de Elisa y agregarle 1 gota de nitrato de plata.
4.1.7. En ese mismo intervalo de tiempo, extraer 1 mL de la solución del vaso de precipitado
y agregarle 1 gota de nitrato de plata.
4.1.8. Finalmente, agregar 1 gota de nitrato de plata en 1 mL de agua desionizada o destilada.
Describir cualquier cambio en las 3 pruebas, o la ausencia del mismo. Registrar los
resultados en la tabla 3.
4.2. Ósmosis en la Elodea sp
4.2.1. Hacer 4 (cuatro) preparaciones temporales de hojas de Elodea sp.
17
UPIBI-IPN
4.2.2. Observar una de ellas al microscopio y describir el tamaño celular y el comportamiento

de los cloroplastos.
4.2.3. De las 3 preparaciones restantes, agregar a una de ellas tres gotas de solución salina
al 10%, a otra agregar tres gotas de solución salina al 0.85% y, a la tercera, adicionar
tres gotas de agua desionizada.
4.2.4. Observar al microscopio y describir, en cada preparación, el tamaño celular y el
comportamiento de los cloroplastos.
4.3. Osmosis en Eritrocitos
4.3.1. Limpiar con alcohol etílico el dedo índice de la persona que donará sangre.
4.3.2. Pinchar con una lanceta estéril y colocar dos o tres gotas de sangre en 3 portaobjetos.
4.3.3. Agregar dos gotas de la solución salina al 2% a uno de los portaobjetos y homogenizar
con un aplicador de madera.
4.3.4. Al término de un minuto observar, comparando el grado de turbidez o transparencia
contra luz.
4.3.5. Colocar un cubreobjetos y observar al microscopio con los objetivos 10X y 40X.
4.3.6. Realizar los esquemas o tomar las fotografías correspondientes.
4.3.7. Realizar el mismo procedimiento con solución salina al 0.85% en un portaobjetos, y
con agua desionizada en el tercer portaobjetos.
4.3.8. En este último caso, observa de inmediato al microscopio.
5. RESULTADOS
5.1 Ósmosis en tubo
5.1.1 Completar la Tabla 2 con los valores obtenidos en el experimento de “Ósmosis en un

tubo”, tomado como referencia el desplazamiento de la solución con respecto al tiempo.
Tabla 2. Formato de referencia para reportar el resultado 5.1.
Desplazamiento de la solución
Tiempo (min)
(mm)
30
60
90
120
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Tabla 3. Formato de referencia para reportar el resultado 5.1
Tipo de muestra Grado de turbidez al

adicionarle
Nitrato de Plata (*)
Solución del tubo con colodión

( 120 min)
Solución salina del matraz
Agua desionizada o destilada
( * ) _ Sin turbidez + Poca turbidez +++ Mucha turbidez
5.1. 2 Describir el aspecto y la coloración del agua desionizada, de la solución del tubo y de
la solución salina del matraz, al agregar las gotas de nitrato de plata.
5.2 Ósmosis en la Elodea sp
5.2.1 Presentar ordenadamente en la Tabla 4, los dibujos de las células vegetales para ilustrar
su aspecto y la posición de los cloroplastos, con las diferentes concentraciones de la solución salina.

Elodea con solución salina Elodea con solución salina
Aumento Elodea con agua desionizada
al 10 % al 0.85 %
S.D. (10X)
S.F. (40X)
5.2.2 Indicar si se observa alguno de los siguientes eventos: Ciclosis; Plasmólisis; Turgencia.
5.2.3 Indicar en cada caso si se trata de una solución hipertónica, hipotónica o isotónica.
5.3 Osmosis en Eritrocitos
5.3.1 Mostrar en la Tabla 5, el aspecto que tienen los eritrocitos, después de agregar las
soluciones con diferentes concentraciones de NaCl, indicando cuando se trate de una solución
hipertónica, hipotónica o isotónica.
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UPIBI-IPN
5.3.2 Indicar si se presentó lisis o crenación en alguna de ellas.

Eritrocitos con Eritrocitos con Eritrocitos con
Aumento
solución salina al 2% solución salina al 0.85 % agua desionizada
S.D. (10X)
S.F. (40X)
6.1. En el montaje del tubo para ósmosis, ¿qué factores físicos y químicos están presentes?
¿Cuáles de ellos determinaron la naturaleza del fenómeno?
6.2. Describir la reacción química que sucede entre la solución del tubo y el nitrato de plata. Explica
este resultado.
6.3. Describir las diferencias observadas en las preparaciones de Elodea sp y de los eritrocitos, en
relación a la adición de solución hipertónica, hipotónica e isotónica, y la ocurrencia de los
siguientes eventos: ciclosis, plasmólisis, turgencia, lisis y crenación.
6.4. Argumentar sobre las causas de las diferencias entre el comportamiento osmótico de la célula
vegetal y de la célula animal.
7. CONCLUSIONES
Elabora tus conclusiones con base en los resultados obtenidos y el análisis de los mismos.
8. BIBLIOGRAFÍA
Avers Ch. 1991. Biología Celular. Ed. Iberoamericana. México.

Alberts B, Jonson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P. 2002. Molecular Biology of the Cell. 4a. ed. Ed.
Garland Science. New York.1463 pp.
Giese A. 1983. Fisiología Celular y General. Ed. Interamericana. México. Págs. 574, 876 y 455.
20
UPIBI-IPN
PRÁCTICA 6
FERMENTACIÓN
1. INTRODUCCIÓN
La fermentación es un proceso bioquímico mediante el cual algunos organismos obtienen energía a partir
de fuentes de carbono como los carbohidratos, generan CO 2 y subproductos como el etanol y ácidos
orgánicos como el ácido acético y el ácido láctico.
La producción de hongos a escala industrial requiere de un medio líquido enriquecido con sustancias
nutritivas, como el nitrógeno y, en menor proporción, vitaminas y azúcares. La sacarosa, glucosa o lactosa
son algunos de ellos, aunque también puede ser algún alcohol o producto residual como efluentes de
destilería o material de desecho de repostería.
Describe las características de Saccharomyces cerevisiae, su importancia biotecnológica y menciona tres

ejemplos.
_____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
La presente práctica consta de dos sesiones de laboratorio. En la primera se prepara una serie de tubos con
concentraciones decrecientes de sacarosa y constante en la cantidad de levadura, para observar la
utilización de la primera por las levaduras y la producción de CO2 debido a su metabolismo respiratorio. En
la segunda sesión, se evaluará la producción de biomasa por un método analítico.
2. OBJETIVO
Establecer la relación que existe entre la degradación de azúcar, la producción de CO 2 y el aumento de

biomasa en el proceso de fermentación con levaduras.
3. MATERIAL REQUERIDO
3.1. MATERIAL POR EQUIPO

Tabla 1. Material y reactivos requerido por equipo para la práctica de “Fermentación”
Cantida Cantida
No
Material y Equipo d No. Material y Equipo d
.
(pza) (pza)
Tubo de ensayo (13 x 100
1 Tubo de ensaye (22 x 175 mm) 11 8 11
mm)
2 Matraz Erlenmeyer (250 mL) 2 9 Papel aluminio (4 x 4 cm) 11
3 Gradilla 1 10 Cinta adhesiva 1
Tiras de masking tape graduadas (8 cm y
4 11 11 Caja de Petri 1
80mm)
21
UPIBI-IPN
5 Pinza de disección de punta roma 1 12 Solución de sacarosa (60 %) 100 mL

6 Pipeta graduada (10 mL) 2 13 Paquete de levadura activa 1
7 Probeta graduada (10 mL) 1
3.2. MATERIAL POR GRUPO

Tabla 2. Material y reactivos requerido por grupo para la práctica de “Fermentación”
Cantidad
No. Material y Equipo
(pza)
1 Matraces Erlenmeyer con 650 mL de agua desionizada estéril 3
2 Gasas (15 cm2) 200
3 Paquete de algodón (1kg) 1
4 Balanza analítica 3
5 Estufa 1
4. PROCEDIMIENTO
PRIMERA SESIÓN
4.1. Pesa 1 g de levadura y disuelve en 100 mL de agua destilada estéril en un vaso de precipitados.
Tener precaución de vaciar el agua poco a poco para lograr una mezcla uniforme y agitar
perfectamente.
4.2. Preparar 100 mL de una solución de sacarosa al 60%.
4.3. Rotular 11 tubos de 22 x 175 mm y agregar, a cada uno de ellos, las cantidades de solución de
sacarosa, agua destilada y solución de levadura que se indican en la siguiente Tabla 3.
Tabla 3. Cantidades de reactivos y microorganismos a emplear en el experimento de la Primera Sesión

AGUA DESTILADA
No. TUBO SOLUCIÓN DE SACAROSA AL 60 % (mL) SOLUCIÓN DE LEVADURA (mL)
(mL)
1 25.0 0.0 5
2 20 5 5
3 15 10 5
4 10 15 5
5 5 20 5
6 1.0 24 5
7 0.5 24.5 5
8 0.25 24.75 5
9 0.1 24.9 5
10 0 25 5
4.4. Introducir 1 tubo de ensayo de 13 x 100 mm, en posición invertida, dentro de cada uno de los
tubos preparados en el punto anterior. Tapar los tubos grandes con parafilm y voltearlos
horizontalmente con el fin de introducir la solución dentro de los tubos pequeños, cuidando de
no dejar burbujas de aire, ya que esto puede interferir en los resultados.
4.5. Coloca tapones de gasa y algodón o tapón roscado, dependiendo el caso, a cada uno de los
tubos grandes.
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UPIBI-IPN
Serie de tubos preparados con concentraciones decrecientes de sacarosa y un

tubo pequeño invertido en su interior, para observar la producción de CO 2.
4.6. Colocar, por fuera de cada uno de los tubos grandes, la tira de masking tape graduada con las
marcas en mm hasta una altura de 8 cm, cuidando la precisión. El inicio de la escala debe
quedar en la base del tubo pequeño.
4.7. Colocar los tubos en una gradilla, incubarlos durante 24 horas a temperatura ambiente en el
sitio que te indique el (la) docente responsable.
4.8. Registrar en bitácora las condiciones ambientales del sitio de ubicación de los tubos (luz,
temperatura y humedad).
4.9. Una vez transcurridas las 24 horas de incubación, observar y anotar los cambios registrados
en cada uno de los tubos.
4.10. Observar y registrar si hubo o no desplazamiento de la campana (producción de gas).
4.11. Colocar los tubos en un bote etiquetado con los datos del equipo y grupo, almacenarlos en el
refrigerador hasta la siguiente sesión.
SEGUNDA SESIÓN
4.12. Hacer charolas de aluminio de 5X5 cm etiquetar del 1 al 10 y pesar en balanza analítica.
4.13. Sacar los tubos del refrigerador.
4.14. Tomar los tubos del 1 al 10, cuidando de no agitarlos.
4.15. Observar y registrar si hubo o no producción de gas en la campana (tubo pequeño).
4.16. Homogeneizar el contenido del tubo y vaciar el contenido en tubos falcon, previamente
etiquetados y extrae la campana.
4.17. Equilibrar los tubos falcon para posteriormente introducirlos a la centrífuga.
4.18. Centrifugar a 4000 rpm. durante 10 minutos.
4.19. Transcurrido este tiempo decantar el sobrenadante y recuperar el botón celular adicionando 3
gotas de agua y vaciar en las charolas de aluminio.
4.20. Colocarlas en la estufa por 24 horas a 60°C, volver a pesar y por diferencia de peso obtener la
cantidad de biomasa producida.
5. RESULTADOS
5.1. Elabora una tabla que contenga: Concentración de sacarosa; CO 2 producido y peso de
biomasa.
5.2. Indicar cuáles fueron las condiciones ambientales a las cuales crecieron las levaduras.
23
UPIBI-IPN
5.3. Construir una gráfica de concentración de sacarosa contra mg de biomasa al final del
experimento.

6.1. Explica la relación que existe entre la concentración de sacarosa, la producción de CO 2 y la

producción de biomasa de levaduras.
6.2. ¿Qué otro sustrato puede usarse para hacer más eficiente el proceso de fermentación en
levaduras?
6.3. En base a los resultados obtenidos ¿se considera que la sacarosa es un buen sustrato para el
metabolismo de levaduras?
6.4. ¿Cómo demuestras que las levaduras fermentan en lugar de respirar?
6.5. Si el objetivo de la práctica fuera la respiración, ¿qué cambios en el diseño experimental se
deben realizar?
6.6. Menciona cuáles son las aplicaciones biotecnológicas de este proceso metabólico.
6.7. ¿Cuál es la fuente de carbono empleada por la levadura?
7. CONCLUSIONES
Explicar la importancia que tiene la sacarosa como fuente de carbono en la fermentación de las levaduras y
la importancia de conocer este proceso para posibles aplicaciones biotecnológicas en el área ambiental.
8. BIBLIOGRAFÍA
8.1. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA, NO EXCLUSIVA
Curtis H y Barnes N S 1994. Biología. 3ª reimp. de la 5ª ed. Ed. Médica Panamericana. México. 1199 pp.
Prescott J, Harley M, Klein E 2004. Microbiología. Ed. Mc Graw-Hill. New York.
Solomon, B M 2001. Biología. 5a ed. Ed. Mc Graw- Hill. México. Págs. 155-178.
24
UPIBI-IPN
PRÁCTICA 7
FOTOSÍNTESIS: AISLAMIENTO DE CLOROPLASTOS Y REACCIÓN DE HILL
1. INTRODUCCIÓN
El sol es la principal fuente de energía en el planeta, esta energía llega a la Tierra en forma de ondas, las
cuales forman parte de un espectro electromagnético. Éste está formado por ondas cortas, como los rayos
gama, que se miden en nanómetros, y ondas largas, como las de radio, que se miden en kilómetros. El
espectro visible lo forman los colores del arco iris que son detectados por el ojo humano, comprende
longitudes de onda (λ) que van de los 380 nm (como el color violeta), hasta el rojo de 760 nm; por arriba de
esta longitud encontramos los rayos infrarrojos.
Los organismos eucariotes capaces de transformar la energía luminosa en energía química son las algas y
las plantas verdes, mediante un proceso conocido como fotosíntesis. En este proceso, la luz solar es captada
en forma de fotones o pequeños paquetes de energía, los cuales activan los electrones de las moléculas de
clorofila en los cloroplastos. La fotosíntesis se divide en dos fases: una dependiente de la luz, conocida como
fotofosforilación, y otra independiente de la luz, conocida como Ciclo de Calvin.
La reacción química de la fotosíntesis se sintetiza de la siguiente forma:
Los cloroplastos son organelos celulares que se encuentran principalmente en las hojas de las plantas,
poseen una membrana externa y una membrana interna. La membrana interna está formada por una matriz
denominada estroma, lugar donde se localizan las enzimas que participan en la formación de carbohidratos
durante la fase independiente de la luz. En esa matriz también se encuentra un conjunto de membranas
aplanadas conocidas como tilacoides, el conjunto de tilacoides recibe el nombre de grana.
Las membranas de los tilacoides contienen los pigmentos fotosintéticos que captan la energía luminosa, los
principales son la clorofila a y b. Éstos absorben con mayor eficiencia la luz azul y roja del espectro visible.
Otros pigmentos fotosintéticos son los carotenoides que absorben otras longitudes de onda, también aportan
energía en el proceso fotosintético.
Las reacciones fotosintéticas pueden ser estudiadas y verificadas en condiciones in vitro (controladas), en
cloroplastos aislados de órganos fotosintéticos (hojas y tallos verdes). El aislamiento de los organelos
celulares se hace por medio de centrifugaciones diferenciales, aplicando diferentes gravedades (g) o
revoluciones por minuto (rpm) en forma consecutiva, o por medio de gradientes de densidad (continuos o
discontinuos) logrados por soluciones de sacarosa o Ficoll en concentraciones crecientes. Gracias a ellas
es posible obtener suspensiones de cloroplastos puras.
Una de las múltiples reacciones que se llevan a cabo dentro de los cloroplastos es la cadena de transporte
de electrones. Ésta se inicia cuando la energía solar excita una molécula de clorofila alojada en las
membranas de los tilacoides y desencadena una serie de reacciones de óxido-reducción mediada por
proteínas como plastocianina, ferredoxina, Coenzima Q, citocromo C, entre otras, que finalizan en la
formación de NADPH+ y ATP. Ésta es la llamada fase luminosa (dependiente de la luz) de la fotosíntesis.
25
UPIBI-IPN
Las reacciones de óxido-reducción de la cadena de transporte de electrones pueden demostrarse con la

aplicación del colorante 2, 4 – diclorofenolindofenol en cloroplastos previamente aislados. Las reacciones
de reducción se manifiestan por la decoloración del colorante en determinado tiempo, a este fenómeno se
le conoce como Reacción de Hill. Escribe a continuación la reacción de Hill:
En la fase dependiente de la luz de la fotosíntesis, la energía solar también sirve para romper moléculas de
agua, de la cual se liberan electrones del hidrógeno, mismos que son utilizados para estabilizar la pérdida
de éstos en la clorofila. El oxígeno desprendido de la reacción de fotólisis del agua, se libera para ser
incorporado en el aire, de ahí la importancia de las plantas en la regulación de este elemento en la atmósfera.
ELABORA UN CUADRO DONDE SE MUESTREN LAS DIFERENCIAS ENTRE LAS REACCIONES

DEPENDIENTES DE LA LUZ Y LAS REACCIONES INDEPENDIENTES DE LA LUZ
Mientras el oxígeno es incorporado al ambiente, el CO2 presente en la atmósfera, es captado por las plantas
para la elaboración de carbohidratos durante la fase oscura (independiente de la luz) de la fotosíntesis, este
proceso es conocido como Ciclo de Calvin.
El CO2 fijado en la tierra por las plantas y las algas en los mares, contribuye a la regulación de este compuesto
en la atmósfera. Sin embargo, la tala indiscriminada de los bosques y el aumento de actividades industriales
han provocado el aumento en la concentración de este compuesto que, junto con otros, provocan el llamado
efecto invernadero, que conduce a cambios en los patrones climáticos. De ahí la importancia de valorar el
proceso fotosintético por el papel que juega en la regulación del CO2 en la atmósfera.
La presente práctica se llevará a cabo en dos sesiones de laboratorio. En la primera, se obtendrán los
cloroplastos de hojas de espinaca, y en la segunda parte, se emplearán para demostrar que en éstos ocurre
la cadena de transporte de electrones.
REALIZA UN ESQUEMA, DE LA FOTOSINTESIS EN PLANTAS C3 Y UNO PARA C4.
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OBJETIVOS
1. Aplicar técnicas de centrifugación para el aislamiento de cloroplastos.

2. Interpretar la fase luminosa de la fotosíntesis a través de los procesos de oxidación y
reducción en los cloroplastos.
3. Evaluar la capacidad fotosintética de los cloroplastos sometidos a una fuente luminosa.
PRIMERA SESIÓN DE LA PRÁCTICA
Tabla 1. Material y equipo requerido para la primera sesión de la práctica de “Fotosíntesis”

Cantida Cantida
No
No. Material o Equipo d Material o Equipo d
.
(pza) (pza)
Mortero con pistilo, (pre- Tubos para centrífuga (15
1 1 12 6
enfriados) mL)
2 Embudo de filtración 1 13 Palangana con hielo 1
3 Vaso de precipitados (250 mL) 1 14 Microscopio compuesto 1
4 Tubos de ensaye (16 x 150 mm) 6 15 Centrifuga (refrigerada) 1
5 Pipeta (5 mL) 1 16 Solución de sacarosa (0.5 M) 25 mL
6 Pipeta (1 mL) 1 17 Espinacas frescas 250 g
7 pipetas (10 mL) 2 18 Sal en grano 4g
8 Cutter o navaja con un solo filo 1 19 Etanol o acetona
9 Cuadros dobles de gasa de algodón 5 20 Solución de NaCl (0.035 M) 6 mL
10 Papel seda - 21 Probeta (100 mL) 1
1. PROCEDIMIENTO
1. Preparar un baño de hielo y adiciona una cucharadita de sal de grano. Enfriar

previamente todo el material que será utilizado.
2. Seleccionar varias hojas de espinaca frescas y enjuágalas con agua corriente y después
con agua desionizada. Remover las venas largas, jalándolas a lo largo de las hojas.
3. Pesar 6.0 g de hojas desvenadas y secas, y cortarlas en trozos pequeños.
4. Adicionar los trocitos en un mortero frío conteniendo 5 mL de solución de sacarosa 0.5
M.
5. Macerar el tejido y adiciona, paulatinamente, más solución de sacarosa hasta completar
15 mL.
6. Filtrar el homogenizado a través de 5 capas de una gasa de algodón con ayuda de un
embudo.
7. Recibir el filtrado en un vaso de precipitados, exprimir la pulpa del tejido para recobrar
toda la suspensión posible sin residuos de espinaca.
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8. Transferir la suspensión de espinacas a tubos de centrífuga (de 15 mL) fríos y centrifugar

a 1,500 rpm durante 10 min a 4°C, para separar agregados celulares, células enteras y
fragmentos de las mismas.
9. Recuperar por decantación el sobrenadante y colocarlo en tubos de centrífuga de 15 mL,
limpios y fríos. Centrifugar a 3000 rpm por 10 min. El botón formado contiene los
cloroplastos. Decanta y desecha el sobrenadante.
10. Adicionar 6.0 mL de la solución 0.035 M de cloruro de sodio fría, y re-suspender
cuidadosamente los cloroplastos del botón obtenido por re-pipeteo.
11. Cubrir totalmente los tubos con papel aluminio y colocarlos a temperatura de refrigeración
(2°C a 8°C). Ésta será la suspensión de cloroplastos que se usará en la siguiente sesión.
SEGUNDA SESIÓN DE LA PRÁCTICA
Tabla 3. Material y equipo requerido para la segunda sesión de la práctica de “Fotosíntesis”

Cantida Cantida
No
Material o Equipo d No. Material o Equipo d
.
(pza) (pza)
1 Pipeta graduada (5 mL) 1 8 Piceta con agua desionizada 1
2 Pipetas graduada (2 mL) 2 9 Solución de cloruro de sodio 0.035 M
Tubos de ensaye (16 x 150
3 7 10 Baño de agua hirviendo 1
mm)
4 Pipeta Pasteur 1 11 Baño de hielo 1
Gradilla para tubos de Solución de 2,6-Di-Cloro-Fenol-Indo-Fenol
5 1 12 1 mL
ensaye (DCPIP) (22 mM)
Solución amortiguadora de fosfatos (0.1 M, pH
6 Papel aluminio - 13 20 mL
6.5)
Suspensión de
7 - 14 Micropipeta de 10 a 100 µL 1
cloroplastos
2. PROCEDIMIENTO
1. Tomar 2 mL de la suspensión de cloroplastos en un tubo de ensayo, e incubarlo por 5

minutos a temperatura de ebullición dentro de un baño de agua hirviendo.
2. Inmediatamente después del término del tiempo de incubación, colocarlo en un baño de
agua fría o hielo.
3. Mantener el resto de la suspensión de cloroplastos frescos en un baño de hielo a 4°C.
4. Prepara los 6 tubos de ensayo como se indica en la Tabla 4.
5. En cuanto se terminen de preparar los tubos del 1 al 3, mezclar perfectamente, comparar
color y turbidez de cada tubo y anotar las observaciones.
6. Antes de preparar los tubos del 4 al 6, se deben cubrir por completo con papel aluminio
para conservarlos en condiciones de oscuridad
7. Adicionar las soluciones indicadas, mezclar perfectamente y de inmediato.
¡Es muy importante que no entre nada de luz al interior de los tubos!
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1. Coloca los tubos 1, 2 y 3 en una gradilla y sácalos al exterior del laboratorio, de

manera que les dé la luz solar. Los tubos 4, 5 y 6 deben permanecer en el interior del
laboratorio, durante todo el desarrollo de la práctica.
2. Verificar si ocurrió algún cambio en la coloración de los tubos y anotarlo.
Tabla 4. Tratamientos y condiciones experimentales para verificar la fase luminosa de la fotosíntesis a

través de los procesos de oxidación y reducción en los cloroplastos aislados mediados por el DiCloro-
Fenol-Indo-Fenol (DCPIP).
Número de Tubo
Soluciones: 1 2 3 4 5 6
Blanco Blanco
Solución amortiguadora de fosfatos 0.1 M, pH 6.5 (mL) 2.9 1.9 1.9 2.9 1.9 1.9
DCPIP (µL) 30 30 30 30 30 30
Suspensión de cloroplastos hervidos (mL) --- 1.0 --- --- 1.0 ---
Suspensión de cloroplastos frescos (mL) --- --- 1.0 --- --- 1.0
Condiciones de iluminación Luz Oscuridad
1. Documentar el procedimiento de obtención de los cloroplastos aislados.

2. Describe la apariencia del contenido de los tubos antes y después de la incubación en
condiciones de luz y oscuridad.

1. ¿Por qué escoger espinacas para obtener cloroplastos? ¿Por qué se tienen que macerar
las espinacas para la obtención de sus cloroplastos?
2. ¿Por qué se trabaja con el material frío para la extracción de los cloroplastos?
3. ¿Cuál es el objetivo que persigue la centrifugación del homogeneizado de espinacas?
4. ¿Qué función desempeña el amortiguador de fosfatos?
5. ¿Qué tipo de solución es la de NaCl 0.035 M (isotónica, hipertónica o hipotónica)?
6. Indicar en qué fase y explica cómo participa en el proceso de la fotosíntesis el 2,6-Di-
Cloro-Fenol-Indo-Fenol (DCPIP). Esquematizar la reacción que se lleva a cabo.
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UPIBI-IPN
7. Analizar a qué se deben los cambios en la coloración de los tubos en los diferentes
tiempos de incubación en luz y oscuridad.
5. CONCLUSIONES
1. Concluir sobre la importancia de la técnica de aislamiento de cloroplastos.

2. Explicar la importancia de la fotosíntesis en el planeta.
6. BIBLIOGRAFÍA
6.1 BIBLIOGRAFÍA SUGERIDA, NO EXCLUSIVA
Curtis H y N S Barnes. 1994. Biología. 3ª reimp. de la 5ª ed. Ed. Médica Panamericana. México. 1199 pp.
Solomon B M. 2001. Biología. 5a ed. Ed. Mc Graw-Hill Interamericana. México. Págs. 177-199.
6.2. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
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PRÁCTICA 8
OBTENCIÓN DE ADN (MÉTODO CASERO)
1. INTRODUCCIÓN
Es posible estudiar a las células eucariotas desde sus elementos constituyentes, es decir, desde uno o
varios de sus organelos (como en la práctica anterior) o a partir de las moléculas que las conforman. Las
macromoléculas que generan mayor información sobre el estado fisiológico de las mismas son las proteínas
y los ácidos nucleicos: Ácido Desoxirribonucleico (ADN) y Ácido Ribonucleico (ARN) (nos referiremos
únicamente al primero para la presente práctica). Para obtener estas macromoléculas, es menester romper
las células y los organelos contenidos en ellas, especialmente el núcleo, para que éstas sean liberadas al
sobrenadante (medio circundante en el que se encuentran las células). La lisis celular es un procedimiento
que es particular para los tipos de barreras que tienen las células eucariotas. Por ejemplo, las plantas por
presentar una pared celular requieren de mayores esfuerzos para su ruptura en comparación con las células
de origen animal que no tienen una pared, por lo que los protocolos para dicho fin son diferentes.
Para la lisis se emplean detergentes aniónicos, como el dodecil sulfato de sodio (SDS), además de sales de
sodio o de fosfato, para crear un ambiente iónico favorable para las macromoléculas, o de citrato, para
precipitar contaminantes, como los carbohidratos. Es necesaria una fuerte agitación o maceración con perlas
de vidrio para favorecer el rompimiento celular. Durante la lisis se desintegran las membranas, tanto la
plasmática de las células como las de los organelos internos. Al mismo tiempo, se liberan de los lisosomas
y peroxisomas, entre los más importantes, las enzimas que degradan a las macromoléculas de interés. Para
evitarlo, se usan inhibidores de proteasas y nucleasas, agentes caotróficos (tiocianato de guanidina),
quelantes (quienes capturan iones divalentes como el Mg 2+ y Ca2+, útiles para la correcta actividad de las
enzimas degradadoras) y se baja la temperatura para establecer condiciones desfavorables para la actividad
enzimática. Es importante señalar que durante todo el procedimiento de extracción, particularmente para
ácidos nucleicos, es necesario trabajar con el material libre de ADNasas. Esta condición se logra tratándolo
con dietilpirocarbonato (DEPC) al 0.1 % y esterilizándolo a 121 °C por 15 min para su desnaturalización, o
usando material nuevo libre de ADNasas que se puede adquirir comercialmente.
Después de la liberación de las proteínas y los ácidos nucleicos de las células, éstos se deben separar de
los restos celulares (detritus) y entre ellos mismos. Lo anterior se logra por medio de centrifugaciones
diferenciales y, principalmente, empleando sus características físico-químicas. Se usan solventes
(cloroformo, fenol, alcohol isoamílico) para separar los componentes orgánicos, es decir, las proteínas,
lípidos y carbohidratos, quedando el ADN disuelto en la fase superior acuosa líquida (menos densa) y las
proteínas en la fase orgánica inferior (más densa que la fase líquida). Finalmente, y después de separar
cada una de las fases, se usan alcoholes (etanol absoluto) para favorecer la precipitación de ambas
macromoléculas.
La cantidad de proteínas y ácidos nucleicos que se pueden obtener de las células eucariotas dependerá del
origen del tejido del que formen parte, del número de células contenidas en la muestra procesada y de la
cantidad de agua presente en ella. Su cuantificación exacta se logra por métodos espectrofotométricos
empleando colorantes que se unen a la estructura de las proteínas (método de Bradford o Lowry) o de nuevo
haciendo uso de las características fisicoquímicas de los ácidos nucleicos. El ADN presenta un pico máximo
de absorción a 260 nm. Una densidad óptica de 1 a 260 nm corresponde a aproximadamente 50 µg/mL
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para ADN de doble cadena, 40 µg/mL para ADN de una cadena y para ARN, y 20 µg/mL para
oligonucleótidos (Maniatis et al., 1982).
Por espectrofotometría, también es posible determinar la pureza del ADN separado, estimando la proporción
entre la Absorbancia (A) a 260 nm con respecto a la Absorbancia a 280 nm, que corresponde, ésta última,
al pico máximo de absorción de las proteínas. La razón A 260/A280 debe ser mayor a 1.8 y no pasar el valor
de 2.0 para el ADN, lo que significa que la muestra presenta una cantidad pequeña o nula de proteínas y
daría cuenta de lo eficiente del protocolo de extracción para la macromolécula. En relación con el estudio
de los ácidos nucleicos, está la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), transcripción reversa PCR (RT-
PCR), y el análisis de expresión de genes, entre otras. Todas estas reacciones se ven inhibidas por
impurezas contenidas en el ADN procedentes del proceso de extracción y remanentes del tejido original.
La integridad de las moléculas extraídas es de igual forma determinante para llevar a cabo algunas técnicas
moleculares para los ácidos nucleicos y durante la identificación de las proteínas. Para ADN, ésta se evalúa
por electroforesis en geles de agarosa, un polisacárido altamente purificado obtenido del agar.
Realiza un modelo tridimensional de DNA con todos sus componentes de 10 cm de ancho por 30 cm de
altura.
2. OBJETIVO
Extraer ADN a partir de tejidos de origen vegetal.
3. EQUIPO, REACTIVOS Y MATERIAL POR EQUIPO
Tabla 1. Material requerido para la práctica de “Obtención de ADN, método casero”

Cantidad Cantidad
(pza) (pza)
1 Fresas frescas 25 g 7 Sal de grano 5g

2 Probeta (100 mL) 1 8 Detergente neutro 5 mL
3 Tubos de ensaye (16 X 150 mm) 4 9 Ablandador de carnes .25 g
4 Vaso de precipitados (250 mL) 1 10 Baño de hielo 1
5 Agua desionizada o destilada 11 Licuadora 1

6 Alcohol etílico comercial 100 mL
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Calentar la varilla de vidrio y hacerle espículas en una punta ayudándose con otra varilla más
pequeña.
4.2 En tanto se prepara la varilla, colocar 100 mL de alcohol en un baño de hielo.
32
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4.3 Lavar la muestra con agua corriente.

4.4 Licuar la muestra con aproximadamente 100 ml de agua desionizada y unos granos de sal
durante 45 segundos.
4.5 Filtrar la solución y exprimir la gasa. Recuperar la solución.
4.6 A la solución anterior, adicionar 30 ml de detergente líquido neutro, mezclar suavemente.
4.7 Dejar reposar 10 minutos.
4.8 Pasar la solución en sólo una tercera parte de los tubos de ensaye (marcar los tubos en tres
partes).
4.9 Adicionar a cada tubo una pequeña porción de ablandador de carne y mezclar suavemente.
4.10 Posteriormente, adicionar un volumen (otra tercera parte) de alcohol frío resbalando por las
paredes, tener cuidado de no mover mucho los tubos.
4.11 En la interfase (observar con atención), se observa un precipitado de aspecto mucoso.
4.12 Recuperar el precipitado, que contiene el ADN, con la varilla de vidrio.
Hacer un registro detallado de lo observado.

6.1 Si para la extracción de ADN se utiliza una muestra de origen animal y otra de origen vegetal,
¿en cuál de las dos se obtendrían mejores resultados y por qué?
6.2 ¿Se obtiene ADN puro?
6.3 ¿Qué puede hacerse para caracterizar al ADN y demostrar que en realidad es eso?
6.4 ¿Cómo puede purificarse la muestra de ADN?
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UPIBI-IPN
6.5 ¿Es posible aplicar electroforesis para esta práctica? ¿Por qué?
6.6 ¿Qué aplicaciones en Biotecnología Ambiental puede tener?
6.7 Explicar por qué es posible separar las proteínas del ADN de la misma muestra con el
procedimiento descrito en la práctica.
6.8 Explicar cuál es la función de la solución de la sal durante el procedimiento de extracción de
las macromoléculas.
6.9 Explicar por qué el etanol favorece la precipitación del ADN y de las proteínas.
7. CONCLUSIONES
Elaborar las conclusiones con base en la discusión de los resultados obtenidos y los objetivos planteados.
8. BIBLIOGRAFÍA
Maniatis T, Fritsch EF y Sambrook J. 1982. Molecular cloning. A manual laboratory. 13a. reimp. Ed. Cold
Spring Harbor Laboratory. Nueva York. 545 pp.
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PRÁCTICA 9
MITOSIS EN MERISTEMO DE CEBOLLA
1. INTRODUCCIÓN
El ciclo celular consiste en tres fases: Interfase, Mitosis y Citocinesis. Antes de que una célula eucariótica
pueda comenzar la mitosis y dividirse efectivamente, debe duplicar su ADN, sintetizar histonas y otras
proteínas asociadas con el DNA de los cromosomas, producir una reserva adecuada de organelos para las
dos células hijas y ensamblar las estructuras necesarias para que se lleven a cabo la mitosis y la citocinesis.
La fase M o Mitosis, es el proceso de división nuclear, el cual es dividido convencionalmente en cuatro

fases: Profase, Metafase, Anafase y Telofase. Durante este proceso se efectúa la distribución de los
cromosomas replicados en la interfase, fase en la cual los cromosomas aparecen como filamentos
enrollados, denominados cromatina.
ELABORA UN DIBUJO O ESQUEMA A COLOR DE LA MITOSIS, SEÑALANDO CADA UNO DE SUS

EVENTOS.
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UPIBI-IPN
La profase
Al iniciar la profase se encuentran presentes dos pares de centriolos (a excepción de las plantas superiores),
a un lado del núcleo. Durante esta fase, los pares de éstos se separan por la formación entre ellos de fibras
del huso. En algunas células se forman pequeños filamentos, llamados áster, que salen de cada par de
centriolos como si fueran rayos. Al finalizar la profase, los centriolos se encuentran dispuestos en los polos
opuestos de la célula y la envoltura nuclear ha desaparecido totalmente.
Al inicio de la metafase,
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
En la anafase
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________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
Cuando se inicia la telofase,

________________________________________________________________________________
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________________________________________________________________________________
La citocinesis consiste en la formación de una barrera entre las dos nuevas células hijas, permitiendo la
distribución más o menos homogénea del citoplasma y la separación de los núcleos hijos.
En las células animales y algunos protoctistas, la citocinesis comienza con la invaginación de la membrana
sobre la línea media donde se formó el huso, pero de manera perpendicular a éste, los cambios dan inicio
durante la telofase y el proceso recibe el nombre de formación del surco o segmentación. La constricción
en la línea media es generada por la contracción de filamentos de actina y miosina que se ensamblan en un
anillo contráctil actuando como cordón que cierra la célula.
¿Qué sucede en las células vegetales?
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
2. OBJETIVOS
2.1. Estudiar la Mitosis en la raíz de la cebolla.

2.2. Diferenciar las fases de la Mitosis.
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3. MATERIAL
Tabla 1. Material y reactivos requerido para la práctica de “Mitosis”

Cantida
Cantidad
(pza)
(pza)
1 Microscopio óptico 1 7 Un clip 3
2 Portaobjetos 5 8 Bulbos de cebolla con raíces 10
3 Cubreobjetos 5 9 Papel absorbente -
4 Tubo de ensayo (16 x 150 mm) 3 10 Baño María a 60°C 1
5 Bisturí 1 11 Orceína acética 1 gotas
6 Pinzas para tubo 2 12 HCl (1N) 15 mL
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Colocar las cebollas en un recipiente con agua a manera que la zona radicular de la cebolla
toque ligeramente la superficie del agua y dejarla en un sitio con luz natural.
4.2. Esperar alrededor de seis días, hasta que las raicillas tengan unos cuantos centímetros de
largo y una hora previa al desarrollo de la práctica, colocar la cebolla en agua con hielo,
sumergiendo con cuidado las raicillas.
4.3. Revisar el aspecto de las raíces, el extremo debe presentar un aspecto lechoso al revisar a
contra luz.
4.4. Corta 1 cm de la raíz de forma diagonal y coloca varios segmentos en un tubo de ensayo
conteniendo 5 ml de HCl 1N.
4.5. Calentar el tubo en un Baño María a 60° durante 2 minutos.
4.6. Decantar el contenido del tubo y sobre un papel secante colocar las raicillas.
4.7. Coloca las raíces en un portaobjetos y corta los 5 mm correspondientes al ápice, eliminando el
resto.
NOTA: EL PORTAOBJETOS DEBE ESTAR SOBRE PAPEL SECANTE.
4.8. Depositar sobre la muestra una gota de orceína acética y colocar un cubreobjetos.
4.9. Ejercer presión sobre la muestra y extenderla utilizando un clip (Técnica de Squash).
4.10. Observar la preparación al microscopio, a diferentes aumentos.
Identificar y esquematizar o fotografiar las células en las diferentes fases del ciclo celular (interfase, profase,
metafase, anafase, telofase y citocinesis).

6.1 ¿Qué fases de la mitosis se han observado y cuál es su significado?
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6.2 ¿Por qué los cromosomas se tiñen de rojo?

6.3 ¿Se ha observado el proceso de citocinesis? En caso afirmativo, describirlo.
6.4 ¿En qué se basa la técnica de tinción con Orceína Acética?
7. CONCLUSIONES
Elabora las conclusiones con base en los objetivos establecidos, las observaciones, los resultados obtenidos
y el análisis efectuado.
8. BIBLIOGRAFÍA
Audesirk, Teresa. 2003. Biología. La vida en la Tierra. Pearson Education. México. 790 pp.
Gutiérrez Barba BE, Vivero Santos JM, Sánchez García ML, Herrera Colmenero NI, Macías Arredondo JM
y Mora Ramírez R. 1996. Manual de prácticas de laboratorio de Biología General. Instituto Politécnico
Nacional. México. 98 pp.
Lodish, Harvey. 2002. Biología celular y molecular. Médica Panamericana. España. 1053 pp.
Starr C y Taggart R. 2004. Biología: La unidad y diversidad de la vida. Thomson Learning. México. 804 pp.
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PRÁCTICA 10
OBSERVACIÓN DE HONGOS
1. INTRODUCCIÓN
Los hongos pertenecen al reino Fungi, es un grupo muy diverso que agrupa alrededor de 100,000 especies
descritas, son organismos eucariotas que carecen de clorofila, la mayoría son terrestres, se desarrollan
preferentemente en medios húmedos en lugares donde exista materia orgánica disponible. En ambientes
secos los hongos sobreviven al entrar en un estado de reposo o a través de la producción de esporas.
Son organismos unicelulares como las levaduras, y multicelulares formados por redes filamentosas
denominadas hifas, las cuales en conjunto forman lo que se conoce como micelio, las hifas pueden estar
divididas por septos o tabiques y contener uno o más núcleos, en algunos hongos las hifas no poseen
septos y se le denomina micelio cenocítico. El micelio aéreo crece hacía la superficie formando esporas,
también se conoce como micelio reproductor, cuando el micelio crece hacia un sustrato y absorbe nutrientes
se denomina micelio vegetativo. La pared celular de la mayoría de hongos está compuesta por quitina que
es un polisacárido.
Son heterótrofos y se alimentan por absorción, la mayoría son saprobios ya que se alimentan de materia
orgánica muerta, otros son parásitos y absorben sus nutrientes de organismos vivos, mientras que otros
viven en asociación íntima con otros organismos (mutualismo).
Los hongos saprobios, junto con las bacterias son los principales descomponedores de la Tierra, ya que
contribuyen a la descomposición y reciclado de los elementos utilizados por los seres vivos. Los hongos son
los principales descomponedores de celulosa y lignina, mientras que otros descomponen la queratina.
La reproducción de los hongos es asexual y sexual. La asexual es por esporas, fragmentación del micelio o
gemación como en las levaduras. En algunos hongos, las esporas se producen en estructuras llamadas
esporangios o conidióforos, las esporas reciben el nombre de esporangiosporas o conidiosporas (conidios)
respectivamente. La reproducción sexual se lleva a cabo en hifas especializadas conocidas como
gametangios, un núcleo haploide de una célula donante puede penetrar en el citoplasma de una célula
receptora, se fusionan y forman un cigosto diploide, también puede ocurrir que dos gametos sean liberados
de los gametangios y se fusionen. La reproducción sexual es poco frecuente y puede formar esporas
sexuales conocida como zigosporas y ascosporas.
La siguiente clasificación de hongos se hizo con base en la reproducción sexual, y estructura de los cuerpos
fructíferos, consta de cinco Filos: Chytridiomycota (Allomyces), Glomerommycota (micorrizas), Zygomycota
(Rhizopus), Ascomycota (Saccharomyces, trufas), Basidiomycota (Agaricus) y otro taxón más,
Deuteromycota u Hongos Imperfectos (Penicillium, Aspergillus) algunas veces a éstos hongos se les incluye
como una dentro de los Ascomycota.
Los líquenes son organismos duales que evolucionaron a partir de una relación simbiótica entre un
organismo autótrofo cianobacteria o algas verdes y un hongo basidiomiceto o ascomiceto, existen alrededor
de 14,000 mil especies descritas de líquenes, su importancia ecológica radica en que son organismos
formadores de suelos.
Con base en la reproducción sexual y la estructura de los cuerpops fructíferos describe como se clasifican
los hongos r realiza una tabla comparativa.
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Escribe el género y especie de 5 hongos de importancia. Biotecnológica

________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
2. OBJETIVOS
2.1. Observar, dibujar y/o fotografiar las características morfológicas y de reproducción asexual por
gemación que presentan las levaduras como representantes de los hongos unicelulares.
2.2. Comparar los diferentes tipos de estructuras presentes en los microscópicos y macroscópicos.
2.3. Dibujar o fotografiar las estructuras en hongos microscópicos, hongos macroscópicos y
líquenes.
3. MATERIAL
Tabla 1. Material, equipo y reactivos requerido para la práctica de “Observación de hongos”

Cantida
Cantidad
(pza)
(pza)
1 Microscopio óptico 1 9 Ejemplares de líquenes Varios
Cultivos de mohos (en pan,
2 Microscopio estereoscópico 1 10 Varios
tortilla, etc.)
3 Portaobjetos Cubreobjetos 5 11 Levadura Varios
Agua destilada con un poco de
4 Mechero bunsen 5 12
azúcar (sacarosa)
5 Asa microbiológica para hongos 2 13 Azul de algodón lactofenol 10 gotas
6 Aguja de disección 2 14 Barniz de uñas (transparente) -
7 Navaja de un solo filo o bisturí 1 15 Mortero con pistilo 1
8 Ejemplares de hongos macroscópicos Varios 16 Pipeta Pasteur 1
4. PROCEDIMIENTO
4.1. PARA LA LEVADURA
4.1.1. Disolver un poco de levadura en un tubo de ensaye que contenga 1 mL de agua tibia,
ligeramente azucarada, e incuba durante 10 minutos a temperatura ambiente.
4.1.2. Colocar tres gotas de ésta suspensión en un portaobjetos, colocar un cubreobjetos y
observa en el microscopio óptico a seco débil (10X), seco fuerte (40X) e inmersión
(100X).
4.1.3. Dibujar o tomar fotografías de las estructuras observadas e identificarlas en cada uno
de los esquemas.
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UPIBI-IPN
4.1.4. Repetir el paso anterior mezclando sobre el portaobjetos la suspensión acuosa de la

levadura con una gota de azul de algodón.
4.2. PARA EL MOHO MICROSCÓPICO EN MUESTRA DE PAN, TORTILLA O FRUTA
4.2.1. Describir la morfología colonial del moho como: Color del micelio vegetativo y
reproductor; su aspecto (aterciopelado, pulverulento o algodonoso).
4.2.2. Realizar una preparación temporal de los cultivos de moho e identificar el tipo de hifas
y las estructuras reproductivas que presenten.
4.2.3. Tomar un pedazo de diurex y colocarlo sobre la muestra de pan fruta o tortilla, para
que la muestra de moho quede adherida a la superficie, colocarla en el centro de un
portaobjetos que contenga una gota de azul de algodón. Observar las preparaciones a
seco débil (10X) y seco fuerte (40X), y dibujar o tomar fotografías de las estructuras
observadas.
4.2.4. Con ayuda de la bibliografía, identificar de qué moho se trata.
4.3. PARA OBSERVAR EL HONGO MACROSCÓPICO
4.3.1. Describir las características macroscópicas de los ascomicetos, como el color del píleo
y del estípite (si lo hay).
4.3.2. Hacer esquemas o tomar fotografías de lo observado.
4.3.3. Realizar un corte fino de las láminas, poros o dientes de un basidiomiceto, colocarlo en
un portaobjetos para hacer una preparación temporal.
4.3.4. Obsérvalas a seco débil (10X) y luego a seco fuerte (40X), localizando las hifas, los
basidios y las basidiosporas.
4.4. PARA OBSERVAR LOS LÍQUENES
4.4.1. Observar los líquenes, describiendo su forma y color.

4.4.2. Hacer una preparación temporal, tomar un fragmento pequeño del líquen, y ponerlo a
remojar 30 minutos en agua destilada, triturarlo con el mortero, una vez triturado,
agrégale un poco de agua, mezclar para tener una muestra homogénea posteriormente
tomar una muestra con la pipeta pasteur y colocar una gota en un cubreobjetos limpio,
colocar el cubreobjetos y observar a seco débil (10X) y seco fuerte (40X).
4.4.3. Esquematizar o tomar fotografías de las observaciones.
5.1. Hacer esquemas o tomar fotografías de cada una de tus observaciones hechas en el
microscopio y organizarlas de la forma que indican los siguientes cuadros:
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Tabla 2. Formato para el reporte de observaciones microscópicas de levaduras

En suspensión acuosa con agua
Organismo En suspensión acuosa con azul de algodón
azucarada
Levadura
Tabla 3. Formato para el reporte de observaciones de hongos microscópicos

Organismo en:
Morfología colonial
Cultivo Pan Tortilla o frutas
Color del micelio vegetativo y
reproductor.
Tipo de hifas y esporas
Observaciones a
10X y 40X
Nombre del moho
Realiza un esquema de la estructura macroscópica y microscópica de la preparación de

líquenes.
GUIA PARA LA ELABORACION DEL ANALISIS DE RESULTADOS (NO CONTESTAR ESTE RUBRO EN
FORMA DE CUESTIONARIO, es sólo una ayuda para poder desarrollar la actividad)
6.1. Compara las diferencias y semejanzas estructurales y funcionales observadas entre levaduras,
hongos microscópicos, macroscópicos y líquenes.
6.2. Describe la importancia biotecnológica de los hongos.
42
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7. CONCLUSIONES
Elabora tus conclusiones con base en los objetivos establecidos, las observaciones, los resultados
obtenidos, y el análisis efectuado.
8. BIBLIOGRAFÍA
Audesirk, Teresa. 2003. Biología. La vida en la Tierra. Pearson Education. México. 790 pp.
Lodish, Harvey. 2002. Biología celular y molecular. Médica Panamericana. España. 1053 pp.
43
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PRÁCTICA 11
OBSERVACIÓN DE ALGAS Y PROTOZOARIOS
1. INTRODUCCIÓN
En el Reino Protoctista se sitúan los microorganismos eucariontes y sus descendientes inmediatos: Las
algas nucleadas (incluyendo las multicelulares); los hongos acuáticos; los undulipodiados (antes conocidos
como flagelados) y; los protozoarios. Todos los protoctistas son acuáticos, algunos son de agua dulce, otros
son principalmente marinos y otros viven en los tejidos con alto contenido de agua de otros organismos. Los
organismos pluricelulares de este grupo no llegan a formar tejidos diferenciados, pueden ser autótrofos o
heterótrofos, móviles o sésiles, con vida libre o parasitaria. Los organismos pertenecientes a este reino
presentan una gran diversidad en cuanto a su organización celular, a su tipo de división celular, a su ciclo
vital y a su forma de nutrición.
Las algas están formadas por células eucariotas y podemos encontrar individuos unicelulares o
pluricelulares. Todas son autótrofas, esto es, forman materia orgánica a partir de materia inorgánica,
utilizando la luz como fuente de energía por medio de la fotosíntesis. Las algas se utilizan en la industria
alimentaria como espesantes de mermeladas y salsas. En medicina se utilizan para hacer los medios de
cultivo para las bacterias, también se extraen de ellas sustancias para producir medicamentos. La mayoría
poseen pared celular, que contiene carbonato de sílice. Su color varía, las hay verdes (clorofitas), rojas
(rodofitas), doradas (crisofitas) y cafés (feofitas). Las tres últimas, su color se debe a los pigmentos
accesorios, que le dan esa característica a las algas para poder atrapar la luz solar a distintas profundidades.
Las algas pueden llegar a ser importantes constituyentes de la flora del suelo y pueden existir incluso en
situaciones tan extremas como sobre la nieve, entre las arenas del desierto o en aguas termales cuya
temperatura está por sobre los 80ºC. Sin embargo, su mayor desarrollo y diversidad se ha logrado en el
mar. Allí viven en dos tipos de situaciones muy distintas: algunas viven flotando en las capas más
superficiales de agua, son generalmente unicelulares y se les reconoce con el nombre general de algas
planctónicas. Otro grupo vive adherido a rocas, piedras y bolones, y se les conoce como algas bentónicas.
Ambos grupos son los productores más importantes en el mar y la base de todas las cadenas tróficas allí
existentes; sin embargo, sólo las algas bentónicas tienen importancia económica directa.
Las algas se clasifican en unicelulares y multicelulares. Las primeras son seres formados por una sola célula,
pueden vivir libres, como es el caso de la Euglena. También pueden asociarse y formar colonias, como es
el caso de Volvox.
Algunas algas unicelulares se agrupan unidas por mucílagos formando un cenobio. De entre ellos es posible
distinguir:
✓ Unicelulares móviles por flagelos.

✓ Unicelulares inmóviles.
✓ Ameboides (no tienen pared celular).
Elabora un cuadro comparativo de las algas verdes, doradas, pardas y rojas. Pon el nombre del
phylum, características distintivas, hábitat e importancia biotecnológica.
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Los protozoos son un grupo de transición muy extenso, diverso que tiende a ser considerado más cercano
a los animales, ya que su actuación general respecto a la fisiología de su nutrición, locomoción y otras
características más, así lo indica. Este tipo de organismos se encuentra generalmente en formas libres o
como parásitos del hombre y demás los animales.
Como ejemplo podemos mencionar a, paramecium, amibas, y vorticelas.
Elabora un cuadro comparativo de sarcodinos, ciliados, suctorios y esporozoarios, características

distintivas, hábitat e importancia biotecnológica.
2. OBJETIVO
Identificar las características morfológicas, estructurales de diferentes organismos pertenecientes al

Reino Protoctista.
3. EQUIPO, REACTIVOS Y MATERIAL POR EQUIPO
Tabla 1. Material requerido para la práctica de “Observación de algas y protozoarios”

Cantidad Cantidad
(pza) (pza)
1 Microscopio óptico 1 5 Cubreobjetos 10

2 Microscopio estereoscópico 1 6 Pipetas Pasteur 2
3 Cajas de Petri 3 7 Muestras de agua estancada Varias
4 Portaobjetos 10
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4. PROCEDIMIENTO
Para poder hacer esta práctica se debe tomar agua estancada, esta debe ser de preferencia
estancada con vegetación y además tener un mínimo tres días
4.1. Con una pipeta Pasteur verter en una mitad de caja de Petri una muestra de agua estancada,
tomada si es posible de tres niveles de profundidad diferentes del cuerpo de agua que se
escoja: Superficial, medio y fondo, procurando no remover mucho el fondo. Observar al
microscopio estereoscópico y esquematizar a color las observaciones, indicando el nivel al que
se tomó la muestra.
4.2. Hacer una preparación temporal con las muestras de agua estancada de los tres niveles
mencionados anteriormente y observarlas al microscopio óptico, identificando los organismos
que encontrados, con la ayuda de los anexos proporcionados y la asesoría del docente.
4.3. Tomar fotografías y/o esquematizar a color las observaciones efectuadas, indicando el nivel en
que se tomó la muestra.
4.4. Realiza lo indicado en los puntos 4.1. al 4.3. con muestras del cultivo de algas y otra de
protozoarios.
5. OBSERVACIONES Y RESULTADOS
Esquematizar las observaciones efectuadas, señalando y describiendo los diferentes tipos de organismos
que se encuentren, indicando el nombre científico o el grupo (Género, Familia, Orden, Clase, etc.) de cada
ejemplar.
Elabora un cuadro comparativo de los ejemplares observados, indicando las características que presentan
y las diferencias existentes entre cada uno de ellos, para poder realizar el análisis.
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7. CONCLUSIONES
Elabora las conclusiones con base en los objetivos establecidos, las observaciones realizadas y el análisis
efectuado.
8. BIBLIOGRAFÍA
8.1. BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA, NO EXCLUSIVA
Alonso Tejeda ME. 2003. Biología: un enfoque integrador. McGraw Hill Interamericana. México. 279 pp.
Audesirk T. 2003. Biología. La vida en la Tierra. Pearson Education. México. 790 pp.
Lodish H. 2002. Biología celular y molecular. Médica Panamericana. España. 1053 pp.
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Apéndice
Ascomicetes
Basidiomicetes
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Basidiomicetes
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Tipos de hongos encontrados en alimentos
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Tipos de hifas
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Algas encontradas en suministros de agua
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Algas de agua limpia
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Práctica 4. Observación de células y tejidos vegetales.
No Uso / Especificación /
Solución Procedimiento
. Observación
1. Lugol Añadir 1 g de yodo, 2 g de yoduro de potasio a 25 mL de Esp. Modificación del

(Yodo de Agua Destilada. Cuando se ha disuelto completamente, método de Gram para las
Lugol) aforar a 100 mL con Agua Destilada. bacterias
2. Azul de 1 g de azul de metileno en 100 mL de Agua Destilada, añadir Uso. Tinción para
Metileno 0.5 g de cloruro de sodio. organismos vivos
Solución de 0.3 g de azul de metileno disuelto en 30 mL de Uso. Adecuado para

etanol al 95% al que se le añadió 100 mL de Agua Destilada. bacterias y tejidos
delicados. Para material
muerto
3. Colorante 0.5 g de escarlata R, 100 mL de etanol al 70%. Disolver en Esp. Escarlata R

Sudán III caliente a baño maría y filtrar. (alcohólica). Tinción de
grasa
Práctica 5. Transporte a través de membrana.
. Observación
1. Solución salina Para obtener 100 mL de solución, en 50 mL de Agua Uso. Para gradiente
(NaCl) al Destilada, disolver 0.85 g de cloruro de sodio y aforar a 100 osmótico
0.85% mL.
(NaCl) al 2% Destilada, disolver 2 g de cloruro de sodio y aforar a 100mL osmótico
con agua destilada.
(NaCl) al 10% Destilada, disolver 10 gramos de cloruro de sodio y aforar a osmótico
100 mL con agua destilada.
4. Nitrato de
plata
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Práctica 6. Fermentación.
. Observación
1. Solución de Se pesan 60 g de sacarosa y se disuelven en 40 ml de Agua

sacarosa al Destilada.
60%
Práctica 7. Fotosíntesis: Aislamiento de cloroplastos y reacción de Hill.

. Observación
1. Sacarosa 0.5 Para obtener 100 mL de solución, se pesan 17.11 g de

M sacarosa, se disuelve y afora a 100 mL con Agua Destilada.
2. Amortiguadora Para obtener aproximadamente 800 mL de Solución

de fosfatos Amortiguadora a pH 6.5, se prepara la Solución Básica (SB
0.1M, pH 6.5 0.1M), para lo cual se pesan 7.02 g de fosfato de potasio
dibásico (K2HPO4) y se diluyen en 400 mL de Agua Destilada.
Por otro lado se prepara la Solución Ácida (SA 0.1M), se
pesan 5.44 g de fosfato de potasio monobásico (KH2PO4) y se
disuelven en 400 mL de Agua Destilada. Se mide el pH a la
SB y se le adiciona paulatinamente la SA hasta llegar a pH
6.5.
3. Cloruro de Para preparar 1,000 mL, se pesan 2.04 g de NaCl, se

sodio (NaCl), disuelve y afora a 1,000 mL con Agua Destilada.
0.035 M
4. 2,6-di-cloro- Para preparar 100 mL de solución, se pesan 0.64 g de

fenol- DCPIP y se diluyen en Agua Destilada, aforar a 100 mL.
indofenol
(DCPIP),
22mM
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Práctica 9. Mitosis.
. Observación
1. Orceína Poner 1 g de orceína y 45 mL de ácido acético glacial en un Uso. Tinción de

acética recipiente, añadir 55 mL de Agua Destilada.tapar con lana de cromosomas vegetales.
algodón o vidrio de reloj y calentar hasta ebullición por 5
minutos, dejar enfriar y filtrar.
2. HCl 1N Se miden 3.6 mL de HCl, aforar a 100mL.

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE

M. en C. María de Lourdes Sánchez García

La práctica 10 conduce al alumno a la identificación y comparación de estructuras reproductoras de un

Práctica 11. Observación de Algas y Protozoarios……….…………………………..………………… 44

2) Cada equipo deberá traer:

3) De igual forma deberán traer por grupo:

Trabajo en el laboratorio 4.0 puntos

9) Para la evaluación del trabajo en el laboratorio, se considerarán los siguientes aspectos:

Participación y desempeño de las actividades 3.0 puntos

Bitácora completa y actualizada 1.0 puntos

Objetivos y bibliografía 0.5 puntos

13) El laboratorio representará el 30 % de la calificación global de la asignatura.

Enumera y explica los pasos del método científico experimental____________________________

Da un ejemplo utilizando los pasos anteriores

A fin de cuentas, la metodología de la investigación científica, así como la presentación de un trabajo

La hipótesis tiene como funciones: La generalización de experiencias; el desencadenamiento de inferencias;

3. MATERIAL POR EQUIPO

Se establecen con base en los objetivos, hipótesis planteadas y resultados obtenidos.

8.1. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA (TRES CITAS BIBLIOGRÁFICAS)

Describe la iluminación Köhler, así como los pasos para realizarla:

1.1. Cálculo de aumentos o amplificación

Aumento Total = (Aumento del Objetivo) X (Aumento del Ocular)

Ejemplo: (10X) * (10X) = 100X

1.2. Microscopio Estereoscópico

Partes del Microscopio Estereoscópico: Consta de un sistema mecánico y un sistema óptico.

Describe las partes y función de cada uno de los sistemas.

3. MATERIAL POR EQUIPO

Tabla 2. Material requerido para la práctica de “Microscopía”

Siempre atienda las indicaciones del (la) docente.

Para trabajar con el microscopio estereoscópico realiza lo siguiente:

4.8. Identificar las partes del microscopio estereoscópico.

i. Ajustar los oculares a la distancia que hay entre sus ojos.

6.5. Defina los siguientes términos:

8.1. BIBLIOGRAFÍA SUGERIDA, NO EXCLUSIVA

8.2. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

Realiza un cuadro comparativo entre los diferentes tipos de tejidos animales.

3. MATERIAL POR EQUIPO

Tabla 1. Material requerido para la práctica de “Observación de Células y Tejidos Animales”

GUIA PARA LA ELABORACION DEL ANALISIS DE RESULTADOS (NO CONTESTAR ESTE

7.1. BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA, NO EXCLUSIVA

Berkaloff Andre. 1980. Biología y fisiología celular. Editorial Omega. España.

7.2. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA

A continuación, elabora un cuadro comparativo de los tejidos vegetales

3. MATERIAL POR EQUIPO

Elabora el Diagrama de Bloques:

Tabla 2. Formato de referencia para reportar el resultado 5.1.

GUIA PARA LA ELABORACION DEL ANALISIS DE RESULTADOS (NO CONTESTAR ESTE

8.1. SUGERIDA, NO EXCLUSIVA

8.2. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

REALIZA EL ESQUEMA O DIBUJO DE LA MEMBRANA CELULAR

3. MATERIAL POR EQUIPO

Tabla 1. Material y reactivos requerido para la práctica de “Transporte a través de membrana”

4.1. Ósmosis en un tubo

4.2. Ósmosis en la Elodea sp

4.2.1. Hacer 4 (cuatro) preparaciones temporales de hojas de Elodea sp.

4.2.2. Observar una de ellas al microscopio y describir el tamaño celular y el comportamiento

4.3. Osmosis en Eritrocitos

5.1 Ósmosis en tubo

5.1.1 Completar la Tabla 2 con los valores obtenidos en el experimento de “Ósmosis en un

Tabla 2. Formato de referencia para reportar el resultado 5.1.

Tabla 3. Formato de referencia para reportar el resultado 5.1

Tipo de muestra Grado de turbidez al