Quinases dependentes de ciclina

Resumo

Quinases dependentes de ciclina (CDKs) são proteínas quinases caracterizada pela necessidade
de uma subunidade separada - ciclina - que fornece domínios essenciais para enzimas
atividade. CDKs desempenham papéis importantes no controle de células divisão e modular a
transcrição em resposta a várias sugestões extra e intracelulares. O evolucionário expansão da
família CDK em mamíferos levou à divisão de CDKs em três ciclos relacionados ao ciclo celular.

Subfamílias (Cdk1 Cdk4 e Cdk5) e cinco subfamílias transcricionais (Cdk7 Cdk8 Cdk9 Cdk11 e
Cdk20). Ao contrário da prototípica Cdc28 quinase de levedura a maioria desses CDKs liga um
ou poucas ciclinas consistente com a especialização funcional durante a evolução. Esta revisão
resume como embora CDKs são tradicionalmente separados em CDKs transcricionais ou de
ciclo celular essas atividades são frequentemente combinados em muitos membros da família.
Não surpreendentemente a desregulação desta família de proteínas é uma característica de
várias doenças incluindo câncer e inibição dirigida a drogas de membros específicos tem gerou
resultados muito encorajadores em ensaios clínicos.

Organização genética e história evolutiva

Quinases dependentes de ciclina (CDKs) são serina / treonina quinases cuja atividade depende
de uma subunidade reguladora - uma ciclina. Com base na sequência do domínio da quinase

CDKs pertencem ao grupo CMGC de quinases (nomeado para iniciais de alguns membros)
juntamente com proteínas quinases mitogenactivadas (MAPKs) glicogênio sintase quinase-3
beta (Gsk3β) membros da especificidade dupla família de quinase regulada por tirosina (DYRK)
e semelhante a CDK quinases 1. Em quinases relacionadas como MAPKs substrato a
especificidade é conferida pelos locais de ancoragem separados o local catalico enquanto que
as CDK s caracterizadas pela dependecia de subunidades de protea separadas que
proporcionam sequcias adicionais requeridas para a actividade enzimica. Ajudar nomenclatura
e análise de CDKs proteínas pertencentes para esta família foram recentemente renomeados
como Cdk1 através de Cdk20 2.

CDKs foram descobertos pela primeira vez por genética e bioquímica estudos em organismos
modelo como leveduras e rãs (revisto em 3). Este trabalho estabeleceu a importância de CDKs
na promoção de transições através do ciclo celular.

Além disso esses estudos mostraram que a subunidade catalítica o CDK deve se associar a uma
subunidade reguladora a ciclina cujos níveis de proteína estão sujeitos à regulação durante o
ciclo celular (essa oscilação emprestou esses reguladores seu nome de ciclina). Desde esses
estudos pioneiros realizados na década de 1980 a importância dos CDKs principal família de
proteínas quinases eucarióticas envolvidas na integração de sinais extracelulares e
intracelulares a modular a transcrição do gene e divisão celular tem sido claramente
estabelecido 3-6.
Apesar de sua função na divisão celular eucariótica e transcrição CDKs passaram por uma
extraordinária grau de divergência evolutiva e especialização. Seis CDKs diferentes estão
presentes na levedura de brotamento (Figura 1).

Esses CDKs podem ser agrupados como primeiro CDKs que ligam múltiplas ciclinas e pode
regular o ciclo celular e segundo CDKs que são ativados por uma única ciclina e são envolvidos
na regulação da transcrição. Na levedura de florescimento Saccharomyces cerevisiae o
primeiro grupo contém Cdc28 e Pho85 cada um ligando nove ou dez ciclinas diferentes
respectivamente. Esta promiscuidade forma a base para a sua regulação dinâmica e sua
capacidade de fosforilam múltiplos substratos regulando assim o ciclo de divisão celular em
resposta a diferentes pistas celulares.

O segundo grupo compreende quatro CDKs - Kin28 Srb10 Bur1 e Ctk1 - cada um ativado por
uma única ciclina específica (Figura 1). Essas ciclinas geralmente não são reguladas depende
do ciclo celular e os membros deste segundo grupo de CDKs estão envolvidos no controle de
transcrição gênica.

O número de CDKs aumentou durante a evolução e foi marcada por uma maior expansão do
grupo célula-ciclada. Os
fungos contêm 6 a 8 CDKs
e 9 a 15 ciclinas enquanto
moscas e equinodermos
contêm 11 CDKs e 14
ciclinas e células humanas
têm 20 CDKs e 29 ciclinas
(Caixa 1) 7.

Figura 1 Comparação de CDKs de leveduras e mamíferos. As células da levedura

Saccharomyces cerevisiae contêm dois CDKs relacionados ao ciclo celular que são ativados por
múltiplas ciclinas - Cdc28 e Pho85. Cdk1 é o ortólogo mamífero de Cdc28 enquanto Cdk5 é
considerado o Pho85 ortholog. A subfamília Cdk4 / Cdk6 não está presente na levedura. Kin28
Srb10 Bur1 e Ctk1 são os ortólogos de levedura de Cdk7 Cdk8 Cdk9 e Cdk12 respectivamente.
As subfamílias Cdk20 e Cdk11 / Cdk10 não estão representadas em levedura. Também
indicado é o parceiro de ciclina para o mamífero CDKs. CDK quinase dependente de ciclina.

Estudos evolutivos sugerem que os CDKs caem em oito subfamílias representadas por Cdk1
Cdk4 e Cdk5 (da levedura relacionada ao ciclo celular CDKs) e Cdk7 Cdk8 Cdk9 Cdk11 e Cdk20
(funcionando como CDKs transcricionais) 78 (Figura 2). Como se fosse ortólogo de levedura
Cdk1 é o único CDK essencial para ociclo celular em mamíferos 9 enquanto tanto Cdk2 como
Cdk3 são dispensáveis 310. Embora Pho85 não seja essencial em levedura esta quinase é
necessária para a viabilidade em alguns condições de estresse como o crescimento após a
inanição. Pho85 exibe várias funções relacionadas ao ciclo celular bem como regulação da
expressão gênica metabolismo morfogênese polaridade celular e envelhecimento; funciona
como um integrador de sinais como disponibilidade de nutrientes danos no outros tipos de
estresse 11. Sequenciamento e funcional estudos sugerem que o homólogo mamífero de
Pho85 é Cdk5 embora estas quinases se agrupem com múltiplos quinases de mamíferos da
subfamília Cdk5 nomeadamente Cdk14 para Cdk18. Pho85 pode interagir com até 10 ciclinas
dos grupos Pcl1 / Pcl2 ou Pho80 enquanto que a Cdk5 de mamero activada por proteas n
ciclinas incluindo Cdk5R1 (p35) e Cdk5R2 (p39). Curiosamente outros membros da subfamília
Cdk5 como Cdk14 ou Cdk16 são ativados pela ciclina Y que é uma ciclina de perto relacionado
a proteínas Pcl1 / Pcl2 de levedura 1213. The Cdk4 subfamília é única pois só é encontrada em
eumetazoans e os membros desta família divergem igualmente da Subfamílias Cdk1 ou Cdk5
(Figuras 1 e 2) 7. De outros subfamílias relacionadas ao ciclo celular tais como as subfamílias
relacionadas ao Cdk1As CDKs do tipo B são específicas de plantas e não são encontradas em
animais ou fungos 14.

As CDKs transcricionais são mais conservadas tanto em seqüência quanto em função (Figura
1). Fermento Kin28 e humano Cdk7 são subunidades do fator de transcrição TFIIH que está
envolvido na iniciação da transcrição por fosforilação o resuo Ser5 do domio Cterminal da RNA
polimerase II (RNAPII) (CTD) nos promotores do gene. Cdk7 também é capaz de fosforilar e
ativar outras CDKs agindo assim como uma quinase ativadora de CDK (CAK; Box 2). Kin28 faz

não tem essa atividade que é mediada em levedura por um quinase diferente não relacionada
a CDKs Cak1 8. O fermento proteína Srb10 é ortóloga para Cdk8 e Cdk19 humanos e é o
componente enzimático do mediador

Caixa 1. A família das ciclinas

As ciclinas são uma grande família de aproximadamente 30 proteínas que variam

massa de 35 a 90 kDa. Estas proteínas são definidas estruturalmente

pela presença da chamada caixa de ciclina um domínio de aproximadamente 100 resíduos de

aminoácidos que forma uma pilha de cinco

α-hélices. Muitas ciclinas têm duas caixas de ciclina uma caixa aminoterminal para ligação a
CDKs e uma caixa de terminal carboxi

que é normalmente necessário para o dobramento adequado da molécula de ciclina. A caixa

de ciclina também está presente em outras moléculas como

a proteína do retinoblastoma (Rb) o fator de transcrição TFIIB

e Cabos (substrato 1 da enzima CDK5 e ABL1) que provavelmente não funcionarão como
ativadores de CDK. Em geral as ciclinas mostram menos

similaridade de seqüência que os CDKs. A família das ciclinas contém aproximadamente 29

proteínas em humanos agrupadas em 16 subfamílias

e três grupos principais grupo I (grupo ciclina B A- B- D- E- F-

G J I e O); grupo II (grupo ciclina Y - parceiro do Cdk5

subfamília); e grupo III (grupo ciclina C C- H- K- L- e T- -

principais parceiros das CDKs transcricionais) 766. Ciclina D e ciclina

E clades (parceiros das subfamílias Cdk1 e Cdk4) sofreram expansão e especialização de
linhagem específica em metazoa

e plantas 7.

Figura 2 Relações evolutivas entre as subfamílias de CDK de mamíferos. O nome das

diferentes subfamílias CDK funcionando no

ciclo celular (laranja) ou transcrição (verde) é mostrado em negrito e a estrutura do domínio

das proteínas individuais é representada. O conservado

o domínio proteína quinase (vermelho) e alguns domínios adicionais (ver chave) são indicados
para cada CDK. Células humanas contêm dois genes separados Cdk11A

e Cdk11B cada um deles codificando uma longa isoforma Cdk11p110 e uma prote�a mais
curta Cdk11p58 gerada por um s�io interno de liga�o ao ribossoma.

A árvore filogenética é baseada na comparação dos domínios da cinase humana 1. CDK

quinase dependente de ciclina.

complexo envolvido na regulação da RNAPII durante

transcrição 15. Cdk9 é o ortólogo de levedura Bur1

enquanto a função da levedura Ctk1 na fosforilação do RNAPII CTD é realizada por Cdk12 em

Drosophila e em células humanas 16. O evolucionário

relação das subfamílias Cdk11 e Cdk20 com as

levedura CDKs não é clara embora estas proteínas estejam bem

conservado 7. Ao contrário das ciclinas para quinases relacionadas ao ciclo celular as

subunidades da ciclina das CDKs transcricionais

não mostram oscilações significativas nos níveis de proteína durante

o ciclo celular e estas CDKs transcricionais são portanto reguladas por interações proteína-
proteína ou outras

mecanismos. Quinases relacionadas à transcrição possivelmente se originaram após CDKs

relacionados ao ciclo celular e

diversa à medida que aumenta a complexidade da transcrição 17.

Características estruturais característicos

Como outras quinases CMGC CDKs são dirigidas por prolina

serina / treonina-proteína quinases com alguma preferência

para a sequência S / T-P-X-K / R como consequência da

presença de uma bolsa hidrofóbica perto do local catalítico

que acomoda a prolina (posição 1). Contudo

o requisito para o resíduo básico na posição 3

não é mantido em Cdk4 ou CDKs transcricionais

que exibem um consenso S / T-P-X menos rigoroso. Alguns

outros membros da família como Cdk7 ou Cdk9 não são necessariamente dirigidos por prolina
e também podem fosforilar

resíduos na ausência da 1 prolina 18.

Caixa 2. O complexo cinase de ativação de CDK

O complexo CAK (compreendendo Cdk7 ciclina H e Mat1)

fosforila o loop-T de todas as CDKs testadas participando

em sua ativação. Além disso este complexo pode fazer parte do

fator de transcrição fosforilando o CTD de RNAPII também

como múltiplos receptores nucleares tais como ácido retinóico ou receptores da tiróide o
receptor estrogénico α ou o coativador do receptor da vitamina D Ets1 33. O complexo CAK
também pode ser encontrado associado a uma subunidade adicional de TFIIH - o dependente
de DNA

helicase Xpd - formando um complexo conhecido como CAK-XPD. Este complexo desempenha
um papel na coordenação e progressão da mitose

provavelmente como conseqüência da redistribuição de CAK dentro de diferentes

compartimentos celulares durante os últimos passos da divisão nuclear

67.

As CDKs variam em tamanho de aproximadamente 250 aminoácidos

resíduos ácidos englobando apenas a serina catalítica /

domínio cinase de treonina para proteínas de mais de 1.500

resíduos com extensões nos terminais amino e / ou carboxi de comprimentos variáveis (Figura
2). Como todas as quinases

CDKs tem uma estrutura de dois lobos. O terminal amino

lóbulo contém folhas beta enquanto o terminal carboxi

o lóbulo é rico em α-hélices e o sítio ativo é imprensado

entre. O lóbulo N contém um inibidor rico em glicina

elemento (G-loop) e uma única hélice principal - a C-hélice

(contendo a seqüência PSTAIRE no Cdk1). O lobo C

contém o segmento de ativação que se estende do

Motivo DFG (D145 em Cdk2; EMBL AK291941) para o APE

motivo (E172 em Cdk2) e inclui o resíduo sensível à fosforilação (T160 em Cdk2) no chamado T-
loop

(Figura 3). Na forma monomérica livre de ciclina o CDK

A fenda catalítica é fechada pela alça T impedindo a atividade enzimática. Além disso o
segmento de ativação no Clobe - uma plataforma para ligação do fosfo-receptor

Região Ser / Thr de substratos - é parcialmente desordenada.

Ativação da cinase dependente de ciclina

Após ligação da ciclina a Cdk2 os pacotes CDK-helix C

contra uma hélice específica no parceiro da ciclina através de uma superfície caracterizada por
extensas interações hidrofóbicas.

A associação de ciclinas à hélice-C promove rotação em

o eixo desse segmento gerando novas interações que

fazem parte do site ativo de ligação de ATP. Além disso ciclinas

tirar o segmento de ativação do lóbulo C do local catalítico

para que a treonina se torne acessível para ativar

fosforilação por CAK (Figura 3). Esta fosfotreonina atua como um hub de rigidificação
estabilizando o

forma do heterodímero de quinase 1819. A extensão do

Interface CDK-ciclina varia na estrutura do Cdk4 Cdk9

ou levedura Pho85 182021. Por exemplo Cdk2 e ciclina A

contato entre si nos lóbulos N e C enquanto o

os contatos entre Cdk4 e ciclina D são limitados ao Nlobe e ao contrário do Cdk2 a ciclina não
impõe um ativo

conformação na quinase como o sítio de ligação do ATP Cdk4 é

ainda inacessível aos seus substratos mesmo na presença do

ciclina 2021. Como o Cdk4 se torna ativo não é completamente

claro embora se pense que a ligação do substrato induza o segmento de ativação a se abrir e
se adaptar ao

local de fosfo-aceptor. Alguns CDKs como o Cdk5 ou seus

o ortólogo de levedura Pho85 não requer fosforilação no

segmento de ativação para atividade e esses quinase podem adotar

a conformação correta através de outras interações 18.

Além do domínio de consenso quinase alguns

Os CDKs contêm domínios adicionais com relevância funcional.

Cdk16 Cdk17 e Cdk18 (contendo uma seqüência PCTAIRE

na hélice-C) são caracterizados por um domínio catalítico conservado flanqueado por

extensões do terminal amino e carboxilo envolvidas na ligação da ciclina. Fosforilação da
Cdk16

domínio amino-terminal bloqueia a ligação à ciclina Y fornecendo um novo mecanismo para a

regulação destes complexos

22 Em Cdk12 e Cdk13 (caracterizado por um PITAIRE

motif) o domínio quinase está localizado no centro e motivos ricos em Arg / Ser adicionais no
terminal amino servem como

locais de encaixe para a montagem de fatores de emenda e reguladores de splicing (Figura 2).
Estas duas quinases também contêm
Figura 3 Uma visão tridimensional da estrutura e ativação do CDK. Na Cdk2 monomérica
(esquerda; PDB 1HCL) a principal hélice-C (N-lóbio) e

o domínio de ativação está próximo assegurando que a bolsa catalítica esteja inacessível. Após
a ligação da ciclina A (direita PDB 1JST) a hélice-C e

o domínio de ativação é separado - uma configuração que é ainda fixada pela fosforilação do
resíduo T160 tornando a bolsa catalítica acessível para atividade enzimática. A posição dos
resíduos inibitórios Thr14 (T14) e Tyr15 (Y15) na alça G também é mostrada. Código de cores
CDK

subunidade laranja; subunidade da ciclina verde; púrpura indica domínios específicos de

proteína nomeados. CDK quinase dependente de ciclina.

motivos ricos em prolina concentrados principalmente em sua região carboxiterminal que

servem como locais de ligação para homologia com Src

3 (SH3) WW ou prote�as contendo dom�ios de profilina 16.

Inibição da cinase dependente de ciclina

A região rica em glicina (G-loop) no lóbulo N é um

região reguladora adicional pois contém resíduos (Thr14

e Tyr15 em Cdk2; Figura 3) cuja fosforila�o inibe a actividade da cinase. Fosforilação de

Thr14 e / ou

Os resíduos de Tyr15 das cinases Wee1 e Myt1 inibem vários

membros da família impedindo a progressão do ciclo celular

por exemplo em resposta a danos no DNA. Eliminação de

estes fosfatos por fosfatases da família Cdc25

é então necessário para ativação de CDKs e ciclo celular

progressão 323. Fosforilação Inibitória em Thr14

e Tyr15 não resulta em grandes mudanças no CDK

estrutura mas inibe a atividade de CDK reduzindo

a afinidade do CDK por seus substratos. No entanto a fosforilação em Tyr15 parece estar
ativando no caso de

Cdk5 talvez melhorando o reconhecimento do substrato 18.

Esses resíduos não estão presentes no Cdk7 de acordo com

a crença geral de que esta quinase é constitutivamente ativa

e regulamentado em diferentes níveis.

CDKs relacionados ao ciclo celular também podem ser regulados negativamente

ligando-se a pequenas proteínas das famílias de inibidores INK4 ou Cip / Kip 1924. Proteínas
INK4 (p16INK4a

p15INK4b p18INK4c e p19INK4d) são específicos para o Cdk4

subfamília e interagir com as CDKs monoméricas. Eles

função distorcendo a interface da ciclina ea bolsa de ligação de ATP impedindo assim a

ativação de Cdk4 e

Cdk6 por ciclinas do tipo D ou por CAK 24. Membros de

Família Cip / Kip de inibidores (p21Cip1 p27Kip1 e p57Kip2)

entre em contato com ambas as subunidades CDK e cyclin e são capazes de

inibir os heterodímeros da ciclina CDK dando níveis adicionais de

regulação uma vez que esses complexos já se formaram 19.

Localização e função

Subfamílias Cdk1 e Cdk4

O quadro geral nas células de mamíferos é que Cdk4

e Cdk6 por indução transcricional do tipo D

ciclinas em resposta a vários estímulos mitogênicos promovem

entrada no ciclo celular (Figura 4) 25. Estas quinases

Figura 4 Uma visão geral das funções do CDK na célula. Cada CDK (em caixas laranja) é
mostrado em um complexo com seu parceiro principal (verde) - para maior clareza apenas
alguns substratos são representados. A maioria das CDKs funciona no núcleo (fundo laranja)
enquanto alguns membros da família estão ligados a

a membrana celular ou exibir atividades citoplasmáticas (fundo azul). Ciclo celular clássico
CDKs - Cdk4 Cdk6 Cdk2 e Cdk1 - regulam as transições através das diferentes fases do ciclo de
divisão celular. Estas atividades são pelo menos parcialmente mediadas pelo controle da
transcrição múltipla

fatores (TFs) ou elementos reguladores como a proteína retinoblastoma (Rb). Cdk10 e Cdk11
também controlam a transcrição por fosforilação de TFs

receptores hormonais e reguladores associados (HRs) ou fatores de splicing (SPFs). Cdk7 Cdk9
e Cdk12 fosforilam diretamente o domínio C-terminal

(CTD) da RNA polimerase II (RNAPII) modulando assim as diferentes fases de geração de

transcritos. O complexo Mediador é especificamente regulado pelo Cdk8 ou pelo altamente
relacionado Cdk19. Cdk7 funciona como uma cinase de activação de CDK (CAK) por
fosforilação directa de várias das CDKs acima mencionadas. Cdk5 exibe muitas funções na
célula mas é mais conhecida por sua função no controle de proteínas específicas de neurônios
como

Tau Os membros da subfamília Cdk14 como o próprio Cdk14 ou Cdk16 são ativados na
membrana pela ciclina Y e também participam de muitas

vias diferentes tais como sinalização dependente de Wnt ou transdução de sinal no cílio
primário. É importante notar que para maior clareza muitas interações entre CDKs e outros
parceiros substratos ou processos celulares não são mostradas - por exemplo o Cdk1 pode se
ligar a outras ciclinas e pode

também fosforila mais de 100 substratos durante a entrada mitótica que não são indicados
aqui. CAK cinase de activa�o de CDK; CDK dependente de ciclina

quinase; CTD domio C-terminal; Rb proteína de retinoblastoma; RNAPII RNA polimerase II;
FPS fator de emenda; TF fator de transcrição.
fosforilam e inativam a proteína do retinoblastoma

(Rb) uma proteína adaptadora que reúne diferentes proteínas

e complexos proteína-DNA que reprimem a transcrição

em resposta a uma ampla gama de mecanismos de controle 25.

Em células humanas o Rb contém 13 locais conservados que são

fosforilada por CDKs em células em proliferação. Complexos entre os resíduos de fosforilato

de ciclina D e Cdk4 ou Cdk6 Ser807 e Ser811 iniciando Rb para

fosforilação por estes ou outros CDKs em outros locais

26 Inativação dependente de CDK de Rb (ou seus parentes

p107 e p130) resulta na desrepressão de múltiplos

genes que codificam proteínas necessárias para a síntese de DNA (S

fase) ou mitose 25. A atividade do Cdk2 também pode

contribuir para este processo embora esta quinase possa

tem funções adicionais na replicação de DNA ou DNA

reparar. Uma vez que as células tenham duplicado seu DNA a Cdk1 é ativada pelas ciclinas tipo
A e B promovendo

processos celulares como maturação centrossoma e

separação condensação cromossômica e entrada mitótica

após a desagregação do envelope nuclear 3. Isso simplificou

a visão é obscurecida devido a múltiplas interações não-consensuais entre CDKs e ciclinas e

papéis 6. Por exemplo quando Cdk4 e Cdk6 estão ausentes

Cdk2 pode ligar-se a ciclinas do tipo D 27. Cdk1 também pode

ligam-se à ciclina E ou ciclina D na ausência de Cdk2 ou

Cdk4 respectivamente 9 sugerindo um cenário reminiscente

do ciclo celular de levedura no qual o Cdc28 é suficiente para induzir todas as transições do
ciclo celular interagindo com diferentes ciclinas 6

Subfamília Cdk5 e quinases relacionadas à ciclina-Y

Apesar de sua semelhança com outros Cdks relacionados ao ciclo celular Cdk5

é o protótipo do que são chamados de CDKs atípicos. este

quinase é ativada pelas proteínas não-ciclina Cdk5R1 (p35)

ou Cdk5R2 (p39) e fosforilação na alça T não é

necessário para sua ativação 2829. Embora o Cdk5 seja

expressa em vários tipos de células acredita-se que sua atividade

mais restrito devido à expressão de seus ativadores

p35 e p39 em células diferenciadas terminalmente como neurônios 28. Entretanto além de
suas funções cruciais em

biologia neuronal Cdk5 desempenha vários papéis na expressão gênica diferenciação

angiogênese e senescência entre

outros 52829.

Curiosamente os ativadores de Cdk5 carregam um motivo de miristoilação aminoterinal que é

necessário para sua

segmentação por membrana (Figura 4). Até recentemente o Cdk5 era

pensado para ser o único Cdk associado à membrana mas dados recentes sugerem que os
CDKs Cdk14 para Cdk18

(PFTAIRE e PCTAIRE quinases) exibem atividades similares ao ligar a ciclina Y. Como o Cdk5 o
Cdk16 requer

nenhuma fosforilação da alça T sugerindo que a ciclina Y como

p35 interage fortemente com o loop de ativação aliviando

a necessidade de uma fosforilação ativadora 13. Ciclina Y

também é N-myristoylated e recrutamento dependente de ciclina-Y

e ativação de Cdk14 nos resultados da membrana plasmática

na fosforilação do co-receptor Wnt Lrp5 / Lrp6

(Figura 4). Cdk16 também se liga à ciclina Y e esses complexos fosforilam várias proteínas
incluindo o fator sensível à Nethylmaleimide (NSF) para o controle de

exocitose 30 e são essenciais para a espermatogênese 22.

Os parceiros CDKs da ciclina Y exibem funções sobrepostas

como knockdown de CDKs individuais em embriões de Xenopus

não produziu um fenótipo enquanto que a depleção de ciclina Y e o seu semelhante homólogo
de ciclina-Y resultou num fenótipo de perda de função Wnt 31. Em

Além da relevância da via Wnt no

controle da transcrição β-catenina e outros reguladores Wnt localizam-se em centrosômicos e

/ ou cinetocoros e

regular a formação e orientação da mitótica

fuso e o processo de segregação cromossômica

31 De fato a ciclina Y atinge níveis máximos em G2-M

fase do ciclo celular e é degradada de maneira ubiqueta independente similarmente às ciclinas

mitóticas sugerindo um papel crucial para a via ciclina-Y-Wnt

divisão celular 12. É interessante notar que CDKs e

ciclinas desta subfamília como Cdk17 ou ciclina Y são

altamente conservado em níveis semelhantes a Cdk1 ou ciclina B

13 Na maioria dos casos a relevância celular de muitos

Os membros da subfamília Cdk5 continuam a ser estabelecido

Controle da RNA polimerase II por transcrição

quinases dependentes de ciclina

Uma das atividades mais importantes das CDKs é a fosforilação reversível da CTD da maior
subunidade

(Rpb1) de RNAPII (Figura 4). A CTD consiste em repetições múltiplas de um heptapeptídeo

evolutivamente conservado

possuindo a sequência de consenso Tyr-Ser-Pro-Thr-SerPro-Ser com o número de repetições

variando entre os diferentes organismos variando de 26 repetições em levedura a 52

em mamíferos. O CTD é alvo de múltiplas modificações pós-traducionais incluindo a

fosforilação

gerando um código regulatório complexo conhecido como

Código CTD. O CTD regula a ciclagem de RNAPII

entre uma forma hipofosforilada capaz de entrar no

complexo de pré-iniciação e uma forma hiperfosforilada

capaz de alongamento processivo do transcrito 32.

Múltiplos CDKs podem fosforilar o CTD incluindo

quinases relacionadas com o ciclo celular Cdk1 ou Cdk2 e a maioria das CDKs transcricionais
das subfam�ias Cdk7 Cdk8 e Cdk9 (Figura 4). Cdk7 é um membro das dez subunidades

fator de transcrição geral TFIIHb que fosforila

Ser5 e Ser7 do heptad durante o início e depuração do promotor 3334. Cdk7 também fosforila
e

ativa Cdk9 promovendo assim eventos a jusante 34.

Para liberar o RNAPII em pausa e permitir

alongamento Ser2 do heptado é então fosforilado um

processo em que ambos Cdk9 e Cdk12 foram implicados. Cdk9 liga-se a ciclinas do tipo T (T1 e
T2) como subunidade do fator de alongamento da transcrição positiva

(P-TEFb) que estimula o alongamento. Cdk9 é o ortólogo

de Bur1 que contribui para a fosforilação do Ser2

marca nas extremidades 5 of dos genes 1635. Embora Cdk9 fosse

pensado para ser o principal Ser2 quinase necessária para eficiente

alongamento dados recentes sugerem que este requisito é

mediado por um segundo substrato de Cdk9 o alongamento

subunidade do fator Spt5 cuja fosforilação dependente de Cdk9 alivia a etapa de pausa
precoce 35. Estudos recentes em

Drosophila e células humanas sugerem que Cdk12 em complexo com ciclina K é o ortólogo de
levedura Ctk1 responsável

para a maior parte da fosforilação de Ser2 no CTD e

especialmente a fosforilação nas regiões promotoras-distais

3637. Depleção de Cdk12 resultou em Ser2 com defeito

fosforilação em um subconjunto de genes - na maioria

os complexos - mas não uma mudança na taxa global

transcrição. Cdk12 é especificamente necessário para o

transcrição de genes envolvidos na resposta ao DNA

danos estabelecendo uma nova ligação entre a maquinaria transcricional e a regulação do ciclo
celular 37. Cdk1

também pode fosforilar o CTD e esta atividade é

pensado para inibir a transcrição embora sua relevância fisiológica não tenha sido
estabelecida. Transcrição

terminação resulta em desfosforilação de RNAPII

tornando-o pronto para outra rodada de re-iniciação. Embora o controle da desfosforilação

não seja bem

entendido várias fosfatases neutralizadoras de CDK

Cdc14 provavelmente estão envolvidos 3839.

Cdk8 e seu membro da família intimamente relacionado Cdk19 associam-se a ciclinas do tipo C
como parte da subunidade múltipla

Complexo mediador (Figura 4) 15. Este complexo funciona como uma ponte ligando
ativadores específicos de genes ao
maquinaria geral de transcrição de RNAPII no promotor influenciando assim quase todas as
fases da transcrição

e coordenar esses eventos com mudanças na organização da cromatina. Cdk8 (ou Cdk19)
juntamente com a ciclina C

Med12 e Med13 formam o chamado módulo Cdk8

característica da forma livre de mediador desprovida de

RNAPII O módulo Cdk8 responde a várias vias de sinalização intracelular e é comumente

associado à repressão da transcrição embora possa

também ative a transcrição 15. Cdk8 tem múltiplos alvos e fosforila vários fatores de
transcrição

afetando sua estabilidade e atividade. Evidência recente

sugere vários papéis na ativação do gene na rede p53 na via Wnt-β-catenina na resposta sérica

rede e outras vias governadas por Smads ou pelo

receptor do hormônio tireoidiano 40. Cdk8 também modula

Atividade de Cdk7 pela fosforilação da ciclina H impedindo assim a atividade de Cdk7 e

inibindo o início da transcrição 33. Finalmente o Cdk19 associa-se a

Complexos mediadores embora esses complexos sejam

probabilidade de possuir uma especificidade que ainda está por ser estabelecida 41.

Subfamílias Cdk11 e Cdk20

Cdk11 proteínas são os produtos de dois altamente relacionados

genes em mamíferos (CDK11A e CDK11B) codificando

Cdk11Ap110 e Cdk11Bp110 2 bem como dois menores

proteínas alternativas Cdk11Ap58 e Cdk11Bp58 resultando

da tradução de um local interno de ligação ao ribossoma

gerado durante a fase G2-M. Cdk11 liga-se ao tipo L

ciclinas e participa na coordenação entre

transcrição e processamento de RNA particularmente splicing alternativo 42. Em levedura em

flor Cdk11 tem sido

demonstrou ser um fator crucial para a interação do

Módulo Cdk8 com o complexo Mediador através da fosforilação de resíduos conservados da

Med27 e

Subunidades Med4 Mediador (Figura 4) 43. Cdk11 também participa de muitas outras vias
como sinalização de receptores hormonais ou autofagia 44-46. A isoforma curta
de Cdk11 Cdk11p58 é especificamente expresso em G2-M

e sua atividade quinase é necessária para a duplicação do

centríolos dinâmica do fuso e coesão da cromátide-irmã em centrómeros durante a mitose 47-

49. Falta de Cdk11

resulta em defeitos mitóticos em embriões de camundongos destacando

o papel crucial desta cinase "transcricional" na célula

ciclo 3.

Cdk10 é ativado pela ciclina M uma ciclina mutada em

Síndrome de STAR uma anomalia do desenvolvimento caracterizada por sindactilia do dedo do

pé telecanto e anogenital e

malformações renais 50. A Cdk10-ciclina-M fosforila o Ets2 promovendo sua degradação pelo
proteassoma

50 Mutações associadas ao STAR no gene que codifica

A ciclina M prejudica a ligação da ciclina M à Cdk10 resultando

no aumento da transcrição dependente de Ets2 de c-Raf e

hiperativação da via MAPK. No inseto

Helicoverpa armigera Cdk10 modula a transcrição gênica por hormônios esteróides

promovendo a interação

entre as proteínas de choque térmico e o receptor de ecdisona

EcRB1 51.

Finalmente o Cdk20 (também conhecido como quinase relacionada ao ciclo celular

(CCRK)) pode interagir com a ciclina H e originalmente

propôs ter atividade CAK para Cdk2 sugerindo uma

relação estreita com Cdk7. No entanto o seu papel como um CAK

é controversa 52 e dados adicionais sugerem que

funciona como uma quinase ativadora para quinase relacionada à MAK / quinase celular
intestinal (ICK) 53. Expressão de Cdk20

ativa a sinalização β-catenina-TCF para estimular o ciclo celular

progressão 54 enquanto que sua inibição resulta em acúmulo de ICK nas pontas ciliares e
impede a entrada de células 55 (Figura 4).

Fronteiras

É claro que a família CDK é fundamental para

vias múltiplas de sinalização controlando a transcrição

e progressão do ciclo celular. CDKs provavelmente se originou como um

sistema para modular a actividade promotora do ciclo celular em resposta a vários cenários
celulares. Ao longo de evolução tanto as famílias de genes CDK como de ciclina sofreram de
forma independente um número significativo de

especializações 7. Muitas das interações entre CDKs e ciclinas específicas de mamíferos foram
relatadas

em vitro. No entanto a promiscuidade bioquímica nas interações com CDKcyclin dificulta a

avaliação adequada

a relevância fisiológica in vivo da CDK-ciclina específica

complexos. Por exemplo Cdk1 é pensado para ser ativado

principalmente por ciclinas do tipo A e B mas também pode ligar-se a

ser ativada por ciclinas do tipo D ou E na ausência de

Cdk4 / Cdk6 ou Cdk2 respectivamente 92756. Cdk5 também pode

ligam-se às ciclinas do tipo D embora a extensão em que esses complexos sejam ativos ou
relevantes in vivo não seja clara. A situação é ainda mais complexa para a família menos
conhecida

membros para os quais não existem dados in vivo atuais 2.

Embora a comparação das CDKs de levedura tenha promovido a divisão conveniente entre
transcrição

e atividades do ciclo celular as múltiplas interações entre essas duas atividades em eucariotos
superiores

difícil manter essa classificação simples. Primeiro a transcrição e a progressão do ciclo celular
não podem ser opostas

como estes processos funcionam em diferentes camadas na célula

biologia. Indiscutivelmente a transcrição é um dos principais

caminho necessário para a entrada no ciclo celular. As principais quinases cíclicas-celulares

como Cdk4 e Cdk6 funcionam principalmente

por fosforilação de reguladores de transcrição como Rb

ou Smads 325 e a quinase do ciclo celular arquetípico

Cdk1 também fosforila múltiplos fatores de transcrição

e moduladores epigenéticos (Figura 4) 5. Por contraste

as principais CDKs "transcricionais" como Cdk7 ou Cdk11 controlam diretamente a progressão

do ciclo celular em alguns casos

independentemente da transcrição. Finalmente um único CDK pode

têm atividades relacionadas à transcrição e ao ciclo celular separadas. Como exemplo o Cdk6
foi recentemente caracterizado como um fator de cromatina (Figura 4) que regula

fatores de transcrição envolvidos na angiogênese ou na via NFκB 5758 um processo

independente da via clássica Cdk4 / 6-ciclina-D-Rb envolvida no ciclo celular

regulamento.

Como conseqüência de sua importância em múltiplos processos as CDKs são freqüentemente

mutadas ou desreguladas na doença. Um exemplo clássico é a desregulamentação quase
universal

da via CDK-ciclina-Rb na entrada do ciclo celular durante

transformação maligna 25. Sublinhando o significado das CDKs inibidores de Cdk4 e Cdk6
recebidos em

2013 o avanço da Food and Drug Administration

designação de terapia para tratamento de pacientes com

câncer 59. Outros membros da família CDK também podem

ser considerados alvos interessantes para a terapêutica em

câncer ou outras doenças. Cdk5 exibe várias funções em

doenças neurodegenerativas 28 e em outros tecidos

relevância para diabetes doença cardiovascular ou câncer 29.

Cdk8 apresenta ganhos de número de cópias nos cancros do cólon e recentemente tem sido
caracterizado como um coativador do câncer de cólon.

via beta-catenina na proliferação de células cancerígenas do cólon

6061. Cdk10 é um dos principais determinantes da resistência a

terapia endócrina para câncer de mama 62 e inibição da

Cdk12 confere sensibilidade a inibidores de poli (ADP-ribose)

polimerases PARP1 e PARP2 63. Cdk14 confere vantagens motilidade e potencial metastático
em hepatocelular

motilidade e metástase de carcinoma 6465. Finalmente como indicado acima as ciclina Y

quinases regulam a via Wnt

31 proporcionando novas oportunidades terapêuticas que ainda são

para ser explorado. Portanto parece muito provável que novos alvos

dentro da família CDK será explorado em um futuro próximo

para terapia de câncer ou outras doenças.