MÓDULO

INMUNODIAGNÓSTICO
REPASO COMO
PREPARACIÓN AL
VIDEOCHAT 1

Docente: Esperanza Rueda de Clavijo

Microbióloga Universidad de los Andes. Bogotá.
MSc. Microbiología. Universidad Nacional de Colombia
NIVELES DE ORGANIZACIÓN DEL SISTEMA
INMUNE

CÉLULAS
ÓRGANOS TEJIDOS

MOLÉCULAS

Derechos reservados U.D.C.A

Inmunidad definida como la capacidad de respuesta o estado de protección contra agentes
extraños
DEFENSA(Plasma,linfa, líquido pleural, sinovia, LCR)  HOMEOSTASIS

Específica

o ADQUIRIDA
depende de Leche/placenta maternas
experiencia
previa Infección superada

No hay tiempo para producir Ac propios

Inducida por vacunas

o CONGÉNITA
Independiente de
contacto previo
Inespecífica
 Célula madre (Stem) Blastocisto
Base celular de la Mesodermo
respuesta inmune
Hemocitoblasto

Proeritroblasto

Eritroblasto Mieloblasto Monoblasto Linfoblasto Megacarioblasto

Progranulocito

Eritrocito
Eosinófilo Neutrófilo Basófilo Monocitos Linfocitos B Linfocitos T Asesinas Plaquetas
(M) naturales

https://image.slidesharecdn.com/universidadnacionalpedrohenriquezure https://previews.123rf.com/images/mikrostoker/mikrostoker1601/mikrostoker160100022/502
na2-140719143356-phpapp01/85/las-plaquetas-origen-formacin-y- 43546-c%C3%A9lula-madre-el-desarrollo-de-los-gl%C3%B3bulos-rojos-leucocitos-
funcin-3-320.jpg?cb=1405780477 macr%C3%B3fagos-linfocitos-y-plaquetas-infograf%C3%ADa-ilust.jpg
 Organización del sistema inmune
INNATO y ADAPTATIVO

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 INMUNIDAD INNATA, NATURAL O INESPECÍFICA

“ Es la sumatoria de todos los mecanismos

que ocurren de manera natural, para proteger
a un individuo de la enfermedad (infecciosa).
Compuesta por mecanismos fisiológicos del
reino animal y es cualidad inherente a cada
especie”

No son específicos a un patógeno

dado, ni generan memoria

files.sld.cu/patologiaclinica/files/2010/06/2dacomponente-ii-e-ia12.pdf
 INMUNIDAD INESPECÍFICA
• Innata o Congénita.
Capacidad nativa de un organismo que le permite
actuar inmediatamente frente a un organismo invasor.
http://homepage.mac.com/penagoscorzo/udla/somato/imagen_somato/dermis.jpg

Barreras Físicas/mecánicas/químicas
Piel
Secreciones mucosas
Lágrimas, saliva, orina
Enzimas proteolíticas. Mucinas
http://www.medicinajoven.com/2010/0
pH: Gástrico, piel, mucosa vaginal 2/imagenes-de-una-fagocitosis.html

Mecanismo Humoral: Complemento vía alterna

Mecanismo Celular: Fagocitosis, Activación NK

http://dramarthaz.blogspot.com/2012/03/histologia-de-la-piel.html
 Defensa innata /respuesta inespecífica

Componentes celulares:
Fagocitos PMN
Monocitos/Macrófagos: presentes en sangre y otros tejidos.
Células no fagocíticas: Eosinófilos, basófilos.

Componentes humorales:
Péptidos y proteínas antimicrobianas (secretados por los fagocitos).
Sistema del complemento.

https://slideplayer.com/slide/7337038/24/images/26/Classical+pathway+activation.jpg

www.javeriana.edu.co//digestivo3Ed
 Inmunidad innata inespecífica

• Inflamación
• Fagocitosis (PMNN y M, NKC): Participación directa en Citolisis
• Sistema del Complemento: Lisis celular, propicia
fagocitosis/opsonización
• Proteínas de fase aguda: Lectina Enlaza manosa de Carbohidratos
microbiales, facilita fagocitosis y activa complemento. PCR enlaza
fosforilcolina de patógenos y media fagocitosis
• Factores de coagulación Captación mecánica en coágulos
• IFN: Propician estados antivirales
• Lisozima : Lisis de paredes bacterianas
VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL COMPLEMENTO

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 En detalle las funciones del Sistema del
Complemento

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 INTERACCIONES
Control inicial de infección viral CELULARES
por células naturales asesinas

Funciones del macrófago

Opsonización de fagocitos

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 INTERACCIONES
CELULARES y NO
CELULARES
Efectos de algunas interleuquinas
(IL)

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 INMUNIDAD ESPECÍFICA

• Es Adquirida.
Basada en Memoria-Aprendizaje de respuesta frente a
microorganismos o substancias extrañas, : exhibidos por
componentes
 Celulares: Linfocitos T y B.
Células AsesinasNaturales (NK),
Células dendríticas, Langerhans, etc.
 Humorales (secretados por los linfocitos): Anticuerpos.
 Linfocitos B y producción
de Anticuerpos

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Componentes de la Inmunidad
adquirida.

INTERACCIONES
LB-LT-Macrófagos

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Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) o MHC

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 Antígenos del COMPLEJO MAYOR DE
HISTOCOMPATIBILIDAD (CMH)

Región genómica codifica Ag de histocompatibilidad, algunos componentes del

Complemento y proteínas relacionadas

ANTÍGENOS del CMH

Son glicoproteínas receptoras especializadas presentes en la superficie
celular (propias, únicas e irrepetibles/Determinan aceptar o rechazar
injertos)
Función principal: presentar el Atg procesado a las células de respuesta
inmune

CMH Clase I CMH Clase II

Presentan Atg endógenos a Presentan Atg exógenos a LTh
LTc CD8 CD4
Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) o MHC

MHC-I Se encuentran
en casi todos los tipos
celulares (excepto
hematíes y trofoblastos
fetales

Dos grupos de
proteínas

MHC-II Aparecen solo

en células con función
inmune (Células
presentadoras de Ag)

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 Función de las Células
presentadoras de antígenos y CMH
(o MHC)

Lisosoma digiere Fragmento del

parcialmente al Ag
Ag
Vesícula con Fusión de membrana
Antígeno moléculas del celular con la
(Ag) CMH vesícula
Producto de
la digestión

Complejo
Ag-CMH

Lisosoma

Traducido de: https://es.123rf.com/photo_84931037_activaci%C3%B3n-de-leucocitos-de-c%C3%A9lulas-b-linfoblasto-

activaci%C3%B3n-c%C3%A9lulas-b-memoria-virus-c%C3%A9lulas-plasm%C3%A1ticas-anticuerp.html

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 Antígeno
(Ag)

Linfocito B Linfocito T

interleukina
Anticuerpos
(Ac)
La activación de
linfoblastos genera las
células plasmáticas
(productoras de Ac) y las
células de memoria
Célula Célula B de
plasmática memoria

https://previews.123rf.com/images/designua/designua1708/designua170800039/84931037-activaci%C3%B3n-de-
leucocitos-de-c%C3%A9lulas-b-linfoblasto-activaci%C3%B3n-c%C3%A9lulas-b-memoria-virus-c%C3%A9lulas-
plasm%C3%A1ticas-anticuerp.jpg

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 Activación de Célula B
Antígeno

Célula B en
reposo

Linfoblasto
Anticuerpos

Célula B de
memoria Activación de linfocitos
B
Célula Plasmática

Célula B

Célula Citokinas

Célula infectada Célula T

Activación T Existen Antígenos T independientes

Fagocito y Ag T dependientes para la
producción de Anticuerpos

Activación de linfocitos
Replicación T T
Destrucción
de la célula

https://previews.123rf.com/images/designua/designua1708/designua170800040/84800618-activaci%C3%B3n-de-leucocitos-de-
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c%C3%A9lulas-t-las-c%C3%A9lulas-t-encuentran-su-ant%C3%ADgeno-af%C3%ADn-en-la-superficie-de-una-c%C3%A9lula-in.jpg
 INTERACCIONES

Respuesta inmune celular

Respuesta inmune humoral

Respuesta inmune celular

mediada por Linfocitos TH1

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 Respuesta Inmune Celular
Complejo
Ag-CMH
Célula
infectada Linfocito T
de memoria

Linfocito T
Macrófago ayudador
Citokinas

Célula T
asesina
Muerte de la
célula infectada

Mitosis
Citokinas

Célula infectada

Traducido de https://previews.123rf.com/images/designua/designua1403/designua140300008/27277763-de-la-
c%C3%A9lula-mediada-por-inmunidad-los-linfocitos-t-no-secretan-anticuerpos-esta-respuesta-incorpora-m.jpg

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 INTERACCIONES

Respuesta inmune celular mediada por Linfocitos TH2

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 https://image.slidesharecdn.com/3-130708194910-phpapp02/95/3-clulas-y-tejidos-del-sistema-inmunitario-adaptativo-5-638.jpg?cb=1373313302

Primarios.
Médula ósea (madura LB y precursores
hematológicos) y Timo (Madura LT)
Secundarios.
Ganglios linfáticos
Bazo
Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT) A pesar que el sistema inmune está repartido por
todo el organismo, el máximo acúmulo de linfocitos
se encuentra en el tubo digestivo

https://www.youtube.com/watch?v=LxF6pPs7
3rU
 INMUNOGLOBULINAS

Composición
Todas presentan dos cadenas pesadas y dos livianas con
sus correspondientes regiones variables y constantes

Diversidad
Un solo individuo puede producir 1010 inmunoglobulinas
pero no hay el mismo número de genes codificándolas

Variantes
Se dividen en variantes isotípicas, alotípicas e idiotípicas.
 Sitio de unión al Atg

Carbohidratos
Cadena liviana

Uniones disulfuro
Cadena J
Cadena
pesada Carbohidratos
Cadena pesada
IgG IgM

Los Isotipos pueden ser solubles o estar anclados a las

membranas de LB constituyendo su receptor (BCR)

Cadena pesada

Cadena J
Componente Cadena
secretorio pesada
Cadena
pesada

IgE IgD
IgA secretoria (dímero) IgA (monómero)

Tomado y traducido de: http://4.bp.blogspot.com/-y4HjCR1c5Bc/VU4h4jnHLXI/AAAAAAAACo4/KUN91cgMhjw/s1600/clases%2Banticuerpos.jpg

 ¿ Qué produce la Diversidad?
• Un individuo  1010 Ig pero no hay el mismo
número de genes codificándolas
• Regiones hipervariables dentro de regiones
variables (Pesadas y ligeras).
• A > frecuencia de variabilidad > diversidad al locus
de reconocimiento del antígeno, > reconocimiento a
múltiples antígenos diferentes.
• En la línea germinal hay múltiples genes (V, J, D) y
recombinación génica en cadenas ligeras y pesadas
• Imprecisiones en las recombinaciones
• Mutación somática puntual
• Existencia de dos tipos de cadenas (pesada y ligera)

Dominios tipo
Ig en CMH
tienen sitios de
unión para CD4
y CD8

1.www.uv.es/jcastell/3_Generacion_de_la_variabilidad.pdf
Jan Koolman/Klaus Rohm Bioquímica Texto y Atlas 3a Edición Revisada y
ampliada/Ed panamericana https://books.google.com.co Variabilidad de las
Inmunoglobulinas Página 303

VARIANTES

Garland Science
2005.

• Isotipos: Distintas clases de Ig (IgG, IgM,

IgE, IgA, IgD). Difieren en cadenas
pesadas.
• Alotipos: Los Isotipos de individuos de
distintas especies.
• Idiotipos: Alteraciones de regiones
variables en Ac de una misma clase
(especificidad).
 UNIÓN ANTÍGENOANTICUERPO

Características de la unión del complejo inmune

El Ag también puede ser multivalente
Interacción por complementariedad espacial, no por uniones
covalentes.
Específica
Reversible
Dependiente de pH
Sensible a la temperatura
Sensible a la fuerza iónica
Estructura normal Estructura deformada

Flexibilidad de la Ig y su Ag específico Immunology Roit 10th Ed.

 UNIÓN ANTÍGENOANTICUERPO
La permanencia de la unión depende de:

Grado de adaptación de cada molécula.

Fuerzas y estabilidad de los enlaces (Puentes Hidrógeno, fuerzas electrostáticas,
van der Waals, interacciones hidrofóbicas) a distancias cortas.
A >Multivalencias> Estabilidad (Precaución: impedimento estérico)
Afinidad fuerza de interacción del Ac por el Ag en un solo sitio antigénico
Avidez fuerza de unión de los Ac multivalentes con un Ag multivalente
Especificidad. Cuando el Ac y el Ag forman complejos multivalentes, la
fuerza de interacción es mucho mayor y esto define la especificidad del
anticuerpo como la probabilidad del Ac para unirse a un preciso epítope del
Ag.

La fuerza de unión AgAc sigue principios termodinámicos

de interacción reversible bi-molecular
Ac + Ag AcAg
Anticuerpos policlonales
y monoclonales
Anticuerpos policlonales

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Anticuerpos policlonales

http//Immunobiology (C Garland Science 2005

 Reconocimiento
Ac Policlonales de varios epítopes

Los policlonales son colecciones de Anticuerpos (Ac)

producidas por distintas familias de linfocitos B, que no
obstante reconocer un mismo antígeno, reaccionan contra
distintos epítopes del mismo.
Cuando un animal es estimulado con un antígeno o con un
inmunógeno, responde produciendo gran variedad de
Anticuerpos (Ac) en su suero, al que ahora se denomina
suero hiperinmune o antisuero hiperinmune.

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https://www.docsity.com/documents/pages/apuntes/2018/06/03/80d4850b5b03d7b889cd2d6e3bd62ca0.png
 VENTAJAS DE LOS POLICLONALES
• Afinidad: Reconocimiento de distintos epítopes con alta
afinidad por el antígeno, lo que permite amplificar la señal en el
caso de antígenos con bajos niveles de expresión o en bajas
cantidades en la muestra a analizar.
• Flexibilidad con los cambios antigénicos: Son menos sensibles
a los cambios que puedan ocurrir en los antígenos.
• Robustez: En los resultados debido a su capacidad para unirse
a distintos epítopes del antígeno.
• Producción rápida y de menor costo

INCONVENIENTES
• Difícil reproducibilidad: Los distintos animales producen
antisueros variables, dificultando la reproducibilidad de los
ensayos.
• Baja Especificidad: Pueden generar reacciones cruzadas.

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 ANTICUERPOS
Epítopes
MONOCLONALES

Reconocimiento de
un solo epítope Ac Monoclonales

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 Anticuerpos monoclonales

 La respuesta inmune ante cualquier antígeno

es policlonal: se producen anticuerpos contra un
rango amplio de estructuras (epítopes) presentes en
el antígeno.

 MacFarland Burnet (premio Nobel 1960) postuló la

teoría clonal de la generación de anticuerpos es decir
la generación de moléculas idénticas en su
estructura y en su capacidad de reconocer a un
antígeno

 Cada célula plasmática B (clon B) fabrica un solo tipo

de anticuerpo.
 Anticuerpos
monoclonales

Milstein y Köhler pensaron que si aislaban clones de

células B y las cultivaban en microplacas, el anticuerpo
que producirían las células sería monoclonal.
Inconveniente: las células B mueren a los pocos días de
ser cultivadas in-vitro.

Entonces, pensaron que si las fusionaban con una célula

con potencial de inmortalidad (Mieloma), los híbridos de
ambas células podrían fabricar anticuerpos monoclonales
casi indefinidamente: hibridomas la clave para producir
anticuerpos monoclonales.
 Los
detalles
los
veremos
en el
Video-
Chat 1

ESQUEMA ORIGINAL PARA LA PRODUCCIÓN DE ACMO POR LOS INVESTIGADORES GEORGE KÖHLER Y CESAR
MILSTEIN QUIENES EN 1984 JUNTO CON JERNE RECIBIERON EL PREMIO NOBEL EN FISIOLOGÍA Y MEDICINA

Vamos a ver un ejemplo