Análisis de la cromatografía

Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo

objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo
identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles
en el coeficiente de partición de los compuestos dan como resultado una retención
diferencial sobre la fase estacionaria y, por tanto, una separación efectiva en
función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.

La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen

mutuamente:

 Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que

puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
 Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En
este caso, las cantidades de material empleadas suelen ser muy pequeñas.

Términos de la cromatografía

 El analito, es la sustancia que ser separados durante la

cromatografía. También es normalmente lo que se necesita de la mezcla.
 Cromatografía analítica, se utiliza para determinar la existencia y,
posiblemente, también la concentración de analito en una muestra.
 Una fase unida, es una fase estacionaria que está unido covalentemente a
las partículas de soporte o a la pared interior del tubo de columna.
 Un cromatograma, es la salida visual del cromatógrafo. En el caso de una
separación óptima, diferentes picos o patrones en el cromatograma
corresponden a diferentes componentes de la mezcla separada.
 Un cromatógrafo es un equipo que permite una separación sofisticado, por
ejemplo, cromatografía de gases o separación cromatografía líquida.
 La cromatografía es un método físico de separación que distribuye
componentes para separar entre dos fases, unos estacionarios (fase
estacionaria), el otro (la fase móvil) que se mueven en una dirección
definida.
 El eluato es la fase móvil sale de la columna. Esto también se llama
efluente.
 El eluyente es el disolvente que lleva el analito.
 El eluite es el analito, el soluto se eluyó.
 Una serie eluotrópica es una lista de disolventes clasificados de acuerdo
con su poder de elución.
 Una fase inmovilizada es una fase estacionaria que está inmovilizado
sobre las partículas de soporte, o en la pared interior del tubo de columna.
 La fase móvil es la fase que se mueve en una dirección definida. Puede
ser un líquido LC y capilar electrocromatografía (CEC), un gas (GC), o un
fluido supercrítico (cromatografía supercrítica de fluido, SFC). La fase móvil
consiste en la muestra que está siendo separada analizado y el disolvente
que se mueve la muestra a través de la columna.
 La cromatografía preparativa se utiliza para purificar cantidades
suficientes de una sustancia para su uso posterior, en lugar de análisis.

 El tiempo de retención es el tiempo característico que le toma a un analito

particular para pasar a través del sistema (desde la entrada de la columna
al detector) bajo condiciones establecidas.
 La muestra es la materia analizada en la cromatografía. Se puede consistir
en un solo componente o puede ser una mezcla de componentes. Cuando
la muestra se trata en el curso de un análisis.
 El soluto se refiere a los componentes de la muestra en la cromatografía
de partición.
 El disolvente se refiere a cualquier sustancia capaz de solubilizar otra
sustancia, y especialmente la fase móvil líquida en cromatografía líquida.
 La fase estacionaria es la sustancia fija en su lugar por el procedimiento
de cromatografía. Los ejemplos incluyen la sílice de capa en cromatografía
de capa fina
 El detector se refiere al instrumento utilizado para la detección cualitativa y
cuantitativa de analito después de la separación.
Medición de hidrocarburos mediante cromatografía de gases.

Este método de análisis se ha desarrollado para determinar concentraciones

medias ponderadas en el tiempo de vapores de hidrocarburos aromáticos en aire,
mediante la utilización de equipos de toma de muestras de bajo caudal, tanto para
muestreos personales como en lugares fijos. No puede ser utilizado para medir
concentraciones instantáneas o fluctuaciones de concentración en periodos cortos
de tiempo.

Reactivos y productos
 Gases
 Nitrógeno purificado
 Hidrógeno purificado
 Aire sintético puro
 Reactivos
 Benceno
nota: sustancia toxica y fácilmente inflamable.
 Tolueno
nota: sustancia nociva y fácilmente inflamable.
 Etilbenceno
nota: sustancia nociva y fácilmente inflamable.
 Xileno
nota: sustancia nociva.
 Trimetilbenceno n-Propilbenceno
nota: sustancia irritante.
 Sulfuro de carbono, debe estar exento de compuestos que convivan con los
analitos de interés. nota: sustancia muy inflamable y muy toxica.
Determinación de la eficacia de desorción

La eficacia de desorción de los vapores de hidrocarburos aromáticos puede variar

con el tipo y lote de carbón usado, siendo necesario calcularla para cada lote de
carbón y para cada analito sobre el intervalo de aplicación del método.
Para calcular dicha eficacia de desorción, se inyectan diferentes cantidades de los
analitos de interés en al menos tres tubos conteniendo 100 mg de carbón (primera
sección de un tubo de muestra) para cubrir el intervalo de aplicación del método.
Una vez adicionados los contaminantes a los tubos de carbón, se guardan
refrigeradas durante toda la noche para asegurar la completa adsorción. Estos
tubos se tratan como muestras. Paralelamente debe prepararse un tubo blanco
por cada concentración, de la misma manera que las muestras, excepto que no se
le ha añadido contaminante.

Técnica de lecho cromatografico

 La cromatografía en columna

La cromatografía en columna es una técnica de separación en la que el lecho

estacionario está dentro de un tubo. Las partículas de la fase estacionaria sólida o
el soporte recubierto con una fase estacionaria líquida pueden llenar todo el
volumen interior del tubo (columna de relleno) o ser concentrado en o a lo largo de
la pared del tubo interior dejando un camino abierto, sin restricciones para la fase
móvil en la parte media del tubo (columna tubular abierto). Las diferencias en las
tasas de movimiento a través del medio se calculan a diferentes tiempos de
retención de la muestra.

 Cromatografía planar

Cromatografía planar es una técnica de separación en la que está presente la fase

estacionaria como o en un avión.
El avión puede ser un papel, que sirve como tal o impregnado por una sustancia
como el lecho estacionario (cromatografía en papel) o una capa de partículas
sólidas repartidas en un soporte tal como una placa de vidrio (cromatografía en
capa fina). Diferentes compuestos en la mezcla de muestra viajan distancias
diferentes de acuerdo con la fuerza con que interactúan con la fase estacionaria
en comparación con la fase móvil. La específica factor de retención de cada
producto químico se puede utilizar para ayudar en la identificación de una
sustancia desconocida.

 La cromatografía en papel

La cromatografía en papel es una técnica que consiste en colocar un pequeño

punto o línea de solución de muestra sobre una tira de papel de cromatografía. El
papel se coloca en un recipiente con una capa superficial de disolvente y
sellado. Como disolvente se eleva a través del papel, se encuentra con la mezcla
de muestra, que comienza a viajar hasta el papel con el disolvente. Este papel
está hecho de celulosa, una sustancia polar, y los compuestos dentro del recorrido
mezcla más lejos si son no polar. Más sustancias polares vínculo con el papel de
celulosa con mayor rapidez, y por lo tanto no viajar tan lejos.

 Cromatografía de capa fina (TLC)

Cromatografía de capa fina (TLC) es un uso técnica de laboratorio ampliamente

empleado para separar los diferentes productos bioquímicos sobre la base de su
tamaño y es similar a la cromatografía en papel. Sin embargo, en lugar de usar
una fase estacionaria de papel, se trata de una fase estacionaria de una fina capa
de adsorbente como gel de sílice, alúmina, o de celulosa sobre una superficie
plana, inerte sustrato. En comparación con el papel, que tiene la ventaja de
carreras más rápidos, mejores separaciones, y la posibilidad de elegir entre
diferentes adsorbentes. Para aún mejor resolución y para permitir la
cuantificación, de alto rendimiento TLC se puede utilizar.