Discusión de resultados de extracción de glúcidos:

En la extracción de glúcidos se utilizó agua esterilizada o agua destilada, esto con el fin de que
pudiera ebullir a una temperatura constante para poder formar reflujos a través de la cámara en
donde se encontraba la muestra de harina de lenteja, con el objetivo de poder realizar cada reflujo
se determinó que cada vez que recirculaba, ésta conforme a su sistema de goteo lento se
introducía al dedal contenido en la cámara soxhlet y permite que pueda extraer una cantidad de
glúcidos o carbohidratos, siendo su fin poder saber la cantidad de carbohidratos que posee la
semilla de lenteja obtenida en la mezcla de agua que residúa en el balón de aforo de la cámara, las
perlas de ebullición permiten que al momento de hervir el agua y comience a borbotear no
rebalse la misma y a su vez permita poder hacer reflujos en el sistema Soxhlet con mayor
efectividad y poder obtener mejores resultados, así mismo se debe controlar la llama para que
ésta no provoque un sobrecalentamiento de la rejilla y del balón aforado; sin embargo cuando se
utiliza este método se puede obtener fallas en la cámara de enfriamiento debido a que el flujo de
agua no sea constante y la misma se sobre caliente al igual que todo el sistema, al extraer la
solución de lenteja del balón aforado nos podemos dar cuenta de que el color tiende a un amarillo
fuerte debido a la extracción de carbohidratos obtenidos de la semilla de lenteja

Discusión de resultados de pruebas de extracción de glúcidos:

Hidrólisis:
Cuando nos referimos a hidrólisis se denota una reacción química entre una molécula de agua con
una macromolécula, en donde la molécula de agua se divide y sus átomos pasan a formar una
unión de otra especie química, este es el caso de la hidrolisis de glúcidos ya que al hidrolizarse se
obtiene una reacción química para determinar diferentes características a través de la realización
de diferentes pruebas, la hidrolisis de disacáridos y polisacáridos se utiliza para liberar un
monosacárido y el resto de una molécula, es decir, si se trata de un disacárido se obtiene un
monosacárido y si se trata de un polisacárido complejo se obtiene un polisacárido; en las hidrolisis
obtenidas durante las pruebas del laboratorio se obtuvo que al utilizar HCl concentrado y utilizar
un baño maría un extracto más concentrado para poder hacer las pruebas siguientes más
eficientes y poder determinar la calidad y cantidad de carbohidratos de la semilla de lenteja.

Prueba de Molisch:
La prueba de molisch es muy utilizada para poder teñir todo tipo de carbohidrato presente en una
disolución, con el fin de identificar carbohidratos y a su vez glucoproteínas formando un anillo
púrpura determinando carbohidratos mayores a las tetrosas, el ácido sulfúrico que se utiliza en
esta misma prueba ayuda a hidrolizar enlaces glicosídicos para la obtención de monosacáridos y
seguido a ello ser deshidratados obteniendo furfural y sus derivados, cuando no se encuentran
glúcidos en la solución por la reacción de ácido sulfúrico y α-naftol se torna a la formación de un
anillo de color verde debido a carencia de los mismos, en la prueba realizada en el laboratorio se
identificó la presencia de un anillo púrpura determinando la presencia de glúcidos, la semilla de
lenteja posee una cantidad de 49 gramos por cada 100 gramos de muestra extraída, los
carbohidratos están formados por azúcares, almidones, celulosa, y muchos compuestos variados
más encontrados en los organismos vivientes, la prueba de molisch también es utilizada para el
reconocimiento general de disacáridos y polisacáridos que se hidrolizan formando monosacáridos
de color púrpura violeta, en general todos los glúcidos de deshidratan por la presencia de ácido
sulfúrico concentrado formando compuestos furfúricos dando un producto color violeta.

Muestras a analizar Dictamen Coloración

Extracto - Beishe
Extracto hidrolizado - Beishe
Celulosa (Papel bond) + Anillo púrpura
Almidón + Anillo púrpura
Almidón hidrolizado + Café oscuro
Sacarosa + Café oscuro
Sacarosa hidrolizada + Anillo púrpura
Lactosa + Anillo púrpura
Maltosa + Anillo púrpura
Glucosa + Café oscuro
Fructosa + Café oscuro
Fuente: Elaboración propia laboratorio de bioquímica

Prueba de Benedict:
Es una reacción de oxidación que ayuda a reconocer azucares reductores, en otras palabras
aquellos compuestos que poseen grupos hidroxilo anomérico libre, como es el caso de la glucosa,
lactosa, maltosa, celobiosa, debido a la reducción del ión cúprico se forma un precipitado color
rojo ladrillo debido al óxido cuproso, a su vez la precipitación por la solución alcalina se torna un
color rojo naranja y esto evidencia la presencia de un azúcar reductor, el compuesto Benedict se
forma por sulfato cúprico, citrato de sodio y carbonato anhídrido de sodio, la presencia de
azucares reductores en las pruebas de benedict se evidencia por la precipitación del ión cuproso.

Prueba a analizar Dictamen Coloración

Extracto + Amarillo verdoso
Extracto hidrolizado + Amarillo verdoso
Almidón hidrolizado + Celeste amarillento
Sacarosa + Rojo ladrillo
Sacarosa hidrolizada + Rojo ladrillo
Lactosa + Rojo ladrillo
Maltosa + Rojo ladrillo
Glucosa + Rojo ladrillo
Fructosa + Rojo ladrillo
Fuente: Elaboración propia laboratorio de bioquímica

Prueba de yodo:
Es una reacción química que se utiliza para poder encontrar y determinar la presencia de almidón
o algún otro tipo de polisacáridos, la prueba puede realizarse en todo tipo de producto siempre y
cuando éste contenga almidón, dicha reacción es la prueba de la formación de cadenas de
poliyoduro a partir de una reacción de almidón junto a yodo en una solución de reactivo
denominado lugos, debido a la amilosa que forman hélices en donde se juntan las moléculas de
yodo tomando en consecuencia un color azul oscuro tendiendo a negro; sin embargo la amilo
pectina forma hélices más cortas por lo que las moléculas de yodo son incapaces de juntarse
tornándose de un color intermedio entre naranja y amarillo, cuando se rompe o hidroliza el
almidón el color negro presente desaparece y ésta prueba determina el final de la hidrólisis; el
color que se produce mediante la reacción de polisacáridos se debe a que el yodo ocupa espacios
vacíos en las hélices de la cadena de glucosa tendiendo a la formación de un compuesto de
inclusión que altera las propiedades físicas del mismo.

Muestras a analizar Dictamen Coloración

Extracto + Negro
Extracto hidrolizado + Negro
Celulosa (Papel bond) - Anaranjado
Almidón + Negro
Almidón hidrolizado + Negro
Fuente: Elaboración propia laboratorio de bioquímica

Prueba de Barfoed:
Este reactivo es muy utilizado en las pruebas de identificación de azucares reductores, además es
utilizado en la diferenciación de azucares monosacáridos de los disacáridos, esto debido al tiempo
de aparición del precipitado rojo ladrillo, éste reactivo se basa en la reducción del cobre I; dicha
prueba al permitir una reacción de oxidación de reconocimiento de azucares reductores,
evidenciando semejanza a la reacción de Benedict con una precipitación de color rojo ladrillo, el
medio alcalino permite la facilidad de que el azúcar se encuentre en forma lineal, sin embargo el
azúcar en solución permite la formación de un anillo de piranosa o furanosa, su característica
principal para poder identificar un resultado positivo de la prueba es la precipitación del óxido
cuproso tornándose con una coloración roja.

Muestras a analizar Dictamen Coloración

Extracto - Celeste
Extracto hidrolizado - Celeste
Almidón hidrolizado - Celeste
Sacarosa - Celeste
Sacarosa hidrolizada - Celeste
Lactosa - Celeste
Maltosa - Celeste
Glucosa + Anillo rojo ladrillo
Fructosa + Anillo rojo ladrillo
Fuente: Elaboración propia laboratorio de bioquímica

Prueba de Seliwanoff:
Es muy utilizada para la diferenciación entre cetosas y aldosas, los azucares se pueden distinguir
por su función como cetona o aldehído, se utiliza el ácido clorhídrico para realizar la reacción de
monosacárido y a su vez el resorcinol en reacción de condensación del derivado furfural; cabe
mencionar que es una prueba cualitativa por lo tanto torna de un tono incoloro a una coloración
roja aplicando esto para las cetohexosas y aldohexosas, en esta prueba la sacarosa y la inulina
tienden a ser positivas debido a que el ácido clorhídrico del reactivo provoca en una temperatura
caliente la hidrolisis del compuesto liberando fructosa, las pentosas tienden a reaccionar a esta
prueba tornándose con una coloración verde o azul.

Muestra a analizar Dictamen Coloración

Extracto - Transparente
Extracto hidrolizado - Transparente
Almidón hidrolizado - Transparente
Sacarosa hidrolizada + Anaranjado fuerte
Glucosa - Transparente
Fructosa + Rojo
Fuente: Elaboración propia laboratorio de bioquímica