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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Químico Farmacéutico Industrial

Laboratorio de Fisiología Celular

Práctica 9. Propiedades de músculo cardiaco

Grupo: 4FM2

Equipo: 6
Integrantes:
Criollo Sánchez Daniela
Garduño Quintanar Jorge Daniel
Luz Martinez Jazmin
Monroy Matías Fernando Aarón

Profesoras:
Ana Lilia Gutiérrez Lozano
Elizabeth Guarneros Bañuelos
Sonia Guzmán Velázquez

Fecha de entrega: 30 de Mayo del 2019


INTRODUCCIÓN
El músculo cardíaco es un músculo estriado involuntario,
que se encuentra sólo en el corazón, dicho músculo es
tetracavitario es decir que se encuentra conformado por
dos aurículas (derecha e izquierda) y dos ventrículas
(derecha e izquierda), así como dos venas cavas, una
vena aorta y distintas arterias pulmonares (figura 1).

Así como el músculo esquelético, el músculo cardíaco


presenta distintas capas que lo recubren, la capa más
externa es el epicardio (tejido conjuntivo, mesotelio),
seguida del miocardio (fibras apantanoladas) y
endocardio (tejido conjuntivo laxo y endotelio).

Al momento de las contracciones la sangre pasa por el


ventrículo, encargado de distribuir la sangre a todas partes del cuerpo, incluyendo a
los pulmones donde se logra “oxigenar” la sangre, cabe destacar que la sangre
desoxigenada y oxigenada no se llegan a juntar.

Presenta células apantalonadas con un núcleo grande ubicado en el centro


interconectadas por discos intercalares:gap junctions y desmosomas; permitiendo
sincitios entre las aurículas y los ventrículos.Tiene 3 tipos de células

● Células nodales (señales eléctricas)


● Células de conducción (propagación de PA)
● Células contráctiles (generadoras de las contracciones)

Dichas células producen un sistema, conocido como sistema de conducción, por el


cual se generan y se conducen dichos PA para generar las contracciones
involuntarias del corazón; dicho sistema está compuesto por 2 nodos,
sinoauricular(SA) y
auriculoventricular(NA), el haz de his
y fibras de Purkinje. El nodo SA es
considerado como el marcapasos
del corazón permitiendo que el
corazón continúe latiendo, de aquí
parte el PA que se transmite hasta el
nodo NA, en dicha transmisión se
tiene un ligero retardo que permite la
contracción de la aurícula y con esto
pueda pasar la sangre al ventrículo
antes de que este se contraiga,
posteriormente se propaga hacia el
haz de his y las fibras de Purkinje.
En el músculo cardíaco existen dos tipos de PA que se propagan (figura 3.):

1. En células nodales: PA de respuesta lenta, SA y NA; posee 3 fases, fase 4


prepotencial, fase 0 despolarización y fase 3 repolarización
2. En células contráctiles: PA de respuesta rápida; posee 4 fases, fase 0
despolarización, fase 1 repolarización breve, fase 2 o meseta y la fase 3.

A su vez, en el músculo cardíaco se tiene la influencia de los sistemas simpáticos y


parasimpáticos; siendo que el sistema parasimpático actúa solamente en los nodos
SA y NA, mientras que el sistema simpático actúa sobre todo el corazón.

El sistema parasimpático en general disminuye la frecuencia de los PA y actúa


solamente en las células nodales y las contractile, mientras que el simpático la
aumenta la frecuencia actuando solo en células nodales.

Dentro del estudio de la contracción del músculo cardíaco existen sustancias


químicas capaces de asemejar las acciones del sistema simpático y/o parasimpático;
las sustancias simpaticomiméticas que son aquellas sustancias que imitan la acción
del sistema simpático (ejemplo de ello es la adrenalina), sustancias
parasimpaticomiméticas que son aquellas que imitan la acción del sistema
parasimpático (ejemplo de ello es la acetilcolina) y las sustancias parasimpaticolíticas
que son aquellas sustancias antagonistas de receptores muscarínicos del sistema
parasimpático (ejemplo de ello es la atropina).

OBJETIVOS
1. Determinar el efecto de la adrenalina sobre la fuerza (g) y frecuencia
(latidos/min) de contracción de músculo cardiaco de rana.
2. Determinar el efecto de acetilcolina sobre la fuerza (g) y frecuencia(latidos/min)
de contracción de músculo cardiaco de rana.
3. Determinar el efecto de acetilcolina en presencia de atropina sobre la fuerza(g)
y frecuencia(latidos/min) de contracción de músculo cardiaco de rana.
4. Determinar el efecto de la concentración extracelular de iones calcio y potasio
sobre la fuerza(g) y frecuencia(latidos/min) de contracción de músculo cardiaco
de rana.

FUNDAMENTO

Para el desarrollo de la práctica utilizamos una rana toro debido a que este es un reptil
ectotermo es decir es puede regular su temperatura con la del ambiente y por lo tanto
eliminaremos una variable que pudiera afectar en el registro de nuestros datos .
Así mismo utilizamos la rata toro especialmente ya que es un animal que respira a
través de la piel por lo que la circulación del oxígeno hacia la sangre se efectuará sin
ningún problema y así el corazón de la rana seguirá bombeando sangre incluso
después de decapitar
El decapitar tiene como.objetivo de tener a un organismo vegetativo es decir perderá
la facultad de poder efectuar estímulos o de reflejos
Posteriormente en el desarrollo de la práctica realizamos un registro basal con el
objetivo de tener referencia para nuestros próximos datos , así mismo se bañaba con
solución ringer de manera constante para que el corazón de la rana estuviera vivo ya
que gracias a esta solución podemos acondicionar este a las condiciones fisiológicas
Después bañamos el corazón con adrenalina que es un sustancia simpaticomimética
con el fin de que actúe como agonista del sistema simpático por lo que se esperaría
que aumente la fuerza de contracción y también aumente la frecuencia, una vez que
realizamos esta parte de la práctica lavamos con ringer el corazón para que no quede
adrenalina sobre el corazón
Después bañamos el corazón con acetilcolina lo que esperaríamos que tenga efecto
contrario al de adrenalina

También en la práctica utilizamos atropina ya que es un fármaco antagonista


muscarínico (anticolinérgico)que compite por los receptores muscarínicos de
acetilcolina por lo que debería aumentar la frecuencia y la fuerza , y después de un
minuto aplicamos acetilcolina exógena ya que como sabemos al medir el efecto de
un antagonista debe estar presente el agonista

Por últimos cambiamos la concentración de iones extracelulares , al usar ringer con


un contenido de calcio mayor se podrá ver el aumento de las contracciones ya que el
calcio se unirá a los receptores RyR2 y así saldará mayor cantidad de calcio del
retículo sarcoplásmico y por lo tanto habrá más contracción

Del mismo modo bañamos el.corazón con ringer con concentraciones elevadas de
potasio para poder observar la disminución de a contracción del corazón.
METODOLOGÍA

Preparación Abrir cavidad Fijar el ápice


del corazón de torácica y con un
rana descubrir la ganchito en el
transductor de
fuerza,
perforando
este
Realizar registro Bañar corazón Lavar con
basal, de las con 0.2 mL de solución
contracciones del solución de Ringer
corazón por 1 adrenalina,
minuto registrar por 3
minutos

Realizar registro Bañar corazón Lavar con


basal, de las con 0.2 mL de solución
contracciones del solución de Ringer
corazón por 1 acetilcolina,
minuto registrar por 3
minutos

Realizar registro Bañar corazón Bañar corazón


basal, de las con 0.2 mL de con 0.2 mL de
contracciones del solución de solución de
corazón por 1 atropina, acetilcolina,
minuto registrar por 1 registrar por 3
minuto minutos

Lavar con
Realizar registro Bañar corazón solución
basal, de las con 0.5 mL de Ringer
contracciones del solución Ringer
corazón por 1 con alto
minuto contenido de K+,
registrar por 3
minutos
Bañar corazón Lavar con
con 0.5 mL de solución
solución Ringer Ringer
con alto
RESULTADOS
contenido de
Adrenalina
Ca2+, registrar
por 3 minutos
Figura 4. Contracciones cardiacas durante un minuto basal y 3 minutos administrado
con adrenalina, observando un efecto cronotrópico e inotrópico positivo por el
aumento de frecuencia y fuerza en el corazón de rana.

Figura 5. Frecuencia obtenida durante el lapso del tiempo con la administración de


adrenalina, se puede observar el aumento de la frecuencia con el paso del tiempo,
teniendo un efecto cronotrópico positivo.

Figura 6. Fuerza de contracción obtenida durante el lapso del tiempo con la


administración de adrenalina, se puede observar el aumento de la fuerza con el paso
del tiempo, teniendo un efecto inotrópico positivo
Acetilcolina
Figura 7. Registro de la contracción cardiaca durante un minuto basal y 3 minutos
registrados con la administración de acetilcolina, obteniendo un registro cronotrópico
negativo y un registro inotrópico positivo en corazón de rana.

Figura 8.Frecuencia obtenida durante el lapso del tiempo con la administración de


acetilcolina, se puede observar la disminución de la frecuencia con el paso del tiempo,
teniendo un efecto cronotrópico negativo.

Figura 9.Fuerza de contracción obtenida durante el lapso del tiempo con la


administración de acetilcolina, se puede observar el aumento de la fuerza con el paso
del tiempo, teniendo un efecto inotrópico positivo.

Atropina + Acetilcolina
Figura 10. Registro de la contracción cardiaca durante un minuto basal y un
minuto con la administración de atropina, más tarde se obtuvo el registro de 3
minutos con la administración de acetilcolina, obteniendo un registro
cronotrópico positivo con la atropina, mientras que un registro negativo en el
caso de la acetilcolina, finalmente un registro inotrópico positivo.

Figura 11.Frecuencia obtenida durante el lapso del tiempo con la administración


de atropina, se puede observar un aumento de la frecuencia en el primer minuto
del tiempo, teniendo un efecto cronotrópico positivo. mientras que al
administrar acetilcolina el efecto cronotrópico se vuelve negativo, observando
una disminución de la frecuencia.
Figura 12.Fuerza de contracción obtenida durante el lapso del tiempo con la
administración de atropina y acetilcolina, se puede observar el aumento de la
fuerza con el paso del tiempo, teniendo un efecto inotrópico positivo.

Ringer alto en Calcio

Figura 13.Registro de la contracción cardiaca durante un minuto basal y 3


minutos registrados con la administración de Ringer alto en Calcio, obteniendo
un registro cronotrópico positivo y un registro inotrópico positivo en corazón
de rana.
Figura 14.Frecuencia obtenida durante el lapso del tiempo con la administración
de Ringer alto en Calcio, se puede observar una disminución pero más
adelante, el aumento de la frecuencia con el paso del tiempo, teniendo un efecto
cronotrópico positivo.

Figura 15.Fuerza de contracción obtenida durante el lapso del tiempo con la


administración de Ringer alto en Calcio, se puede observar el aumento de la
fuerza con el paso del tiempo, teniendo un efecto inotrópico positivo.

Ringer alto en Potasio


Figura 16..Registro de la contracción cardiaca durante un minuto basal y 3
minutos registrados con la administración de Ringer alto en Potasio,
obteniendo un registro cronotrópico negativo y un registro inotrópico positivo
en corazón de rana.

Figura 17.Frecuencia obtenida durante el lapso del tiempo con la administración


de Ringer alto en Potasio, se puede observar la disminución de la frecuencia
con el paso del tiempo, teniendo un efecto cronotrópico positivo.

Figura 18.Fuerza de contracción obtenida durante el lapso del tiempo con la


administración de Ringer alto en Calcio, se puede observar el aumento de la
fuerza con el paso del tiempo, teniendo un efecto inotrópico positivo
Figura 19. %de fuerza máxima obtenida con cada experiencia, tomando en
cuenta el registro basal como 100%, obteniendo una mayor influencia por
aumentar la fuerza en el experimento con Ringer alto en Potasio.

DISCUSIÓN

Adrenalina : La adrenalina y noradrenalina poseen 3 tipos de receptores, sin embargo,


los β1 son aquellos que predominan en el músculo cardiaco, este tipo de receptores
son específicos para la vía de señalización Gs, se emplea ATP y la enzima adenilato
ciclasa genera AMPc, el cual es un segundo mensajero que se une a un complejo
para liberar la enzima PKA, la función de esta enzima es fosforilar los CDV de calcio
de tipo f y L y los CDV Na+ de tipo f. Al fosforilar los CDV Na+ f, se genera
despolarización más rápida de la membrana, seguidos por los canales dependientes
de voltaje para Ca2+ de tipo t y posteriormente los de tipo L, esto para que los
potenciales de acción generados por los Nodos (sinoauricular y auriculoventricular)
se den con mayor velocidad, ya que, debido al aumento de velocidad de
despolarización, se alcanza más rápido el potencial umbral. La generación de
potencial por el nodo seno auricular, se da por el aumento en la velocidad de
conducción (efecto dromotrópico (+)), llega al nodo auriculoventricular y al tener sus
canales fosforilados, permite que este genere más rápido y fácilmente potenciales de
acción, para posteriormente conducirlo a las células contráctiles. Al pasar el PA por
las GAP junctions, llega a las células contráctiles donde hay una apertura más rápida
de los CDV Na+ , por lo cual hay una despolarización más rápida como en el caso
pasado, posteriormente hay una apertura de los CDV Ca2+
L en el túbulo T, los cuales se encuentran fosforilados por la PKA , lo que ocasiona
que estén más tiempo abiertos y el acople electroquímico con los canales RYR2
permanezca más tiempo formado, debido a una mayor concentración de entrada de
Ca2+ al citoplasma, al elevarse la concentración de calcio en el citoplasma, propicia
un aumento en la interacción entre la unidad de la troponina y el calcio, permitiendo
mayor formación de puentes cruzados que conlleva al golpe de fuerza (contracción)
en el sarcómero.
Esto genera un aumento en la fuerza de contracción (efecto inotrópico positivo). Al
modificarse la generación de PA de los nodos, se observa aumento en la frecuencia
cardiaca, lo que lleva al corazón a contraerse más rápido (efecto cronotrópico
positivo).
Acetilcolina: Al administrar acetilcolina exógena, se observa el efecto contrario al
observado con la adrenalina, debido a que la acetilcolina es el neurotransmisor
liberado por el sistema nervioso parasimpático, este se activa cuando nos
encontramos en situación de reposo. La acetilcolina actúa sobre los receptores
muscarínicos M2, los cuales activan una vía Gi, esta vía inhibe la enzima adenilato
ciclasa, por lo que la concentración de AMPc es mínima y a su vez disminuye la
actividad de PKA. La vía Gi hace que el dímero α/β se una a los CDV K+ por lo que
la entrada de K+ aumenta, hiperpolarizando (haciendo más negativa) la membrana,
esto causa un aumento en el potencial diastólico máximo, por lo que hace menos
excitable a las células autoexcitables, de esta forma, estas células generan menos
potenciales de acción, de igual forma al disminuir la fosforilación en los canales de
calcio tipo T y L, el flujo de estos iones será más lento disminuyendo el número de PA
que llegan a las células contráctiles obteniendo un efecto cronotrópico negativo.
Al tener una menor frecuencia de contracción el corazón puede bombear más sangre
por lo que se distiende en mayor magnitud siguiendo la Ley de Frank Starling, por lo
que al aumentar el estiramiento del músculo cardiaco, este se vuelve más sensible al
Calcio permitiendo mayor formación de puentes cruzados provocando mayor fuerza
de contracción a pesar de que su efecto cronotrópico sea negativo, su aumento de la
fuerza de contracción es indirecto a la administración de acetilcolina. Finalmente
obtenemos un efecto inotrópico positivo.
Atropina + Ach: Primero se administró atropina al músculo cardiaco, la cual es una
sustancia antagonista competitiva reversible de los receptores muscarínicos, con
mayor afinidad a los receptores M2, al dejar actuar este antagonista durante 1 minuto
y posteriormente administrar acetilcolina, notamos que la acetilcolina no sufrió efecto
en la frecuencia ni la fuerza de contracción disminuyéndolas como en la
experiencia anterior, ya que la atropina bloquea los receptores muscarínicos para
acetilcolina, por ello, la acetilcolina no se unió y no desencadenó la vía Gi para
hiperpolarizar la membrana y hacer menos excitables las células autoexcitables, por
ello fue en aumento la frecuencia y fuerza de contracción.
Ringer alto en calcio : Aumento de la concentración de calcio extracelular, en esta
experiencia obtuvimos un aumento en la frecuencia y fuerza de contracción, debido a
que al aumentar el gradiente electroquímico de este ion, aumentamos la fuerza
electromotriz con lo que el calcio difunde más rápido al interior de la célula mediante
los canales de Calcio tipo T y L causando una despolarización más rápida y con ello
generar una mayor cantidad de potenciales de acción, lo cual repercutirá en un
aumento de la frecuencia, estos potenciales llegarán a las células contráctiles como
ya se explicó previamente y se abrirán los canales de hidropiridina para calcio, el
calcio al tener el gradiente electroquímico aumentado y la FEM igualmente difundirá
al citoplasma, más rápido y aumentará el calcio citosólico y con esto habrá una
interacción mayor entre la troponina (unidad c) y el calcio, a modo que se permitirá
mayor cantidad de formación de puentes cruzados y de esta manera se obtiene una
mayor contracción.
Ringer alto el potasio: Para la experiencia del aumento en la concentración de iones
potasio, notamos el efecto contrario del calcio, en esta experiencia se disminuyó el
gradiente de concentración, por lo que la salida de potasio será más lenta, debido a
esto la repolarización en la células nodales será igualmente más lenta teniendo menor
número de PA en un minuto, lo que significa que disminuye la frecuencia, obteniendo
un registro cronotrópico negativo,este fenómeno pudo ser comprobado
experimentalmente.
Con respecto a la fuerza de contracción, al tener mayor concentración de iones K +
entran en competencia los iones potasio y los iones calcio, manteniendo abierto los
canales de calcio tipo L mayor tiempo, permitiendo mayor entrada de este ion,
estimulando a los canales RyR2 y provocando la salida de calcio citosólico para la
formación de mayor número de puentes cruzados, aumentando su fuerza de
contracción, dando un registro inotrópico positivo.
CONCLUSIONES
1. La adrenalina tiene un efecto cronotrópico positivo y efecto inotrópico positivo.
2. La acetilcolina tiene un efecto cronotrópico negativo y un efecto inotrópico
positivo.
3. La atropina aumenta la frecuencia cardiaca y la fuerza de contracción.
4. Hay mayor concentración de acetilcolina que de atropina.
5. La solución Ringer alta en Ca2+ tiene un efecto cronotrópico positivo al igual
que su efecto inotrópico.
6. La solución Ringer alta en K+ disminuye la frecuencia cardiaca y aumenta la
fuerza de contracción (efecto inotrópico positivo).

BIBLIOGRAFÍA

1. Eric R. Kande (2000). “Principios de neurociencia” Ed. McGraw-Hill


Interamericana de España S.L. 5ª ed.,pág 177-210.

2. Eckert R., Randall D. y Augustine G.. Fisiología Animal. Mecanismos y


Adaptaciones 3a edición. Editorial Interamericana McGraw-Hill. Madrid,
España.1990. pág 433-435.

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